维生素A对Hela细胞凋亡的影响

目的研究维生素A对Hela细胞凋亡的影响。方法应用光学显微镜、电子显微镜观察维生素A对Hela细胞凋亡形态的影响;分别应用细胞DNA琼脂糖凝胶电泳法及流式细胞仪分析维生素A诱导Hela细胞凋亡的生物化学特征、细胞特征及凋亡细胞百分率。结果光学显微镜下可见凋亡小体;电子显微镜下可见细胞固缩,核膜扭曲,核染色体聚集成块并靠近核膜等凋亡细胞特征;在琼脂糖凝胶电泳中由于细胞DNA被降解而呈现典型的“阶梯状”图谱;流式细胞仪检测结果显示二倍体核型的特征,在DNA直方图上,G1峰左侧出现亚二倍体细胞群的峰型;维生素A诱导Hela细胞凋亡具有时间依赖性。结论维生素A可诱导Hela细胞凋亡。     

维生素A对碘过量小鼠甲状腺细胞凋亡相关基因表达的影响

目的 观察维生素A对碘过量小鼠甲状腺细胞凋亡相关基因表达的影响.方法 将昆明种小鼠按体质量随机分成6组:对照(NI)组、高碘(HI)组、低维生素A(LVA)组、高碘低维生素A(HI+LVA)组、高碘补维生素A1(HI+VA1)组、高碘补维生素A2(HI+VA2)组.各组小鼠饲以合成饲料(维生素A分别为4000、4000、0、0、8000、16 000 U/kg),并饮用含不同剂量碘酸钾的去离子水(含碘量分别为50、3000、50、3000、3000、3000μg/L).分别在实验3、6个月时,采用原位末端标记(TUNEL)法检测甲状腺细胞凋亡水平,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测甲状腺细胞凋亡相关基因Fas、FasL、Bcl-2 mRNA表达水平.结果甲状腺细胞凋亡指数随着月龄的增长呈逐渐上升的趋势.3个月时,HI组[(20.91±9.57)%]、HI+LVA组[(20.29±9.90)%]、HI+VA2组[(19.51±8.25)%]均明显高于NI组[(14.09±5.68)%,P均<0.05];6个月时,HI组[(23.22±8.58)%]、LVA组[(22.56±6.17)%]、HI+LVA组[(25.99±9.62)%]、HI+VA1组[(21.65±7.74)%]均明显高于Nl组[(16.80±9.90)%,P均<0.05].3、6个月时HI组Fas、FasL mRNA表达(Fas:1.57±0.36、1.49±0.35,FasL:1.85±0.46、1.84±0.32)与NI组(Fas:1.29±0.25、1.27±0.26,FagL:1.60±0.13、1.65±0.13)比较有增高趋势,但差异无统计学意义(P均>0.05);6个月时,HI+VA1、HI+VA2组Fas mRNA表达(1.33±0.35、1.30±0.26)与HI组比较有降低趋势,与NI组比较差异无统计学意义(P均>0.05);3、6个月时,HI+LVA组Fas、FagL mRNA表达(Fag:1.60±0.27、1.67±0.32,FagL:1.88±0.46、2.10±0.34)与HI组比较,差异均无统计学意义(P均>0.05).上述各组Bcl-2 mRNA表达水平3个月时分别为1.05±0.19、0.96±0.33、0.95±0.26、1.18±0.27、1.10±0.19、0.98±0.36,6个月时分别为1.35±0.28、1.60±0.25、1.48±0.18、1.71±0.26、1.66±0.29、1.56±0.35,组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05).结论 高碘可引起小鼠甲状腺细胞凋亡;补充VA在一定程度上调控了凋亡相关基因的表达水平,部分拮抗了高碘引起的细胞凋亡.     

