结核分枝杆菌检测阳性报告时间探讨——罗氏培养、7H9培养及MPB64胶体金法

[目的]通过改良酸性罗氏培养、7H9液体培养及MPB64的免疫胶体金法对分枝杆菌的检测阳性报告时间进行比较,以了解现有结核分泌蛋白抗原MPB64检测试剂在肺结核诊断尤其是早期诊断中的应用价值。[方法]收集90例确诊为结核病患者的临床标本,分别用改良罗氏培养基培养、7H9液体培养及MPB64的免疫胶体金法检测结核分枝杆菌,并对检测阳性报告时问进行比较。[结果]早期MPB64抗原胶体金检测试剂盒的阳性率明显高于7H9液体培养法和改良酸性罗氏培养法。[结论]MPB64抗原可以作为一种较为敏感、快速简便的检测结核分枝杆菌感染的方法,有助于结核病临床的快速诊断。     

137份痰标本结核MPB64抗原检测结果分析

目的 为研究结核分枝杆菌MPB64抗原检测结果敏感性、特异性以及最早检测时限,以寻找新型更好更快结核病病原检验方法,为结核病早诊断、早治疗提供科学依据.方法 痰标本经4%氢氧化钠恰当处理后,用PH6.8磷酸盐缓冲液中和,再接种快速变色培养基培养6-8天,吸取培养匀液滴加结核MPB64抗原胶体金免疫层析板;以痰厚涂片抗酸染色镜检找抗酸杆菌和改良酸性罗氏培养基培养结核杆菌作对照.结果 痰涂片阳性率为11.68%;酸性罗氏培养基培养结核杆菌阳性率为24.82%;结核MPB64抗原检测阳性率为35.77%.酸性罗氏培养基培养结核杆菌检出时限平均35天,而结核MPB64抗原检测平均为7天.结论 结核MPB64抗原检测具有敏感、特异和快速等特点,是对目前结核病病原学检验方法的有力补充,适合基层结防机构开展.     

变色液体培养基快速检测分枝杆菌的临床应用评价

目的对变色液体培养基快速检测分枝杆菌进行评价.方法通过对113例已确诊肺结核病人,24例非结核病人的晨痰分别用一种新型的分支杆菌快速变色液体培养基与改良罗氏培养基进行培养,同时做涂片抗酸染色.结果变色液体培养基阳性率54.9%(62/113),平均检出时间12天(3～17天);改良罗氏培养基阳性率52.2%(59/113);平均报告时间29天(14～42天);两者阳性检出率差异无显著性(x=0.16,P＜0.05).24例非结核病人,痰抗酸染色,改良罗氏培养基,变色液体培养基检测均为阴性结果.结论变色液体培养基检测分支杆菌阳性率高,报告时间短,不需特殊仪器设备,值得在各实验室推广应用.     

变色液体培养基快速检测分枝杆菌的临床应用评价

目的 对变色液体培养基快速检测分枝杆菌进行评价 方法通过对113例已确诊肺结核病人,24例非结核病人的晨痰分别用一种新型的分支杆菌快速变色液体培养基与改良罗氏培养基进行培养,同时做涂片抗酸染色。 结果 变色液体培养基阳性率54.9％(62/113),平均检出时间12天(3~17天);改良罗氏培养基阳性率52.2％(59/113):平均报告时间29天(14—42天);两者阳性检出率差异无显著性(x2=0.16,P>0.05),24例非结核病人,痰抗酸染色,改良罗氏培养基,变色液体培养基检测均为阴性结果。 结论 变色液体培养基检测分支杆菌阳性率高,报告时间短,不需特殊仪器设备,值得在各实验室推广应用。     

结核分枝杆菌快速培养基临床应用研究

目的 评价分枝杆菌变色液体培养基快速检测痰标本结核分枝杆菌的可靠性.方法 将230例疑似肺结核患者痰标本接种于分枝杆菌变色液体培养基和酸性罗氏培养基培养,进行对照平行测定.结果 230例痰涂片标本检出阳性率为27.8%;变色液体培养基和酸性罗氏培养基培养阳性率分别为47.4%,47.0%,两种方法阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 分枝杆菌变色液体培养基检测结核分枝杆菌具有特异、快速、可靠等优点,对结核病患者的早发现、早治疗具有积极意义.     

