HPLC法同时测定香加皮中杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛

[目的]同时测定香加皮中杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的含量。[方法]采用HPLC法,ODS色谱柱,流动相为乙腈∶水=27∶73,检测波长220nm。[结果]杠柳毒苷线性范围0.05～1.6μg,r=0.9994;4-甲氧基水杨醛线性范围0.23～7.4μg,r=0.9993;杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的精密度分别为1.2%、3.0%,重现性分别为1.4%、2.8%,加样回收率分别为100.2%、99.8%。[结论]本法简便、准确,可同时测定香加皮中的杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛。     

HPLC法同时测定香加皮中杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的方法改进

[目的]建立同时测定香加皮中杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛含量的方法。[方法]采用高效液相色谱(HPLC)法,ODS色谱柱,流动相为乙腈∶甲醇∶水=27∶10∶63,检测波长220nm。[结果]杠柳毒苷线性范围0.08～1.0μg,r=0.9993;4-甲氧基水杨醛线性范围0.22～3.0μg,r=0.9999;杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛精密度的峰面积(RSD)值分别为0.79%、0.67%,重现性的RSD值分别为1.2%、2.2%,加样回收率分别为97.1%、96.2%。[结论]本法可同时测定香加皮中杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的含量,分析时间短,且改进方法的准确度和重现性要优于文献报道方法。     

杠柳不同部位的杠柳毒苷含量

目的：测定杠柳不同部位的杠柳毒苷含量。方法：采用HPLC法，ODS色谱柱，流动相为乙腈：水=27：73，检测波长220nm。结果：杠柳的根皮、茎皮、根的木质部和茎的木质部的杠柳毒苷含量分别为1．03％、0．65％、0．26％、0．39％；杠柳的叶及果实未检出杠柳毒苷。结论：杠柳植物可综合利用。     

HPLC测定强心胶囊中杠柳毒苷的含量

强心胶囊由黄芪、人参、附子、丹参、香加皮等11味药组成，功效为益气温阳，活血通络，利水消肿。用于冠心病、高血压病所致轻中度充血性心力衰竭证属阳气虚乏，络瘀水停者。该制剂中含有香加皮，为萝蓐科植物杠柳Periploca sepium Bge．的干燥根皮。香加皮主要的化学成分为十余种杠柳苷，含杠柳苷A-0，其中G为强心苷，又名杠柳毒苷，是香加皮的主要强心成分，但同时也是其毒性成分。杠柳毒苷的毒性作用与毒毛旋花子苷相似。如使用剂量过大、时间过长，将产生不良反应。     

杠柳毒苷、杠柳次苷及杠柳苷元生物药剂学分类研究

目的采用生物药剂学分类系统(Biopharmaceuticals Classification System,BCS)对杠柳毒苷、杠柳次苷及杠柳苷元进行生物药剂学分类研究。方法采用实验和计算机预测软件Pipeline Pilot 8.5、ChemDraw研究杠柳毒苷、杠柳次苷和杠柳苷元的溶解性和渗透性,根据实验值和预测值利用BCS分类方法对3者进行分类。结果根据实验结果杠柳毒苷、杠柳次苷和杠柳苷元均为BCSⅢ类药物,与不同软件预测的分类结果存在差异。基于Clg P的渗透性结果与实验结果一致;基于lg Cs的溶解性及基于Alg P、lg D的渗透性预测结果与实验结果相反。结论杠柳毒苷、杠柳次苷和杠柳苷元均为BCS Ⅲ类药物,3者溶解性依次降低,但仍都属于高溶解性成分。3者的渗透性是影响其吸收的关键因素。基于化学结构对甲型强心苷类药物活性成分进行的生物药剂学属性预测值与实验结果存在较大差异,对含此类成分的中药制剂的口服吸收进行BCS研究及体内外相关性评价时建议采用多种方法对数据进行校正,增加结果的可靠性。     

不同生长期杠柳各部位活性成分的累积变化

目的 考察一年内不同生长期杠柳各部位(根皮、根木质部、茎皮、茎木质部和叶)中主要活性成分杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的量,研究其动态累积变化规律,确定其最佳采收期.方法 每月平行采样2次,超声提取法制备样品,RP-HPLC法测定杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的量.结果 杠柳各部位成分累积动态变化曲线呈“双峰”型,其中茎皮中杠柳毒苷的量最高可达1.400％;根皮中4-甲氧基水杨醛累积量最高达0.781％,而其他部位均低于0.2％.结论 整个生长周期杠柳各部位中两种成分的累积变化呈一定的规律性,其变化可能与不同生长阶段及相应的生理代谢活动等密切相关;茎皮和根木质部均可作为提取杠柳毒苷的新药用部位,最佳采收期为生长期.     