TRAIL 基因转染对人宫颈癌 Hela 细胞凋亡的影响

目的：探讨外源性肿瘤坏死因子相关凋亡配体（ TRAIL）基因对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法将构建的真核表达质粒pEGFP-TRAIL用Lipofectamine2000转染试剂盒转染到Hela细胞中,共聚焦显微镜下观察质粒的表达,分别用DAPI细胞核染色法和四甲基偶氮唑蓝（ MTT）比色法细胞染色法检测Hela细胞凋亡率。结果真核表达质粒pEGFP-TRAIL构建成功且能在Hela细胞中持续表达;转染真核表达质粒pEGFP-TRAIL的Hela细胞、转染空载体pEGFP-C1的Hela细胞凋亡率分别为12．1％、61．2％,两组比较,P＜0．05。结论外源性TRAIL基因可诱导Hela细胞凋亡。     

维生素A对大鼠实验性肺气肿肺泡壁细胞增殖与凋亡的影响

目的 观察维生素A对大鼠实验性肺气肿的干预作用,探讨其对肺泡壁细胞增殖和凋亡的影响.方法 雄性Wistar大鼠24只,采用随机数字表法分为对照组、模型组和维生素A组,每组8只.模型组、维生素A组在实验之初采用气管内滴入2 kU/kg弹性蛋白酶复制肺气肿模型,对照组气管内滴入等量生理盐水,术后第5周起进行药物干预,维生素A组每天给予100 kU/kg维生素A灌胃,其他两组给予等量油剂,共进行4周.实验第8周后处死大鼠.行HE染色观察各组大鼠肺泡的病理学变化,免疫组织化学法观察增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,末端脱氧核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法观察肺泡壁细胞的凋亡.统计学处理采用单因素方差分析,多组间两两比较采用LSD法.结果 模型组平均肺泡数(43±11)明显低于对照组(101±15)和维生素A组(56±8);平均肺泡面积[(3763±504)μm2]明显高于对照组[(1919±270)μm2]和维生素A组[(2710±276)μm2];增殖指数[(30.7±7.6)%]明显高于对照组[(9.9±1.8)%],明显低于维生素A组[(45.4±5.0)%];凋亡指数[(22.0±4.6)%]明显高于对照组[(9.8±1.7)%]和维生素A组[(17.3±3.5)%];增殖指数/凋亡指数(1.03±0.19)与对照组(1.45±0.52)无明显差别,明显低于维生素A组(2.73±0.64).结论 维生素A能促进弹性蛋白酶诱导大鼠实验性肺气肿的肺泡壁细胞增殖并抑制其凋亡,使肺泡壁细胞增殖/凋亡的平衡向增殖倾斜,从而对大鼠实验性肺气肿起到一定的改善作用.     

丹参酮ⅡA对子宫内膜癌KLE细胞增殖及凋亡的影响

目的观察丹参酮ⅡA对子宫内膜癌KLE细胞增殖和凋亡的影响,探讨其可能抗肿瘤的作用。方法将体外培养子宫内膜癌KLE细胞株分组,丹参酮组常规细胞培养24 h后加入不同浓度的丹参酮ⅡA,顺铂组加入60μg/mL顺铂,阴性对照组进行常规细胞培养。倒置荧光显微镜下观察细胞形态学变化,采用中性红法以酶联免疫检测仪检测12、24、48 h细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测24、48 h细胞凋亡率及细胞周期。结果低浓度(<50μg/mL)丹参酮ⅡA对KLE细胞增殖抑制作用不明显,但当浓度达到100μg/mL以上时,则能显著抑制子宫内膜癌细胞增殖并促进其凋亡;细胞明显被阻止于G0～G1期,而G2期细胞明显减少;其各种影响效应随时间和浓度的增加呈逐渐增强趋势。结论丹参酮ⅡA在体外对子宫内膜癌KLE细胞具有显著的抑制增殖、促进凋亡的作用,其机制可能为将细胞阻滞于G0～G1期。     

齐墩果酸对宫颈癌细胞HeLa侵袭及凋亡的影响

目的探讨齐墩果酸对宫颈癌HeLa细胞侵袭以及细胞凋亡的影响。方法以HeLa细胞为研究对象,不同浓度的齐墩果酸处理细胞,CCK-8法观察其对HeLa细胞生长的抑制率;Transwell体外侵袭模型检测其对HeLa细胞侵袭能力的影响;Western blot检测不同浓度作用下HeLa细胞caspase-3、bcl-2蛋白表达的变化;ELISA检测各组细胞MMP-2、MMP-9的表达。结果齐墩果酸对对HeLa细胞的增殖及侵袭具有明显的抑制作用。0.2、0.4、0.8μmol/L的齐墩果酸作用下,HeLa细胞caspase-3的表达量分别比未处理组提高了0.31、0.80、0.98倍,而bcl-2的表达量分别降低了26.49%、49.72%和59.46%。不同浓度齐墩果酸作用下,HeLa细胞MMP-2和MMP-9的表达均有所下降,且呈一定的剂量依赖性。结论齐墩果酸可以抑制HeLa细胞的侵袭,并且诱导细胞的凋亡。     