Xpert MTB/RIF检测技术在肺结核实验室诊断中应用价值探析

目的：探讨结核分枝杆菌及利福平耐药检测(Xpert MTB/RIF)在肺结核实验室诊断中的临床价值。方法：选取2020年1月至2022年1月收治的118例疑似肺结核患者作为研究对象,所有疑似患者均采集痰液标本,开展痰培养、痰涂片抗酸染色、Xpert MTB/RIF检测,并以痰培养为金标准,分析痰涂片抗酸染色法、Xpert MTB/RIF检测诊断肺结核的临床价值;采用kappa检验验证痰涂片抗酸染色法、Xpert MTB/RIF检测诊断肺结核与痰培养的一致性。结果：118例疑似患者痰培养检出92例,其中痰涂片抗酸染色法检出80例,检出率为86.96%(80/92);Xpert MTB/RIF检测检出90例,检出率为97.83%(90/92);Xpert MTB/RIF检测检出率高于痰涂片抗酸染色法,差异有统计学意义(χ²=7.731,P=0.005);Xpert MTB/RIF检测诊断肺结核的灵敏度[96.74%(89/92)]、准确度[96.61%(114/118)]及阴性预测值[89.29%(25/28)]高于痰涂片抗酸染色法[84.78%(78/92)、86....     

痰涂片检查在结核病控制项目工作中的实验评价

目的评价痰涂片检查在世界银行贷款结核病控制项目中的作用。方法分别采用直接涂片抗酸染色法和经典改良罗氏培养基培养法对120例患者痰标本进行平行试验并比较结果。结果120例符合项目要求合格痰直接涂片抗酸染色法阳性率为30%（36/120）,并经省、市项目参比实验室复核证实,改良罗氏培养法阳性率为34.17%（41/120）。另对不符合项目质控要求的80例黏液唾液痰进行涂片检查和培养,结果直接抗酸涂片阳性率仅为1.25%（1/80）,改良罗氏培养法阳性率为3.75%（3/80）,均明显低于合乎项目质控要求的120例痰标本阳性率（P〈0.01）。结论用直接涂片抗酸染色法查痰出结果时间短、简便、费用低,只要痰标本质量符合项目要求,痰检质控好,并且镜检认真判读,就能最大限度地提高阳性率、减少排菌患者漏诊,反映出项目中痰涂片查菌是可信的。     

支气管肺泡灌洗液中分支杆菌检查方法的研究

目的 :研究痰涂片阴性的肺结核病人支气管肺泡灌洗液 (BAL F)标本的最佳检查方法。方法 :采用直接涂片法、沉淀集菌法、改良罗氏培养法和 BACTEC快速培养法进行分支杆菌检测。结果 :直接涂片法检出 4例 ,阳性率 2 .6 % ;沉淀集菌法检出 18例 ,阳性率 11.6 % ;改良罗氏培养法检出 2 8例 ,阳性率 18.1% ;BACTEC快速培养法检出 46例 ,阳性率 2 9.7%。结论 :支气管肺泡灌洗液检查分支杆菌 ,最好是沉淀集菌法和改良罗氏培养法同时进行 ,才能达到高的检出率。     

两种方法在结核分枝杆菌培养中的比对研究

目的比较MGIT960系统液体培养法与改良罗氏(L-J)培养法在结核分枝杆菌培养中的效果。方法选择2015年1月至2017年12月到该所就诊的活动性肺结核患者3 685例,对每份病例标本分别进行痰涂片抗酸染色(萋-尼法)镜检、改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法,并分别计算抗酸染色镜检与改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法的阳性符合率;统计改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法的阳性率、污染率及培养时间。结果痰涂片镜检与改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法的阳性符合率分别为94.21%(114/121)和82.64%(100/121)。改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法结果符合率为93.70%(3 197/3 412),所需的培养时间分别为28.0(25.0～31.0)d和16.5(14.0～19.0)d。结论 MGIT960系统液体培养法阳性率与传统的改良罗氏(L-J)培养法基本一致,报告时间平均缩短至16.5d,比改良罗氏(L-J)培养法提前10.0d以上,为临床早诊断、早治疗提供了可靠依据,而且为后续进行的药敏试验提供了菌株。     

