低能量He—Ne激光对培养的人牙髓纤维样细胞生长的影响

用5mw的Hc-Ne激光器照射离体培养的人牙髓纤维样细胞,用MTT方法检测,结果显示0.33～6J/cm~2的能量密度范围有刺激该细胞增生的趋向。     

低能量He-Ne激光对离体培养的人牙髓纤维样细胞DNA合成的影响

将正畸拔除牙的牙髓进行培养至第七代,以He-Ne激光照射,观察对细胞DNA代谢的作用,证明低能量激光具有生物刺激效应,可使牙髓纤维样细胞DNA代谢增强,将对牙髓疾病的治疗和康复产生积极影响。     

骨形成蛋白影响人牙髓纤维样细胞生物学特性的体外观察

利用体外培养传代的人牙髓纤维样细胞，观察了骨形成蛋白在体外对牙髓纤维样细胞的细胞增殖，＾３ＨＴｄＲ掺入，碱性磷酸酸酶活力水平等方面的影响，实验结果显示，骨形成蛋白可促进人牙髓纤维样细胞的细胞增殖，＾３ＨＴｄＲ掺入和碱性磷酸酶活力，研究表明，骨形成蛋白体外可促进人牙髓纤维样细胞的增殖和分化     

纤维蛋白封闭剂对人牙髓细胞生长的影响

目的：观察fibrin sealant(FS)对人牙髓细胞贴壁率、生长曲线、增殖以及碱性磷酸酶活性的影响。方法：体外培养人牙髓细胞并鉴定，采用细胞记数法计算细胞贴壁率，绘制细胞生长曲线；采用MTT法测定细胞增殖；采用碱性磷酸酶试剂盒测定碱性磷酸酶活性。结果：FS组细胞的早期贴壁率明显高于对照组。FS组的细胞贴壁率在2h时是对照组的4．6倍，8h时FS组细胞的贴壁率超过100％(102．6％)，而对照组在24h超过100％(103％)。进入对数生长期后，FS组和对照组两条曲线曲度大致相似，实验组与对照组的MTT和ALP的A值无显著差异。结论：FS具有良好的生物相容性，有利于体外培养的牙髓细胞的早期贴壁和存活，但对细胞增殖速度及细胞分化无显著影响。     

IL—6对人牙髓细胞,牙周膜细胞生长影响的实验研究

目的：了解ＩＬ－６对构成牙髓、尖周组织主要细胞生长的影响，揭示ＩＬ－６在牙髓、尖周病变过程中的作用。方法：应用细胞培养技术，采用ＭＴＴ比色法进行细胞生长及存活状态测定。结果：ＩＬ－６抑制牙髓细胞、牙周膜细胞的生长，并呈时间和剂量依赖关系，两细胞间无显著差异。结论：ＩＬ－６可能对牙髓、尖周组织损伤的修复和代谢功能有一定影响     

蟾酥制剂对人牙髓细胞的细胞毒性研究

目的：观察人牙髓细胞(Human dental pulp cell，HDP)受到蟾酥制剂浸出液的细胞毒刺激后的MTT值。方法：用蟾酥制剂浸出液五种浓度分别处理人牙髓细胞1、2、4、6、24h后，测算MTT值。结果：1、2、4h组间的活细胞数量无显著差别，6h、24h组间差别明显。结论：蟾酥制剂对体外培养的人牙髓细胞有较大的毒性。     

人牙髓细胞的培养

本实验从人恒牙内分离出牙髓细胞，进行组织培养。培养３天，见组织块边缘有梭形细胞游出，随着培养天数的增多，游出的细胞也逐渐增多。来源于相邻组织块的细胞团逐渐靠近，接触；培养２０天时，细胞长满瓶底，铺成单层，按１：３的比例进行传代，平均６天传代一次，观察细胞的形态，排列及增殖情况，从细胞生长曲线可以看到，接种后第１天，细胞基本无增长，第２～５天，细胞增长旺盛，第６天，细胞生长又趋于缓慢，第７天时，增长     