维生素A和4HPR对Hela细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究维生素A、N-(4-羟基苯基)维生素甲酰胺(4HPR)对Hela细胞增殖与凋亡的影响.方法 通过集落形成试验和裸鼠致瘤试验观察维生素A和4HPR对Hela细胞增殖的影响;通过电子显微镜及细胞DNA琼脂糖凝胶电泳法观察维生素A和4HPR对Hela细胞凋亡形态的影响及生物化学特征.结果 维生素A和4HPR对Hela细胞集落形成有明显抑制作用,并可抑制Hela细胞对裸鼠的致瘤作用(P<0.01);维生素A的抑瘤作用强于4HPR(P<0.01);电镜下可见细胞固缩,核膜扭曲,核染色体聚集成块并靠近核膜等凋亡细胞特征;细胞DNA被降解,在琼脂糖凝胶电泳中呈现典型的"阶梯状"图谱.结论 维生素 A和4HPR可抑制Hela细胞增殖,诱导Hela细胞凋亡.     

GRHL2沉默对肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨GRHL2沉默对肺癌A549细胞的增殖、凋亡的影响。方法利用RNA干扰技术,构建GRHL2沉默慢病毒表达载体,将肺癌A549细胞分为3个组,实验组:GRHL2沉默慢病毒感染的A549细胞系;阴性对照组:空载慢病毒感染的A549细胞系;空白对照组:不给予任何处理的A549细胞系。采用倒置荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白的强度,通过实时定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹法检测肺癌A549细胞中GRHL2 mRNA和蛋白质表达水平。采用细胞计数试剂盒检测GRHL2沉默对A549细胞增殖的影响。采用Annexin V-APC/PI细胞凋亡检测试剂盒及流式细胞术分析GRHL2沉默对A549细胞凋亡的影响。结果实验组中GRHL2 mRNA及蛋白质表达水平均较空白对照组及阴性对照组显著降低(F=48.13、42.57,P值均<0.05),A549细胞的增殖能力明显下降(F=65.64,P<0.05),凋亡显著增强(F=56.76,P<0.05)。结论靶向沉默GRHL2能显著抑制肺癌A549细胞的增殖并促进其凋亡,GRHL2有望成为临床肺癌靶向治疗的新靶点。     

灰树花多糖对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响

目的 探讨灰树花多糖(PGF)对HeLa细胞的抑制作用和可能机制.方法 采用MTT法研究灰树花多糖对HeLa细胞增殖的体外抑制作用,RT-PCR分析survivin和caspase-3 mRNA的表达.结果 灰树花多糖以剂量依赖的方式抑制HeLa细胞的生长,RT-PCR表明caspase-3基因表达增强、survivin基因表达减弱.结论 灰树花多糖诱导HeLa细胞凋亡的分子机制可能与上调caspase-3基因表达、下调survivin基因表达有关.     

原花青素对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨原花青素对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3细胞（PC-3细胞）增殖和凋亡的影响。方法体外培养的PC-3细胞与100、200、300μg／ml的原花青素共孵育,分别在24、48和72h时采用HE染色观察细胞形态学变化,噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术（FCM）分析细胞凋亡情况。结果原花青素可引起PC-3细胞形态明显改变;抑制PC-3细胞增殖,不同浓度（100、200、300μg／ml）原花青素对PC-3细胞作用72h时的细胞增殖抑制率分别为25．2％、70．9％和85．2％;FCM检测表明原花青素可诱导PC-3细胞凋亡,300μg／ml原花青素处理7Zh引起36．3％的凋亡率。这3种作用均随原花青素浓度和作用时间的延长而增强。结论原花青素可在体外抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,并促进其凋亡。     

