乳腺癌干细胞亚群比例的改变与芳香化酶抑制剂耐药的相关性

目的分析乳腺癌干细胞(BCSCs)亚群比例的改变与芳香化酶抑制剂(AIs)耐药之间的相关性。方法采用流式细胞术检测对AIs耐药的人源性乳腺癌细胞株MCF-7(MCF-7/AI)及野生型人源性乳腺癌细胞株MCF-7中CD44+CD24-细胞的数量,比较MCF-7/AI和MCF-7中CD44+CD24-细胞的比例。结果 MCF-7/AI和MCF-7中CD44+CD24-细胞的平均比例分别为(13.15±5.50)%和(0.39±0.22)%(P<0.05)。结论 MCF-7/AI中BCSCs亚群的比例显著高于MCF-7,提示AIs耐药和BCSCs之间可能存在着一定的相关性,BCSCs亚群比例的改变可能是AIs耐药的重要标志之一。     

三氧化二砷诱导乳腺癌细胞凋亡的早期事件——凋亡性容量下降

目的探讨凋亡性容量下降(apoptotic volume decrease,AVD)是否是三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的早期事件。方法噻唑兰(MTT)法检测As2O3对MCF-7细胞存活率的影响;流式细胞技术检测As2O3能否引起MCF-7细胞凋亡;时滞显微摄影技术检测细胞容量;Caspase-3试剂盒检测凋亡信号活性。结果 MTT实验表明As2O3使MCF-7细胞存活率下降并呈现剂量依赖的量效关系;流式细胞测定结果证实As2O3对乳腺癌细胞的致凋亡作用;As2O3作用MCF-7细胞在2h内细胞出现AVD,但Caspase-3的活性无明显变化,直到作用MCF-7细胞6h后Caspase-3活性显著升高。结论 AVD是As2O3诱导乳腺癌细胞凋亡的早期事件。     

天花粉对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的研究天花粉对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法取对数生长期人乳腺癌MCF-7细胞以30,60,90,120μg·m L^-1的天花粉蛋白处理,作为实验组,对照组用等量的0.9%Na Cl处理,继续培养24,48,72h。观察并比较各组细胞形态学及细胞核凋亡形态学变化,以噻唑蓝(MTT)比色法检测各组人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制情况,分光光度法检测天花粉蛋白对人乳腺癌MCF-7细胞胱天蛋白酶(caspase)-3和caspase-8表达的影响。结果实验组人乳腺癌MCF-7细胞呈现明显的细胞凋亡及核凋亡现象,且随天花粉蛋白质量浓度的增加,其细胞核凋亡现象越明显;干预24 h后,30,60,90,120μg·mL^-1实验组增殖抑制率分别为(1.61±0.94)%,(2.81±1.01)%,(7.05±1.03)%和(9.59±1.12)%;干预48 h后增殖抑制率分别为(2.13±1.01)%,(6.14±1.12)%,(9.05±1.09)%和(19.60±1.15)%;干预72 h后增殖抑制率分别为(3.28±1.07)%,(7.18±1.51)%,(18.39±1.81)%和(29.59±1.63)%。实验组人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制率随作用时间的延长及天花粉蛋白质量浓度的增大而逐渐升高(均P<0.01);90μg·m L^-1实验组24,48,72 h caspase-3分别为1.49±0.15,2.36±0.25,2.15±0.23;caspase-8分别为1.94±0.26,1.56±0.19,1.39±0.20。对照组人乳腺癌MCF-7细胞caspase-3及caspase-8随作用时间的延长无显著变化(均P>0.05),而90μg·mL^-1实验组caspase-3先升高后降低(P<0.05或P<0.01),以48 h时最高;caspase-8则逐渐降低(P<0.01);且各时间点90μg·m L^-1实验组caspase-3及caspase-8均显著高于对照组(均P<0.01)。结论天花粉蛋白可有效促进人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,抑制其增殖,且增殖抑制作用呈时间-剂量依赖性,其作用机制可能与上调人乳腺癌MCF-7细胞caspase-3及caspase-8表达相关。     

Correlation of the changes of proportion of breast cancer stem cells subgroup and the resistance of aromatases inhibitors

目的 分析乳腺癌干细胞(BCSCs)亚群比例的改变与芳香化酶抑制剂(AIs)耐药之间的相关性.方法 采用流式细胞术检测对AIs耐药的人源性乳腺癌细胞株MCF-7(MCF-7/AI)及野生型人源性乳腺癌细胞株MCF-7中CD44+ CD24-细胞的数量,比较MCF-7/AI和MCF-7中CD44+CD24-细胞的比例.结果 MCF-7/AI和MCF-7中CD44+ CD24-细胞的平均比例分别为( 13.15±5.50)％和(0.39±0.22)％(P＜0.05).结论 MCF-7/AI中BCSCs亚群的比例显著高于MCF-7,提示AIs耐药和BCSCs之间可能存在着一定的相关性,BCSCs亚群比例的改变可能是AIs耐药的重要标志之一.     

