山楂叶与三七叶有效部位组合物对兔全脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察山楂叶与三七叶有效部位(SS)组合物对兔全脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用六动脉结扎加股动脉放血法制备家兔全脑缺血再灌注损伤模型,缺血30 min,再灌注2 h。40只家兔随机分为假手术组、模型组、血塞通21. 0 mg/kg组、SS组合物高、低剂量组(6. 370、3. 185 mg/kg)。于再灌2 h后使用南京建成生物工程研究所测定试剂盒检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)、谷氨酸含量及血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力,并进行病理学检查。结果 SS组合物高、低剂量组均能明显增加脑组织SOD活性(P<0. 01; P<0. 05),降低脑组织中MDA含量(P<0. 01)及脑组织中谷氨酸含量(P<0. 01; P<0. 05),同时还可明显增加血清GSH-PX活力(P<0. 05),病理检查结果显示,SS组合物能减少家兔全脑缺血再灌注损伤的脑组织范围,并能保护神经细胞。结论 SS组合物对兔脑缺血再灌注损伤有一定的保护及改善作用,其机制可能与其抗氧化和抑制兴奋性氨基酸释放或拮抗兴奋氨基酸毒性有关。     

党参对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究党参(Codonopsis pilosula．)对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用，并从改善能量代谢角度探讨其作用机制。方法 Wistar大鼠随机分为假手术组，缺血再灌注 生理盐水组，缺血再灌注 党参组，缺血再灌注 CoQ10组。其中缺血再灌注 生理盐水组、缺血再灌注 党参组、缺血再灌注 CoQ10组分别连续5d灌胃口服生理盐水、党参浸提液、CoQ10混悬液。采用阻断大鼠双侧颈总动脉和尾部放血，并重复缺血再灌注的脑缺血模型，分别于缺血后3，6，12h断头取脑，采用高效液相法测定脑组织中ATP含量、比色法测定Na^ ，K^ —ATPase活性。结果 生理盐水对照组中大鼠脑组织ATP含量、Na^ ，K^ —ATPase活性明显低于假手术组(P＜0．05)，党参组、CoQ10组中大鼠脑组织ATP含量、Na^ ，K^ —ATPase活性明显高于生理盐水对照组(P＜0．05)，且二者间无显著性差异。结论 党参可改善缺血再灌注脑细胞能量代谢，具有脑保护作用，作用效果与CoQ10相近。     

神经生长因子对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制

目的探讨神经生长因子（NGF）对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法将120只雄性Wistar大鼠随机分为脑缺血组、NGF组及对照组各40只。脑缺血组、NGF组采用大脑中动脉内栓线阻断法造成大鼠局灶性损伤模型,NGF组术后即刻肌注NGF1000BU,脑缺血组和对照组注射等量生理盐水。观测三组不同时间点神经学评分改变及一氧化氮合酶（NOS）水平变化。结果与脑缺血组比较,NGF组神经学评分及NOS水平明显降低（P〈0．05）。结论NGF对脑缺血再灌注损伤有保护作用,可能机制为抑制NOS活性。     

大黄及其提取物对脑缺血大鼠一氧化氮和肿瘤坏死因子的影响

目的 从一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子(TNF)的变化探讨大黄及其提取物抗脑缺血损伤的机制。方法 采用双侧颈总动脉缺血模型，分为假手术组、模型组、尼莫地平组、大黄组、大黄部位1组、大黄部位2组、大黄部位3组、大黄部位4组。观察脑组织病理改变，测定脑电图、脑组织和血清NO和TNF—α。结果 模型组脑电图幅值降低、脑组织病理损伤严重，血清和脑组织中：NO、TNF—α水平增高。与模型组比较，尼莫地平组和其他用药组脑组织病理损伤减轻；除了大黄部位2组外，其他用药各组脑电幅值增高；尼莫地平组、大黄组、大黄部位3组、大黄部位4组血清和脑组织NO、TNF—α水平显著降低；大黄部位1组脑组织TNF—α水平和血清NO、TNF—α水平降低显著，大黄部位2组脑组织NO含量和血清、脑组织TNF—α水平皆降低明显。结论 大黄及4个不同部位可改善缺血后脑组织损伤，其保护机制可能与减轻NO、TNF介导的神经毒性作用有关。     