直接检测痰标本中MPB64蛋白在结核病诊断中的临床应用价值

目的:探讨直接检测痰液标本MPB64蛋白作为结核病快速诊断方法的可能性.方法:对65例肺结核病患者和72例非结核病患者的痰液标本同时进行痰涂片染色抗酸菌检查、实时荧光定量PCR检测结核杆菌DNA和免疫胶体金法检测MPB64蛋白,比较分析3种方法的检测结果,并依据临床诊断对MPB64蛋白检测结果进行诊断方法学评价.结果:MPB64蛋白检测法与涂片染色、荧光定量PCR检测结果的符合率均为60.58%:MPB64蛋白检测的敏感度、特异度、准确度分别为58.46%、69.44%和64.23%,其敏感度显著高于涂片染色法的27.69%与荧光定量PCR法的35.38%,但其特异度和准确度则低于涂片染色法(100%、65.69%)与荧光定量PCR法(98.61%、68.61%).结论:采用免疫胶体金法直接检测痰液标本中MPB64蛋白对结核病的诊断具有较高的敏感度,可以作为筛查检测手段;但特异度相对较低,可否作为一种结核病快速诊断方法值得进一步研究.     

显色固液双相培养基快速检测结核分枝杆菌的临床应用评价

目的探讨固液双相培养基快速检测结核分枝杆菌的临床价值。方法对350例患者的痰标本分别进行涂片抗酸染色、改良罗氏培养法、固液双相培养法、Bactec 960培养法检测。结果 350例痰标本涂片抗酸染色法阳性率为14.8%,改良罗氏培养法为24.0%,固液双相法为35.7%,Bactec 960培养法为40.3%,改良罗氏培养法与涂片抗酸染色法比较,差异有统计学意义(P0.01),固液双相培养法与改良罗氏培养法比较,差异有统计学意义(P0.01),固液双相培养法与Bactec 960培养法比较,差异无统计学意义(P0.05)。改良罗氏培养法平均报告阳性时间为21.5d,固液双相培养法液相平均为13.2d,固相为16.4d,Bactec 960培养法平均为11.8d。结论固液双相培养法操作简便,阳性率高,时间短,适合基层医院快速检测结核分枝杆菌。     

环介导等温扩增技术检测肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌

目的建立环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测肺结核患者痰标本和分枝杆菌阳性培养物中的结核分枝杆菌(MTB)。方法选择临床可疑肺结核患者痰标本121份、MTB阳性分离物14份,非结核分枝杆菌(NTM)阳性分离物14种共31株,用涂片抗酸染色镜检、罗氏固体培养基培养、LAMP技术分别进行检测,用LAMP技术对人MTB标准菌株H37Rv及卡介苗(BCG)进行检测,判断LAMP检出限并评价敏感性和特异性。结果涂片法抗酸杆菌检出率为38.02%(46/121),培养法MTB检出率为42.15%(51/121),LAMP法MTB检出率为49.28%(56/121),差异无统计学意义(χ2分别为3.146和1.247,P均>0.05)。对121例可疑肺结核患者痰标本进行MTB检测,以罗氏固体培养基培养结果为金标准,LAMP检测结果的敏感性为92.16%(47/51),特异性为87.14%(61/70),二者无显著性差异(χ2=1.247,P>0.05),且一致性强(kappa=0.78,P<0.01)。LAMP能准确分辨MTB和NTM阳性分离物,对H37Rv、BCG检测结果均为阳性;对H37Rv菌株的检出限为120 CFU/mL。结论 LAMP检测MTB敏感性和特异性高,操作简便易行、快速准确,不需要昂贵的检验设备,适于基层医院结核病诊断的推广和应用。     

