血清BLyS和APRIL水平与系统性红斑狼疮关联性研究

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者血清B淋巴细胞刺激因子（BLyS）和增殖诱导配体（APRIL）蛋白水平与疾病活动性的关系。方法：应用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测SLE活动组（13例）和SLE缓解组（10例）患者血清BLyS和APRIL水平,以健康志愿者（23例）作为对照;同时将血清BLyS和APRIL水平与患者的临床检验指标（尿蛋白、抗dsDNA抗体）分组进行分析。结果：SLE患者组血清BLyS水平高于健康对照组,且活动期高于缓解期（P〈0.05）;尿蛋白阳性组血清APRIL水平明显低于尿蛋白阴性组患者（P〈0.05）;抗dsDNA抗体升高组血清BLyS和APRIL均高于抗dsDNA抗体滴度正常组,但均无统计学意义。结论：SLE患者血清BLyS水平增高,且增高与疾病的活动性有关;尿蛋白阳性组血清APRIL水平明显低于尿蛋白阴性组SLE患者,提示BLyS和APRIL可能参与SLE的发病过程。     

系统性红斑狼疮患者B淋巴细胞刺激因子及其受体表达水平的研究

目的：研究系统性红斑狼疮（SLE）患者B淋巴细胞刺激因子（BLyS）及其受体的表达水平，并探讨其与系统性红斑狼疮疾病活动指数（SLEDAI）的关系。方法：检测缓解组（14例）和活动组SLE患者组（23例）血清BLyS及其受体的表达水平，以健康志愿者（30例）作为对照。结果：SLE患者BLyS、穿膜蛋白活化物（TACI）和B细胞活化因子受体（BAFF—R）mRNA的表达明显高于正常人（P〈0．01），活动期患者的表达高于缓解期（P〈0．01）。结论：SLE患者BLyS、TACI和BAFF—R mRNA表达含量升高，提示BLyS、TACI和BAFF—R可能与SLE的发病有关。     

SLE患者血清高半胱氨酸水平与自身抗体的相关性

目的 探讨SLE患者血清高半胱氨酸（Hcy）水平与自身抗体的相关性。 方法 用ELISA法检测89例SLE患者及30例体检健康者血清Hcy水平,并与ANA、抗Sm抗体、抗dsDNA抗体及Ig、C3、C4进行分析比较。血清Hcy≥15 μmol/L为高Hcy血症。 结果 SLE组高Hcy检出率及Hcy水平显著高于健康人对照组,P＜0.01;SLE组Hcy水平与Ig呈正相关,与C3、C4呈负相关,健康人对照组则无明显相关性;SLE患者ANA高滴度组与低滴度组、抗Sm抗体阳性组与阴性组患者Hcy水平无显著性差异（P＞0.05）,抗dsDNA阳性SLE患者Hcy水平显著高于抗dsDNA阴性者（P＜0.01）。SLE患者治疗后血清Hcy水平比治疗前明显降低,P＜0.01。 结论 SLE患者血清Hcy水平显著升高,且Hcy的变化与疾病活动程度关系密切,检测血清Hcy有助于SLE的诊断及其活动性判断。     

血清APRIL表达水平与非霍奇金氏病相关性的初步研究

目的研究非霍奇金氏病（NHL）患者血清增殖诱导配体（APRIL）蛋白水平，并探讨其与血清乳酸脱氢酶（LDH）的关系。方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测LDH升高患者组（10例）和LDH正常NHL患者组（12例）血清APRIL水平，以健康志愿者（23例）作为对照；同时将血清APRIL水平与患者血清乳酸脱氢酶（LDH）进行相关性分析。结果NHL患者血清APRIL水平与健康对照组无显著性差异（P〉0．05），但LDH升高患者组血清APRIL水平明显高于LDH正常患者组（P〈0．05）；NHL患者组和LDH升高患者组血清APRIL水平与LDH正相关（r=0．923,0．799，P〈0．05）。结论NHL患者血清APRIL水平与健康对照组无显著性差异，LDH升高患者组血清APRIL水平明显高于LDH正常患者组，提示APRIL可能与NHL的预后及恶性程度有关。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中Foxp3的表达及意义