异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联用对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的观察异常黑胆质成熟剂总酚（简称总酚）与顺铂、多西他赛联用对体外培养的人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法取对数生长期HeLa细胞接种于96孔板,加入0、50、75、100、125μg/ml总酚,然后加入0.1、1、5μg/ml顺铂或5、10、20μg/ml多西他赛,培养24、48、72 h,每孔设只加相同浓度顺铂或多西他赛的对照孔和只加培养液的对照孔。用MTT法检测细胞增殖抑制率。取对数生长期的HeLa细胞接种到培养瓶中,分别加入5μg/ml顺铂、20μg/ml多西他赛、50μg/ml总酚、5μg/ml顺铂＋50μg/ml总酚、20μg/ml多西他赛＋50μg/ml总酚,并设对照组,培养48 h后采用流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光倒置显微镜下观察细胞生长情况。结果用总酚联合顺铂、多西他赛培养的HeLa细胞与相同浓度顺铂、多西他赛培养者相比,细胞增殖抑制率和凋亡率更高（P均〈0.05）,形态学改变更明显。结论总酚与顺铂、多西他赛联用能显著抑制HeLa细胞的增殖,促进其凋亡。总酚与顺铂、多西他赛联用有协同作用。     

Aurora A激酶抑制剂VX-680对人宫颈癌细胞化疗敏感性的影响

目的探讨Aurora A激酶抑制剂VX-680对人宫颈癌细胞化疗敏感性的影响。方法以Aurora A激酶抑制剂VX-680抑制宫颈癌细胞株Caski中Aurora A的表达,再将宫颈癌细胞用不同浓度顺铂处理,Western Blot检测Aurora A蛋白受抑制情况,用流式细胞仪分析Aurora A表达下调后宫颈癌细胞生长抑制率和细胞凋亡率的变化。结果 Aurora A表达下调使顺铂对宫颈癌细胞的生长抑制率和细胞凋亡率均升高（P均〈0.01）。结论 Aurora A激酶抑制剂VX-680可使人宫颈癌细胞对顺铂的敏感性增强,抑制Aurora A可望提高顺铂对宫颈癌的治疗效果。     

Effect of parthenolide on proliferation and apoptosis in gastric cancer cell line SGC7901

OBJECTIVE: To investigate the effect of parthenolide (PAR) on proliferation and apoptosis in gastric cancer cell line SGC7901. METHODS: Human gastric cancer cell line SGC7901 cells were incubated with various concentration of PAR. After various periods of incubation, the proliferation of SGC7901 cells was assessed by 3‐(4,5‐Dimethylthiazol‐2‐yl)‐2,5‐diphenyltetrazolium bromide methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay. Apoptosis was measured by the annexin V‐fluorescein isothiocyanate fluoresceine isothiocyanate (FITC)/propidium iodide (PI) double labeled staining method and the morphology of the cell was observed under a fluorescent microscope. Mitochondrial potential was measured by flow cytometry after Rhodamine 123 staining. The expressions of cytochrome C and the Bcl‐2 family of proteins, including Bcl‐2, Bax, Bid and tBid were measured by Western blot. Caspase 3 and 8 activities were measured by enzyme‐linked immunosorbent assay. RESULTS: Treatment with PAR induced apoptosis as confirmed by annexin V‐FITC/PI assay. PAR‐induced apoptosis was associated with intracellular events including the decline of mitochondrial potential, increased release of cytochrome C from the mitochondria, decreased expression of Bcl‐2, increased expression of Bax, Bid and tBid and activation of caspase 3 and 8. CONCLUSION: These results suggest that possibly via activation of the mitochondrial pathway, PAR causes mitochondrial damage leading to the release of cytochrome C and by regulating the expression of the Bcl‐2 family of proteins and activating caspases which leads to results in apoptotic cell death in SGC7901 cells. Our results might be helpful in formulating new therapeutic approaches using Chinese herbal medicine.     

紫杉醇对耐阿霉素膀胱癌细胞株T24/ADM增殖的影响及机制

目的观察紫杉醇对耐阿霉素（ADM）人膀胱癌细胞株（T24/ADM）增殖的影响,并探讨其机制。方法用阿霉素浓度梯度递增法诱导培养人膀胱癌T24/ADM多药耐药细胞。用1、10、102、103nmol/L紫杉醇培养T24/ADM细胞12、24、48、72 h,用MTT法测算T24/ADM细胞增殖抑制率,用流式细胞仪PI单染法测定培养24、48 h时T24/ADM细胞凋亡率,并进行形态学观察。结果紫杉醇可抑制T24/ADM细胞生长,且在一定剂量范围内具有时间和浓度依赖性。实验组细胞凋亡率较对照组高,且随作用时间的延长,细胞凋亡率明显增高。紫杉醇组T24/ADM细胞镜下可见凋亡。结论紫杉醇可抑制膀胱癌T24/ADM细胞株生长,这种作用呈浓度时间依赖性,其机制可能与紫杉醇诱导T24/ADM细胞凋亡有关。     