刍议活动性肺结核早期检验中半巢式全自动实时荧光定量PCR检测与涂片抗酸染色法的应用研究

目的 评估半巢式全自动实时荧光定量PCR检测与涂片抗酸染色法在活动性肺结核早期检验中的应用效能。方法 选取2022年9月—2023年9月于平邑县结核病防治所就诊的90例疑似肺结核患者为研究对象,采用Xpert MTB/RIF技术、涂片抗酸染色法检验及简单法固体培养法同时检测90例疑似肺结核患者痰标本,对检测结果进行比较。结果 以固体培养结果作为金标准,痰培养阳性率85.56%,阴性率14.44%。Xpert MTB/RIF阳性率84.44%、阴性率15.56%。涂片抗酸染色法检验阳性率48.88%、阴性率51.11%。Xpert MTB/RIF检验的灵敏度97.40%、准确度96.67%、阳性预测值98.68%以及阴性预测值85.71%均高于涂片抗酸染色法检验50.64%、52.22%、88.64%、17.39%,差异有统计学意义(χ²=43.768、46.722、5.922、22.546,P均<0.05)。结论 与涂片抗酸染色法相比,在活动性肺结核早期检验中采用半巢式全自动实时荧光定量PCR检测(Xpert MTB/RIF)的应用效能更高。     

Xpert MTB/RIF检测技术诊断结核病及其耐药的研究

目的探讨多色巢式实时荧光定量核酸扩增(Xpert MTB/RIF)检测技术在初诊疑似肺结核患者中的诊断价值及其耐药性。方法收集2015年1-6月在上海市松江区中心医院就诊的初诊疑似肺结核患者430例,对其痰标本同时进行痰涂片抗酸染色、MGIT 960液体分枝杆菌培养和Xpert MTB/RIF检测,比较3种方法诊断结核病的阳性率和符合度。同期将其中91例液体培阳的标本送至上海市疾病预防控制中心(CDC)进行分枝杆菌菌群鉴定(PNB法、TCH法和28℃培养试验)和一线抗结核药物(异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇)的敏感性试验(传统比例法),以上海市CDC鉴定结果为标准,分析Xpert MTB/RIF检测方法的敏感度、特异度和准确度及其耐药性。结果 430例患者中,痰涂片抗酸染色、液体培养和Xpert MTB/RIF 3种检测方法的分枝杆菌检出率分别为14.19%、26.74%、22.79%。Xpert MTB/RIF检测法与液体培养法的符合率为89.53%(385/430),与涂片法的符合率为90.93%(391/430)。91例液体培养阳性患者,经上海市CDC菌群鉴定,84例为结核分枝杆菌复合群(MTC),7例为非结核分枝杆菌,Xpert MTB/RIF检测方法的敏感度为77.38%(65/84),特异度为100.00%(7/7),准确度为79.12%(72/91)。Xpert MTB/RIF检测出的4例利福平耐药患者和61例利福平敏感患者与比例法药敏鉴定结果完全一致。结论 Xpert MTB/RIF检测方法阳性率明显高于涂片法,与传统液体培养法有较好的一致性。该方法具有较高的敏感度、特异度和准确度。     

噬菌体生物扩增法对结核病临床诊断的意义

目的 探讨噬蒲体生物扩增法技术检测临床标本对结核病临床诊断的应用价值.方法 采用噬菌体生物扩增法技术对86例活动性肺结核患者痰标本、73例结核性胸膜炎患者胸水、30例肺结核患者肺泡灌洗液,共计189份临床标本进行检测;对非结核病患者痰标本10例、胸水5例、灌洗液5例共计20份标本进行检测.同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养.结果 86例活动性结核患者痰标本、73例结核性胸膜炎患者胸水、30例肺结核患者肺泡灌洗液噬菌体生物扩增法检测阳性率分别为53.49%(46/86)、49.32%(36/73)、60.00%(18/30);涂片抗酸染色阳性率分别为24.42%(21/86)、2.74%(2/73)、20.00%(6/30);罗氏培养阳性率分别为44.19%(38/86)、4.11%(3/73)、36.67%(11/30).20份非结核患者标本,噬菌体生物扩增法、涂片抗酸染色、罗氏培养都未检出阳性.结论 噬菌体生物扩增法检测结核病标本的阳性率高于涂片法和罗氏培养,该方法 敏感性高、特异性强、操作简便,对结核病临床诊断有较高的应用价值.     