摘要 目的：探讨转录因子Foxp3在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)患者外周血单个核细胞中的表达水平及其在SLE发病中的作用及意义。方法：选择SLE活动性、SLE非活动性患者和正常对照，运用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot技术检测SLE患者和正常对照组外周血单个核细胞中Foxp3mRNA和蛋白的表达水平。结果：活动期SLE组Foxp3mRNA和蛋白的表达水平明显低于SLE非活动性患者和正常对照（P<0.05），SLE非活动性患者Foxp3mRNA和蛋白的表达水平明显低于正常对照（P<0.05）。结论：SLE患者外周血单个核细胞中Foxp3mRNA和蛋白的表达水平显著低于正常对照，随着SLE患者病情的好转，Foxp3mRNA和蛋白的表达水平逐渐增高。提示Foxp3与SLE疾病的活动性呈一定的线性相关关系。     

系统性红斑狼疮患者血清HMGB1水平检测及临床意义

目的了解系统性红斑狼疮（SLE）患者血清中高迁移率族蛋白1（high mobility group box1，HMGB1）的水平，探讨其在SLE发病机制中的作用。方法选择SLE患者60例，根据SLEDAI评分，分为活动组（≥10分）和稳定组（〈10分）各30例，健康志愿者20例作为对照组。采用ELISA方法检测各组患者血清中HMGB1水平。采用统计学方法分析其与SLE临床及实验室指标之间的相关性。结果活动期SLE患者HMGB1血清水平较正常和稳定期SLE患者表达水平明显升高，差异有统计学意义（P〈0.001），而稳定组与健康对照组的差异无统计学意义（P〉0.05）。血清HMGB1水平与SLEDAI、24h尿蛋白水平、抗C1q抗体、抗核小体抗体成正相关（P〈0.05），与C4成负相关（P〈0.05），抗ds-DNA抗体阴性组与阳性组HMGB1浓度的差异有统计学意义。但与感染、淋巴细胞百分比、血沉、C反应蛋白、C3、抗RNP抗体、抗SSA或SSB抗体等无明显相关性。结论活动期SLE患者血清HMGB1水平升高，且与疾病活动指标具有相关性，提示HMGB1可能作为促炎因子在SLE的发病中起重要作用。     

系统性红斑狼疮患者B细胞激活因子mRNA定量测及其意义

目的建立实时荧光定量PCR(RFQ PCR)检测人B细胞激活因子(BLyS)mRNA含量的方法,初步探讨BLyS表达水平与系统性红斑狼疮(SLE)的相关性。方法在BLyS基因保守区设计特异性的引物和荧光探针,RT PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,以标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中BLySmRNA含量,并以BLySmRNA和内参β2M mRNA含量的比值作为评价BLyS表达水平的指标。结果本法检测BLySmRNA含量的线性范围为109pg/ml～101pg/ml,批内和批间变异系数(CV)分别为2.4%～7.4%和4.3%～12.3%。SLE患者BLySmRNA表达水平(1.45±0.33)显著高于健康献血员(0.88±0.13),P<0.01,而且与血清IgG水平和抗ds DNA抗体滴度有显著相关性。结论建立RFQ PCR检测BLySmRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;BLyS在SLE的发生、发展及预后等方面可能具有重要作用。     