HPLC法测定不同产地香加皮中杠柳毒苷的含量

目的:测定不同产地香加皮中杠柳毒苷的含量。方法:采用反相高效液相色谱法,以乙腈-水(26∶74)为流动相,检测波长为220 nm。结果:17个产地的香加皮中杠柳毒苷的含量在0.006%~1.215%之间,其中以天津蓟县最高,山东泰安最低。结论:不同产地香加皮中杠柳毒苷的含量差异较大。     

强心片中4-甲氧基水杨醛的含量测定

本文采用双波长扫描法测定了强心片中4-甲氧基水杨醛（以下简称4-MSA）的含量。该法操作简便易行，且具有一定的精确度，加标回收率为97．34％，CV值为1．02％，可供作为强心片中4-MSA的定量方法。     

香加皮最大耐受量给药小鼠体内杠柳毒苷及苷元的代谢

目的研究最大耐受量下香加皮中杠柳毒苷及苷元在小鼠体内的代谢规律。方法小鼠单次腹腔注射给予最大耐受量的香加皮水提物,高效液相色谱法测定给药后不同时间点血浆及心脏组织中杠柳毒苷及苷元的浓度。结果小鼠给药后,血浆中杠柳毒苷及杠柳毒苷苷元均出现多峰,其中杠柳毒苷在0～45 min时间段为吸收相,符合零级动力学,拟合方程为C=0.320 t,在45 min和120 min出现两个高峰,120～720 min时间段符合二室模型,t1/2α=1.694 min,t1/2β=344.049 min。在药后12 h内心脏组织中杠柳毒苷及杠柳毒苷苷元的含量相对稳定,没有显著降低。结论杠柳毒苷及苷元在体内存在肝肠循环,且苷元吸收较快;杠柳毒苷及苷元在心脏内有一定的蓄积。     

HPLC法测定香加皮中杠柳毒苷的含量

香加皮Perploca sepium Bge,又名北五加皮、杠柳皮，功效为祛风湿、强筋骨，主要用于风寒湿痹、腰膝酸软、心悸气短、下肢浮肿等，近年来常用于慢性充血性心力衰竭的治疗。香加皮的主要化学成分为10余种杠柳苷，其中杠柳毒苷又名杠柳苷G、萝蘼毒苷(periplocin，periploside G)为强心苷成     

怀牛膝愈伤组织悬浮培养及其多糖含量的初步研究

目的：研究怀牛膝悬浮培养条件及其对愈伤组织中ABPS含量的影响。方法：采用正交试验和单因素试验，研究接种时间、接种量、碳源添加及pH对细胞生长量及多糖含量的影响。结果和结论：适宜ABPS生产的培养基是1／4MS＋6-BA0．5mg·L^-1＋2，4-D1．0mg·L^-1＋蔗糖2％＋葡萄糖2％＋果糖1％，pH6．0，培养时间50d，接种量7g·L^-1。     

水飞蓟悬浮培养体系的建立及不同因子对水飞蓟宾量的影响

目的建立水飞蓟Silybum rnarianum悬浮培养体系,测定不同影响因子对水飞蓟宾量的影响。方法采用正交试验确定水飞蓟悬浮培养体系,采用HPLC法测定水飞蓟宾的量。结果激素配比6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+ZT 1.5 mg/L的MS培养基、光照12 h/d、p H值为7、转数110 r/min,为水飞蓟悬浮培养的最佳生长条件。当水杨酸、壳聚糖、硝普钠质量浓度分别为0.05、3、1μg/L时水飞蓟增长量达到最大值,水飞蓟宾量也达到最大值。结论建立的悬浮培养体系可用于水飞蓟的快速繁殖,适宜质量浓度的壳聚糖和硝普钠利于悬浮细胞的生长及水飞蓟宾的积累。     