激光照射对牙髓细胞形态的影响

不同的激光能量可以产生不同的生物效应．本文应用扫描电镜、倒置显微镜观察不同能量、不同频率的激光能量设置对牙髓细胞形态的影响，结果表明：１００ｍｊ２０Ｈｚ、６０ｍｊ４０Ｈｚ、４０ｍｊ５０Ｈｚ以上的能量设置可使牙髓细胞产生裂纹、结构模糊．结论：Ｎｄ：ＹＡＧ激光的能量、频率均可影响牙髓细胞形态     

He－Ne激光照射狗牙深洞后的牙髓组织学反应

选用４只成年杂种狗，在其牙齿唇颊面近颈部制备深洞，用５ｍＷＨｅ－Ｎｅ激光照射２、１０、２０Ｊ／ｃｍ＋２，其中二组照射前窝洞内引入１０μｇ／ｍｌ的亚甲蓝，观察１、２个月。结果显示：２月未加亚甲蓝组的修复性牙本质形成同照射与否存在显著差异（ＦＫＰＦＦ＜０．０１），表明在平均０．４８ｍｍ厚牙本质阻隔的条件下，２～２０Ｊ／ｃｍ２的Ｈｅ－Ｎｅ激光照射仍对牙髓组织具有一定的生物刺激效应     

人牙髓细胞的体外培养

对牙髓细胞的体外培养是研究牙髓的有效工具。随着细胞培养技术的发展，牙髓细胞培养的成功率不断提高。干细胞生物学的研究使得人们认识到，在成体组织中也存在干细胞。目前不仅已分离出牙髓干细胞，而且对其干细胞特征作了进一步的研究，这将给牙髓病治疗和牙齿组织工程带来重大的变化。     

人牙髓细胞的体外培养

对牙髓细胞的体外培养是研究牙髓的有效工具。随着细胞培养技术的发展,牙髓细胞培养的成功率不断提高。干细胞生物学的研究使得人们认识到,在成体组织中也存在干细胞。目前不仅已分离出牙髓干细胞,而且对其干细胞特征作了进一步的研究,这将给牙髓病治疗和牙齿组织工程带来重大的变化。     

4种牙体修复材料对人牙髓细胞毒性的实验研究

目的：比较4种牙体修复材料--Dyract AP、Ceram X、Quixfil U及Surefil复合树脂对人牙髓细胞的生物学作用.方法：制备4种牙体修复材料的细胞培养基（DMEM）浸出液,采用四唑盐MTT比色分析法测定材料对人牙髓细胞生长的影响;通过扫描电镜观察人牙髓细胞在不同材料表面的生长情况.结果：人牙髓细胞在4种复合树脂浸出液作用下,细胞相对增值率（RGR）与对照组相比均有显著性差异（P＜0.05）,其中Surefil的RGR与其他3种材料相比有显著性差异（P＜0.05）,而Ceram X、Quixfil U、Dyract AP 3种材料之间RGR无显著性差异（P＞0.05）;扫描电镜观察到人牙髓细胞在4种材料表面均可贴附,且生长良好.结论：4种牙体修复材料均对牙髓细胞的生长无不良影响,具有良好的生物相容性.     

矿化液诱导人前磨牙牙髓干细胞向成骨细胞样细胞的分化

目的:探讨矿化液诱导人前磨牙牙髓干细胞(HDPSCs)向成骨细胞样细胞分化的潜力.方法:矿化液诱导前磨牙HDPSCs 28d,于诱导的第7、28天时,应用酶化学染色检测碱性磷酸酶(ALP)表达;第14、21、28天时,应用茜素红染色观察细胞矿化情况;于诱导的第0、3、5、7、14、21、28天时,采用RT-PCR法检测其ALP、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨涎蛋白(BSP)和骨钙素(OCN)的基因表达;Western印迹分析、免疫细胞化学染色检测BSP及OCN蛋白的表达.结果:经矿化液诱导后,前磨牙HDPSCs ALP染色阳性,形成钙结节.诱导第3天,细胞ALP mRNA呈高表达;DSPP始终不表达;BSP、OCN mRNA于第5天开始表达,并随时间延长而表达增高;BSP蛋白表达趋势与其RT-PCR结果一致;第5天时OCN染色阳性.结论:前磨牙牙髓干细胞具有向成骨细胞样细胞分化的潜能,有望成为骨组织工程的种子细胞.     