类风湿关节炎患者膝关节滑膜组织中Sirt2和Sirt3 mRNA表达及意义

目的探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者膝关节滑膜组织中Sirt2和Sirt3mRNA的表达情况及意义。方法行膝关节置换术的RA患者8例为RA组,行关节镜手术的半月板损伤患者6例为对照组,采用实时荧光定量PCR检测2组膝关节滑膜组织Sirt2、Sirt3mRNA表达水平,RA组患者检测抗环瓜氨酸多肽抗体、血沉、高敏C反应蛋白、类风湿因子水平,采用DAS28评分评估RA疾病活动度,采用Pearson相关性分析RA患者膝关节滑膜组织Sirt2、Sirt3mRNA表达水平与其临床检验指标间的相关性。结果 RA组膝关节滑膜组织Sirt2 mRNA表达水平(0.56±0.19)低于对照组(1.00±0.00),Sirt3mRNA表达水平(1.89±0.64)高于对照组(1.00±0.00)(P0.05);RA患者抗环瓜氨酸多肽抗体水平为375.96(182.85,865.21)RU/mL,血沉47.00(28.25,68.25)mm/h,高敏C反应蛋白28.20(12.33,40.58)g/L,类风湿因子32.15(0,207.78)u/mL,DAS28评分4.18(3.52,4.69);RA患者膝关节滑膜组织Sirt3mRNA表达水平与抗环瓜氨酸多肽抗体呈正相关(r=0.770,P=0.025),与血沉、高敏C反应蛋白、DAS28评分、类风湿因子和病程无相关性(P0.05),RA患者膝关节滑膜组织Sirt2mRNA表达水平与临床各指标均无明显相关性(P0.05)。结论 RA患者膝关节滑膜组织中Sirt3mRNA表达增高,Sirt2mRNA表达降低;Sirt3可能与RA疾病预后相关。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞干扰素诱导的蛋白10mRNA表达的临床价值

目的 探讨外周血单个核细胞（PBMCs）干扰素诱导的蛋白10（IP-10）mRNA表达与系统性红斑狼疮（SLE）活动的关系。方法 用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测46例SLE患者、20例类风湿关节炎（RA）患者、11例非SLE肾损伤患者及20名正常健康人PBMCSIP-10mRNA表达。结果 SLE活动组PBMCSIP-10mRNA表达水平与非活动组间的差异有统计学意义（P〈0．01），活动性狼疮肾炎（LN）组与无肾损伤组之间PBMCSIP-10mRNA表达水平的差异亦有统计学意义（P〈0．05），而RA组和非SLE肾病组患者与正常对照组水平相近似（P〉0．05）。血清IP—10水平与PBMCSIP-10mRNA表达高度正相关（r=0．8971，P〈0．01）。PBMCSIP-10mRNA表达水平与狼疮病活动指数（SLEDAI）评分呈正相关（r=0．6837，P〈0．01），与肾SLEDAI评分亦高度正相关（r=0．7260，P〈0．01）。结论 SLE活动时期PBMCSIP-10mRNA表达增加，与SLE疾病活动状况相关，尤其与LN的活动状况密切相关。     

血清补体及IL-25在SLE中的表达及临床意义

目的 探讨血清补体（C）及IL-25在SLE累及单个或多个器官系统时的表达差异,以及血清C3、C4、总补体（CH50）、IL-25、CRP、抗双链DNA（dsDNA）抗体之间的相关性。方法 选择151例SLE患者,按SLE累及器官情况分为单纯SLE组（58例）、单器官损伤组（67例,其中狼疮性肾炎51例、血液系统损伤13例、其他器官损伤3例）和多器官损伤组（26例,其中狼疮性肾炎合并其他器官损伤25例,血液系统损伤合并脑损伤1例）。观察3组患者血清C3、C4、CH50、IL-25、CRP水平和抗dsDNA抗体阳性率间的差异,并分析各指标间的相关性。结果 3组SLE患者血清C4、CH50、IL-25、CRP水平相近, 组间血清C3水平和抗dsDNA抗体阳性率比较差异均有统计学意义（P均< 0.05）;与其他2组比较,多器官损伤组血清C3较低,抗dsDNA抗体阳性率较高（P均< 0.017）。Spearman相关性分析显示,SLE患者的C3水平与C4（r_s = 0.73,P < 0.001）、CH50（r_s = 0.81,P < 0.01）水平呈正相关,而与IL-25呈负相关（r_s = -0.14,P < 0.001）。结论 SLE患者发生多器官损伤时血清C3水平下降、抗dsDNA抗体阳性率升高,检测血清补体水平对SLE患者发生多器官损伤的预测有重要意义。     