黄癸素对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的体内外抑制作用

目的观察黄癸素对人三阴性乳腺癌(TNBC)细胞MDA-MB-231及其裸鼠模型肿瘤的抑制作用。方法采用MTT法观察黄癸素对乳腺癌细胞MCF-7及MDA-MB-231的增殖抑制作用;建立MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤模型,观察黄癸素灌胃给药对荷瘤的抑制作用。TUNEL法检测肿瘤组织中细胞凋亡状况。结果黄癸素可明显抑制MDA-MB-231细胞增殖,具有明显的浓度依赖性和时间依赖性,作用48h的IC50为(1.26±0.30)mg·L-1,而对MCF-7细胞的IC50则为(32.07±9.09)mg·L-1。在体实验结果显示,中、高剂量(90、120 mg·kg-1)黄癸素对MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤有明显的抑制作用,抑瘤率分别为42.26%和71.57%(P<0.01)。TUNEL法表明黄癸素组细胞凋亡率明显高于空白组。结论黄癸素有抑制人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231肿瘤生长、促进瘤组织凋亡的作用。     

冬凌草甲素对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、细胞周期和凋亡的影响

目的 探讨冬凌草甲素(oridonin,Ori)对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖、周期及凋亡的影响.方法 以不同浓度的Ori处理MCF-7细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;应用流式细胞分析术检测细胞周期和凋亡.结果 20～50μM的Ori可显著抑制MCF-7细胞的增殖(P＜0.01),50 μM Ori作用24、36 h后细胞生长抑制率分别为67.37%和97.63%.50 μm Ori处理24 h后,MCF-7细胞的凋亡率为80.03%.结论 冬凌草甲素可显著抑制MCF-7细胞的生长,诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡,是一种潜在的抗乳腺癌药物.     

雌激素及三苯氧胺对MCF-7乳腺癌细胞BP1基因表达的影响

目的:检测乳腺癌MCF-7细胞在雌激素(E2)和三苯氧胺(TAM)作用后BP1基因的表达情况.方法:用雌激素(E2)和三苯氧胺(TAM)处理培养的处于对数生长期的MCF-7细胞,应用MTT比色分析法筛选最佳作用浓度.以筛选的浓度同步分组作用于MCF-7细胞72h,同时设对照.用原位杂交法检测BP1基因在ER处于激活和抑制状态下的表达状况,用免疫组化检测bcl-2的表达,用TUNEL法检测细胞凋亡状况.分析MCF-7在ER处于不同表达状态下BP1、bcl-2的表达变化和细胞凋亡变化情况.结果:E2在10-8mol/L、TAM在10-6 mol/L的浓度时,刺激和抑制MCF-7细胞生长的作用最显著.在E2和TAM处理后,MCF-7细胞BP1的表达率分别为95.0%±3.94%、58.5%±5.27%,bcl-2的表达率为80.9%±1.73%、37.8%±2.39%,凋亡指数分别为0.67±0.27、6.7±0.76.分别较对照组76.1%±6.54%、63.5%±3.28%、3.2±0.79之间的差异有统计学意义(P＜0.05).结论:在ER阳性的乳腺癌细胞,BP1的表达受到ER传导通路的调节,E2可能通过调节BP1的表达水平而在乳腺癌的发生中起作用.BP1可能在调节细胞凋亡的过程中起到抑制作用.BP1阳性表达可能成为预后不良的标志.     

华蟾素对乳腺癌细胞株MCF-7的杀伤作用研究

目的研究华蟾素诱导人类乳腺癌MCF-7细胞的凋亡作用。方法利用CCK-8法检测华蟾素对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用;用流式细胞术检测细胞的凋亡抑制率;利用倒置荧光显微镜观察细胞整体形态的变化;利用原子力显微镜(AFM)高分辨率、高灵敏度的特点,从纳米尺度上进一步观察细胞形貌及超微结构的变化。结果 CCK-8结果显示,华蟾素对MCF-7细胞的生长有明显的抑制作用,且随着剂量的增加(6.25～50 mg.L-1)而增大,当浓度为50 mg.L-1时,抑制率达到(68.40±1.02)%。采用流式细胞术对细胞凋亡的检测结果也表明华蟾素浓度为50 mg.L-1时,细胞晚期凋亡率最大,可达到(55.5±1.2)%。AFM与对照组相比,药物作用后,细胞开始坍塌变矮、细胞变小,周围呈月牙状或环状,浓度最大时,细胞中间出现较大孔洞。结论华蟾素能有效抑制MCF-7细胞的生长增殖并诱导其凋亡。利用AFM在单细胞水平上分析华蟾素对MCF-7细胞的作用,使分析结果更加全面。     