参附注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用研究

为观察参附注射液对短暂脑缺血大鼠血浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、血栓素B2(TXB2)及6-酮-前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)含量的影响，2003年3～5月，我们做了相关动物实验，以探讨其对脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。     

雌激素在雄性大鼠脑缺血再灌注损伤中的保护作用

1材料与方法 健康雄性wister大鼠98只,体重240～280g,随机分组.梗死体积、脑含水量实验分别分为3组:假手术组、缺血2 h再灌注24h组及相应的雌激素治疗组.丙二醛、超氧化歧化酶(SOD)实验分为7个组:假手术组、缺血2 h再灌注1 h、6h、24h组及缺血2 h再灌注1 h、6 h、24 h雌激素治疗组.采用改进Lonha方法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCHO)模型.     

参芎注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察参芎注射液对脑缺血再灌注大鼠行为学、脑梗死体积和组织病理学的影响,探讨其脑保护作用及机制。方法33只雄性SD大鼠随机分为4组假手术组、对照组、川芎嗪组和参芎组。采用线栓法制作大脑中动脉缺血1h再灌注模型,用Longa5分制评分和氯化三苯四氮唑(TTC)染色法评价行为学和脑梗死体积,再灌注24h时电镜观察缺血边缘区超微结构改变。结果各组在再灌注6h和24h时,Longa评分无显著差异,但参芎组再灌注24h时的Longa评分较再灌注6h时显著改善(P<0·05);川芎嗪组和参芎组的梗死体积较对照组显著缩小(P<0·05),川芎嗪组和参芎组两组比较无显著差异;川芎嗪组、参芎组细胞的损伤程度较对照组显著减轻(P<0·05);在电镜下,参芎组缺血边缘区的神经细胞超微结构改变轻于对照组,优于川芎嗪组。结论参芎注射液对脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用,且优于单用川芎嗪。     

大黄酚脂质体对脑缺血再灌注损伤小鼠体内抗氧化作用的影响

目的探讨大黄酚(Chry)脂质体(Chr-lip)对脑缺血再灌注损伤小鼠抗氧化作用的相关机制。方法应用线栓法建立小鼠脑缺血再灌注模型,随机分为正常对照组、假手术组、模型组、Chr-lip 3个剂量组。Chr-lip组腹腔给予Chr-lip(10.0,5.0,0.5 mg/kg)1 w,1次/d,采用试剂盒法检测血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平。结果 Chr-lip血清中T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT活性均显著高于模型组,MDA含量显著低于模型组(均P<0.05)。结论 Chr-lip具有提高小鼠脑缺血再灌注损伤抗氧化能力的作用。     

迷走神经刺激对脑缺血大鼠神经保护作用机制的研究

目的通过刺激短暂性局灶性脑缺血大鼠模型迷走神经,探讨迷走神经刺激(VNS)对脑缺血神经保护的作用机制。方法成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠26只,根据体质量大小编号,计算机随机分成假手术组(6只)、模型组(10只)、VNS治疗组(10只)。采用线栓法建立大鼠短暂性局灶性脑缺血模型,VNS治疗组于模型建立30 min后开始刺激颈部右侧迷走神经,刺激强度0.5mA,间期0.5ms,频率20Hz,在1h内每隔5min刺激1次,每次持续30s。模型组重复VNS治疗组步骤,但不予刺激。假手术组重复实验步骤,但既不栓塞血管也不刺激神经。使用激光多普勒血流仪监测脑血流变化。24 h后处死大鼠,取脑组织行免疫组化检测白细胞介素6(IL-6)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达,及原位末端标记法观察神经细胞凋亡情况。结果 (1)与假手术组相比,模型组的IL-6、caspase-3阳性细胞数、神经细胞凋亡计数明显增加[(20.7±5.0)个/高倍镜(HP)比(2.3±1.0)个/HP,(44.5±9.5)个/HP比0,(30.9±9.0)个/HP比0],差异有统计学意义(P0.01);(2)与模型组相比,VNS治疗组的IL-6阳性细胞数[(10.9±3.7)个/HP]、caspase-3的阳性细胞数[(18.9±6.7)个/HP]及神经细胞凋亡计数[(14.0±5.2)个/HP]明显减少,差异有统计学意义(P0.01);(3)模型组与VNS治疗组在造模前及造模后各个时期的脑血流量比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 VNS对脑缺血的神经保护作用机制与通过抑制神经细胞凋亡及减少炎性反应有关,可能与皮质脑血流改变无关。     