抗双链DNA抗体不同检测方法的对比分析及临床应用研究

目的探讨胶体金斑点法(DIGFA)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗双链DNA(dsDNA)抗体的临床应用价值。方法采用DIGFA法和ELISA法同时检测系统性红斑狼疮(SLE)患者(n=80)及健康对照者(n=50)血清中抗dsDNA抗体。并将ELISA法的定量检测结果与SLE患者的临床指标进行相关分析。结果 ELISA法检测抗dsDNA抗体的特异性、阳性预测值均高于DIGFA法,但敏感性略低于后者。ELISA法检测的抗dsDNA抗体水平与SLE患者疾病活动性指数、血沉、血清C3及24小时尿蛋白定量结果呈明显相关性。结论 ELISA法检测抗dsDNA抗体水平较DIGFA法准确性更高,并且是监测SLE病情转归的重要实验室指标之一。     

Correlation of the expression levels of BLyS and its receptors mRNA in patients with systemic lupus erythematosus

OBJECTIVES: To measure the levels of B-lymphocyte stimulator (BLyS) and its receptors mRNA expression in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) using quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR) method and to investigate the relationship between BLyS and its receptors mRNA expression and systemic lupus erythematosus (SLE). DESIGN AND METHODS: Specific primers and TaqMan probe were designed, and real-time PCR was performed. According to the standard curve of plasmids DNA, the levels of BLyS and its receptors mRNA expression in 37 patients with SLE and 30 healthy subjects were determined. The ratio of the expression levels of BLyS mRNA to that of beta2-microglobulin (beta2M) mRNA and the ratio of the expression levels of BLyS receptors mRNA to that of beta2M mRNA were regarded as indicator for the levels of BLyS and its receptors mRNA expression. RESULTS: The expression of BLyS, TACI and BAFF-R mRNA in PBMCs from patients with SLE was significantly elevated compared to healthy controls (P<0.001 for each), and active patients with SLE group had higher mRNA expression than patients with SLE inactive group (P<0.001 for each). The patients with elevated anti-double-stranded DNA (anti-dsDNA) antibody titers had enhanced BLyS, TACI and BAFF-R mRNA expression (P<0.05 for BLyS; and P<0.01 for TACI and BAFF-R). CONCLUSION: The BLyS, TACI and BAFF-R mRNA expression levels were significantly elevated in patients with SLE, which suggests that BLyS, TACI and BAFF-R might be involved in the pathogenesis, and that mRNA expression levels might serve as a biomarker of disease activity.     

系统性红斑狼疮患者血清B淋巴细胞刺激因子的水平研究

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者血清B淋巴细胞刺激因子(BLyS)蛋白水平,并探讨其与尿蛋白的关系.方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测尿蛋白阳性组(17例)和尿蛋白阴性SLE患者组(20例)血清Blys水平,以健康志愿者(30例)作为对照.结果 SLE患者血清Blys水平明显高于健康对照组(P＜0.05),但尿蛋白阳性组血清Blys水平与尿蛋白阴性组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SLE患者Blys水平升高,提示BLyS可能与SLE的发病有关.     

TOLL样受体7表达在系统性红斑狼疮发病机制中的作用

目的探讨TOLL样受体7在系统性红斑狼疮(SLE)狼疮肾炎的发病机制中的作用。方法利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量方法检测30例SLE患者及15例健康对照组外周血中TLR7mRNA的表达水平。结果 SLE患者缓解期组外周血TLR7 mRNA表达水平与正常对照组相比,未显示出统计学差异(P>0.05);外周血TLR7 mRNA表达水平在SLE患者活动期组与正常对照组相比,SLE患者中显著升高(P<0.01);SLE患者外周血TLR7 mRNA的表达水平与SLE活动指数呈正相关,具有统计学意义(r=0.92,P<0.01)。结论提示外周血TLR7mRNA表达水平升高与SLE活动存在联系,TLR7可能参与SLE的发病过程。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中MBD4 mRNA表达水平的研究