丁酸钠对乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制作用

目的 初步研究丁酸钠对乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制作用.方法 常规培养乳腺癌细胞MCF-7至对数生长期,观察用丁酸钠处理后细胞生长速度、倍增时间、克隆形成率、细胞周期分布和细胞凋亡的变化.结果 与MCF-7亲本细胞相比,用丁酸钠处理的MCF-7细胞:①生长速度减慢.倍增时间延长(MCF-7亲本细胞、2.5mmol/L、5mmol/L和10mmol/L丁酸钠处理的MCF-7细胞倍增时间分别为29.9h、62.3h、164.2h和301.0h,P<0.05);②克隆形成率显著降低(MCF-7亲本细胞和丁酸钠(5mmol/L)处理24h的MCF-7细胞平均克隆形成率分别为72%和16.7%,P<0.05);③出现明显的G1期阻滞,S期和G2/M期细胞比例显著减少(P<0.05);④凋亡细胞数量明显增加(P<0.05);⑤出现明显的DNA"梯子"样断裂变化.结论 初步揭示了丁酸钠可以逆转乳腺癌细胞MCF-7的恶性生物学行为,其该作用可能与诱导MCF-7细胞凋亡有关,为丁酸钠在乳腺癌治疗中应用的可能性提供了初步的理论和实验依据.     

18F-FDG用于早期评价放疗对食管癌Eca109细胞生长抑制作用的价值

目的 探讨18氟-氟代脱氧葡萄糖(18 F-FDG)用于早期评价放疗对食管癌Eca109细胞生长抑制的价值.方法 Eca109细胞采用2Gy(A组)、4 Gy(B组)、6 Gy(C组)和8 Gy(D组)照射48 h后,采用18 F-FDG细胞结合实验检测抑制率,CCK-8法检测细胞体外生长情况,流式细胞术检测细胞凋亡率.E组为空白对照组.结果 细胞结合抑制率、细胞生长抑制率与放射剂量呈正相关(r=0.964、0.759,P＜0.01).细胞生长抑制率、细胞凋亡率与细胞结合抑制率呈正相关(r=0.736、0.995,P＜0.01).结论 18 F-FDG细胞结合抑制率、细胞生长抑制率和细胞凋亡率均可用于早期评价放疗对食管癌Eca109细胞生长的抑制作用.     

抗肿瘤化合物CENPOANU的体外抗肿瘤活性研究

目的：研究抗肿瘤化合物1-（2-氯乙基）．3．[2．（2-硝基苯氧）乙酰基]-1-亚硝基脲（CENPOANU）的体外抗肿瘤活性及其机制。方法：考察对人乳腺癌细胞（McF-7）、人宫颈癌细胞（HeLa）、小鼠红白血病细胞（MEL）、人恶性胶质瘤细胞（u251）,CEN—POANU和卡莫司汀（BCNU）的半数抑菌浓度（IC。。）;检测0、0．5、1．O、1．5、2．O、4．O倍IC。的CENPOANU作用24、36、48h后MCF．7的增殖抑制率,0、0．5、1．0、1．5、2．O、4．0倍IC50的CENPOANU、BCNU作用48h后MCF．7的增殖抑制率;测定0、10．5、14．O、28．Oramol／LCENPOANU对MCF-7的克隆形成率;观察14．0gmoFLCENPOANU作用O、24、48h后MCF-7的细胞形态变化和凋亡形态,以及作用48h后空白对照组和CENPOANtJ（14．0p．mol／L）组MCF-7的细胞周期分布、增殖指数和凋亡指数（A）。结果：在MCF．7、HeLa、MEL、U251上的ICmCENPOANU分别为（6．9±2．2）、（14．7±3．5）、（7．8±1．2）、（9．6±2．1）gm01／L,BCNU分别为（14．5±2．6）、（12．4±1．5）、（8．8±1．3）、（11．2±1．4）p．mol／L;CENPOANU对MCF一7的生长具有抑制作用,且与浓度和时间呈正相关。与BCNU比较,CENPOANU对MCF．7的生长抑制作用明显增强（P〈0．01）。CENPOANU能明显降低MCF-7的克隆形成率,且与浓度呈正相关（P〈0．05）。与作用0h比较,MCF．7随作用时间延长,可见体积缩小、空泡等凋亡细胞,且细胞数量减少,发生皱缩、脱落等,其中GJM、S期细胞明显减少（P〈0．01）,空白对照组和CENPOANU组MCF-7的增殖指数分剐为92．05％、42．70％,A分别为（1．5±0．1）％、（13．1±1．3）％。结论：CENPOANU主要通过阻滞细胞周期G2／M、S进程干预细胞增殖,并诱导细胞凋亡,且体外抗肿瘤活性优于BCNU。     