补肾活血化痰方对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察补肾活血化痰方对鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型;采用TTC染色、临床神经功能评分、流式细胞分析和原位末端标记等方法,分别对假手术组、缺血再灌注组(模型组)、胶囊用药(高、中、低剂量)组的缺血后大鼠神经功能缺损征象、再灌注后缺血侧脑梗死面积、鼠脑缺血边缘区神经细胞的凋亡进行观测和比较.结果胶囊用药各剂量组的神经功能评分、脑梗死面积、缺血边缘区神经细胞的凋亡百分率及凋亡细胞数;与缺血再灌注组比较均明显减少(P<0.05).结论补肾活血化痰方具有显著的抗凋亡作用,对缺血再灌注脑组织损伤具有保护作用.     

大鼠缺血脑组织芯片的构建

目的构建缺血性脑损伤大鼠脑组织芯片,为缺血性脑损伤研究提供实验工具。方法将50只雄性SD大鼠随机分为脑缺血20 m in后再灌注1、4、7、14、28 d五组,每组8只,每个时间点设立假手术组2只。采用四血管闭塞全脑缺血模型。选择大脑颞叶皮质、海马、胼胝体为观察位点,依次经过微阵列设计、预制受体蜡块、供体蜡块定位、穿芯取样、连续切片及烤片等步骤,构建缺血性脑损伤大鼠脑组织芯片。结果在36 mm×26 mm×15 mm受体蜡块上,构建15×10共150点阵芯片,分布150个组织标本,每点直径1.0 mm,并连续4μm厚微阵列切片。肉眼所见点阵分布均匀,蜡块无裂纹,载玻片上点阵无脱落,有6点发生移位,移位率为4%。HE染色显示取样组织边缘清晰,无明显组织结构变形。结论成功构建大鼠缺血脑组织芯片,为缺血性脑损伤研究提供便捷的实验工具。     

脑脉通对老龄大鼠脑缺血再灌注血-脑脊液屏障损伤的保护作用

目的研究脑脉通对老龄大鼠脑缺血再灌注（1／R）血-脑脊液屏障（BBB）损伤的保护作用。方法采用线栓法复制局灶性脑缺血模型，分为假手术组、模型组、脑脉通组、尼莫地平组，后3组又分为脑缺血（I）3h和I／R6、12、24h,3、6d时间点。观察脑组织含水量、病理变化、免疫球蛋白（IgG）表达。结果模型组脑组织含水量升高，IgG漏出增加，BBB通透性增加。脑脉通降低脑组织含水量（I／R24h、3d）、减少IgG漏出（I／R24h～6d）、降低BBB通透性。结论脑脉通改善I／R脑损伤作用显著，其机制可能与改善BBB通透性、降低脑水肿有关。     

脑缺血再灌注后神经细胞bcl-2、bax和p53mRNA的表达

目的　研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞 bcl- 2、bax和 p53m RNA表达的变化规律。方法　利用大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型 ,原位杂交技术分别观察缺血 1 .5 h再灌注后 2 h、 6 h、 1 2 h、 1 d、 2 d、 3 d、 7d和 1 4 d不同时间点神经细胞 bcl- 2、 bax和 p53 m RNA的表达。结果　脑缺血再灌注 2 h在缺血周围区 bcl- 2 m RNA开始表达 ,1 d达高峰 ,之后逐渐减弱 ,再灌注 1 4 d接近假手术组水平 ;bax m RNA与 p53 m RNA均于缺血再灌注 6 h出现 ,bax m RNA于 1 d达高峰 ,3 d降至假手术组水平 ,p53 m RNA于 1～ 2 d达高峰 ,7d降至假手术组水平。结论　脑缺血再灌注后 bcl- 2、 bax和 p53m RNA的表达与缺血性损伤有一定关系 ,参与了神经细胞凋亡的调节     

T淋巴细胞在缺血性脑损伤中的作用

缺血性脑损伤程度与卒中的病死率和致残率密切相关,如何最大程度地限制缺血性脑损伤,促进神经功能恢复,是当今神经科学领域十分关注的研究热点之一.大量研究表明,多种因素参与了缺血性脑损伤的病理过程.其中,T淋巴细胞介导的免疫炎症反应在缺血性脑损伤中的作用越来越受到关注,文章主要综述了T细胞在缺血性脑损伤中的作用.     