GeneXpert MTB/RIF系统对肺结核的诊断价值

目的评价Gene Xpert MTB/RIF系统对肺结核的诊断价值。方法对拟诊为肺结核的99例患者痰样本分别进行痰涂片抗酸染色镜检、结核分枝杆菌(MTB)培养和Gene Xpert MTB/RIF系统分子检测,对比分析结果。结果在所有拟诊病例中,Gene Xpert MTB/RIF系统、MTB培养和抗酸染色镜检的阳性率分别为29.6%、25.7%、20.2%;在确诊病例中,Gene Xpert MTB/RIF系统、MTB培养和抗酸染色镜检的阳性率分别为100.0%、100.0%、80.0%。结论 Gene Xpert MTB/RIF系统对肺结核的诊断和疗效评估具有重要价值。     

BACTEC MGIT 960仪在肺结核病诊断中的应用

[目的]探讨BACTEC MGIT 960仪在肺结核病诊断中的应用。[方法]应用BACTEC MGIT 960仪对肺结核病人的痰标本进行培养，并与BACTEC TB 460仪、改良罗氏培养法及涂片抗酸染色法进行对照。[结果]BACTEC MGIT 960仪阳性率为31．96％，与BACTEC TB 460仪的阳性率接近，比改良罗氏培养法及涂片抗酸染色法高。[结论]BACTEC MGIT 960仪能显著缩短（初代阳性平均分离时间为11．6d，比BACTEC TB 460仪快1．9d，比改良罗氏培养法快9．1d。）报告时间，且阳性检出率高。     

六种分枝杆菌培养方法的对照

目的观察痰液离心沉淀法接种于酸罗氏培养基培养分支杆菌的阳性率与其他5种方法的对比. 方法对146例结核病人的痰标本分别作涂片、Bactec 法检测和 2% NaOH 碱处理后,吸取标本管内上清液体、中部液体、自沉淀液体和离心沉淀法后的标本接种于酸罗氏培养基.结果离心沉淀法阳性率最高为39.7%,Bactec 法阳性率为35.6%,中部液体阳性率为30.8%,自沉淀液体和涂片阳性率为30.1%,上清液体阳性率为28.8%.结论离心沉淀法接种于酸罗氏培养基阳性率优于其他五种方法.     

肺结核病空洞与Xpert检出结核分枝杆菌相关性分析

目的:探讨Xpert检出MTB与肺结核病空洞的相关性。方法:选择2014年7月~2015年10月广东省佛山市高明区慢性病防治站收治的确诊为肺结核病的患者资料进行回顾性分析,行Xpert检测,并分析痰涂片找抗酸杆菌、痰抗酸杆菌培养及菌种鉴定等结果。结果:肺结核病空洞与Xpert检出MTB具有相关性(r=0.392);Xpert对MTB的检出率高于痰找抗酸杆菌的阳性率,痰找抗酸杆菌阳性率与MTB的检出密切相关(r=0.996)。结论:肺结核空洞与Xpert检出MTB具有相关性,Xpert检测对于诊断肺结核病较痰找抗酸杆菌具有更高的灵敏度,对于肺结核病的最终确诊、减少误诊和过诊具有重要的临床意义。     

六种分枝杆菌培养方法的对照

目的观察痰液离心沉淀法接种于酸罗氏培养基培养分支杆菌的阳性率与其他 5种方法的对比。方法对 146例结核病人的痰标本分别作涂片、Bactec法检测和 2 % Na OH碱处理后 ,吸取标本管内上清液体、中部液体、自沉淀液体和离心沉淀法后的标本接种于酸罗氏培养基。结果离心沉淀法阳性率最高为 39.7% ,Bactec法阳性率为 35 .6 % ,中部液体阳性率为 30 .8% ,自沉淀液体和涂片阳性率为 30 .1% ,上清液体阳性率为 2 8.8%。结论离心沉淀法接种于酸罗氏培养基阳性率优于其他五种方法