大肠杆菌脂多糖影响Toll样受体4在人牙髓细胞的表达

目的:探讨大肠杆菌脂多糖(lippolysacchaide,LPS)对体外培养的人牙髓细胞(human dental pulp cells,HDPCs)Toll样受体4(Toll-likereceptor4,TLR4)表达的影响及TLR4在LPS对牙髓细胞激活中的作用。方法:以大肠杆菌LPS刺激体外培养的人牙髓细胞,运用实时荧光定量RT-PCR和免疫荧光技术分别检测牙髓细胞TLR4mRNA和蛋白的表达。利用抗体阻断和ELISA方法观察TLR4在LPS激活牙髓细胞释放IL-1β中的作用。结果:正常牙髓细胞不表达TLR4,1×10-4g/L大肠杆菌LPS作用HDPCs6、12、24h后均可见TLR4在胞膜/胞质的表达,胞核并不表达TLR4。FQRT-PCR结果表明LPS能明显上调牙髓细胞TLR4mRNA的表达(P<0.001),并具有LPS浓度依赖性。抗体阻断和ELISA结果证实LPS能激活牙髓细胞释放IL-1β(P<0.01),抗TLR4单抗能明显抑制LPS对HDPCs的激活(P<0.05)。结论:正常人牙髓细胞不表达TLR4,大肠杆菌LPS能诱导牙髓细胞表达TLR4mRNA和蛋白。TLR4介导了LPS对牙髓细胞的活化,在LPS对牙髓细胞激活效应中具有重要作用。     

两种不同盖髓剂对人牙髓细胞毒性的体外研究

目的:研究丁香酚及Dycal对人牙髓细胞的毒性。方法:体外组织块法培养人牙髓细胞,采用噻唑蓝比色法(MTT法)及台盼蓝染色活细胞计数法来评价不同浓度及不同时间段丁香酚及Dycal对牙髓细胞细胞毒性,比色法测定丁香酚干预组细胞内总谷胱甘肽含量。结果:0.1mmol/L浓度的丁香酚及0.1%浓度的Dycal对人牙髓细胞毒性明显,其对细胞毒性反应成浓度及时间依赖性改变。各丁香酚组细胞内谷胱甘肽含量低于对照组,第3天丁香酚最低浓度组细胞内谷胱甘肽含量高于高浓度组。结论:高浓度丁香酚及Dycal对牙髓细胞毒性明显,细胞毒性与浓度及作用时间有关。低浓度丁香酚可能通过谷胱甘肽的参与抵抗氧化应激,从而起到对细胞的保护作用。Dycal可能更加适合用于间接盖髓。     

人牙髓细胞体外培养的方法学研究

作者观察了组织块法和酶消化法以及ＤＭＥＭ和ＲＰＭＩ１６４０二种常用培养液在人牙髓细胞体外培养中的效果。结果表明，组织块法培养出的牙髓细胞为单一的成纤维细胞样细胞，用ＤＭＥＭ时，其传代成功率明显高于用ＲＰＭＩ１６４０；胰蛋白酶消化法、胰蛋白酶和胶原酶联用可培养出成纤维细胞样细胞，少量地梭形细胞和内皮样细胞，钽细胞数量较少，生长缓慢，达不到传代要求。ＤＭＥＭ的培养板和组织培养瓶中均较适合牙髓细胞的生长     

体外培养的人牙髓细胞表型分析

目的：分离培养来源于人体的牙髓细胞并对其细胞表型进行分析。方法：采用组织块法培养人牙髓细胞,根据牙髓的细胞成分选择特异性抗体,利用免疫组化技术对其细胞表型进行分析。结果：Ⅲ型胶原在体外培养的牙髓细胞中广泛表达,ON和OPN表达也较广泛,阳性细胞呈星形,伸出多个胞浆突起互相连接;α-平滑肌肌动蛋白和CD34表达细胞为集落状,前者呈细长的梭形,后者呈圆形;Ⅰ型胶原、BSP和OC仅在少量细胞中表达,且细胞形态不规则;DSP、NF、CD14及CD45均为阴性。结论：体外培养的人牙髓细胞表型呈现多样性,表达平滑肌、内皮细胞及骨的标志物。