长鞭红景天细胞悬浮培养体系优化研究

目的 优化长鞭红景天Rhodiola fastigiata细胞悬浮培养体系及生长条件.方法 研究基本培养基、激素、碳源、氮源等因素对长鞭红景天细胞生长和红景天苷产量的影响,建立高产红景天苷的细胞悬浮培养体系.结果 MS培养基+BA5.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L为长鞭红景天细胞悬浮培养的最适培养条件.结论 对培养条件进行优化,为利用长鞭红景天细胞大规模生产天然活性成分奠定基础,为缓解野生长鞭红景天资源的匮乏提供可行途径.     

怀牛膝愈伤组织悬浮培养及其多糖含量的初步研究

目的：研究怀牛膝悬浮培养条件及其对愈伤组织中ABPS含量的影响。方法：采用正交试验和单因素试验，研究接种时间、接种量、碳源添加及pH对细胞生长量及多糖含量的影响。结果和结论：适宜ABPS生产的培养基是1/4MS+6-BA 0.5 mg·L-1+2,4-D 1.0 mg·L-1+蔗糖2%+葡萄糖2%+果糖1%，pH 6.0，培养时间50 d，接种量7 g·L-1。     

培养条件对西洋参悬浮细胞生物量和 活性成分的影响

目的:研究主要理化因子对西洋参细胞悬浮培养的影响.方法:利用组织培养技术结合高效液相色谱法和紫外分光光度法,考察接种量、培养基种类、基质pH和光照条件对西洋参悬浮细胞生长,人参皂苷Re,Rb1以及西洋参多糖含量的影响.结果:当接种量为25 g·L~(-1)时,西洋参细胞的干重增殖倍数显著增加;通过考察Ms,SH,B_5 3种培养基对西洋参细胞的影响,结果表明MS培养基最有利于西洋参细胞生长,B_5培养基最有利于人参皂苷和西洋参多糖的合成.3种培养基中西洋参细胞多糖含量均高于栽培西洋参;pH变化对西洋参细胞生长影响不大,pH 6.0时,最有利于人参皂苷Re和西洋参多糖的合成;光照培养显著促进西洋参细胞次生代谢物的合成,但对多糖合成没有太大影响.结论:接种量、培养基种类、基质pH和光照条件对西洋参悬浮细胞生长,人参皂苷Re,Rb_1以及西洋参多糖合成有显著影响.     

红花悬浮细胞体系的建立及其化学成分的UPLC-Q-TOF/MS分析

目的构建红花悬浮细胞体系,为进一步研究红花的功能基因搭建平台。方法用红花无菌子叶作为外植体进行愈伤组织培养,选择淡黄色、质地疏松、增殖速度快的愈伤组织为材料进行悬浮培养,考察激素浓度、愈伤起始接种量、p H值、细胞活力对红花悬浮细胞体系的影响以及不同浓度茉莉酸甲酯(Me JA)刺激对悬浮细胞生长曲线的变化。采用UPLC-Q-TOF/MS法对红花悬浮细胞培养体系进行初步化学成分分析。结果红花悬浮细胞培养的最适宜配方是MS+1.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA,最适宜p H值为5.5~6.0,最适宜接种量为0.02 g/m L培养体系;不同浓度的Me JA刺激对细胞增殖率影响较大,50μmol/L Me JA能提高悬浮细胞增殖率,500μmol/L Me JA能对细胞增殖则有明显的抑制作用。从红花悬浮细胞培养体系中初步鉴定出13种化合物。结论利用红花子叶能建立较好的悬浮细胞培养体系,适宜浓度的Me JA刺激可提高悬浮细胞增殖率。     