玉竹提取物B对人食管癌细胞Eca-109增殖与凋亡的影响

目的观察玉竹提取物B（EB-PAOA）对人食管癌细胞Eca-109增殖与凋亡的影响。方法将体外培养的Eca-109细胞与不同浓度的EB-PAOA共育,采用MTT法检测Eca-109细胞增殖抑制率,采用流式细胞仪检测Eca-109细胞凋亡率。结果随着EB-PAOA浓度增大、作用时间延长,Eca-109细胞的增殖抑制率逐渐升高（P均〈0.05）,呈时间、剂量依赖性;随着EB-PAOA浓度增加,Eca-109细胞凋亡率逐渐增加,呈一定浓度依赖性（P均〈0.05）。结论EB-PAOA能够抑制人食管癌细胞Eca-109的增殖,并诱导其凋亡。     

胃安宁含药血清对人胃癌MGC-803细胞增殖及凋亡的影响

[目的]研究胃安宁颗粒含药血清体外对人胃癌MGC-803细胞株增殖、凋亡的影响.[方法]采用MTT比色法检测不同剂量胃安宁颗粒含药血清作用12 h、24 h、48 h后对MGC-803细胞生长增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率.[结果]随着胃安宁颗粒含药血清浓度逐渐增加,细胞增殖率逐渐降低,细胞抑制率、凋亡率逐渐升高,且以早期凋亡为主.[结论]胃安宁颗粒能够抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖,对MGC-803细胞有诱导其早期凋亡作用.     

曲古抑菌素A对乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖的影响

目的探讨曲古抑菌素A（TSA）对乳腺癌细胞株增殖的影响。方法培养乳腺癌细胞株MDA-MB-231,用组不同浓度TSA分别作用于细胞,于24、48、72、96h用MTT比色法观察细胞生长情况,流式细胞术检测S期细胞的比例和周期素（Cyclin）D1、A2表达。结果72h内和4μmol／L的浓度范围内,乳腺癌细胞生长受到抑制,并有一定的时效关系;TSA作用后周期素Cyclin A2表达下降,Cyclin D1表达上升（P均〈0．05）。结论TSA能抑制乳腺癌细胞生长,周期素Cyclin D1、Cyclin A2参与了抑制剂对细胞增殖周期的调控。     

川芎嗪、顺铂对人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响及机制探讨

目的观察川芎嗪、顺铂对小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法将对数生长期的NCI-H446细胞分为A、B、C、D组。A组常规培养,B组加入川芎嗪培养液100μg/ml,C组加入顺铂培养液2μg/ml,D组加入上述浓度的川芎嗪及顺铂培养液,均继续培养72 h。流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,Westernblot法检测各组细胞中的Bcl-2、p53。结果 A组NCI-H446细胞凋亡率为5.23%±1.01%、Bcl-2蛋白为0.87±0.003 5、p53蛋白为0.19±0.002 3,B组分别为16.37%±1.23%、0.58±0.004 8、0.31±0.001 4,C组分别为19.2%±1.51%、0.32±0.003 9、0.46±0.002 5,D组分别为21.2%±1.79%、0.23±0.001 9、0.62±0.002 7。B、C、D组与A组相比,P均〈0.05;D组与B、C组相比,P均〈0.05。结论川芎嗪、顺铂联合应用可诱导小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡,可能与其降低Bcl-2表达水平、升高p53表达水平有关。     

大蒜素对人肺癌H460细胞增殖及凋亡的影响

目的观察大蒜素对人肺癌H460细胞增殖及凋亡的影响。方法将体外培养的人肺癌H460细胞与不同浓度的大蒜素共育,采用MTT法测算H460细胞增殖率,采用流式细胞仪检测H460细胞凋亡率。结果随着大蒜素浓度增大、作用时间延长,H460细胞的增殖率逐渐降低,呈剂量、时间依赖性（P均〈0.05）;随着大蒜素浓度增大,H460细胞凋亡率逐渐升高,呈一定剂量依赖性（P〈0.05）。结论大蒜素能够抑制人肺癌H460细胞的增殖,并诱导其凋亡。