目的探讨系统性红斑狼疮（SEE）患者外周血单个核细胞中MBD4 mRNA表达及其与疾病发病机制、疾病活动性的关系。方法以pactin为内参照,建立逆转录实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）方法,在LightCycler RealtimePCR检测仪上检测70例SLE患者（活动期32例、缓解期38例）、其他结缔组织病（CTD）患者30例（疾病对照组）、健康体检者30例（正常对照组）外周血单个核细胞（PBMCs）中MBD4 mRNA的表达水平和含量。以△Ct=Ct（待测基因）-Ct（内参基因）来比较基因表达水平的高低。结果SLE患者PBMC中MBD4mRNA表达水平高于正常对照组与疾病对照组（P〈0．05）,且疾病不同病期（活动期与缓解期）MBD4 mRNA表达水平差别有统计学意义（P〈0．01）。结论结果显示SLE患者PBMC中MBD4 mRNA表达水平显著高于正常人、疾病对照组,提示MBD4 的表达与SLE的发生发展存在一定关联性,可能参与了SEE的发病过程并与疾病的活动性有关。     

多发性骨髓瘤患者血清肿瘤坏死因子和增殖诱导配体表达临床意义

目的研究多发性骨髓瘤（MM）患者血清内增殖诱导配体（APRIL）蛋白水平,并分析肿瘤坏死因子α（TNPα）的台量,且与临床治疗发病与预后的意义。方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA）法,检测37例MM患者血清APRIL水平与肿瘤坏死因子,（TNFα）的含量,并与25例健康志愿者作了对照。结果MM患者血清APRIL和慨水平明显低于健康对照纽（P〈0．01）呈负相关。结论MM患者血清APRIL水干和TNFα与对照组存在着显著的差异,提示APRIL及TNFQ检测水平与MM患者发病及预后有关。     

BAFF及其受体在多发性骨髓瘤中的表达

目的通过测定B淋巴细胞刺激因子（BLyS）及其受体在单克隆丙球蛋白血症中的表达水平,探讨BLyS及其受体与多发性骨髓瘤（MM）的关联性。方法流式细胞术对9例不同型别的MM患者及11例良性单克隆丙球蛋白血症（MGUS）患者,以及7名正常人外周B淋巴细胞表面BLyS及其3种受体BLyS受体（BAFFR）、穿膜蛋白活化物（TACI）、B细胞成熟抗原（BCMA）进行分析。并运用酶联免疫吸附试验（ELISA）对20例MM患者、23例MGUS患者、20名健康者血清BAFF水平进行检测。结果 MM、MGUS及正常对照组外周B淋巴细胞膜表面均表达BAFFR,但各组间差异无统计学意义（P〉0.05）。膜表面受体结合BAFF情况比较,各组间差异有统计学意义（P〈0.05）。MM组结合能力最强。TACI在MM及MGUS组低表达,其中MM组与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。胞浆BCMA高表达,MM组与正常对照组或与MGUS组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。血清BLyS水平MM组高于MGUS组（P〈0.05）,MGUS组高于正常对照组（P〈0.05）。结论 BLyS及其受体BAFFR、TACI、BCMA可能与MM的发病机制有关。血清BLyS可作为MM的实验室辅助诊断指标之一。     

系统性红斑狼疮患者生长激素释放肽与胰岛素抵抗的相关性研究

目的:初步探讨初治SLE患者生长激素释放肽(Ghrelin)表达水平及其与胰岛素抵抗的关系。方法:选择30例初治SLE患者为观察组,另选择30名健康志愿者为正常对照组。分别检测两组外周血单个核细胞(PBMC)中ghrelin mRNA表达水平和空腹血清ghrelin水平,计算两组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),利用Pearson相关系数进行相关分析。结果:SLE组HO-MA-IR明显高于正常对照组(P<0.01);SLE组PBMC ghrelin mRNA表达比正常对照组明显减弱,其血清ghrelin水平亦明显低于正常对照组(P<0.01),且SLE组低水平的ghrelin与HO-MA-IR呈负相关关系(r=-0.60,P<0.01)。结论:SLE患者存在胰岛素抵抗(IR),ghrelin表达水平低下可能与SLE患者IR相关。