川芎嗪对脑缺血再灌注损伤热休克蛋白70表达的影响

目的研究大鼠脑缺血再灌注（ＣＩＲＩ）时热休克蛋白（ＨＳＰ）７０表达及川芎嗪对ＨＳＰ７０表达的影响。方法采用大鼠左侧颈总动脉结扎并滴注生理盐水脑ＣＩＲＩ模型，以免疫细胞化学法检测２４只鼠脑ＣＩＲＩ及川芎嗪干预ＣＩＲＩ脑组织ＨＳＰ７０表达，并与病理组织学改变进行对照研究。结果（１）非缺血侧脑组织无ＨＳＰ７０表达，缺血３０分钟缺血侧大脑皮层可见ＨＳＰ７０表达；再灌注３０分钟组仅１只大鼠（１／６）缺血侧大脑皮层有ＨＳＰ７０表达。（２）与单纯缺血大鼠相比，川芎嗪干预组缺血侧大脑皮层ＨＳＰ７０表达明显增强，计算机辅助图像半定量分析，ＨＳＰ７０免疫阳性细胞数，分别为平均４３６±１２５个／片和８５０±１６７个／片，两组间差异非常显著（Ｐ＜０００１）。（３）缺血侧皮层神经细胞呈现轻度缺血改变，部分细胞核固缩深染，细胞缩小，细胞周围间隙增大；川芎嗪干预大鼠缺血损伤程度有减轻，细胞核固缩减轻，细胞无缩小。结论脑缺血时可诱导缺血脑细胞部分ＨＳＰ７０表达，川芎嗪干预可使缺血大脑皮层ＨＳＰ７０表达明显增强，皮层神经细胞的缺血损伤减轻。     

清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤Nestin、NGF表达的影响

目的研究清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤后巢蛋白(Nestin)、神经生长因子(NGF)表达的影响,探究清脑益元汤对缺血性脑损伤神经元保护作用的部分机制。方法将192只健康SD大鼠随机分为两大组,每大组再分为4个亚组:空白组(n=6)、假手术组(n=30)、模型组(n=30)、清脑益元汤组(n=30)。采用改良的Longa线栓法制备大鼠急性脑缺血损伤模型,除空白组外,假手术组、模型组及清脑益元组按缺血损伤后1 d、3 d、7 d、14 d、28 d 5个取材时间点分为5个亚组。造模成功后取大鼠缺血侧脑组织,采用免疫组化法检测大鼠缺血侧皮质区Nestin、NGF表达,采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)法检测大鼠缺血侧皮质区Nestin、NGF mRNA表达。结果(1)免疫组化法:与假手术组相比,模型组、清脑益元组在缺血侧Nestin、NGF阳性细胞明显增多(P<0.01,P<0.01);与模型组相比,清脑益元组Nestin、NGF阳性细胞表达明显增多(P<0.01,P<0.05);(2)Real-Time PCR法:与假手术组相比,模型组、清脑益元汤组大鼠脑组织缺血侧皮质区Nestin、NGF mRNA表达量增加(P<0.01,P<0.01);与模型组相比,清脑益元汤组大鼠脑组织缺血侧皮质区Nestin、NGF mRNA表达量升高(P<0.01,P<0.05)。结论清脑益元汤可能通过上调脑缺血损伤后Nestin、NGF蛋白及mRNA表达,促进脑组织损伤修复、保护神经元,进而发挥脑保护的作用。     