石蒜悬浮细胞系的建立及其生物碱累积的研究

目的 研究由石蒜愈伤组织建立细胞悬浮培养体系的条件及其生物碱的累积。方法 以石蒜鳞茎为外植体进行愈伤组织的诱导,筛选出优质的愈伤组织进行悬浮培养,考察了激素、接种量、肌醇和条件培养对石蒜悬浮细胞系建立的影响,并利用HPLC检测石蒜悬浮细胞和培养基中生物碱的量。结果 石蒜悬浮细胞系培养的最佳条件为：MS为基本液体培养基,添加2, 4-D 0.5 mg/L＋KT 0.1 mg/L,肌醇300 mg/L,接种量15%;对数期的培养基能明显缩短细胞系生长的延迟期;细胞系和培养基中加兰他敏分别是石蒜鳞茎中的4.18和0.69倍。结论 利用石蒜愈伤组织建立了较好的细胞悬浮培养体系,且石蒜悬浮细胞系是一种获取加兰他敏的较好途径。     

真菌诱导子对白桦悬浮体系中N和P的吸收利用和三萜合成的影响

目的分析真菌诱导的白桦悬浮体系中N、P的吸收利用和三萜合成的关系。方法在白桦悬浮细胞的生长末期添加40μg/mL真菌诱导子,采用比色法分析真菌诱导后白桦悬浮体系中N、P和三萜量的变化。结果白桦细胞的干质量、三萜量和产量随着真菌处理时间的延长表现为逐渐降低趋势。其中,三萜量和产量均于真菌诱导后第1天达到最高,分别为21.98 mg/g和123.82 g/L,约为对照的2倍;白桦悬浮体系的pH值和电导率在真菌诱导后第1天达到高峰,pH值增长了6.10%,电导率增加了8.20%;除细胞内磷酸根质量分数在诱导的第1、2天分别降低了28.67%、15.68%外,真菌诱导使白桦悬浮培养体系中硝酸根、铵根、磷酸根量基本呈增加趋势。进一步相关性分析发现,真菌诱导使胞外磷酸根、铵根和硝酸根质量分数与三萜量的相关性显著提高。结论真菌诱导后白桦三萜合成的增加可能与磷酸根、硝酸根和铵根质量分数的变化相关。     

Effects of feeding tyrosine and phenylalanine on the accumulation of phenylethanoid glycosides to Cistanche deserticola cell suspension culture

AIM： To investigate the effects of feeding phenylalanine （Phe） and tyrosine （Tyr） on the accumulation of total phenolic compounds and four phenylethanoid glycosides （PeGs） to a cell suspension culture of the parasitic plant Cistanche deserticola.METHOD： A cell suspension culture of C. deserticola was established and precursors of different concentrations were fed. In each group, the cell was sampled at the 24^th day after inoculation. The content of total phenolic compounds and four PeGs compounds were determined using the Folin-Ciocalteu method and an HPLC method, respectively.RESULTS： In the Phe fed cells, the maximum PeGs yield was achieved when Phe was fed at 1.5 mmol·L^-1 and the yield reached 1.13 times the control cell concentration. In the Tyr fed cells, the maximum yield of PeGs was 1.60 times of control when 0.75 mmol·L^-1 Tyr was fed to the cells. Furthermore, it was found that the salidroside yield was 4.01 times of control group when 5 mmol·L^-1 Tyr was fed.CONCLUSION： Tyr is a better precursor for PeGs accumulation compared with Phe, and the rate limiting enzymes might be involved in the Tyr branch.     

腹腔镜手术治疗胆囊结石伴肝硬化的临床效果研究

目的:分析探讨在胆囊结石伴肝硬化治疗过程中应用腹腔镜手术治疗的临床价值。方法:选取2018年1月~2019年1月本院收治的胆囊结石伴肝硬化患者120例,随机分为对照组和观察组各60例。对照组实施常规开腹手术进行治疗,观察组患者实施腹腔镜手术治疗措施,对比两组患者并发症、相关手术指标。结果:观察组并发症发生率显著低于对照组(P<0.05),观察组患者住院时间、出血量、手术时间、排气时间等相关指标显著优于对照组(P<0.05)。结论:在胆囊结石伴肝硬化治疗过程中应用腹腔镜手术治疗措施具有理想的治疗效果,值得在临床上应用推广。