缺血后处理对再灌注大鼠胃黏膜细胞的保护作用

目的探讨缺血后处理对再灌注大鼠胃黏膜的保护作用及其抗氧化机制。方法制备胃缺血后处理模型;实验分为5组（n=6）：假手术组（S）、单纯缺血-再灌注组（I—R）、缺血预处理组（IPC）、缺血后处理组（I-post）、缺血后处理＋缺血预处理组（I-post＋IPC）。记录各组胃黏膜损伤指数并检测胃黏膜丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）的活性变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测胃黏膜细胞的凋亡。结果 与S组相比,I—R组胃黏膜损伤指数和黏膜细胞凋亡率显著升高,胃黏膜MDA含量屁著增加,SOD活性明屁降低;在IPC组、I-post组和I-post＋IPC组,胃黏膜损伤指数与细胞凋亡率较I—R组显著降低,胃黏膜MDA含量也显著降低,而SOD活性明显升高;I-post＋IPC组对再灌注的胃黏膜损伤无叠加保护作用,分别与IPC组和I-post组相比,各项指标的差异无统计学意义。结论缺血后处理可显著减轻胃黏膜再灌注损伤,其效应与缺血预处理相似,其机制之一可能与其再灌注后氧自由基的生成减少,抑制胃黏膜细胞膜脂质过氧化、使冉灌注的胃黏膜细胞凋亡减轻有关。     

妥泰治疗新生大鼠缺氧缺血性脑水肿的实验研究

将32只7日龄Wister大鼠随机分为正常对照组（8只）、缺氧缺血组（12只）、妥泰治疗组（12只）。缺氧缺血后即刻经胃管注入妥泰或生理盐水,24小时后检测各组脑含水量、伊文思蓝（EB）含量及脑组织钠、钙含量。结果显示,缺氧缺血组脑含水量、EB含量及钠、钙含量明显高于对照组（P＜0．01）;妥泰治疗组脑含水量、EB含量及总钠含量明显低于缺氧缺血组（P＜0．01、0．05、0．05）。证实妥泰能减轻缺氧缺血后脑组织中钠蓄积,降低血脑屏障的通透性,减轻脑水肿。     

N-甲基-D-天门冬氨酸受体-1反义寡核苷酸对大鼠脑缺血性损伤的保护作用

目的探讨N-甲基-D-天门冬氨酸受体1(NMDAR1)反义寡核苷酸(ASODN)对局灶性脑缺血再灌注损伤后的影响。方法将90只雄性Wistar大鼠随机分为3组:缺血再灌注组30只:采用Longa改良方法制作大鼠可复流大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,在缺血2h后进行再灌注;对照组30只:MCAO模型成功后立即向侧脑室内注入10μl灭菌PBS,在缺血2h后进行再灌注;ASODN组30只:MCAO模型成功后立即向侧脑室注入10μlNMDAR1反义寡核苷酸。以上3组依缺血2h后再灌注时间0、6、24、48、72h分为5个亚组,除再灌注72h时间点10只外,其余每个亚组5只。在相应时间点取脑,行HE染色、NMDAR1免疫组织化学检测及脑梗死体积测定。结果ASODN组神经功能缺损评分(1.4±0.5)显著低于缺血再灌注组(2.4±0.6)和对照组(2.5±0.4),P<0.05;ASODN组缺血周边区NMDAR1阳性细胞数(36±10)显著少于缺血再灌注组(46±20)和对照组(50±16),P<0.05。ASODN组平均脑梗死体积百分比(28±4)%显著低于缺血再灌注组(42±3)%和对照组(43±5)%,P<0.01。结论局灶性脑缺血后侧脑室内注入NMDAR1反义寡核苷酸可缩小梗死体积,具有脑保护作用。     

脑缺血预处理对calpain活性影响的实验研究

目的通过观察大鼠局灶脑缺血预处理模型对钙依赖中性蛋白酶(calpain)活性变化的影响,初步探讨calpain与脑缺血预处理神经保护作用的关系。方法55只Wistar大鼠随机分为4组,假手术对照组、预处理对照组、预处理缺血组、脑缺血组,比较各组神经功能评分、脑梗死体积、calpain活性变化及组织病理变化。结果预处理缺血组神经功能评分、梗死体积明显低于脑缺血组(P<0.01)。预处理缺血组calpain活性低于脑缺血组(P<0.05)。组织病理可见预处理缺血组有部分梗死性病变,神经元数量明显减少,但组织结构轮廓尚存。假手术对照组及预处理对照组无神经功能缺损及梗死灶形成。结论脑缺血预处理可产生缺血耐受现象,减小梗死体积,减轻缺血性神经损伤,抑制calpain活性。calpain活性减弱可能在脑缺血耐受中发挥一定作用。