重症急性胰腺炎时胰腺组织细胞凋亡与病变严重程度的关系

目的探讨实验性重症急性胰腺炎（SAP）胰腺组织细胞凋亡与胰腺病变严重程度的关系。方法28只SD大鼠随机分为两组：对照组7只、SAP组21只。牛磺胆酸钠诱导SD大鼠SAP模型，于造模成功后3、6、12h分别处死7只。检测血清淀粉酶浓度、胰腺组织学损伤评分（HI），TUNEL法检测胰腺组织细胞凋亡指数（AI）、免疫组化法检测Fas／FasL表达。结果12h时SAP组大鼠死亡1只，对照组无死亡。SAP组的血清淀粉酶浓度（U／L）在3h．6h、12h时分别为3904±737、6133±882、10606±2641（对照组1518±562，P=0．000），相应时点的H1分别是4．85±1．35、8．14±1．34、11．00±1．26（对照组为1．57±0．79，P=0．000），各组间差异有显著统计学意义。对应时间点的胰腺AI分别是1．200±0．497、0．886±0．389和0．700±0．352（对照组为1．028±0．403，），12h与3h的差异有统计学意义（P=0．047）。Fas的表达强度分别为108．00±10．02、93．14±8．17、73．33±9．52（对照组为102．00±13．24，P＝0．001），FasL分别为83．86±31．13、79．57±9．78、73．33±15．79（对照组为88．57±7．68，P=0．023）。SAP组AI与HI（r=-0．510，P=0．022）、AI与AMY（r=-0．471，P：0．036）分别呈负相关关系，Fas与AI（r=0．572，P=0．008）呈正相关关系。结论在实验性SAP大鼠中，胰腺组织细胞凋亡指数与胰腺组织学损伤程度呈负相关，诱导凋亡可能减轻胰腺炎的进展有关。     

透骨草提取物通过Bcl-2和Bax蛋白诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡

目的探讨Bax和Bcl-2蛋白在透骨草提取物诱导人乳腺癌细胞株MCF-7细胞凋亡过程中的作用,为透骨草提取物治疗乳腺癌提供实验依据。方法采用吖啶橙染色方法透骨草提取物对MCF-7细胞形态的影响;采用流式细胞术检测透骨草提取物对MCF-7细胞凋亡率的影响;采用蛋白印迹法检测MCF-7细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果 30.5μg/ml透骨草提取物可诱导MCF-7细胞胞体皱缩,胞核固缩、呈新月状且边集,出现凋亡小体。30.5μg/ml透骨草提取物处理的MCF-7细胞凋亡率（22.3±1.2）%明显高于对照组（3.2±1.0）%（P〈0.05）。30.5μg/ml透骨草提取物可使MCF-7细胞Bcl-2蛋白表达明显低于对照组（P〈0.05）,而Bax蛋白表达明显高于对照组（P〈0.05）。结论透骨草提取物对MCF-7细胞有诱导凋亡作用,其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达有关。     

18F-FDG PET/CT评价兔VX2肺移植瘤三维适形放疗的早期疗效

目的了解兔VX2肺移植瘤模型三维适形放疗过程中的18F-FDG PET/CT显像特点,探讨18F-FDG PET/CT评估肿瘤放疗疗效的价值。方法建立16只兔VX2肺移植瘤模型,按随机数字表法分为放疗组和对照组,每组各8只,分别于三维适形放疗累积剂量达06、、121、8 Gy时行18F-FDG PET/CT检查,采集不同时期两组模型兔肺部肿瘤延迟最大标准摄取值(SUVmax)、对侧正常肺组织SUVmax及两者的比值(T/L),观察两组模型兔T/L及肿瘤体积变化情况;放疗结束后,取出两组模型兔肺部肿瘤,常规HE染色。结果放疗组模型兔累积照射剂量达0、6、12、18 Gy时,T/L分别为(8.447±1.488)(、9.344±1.342)、(7.143±1.307)(、6.221±1.066),各时间点依次比较,差异均有统计学意义(t=3.679、5.010、5.984,P均<0.05),而对照组相应时间T/L逐渐升高,分别为(8.428±1.705)(、9.610±1.282)(、10.402±1.283)(、11.586±1.627),各时间点依次比较,差异均有统计学意义(t=3.360、3.2252、.611,均P<0.05);两组模型兔肺部肿瘤体积均有增长,累积剂量达6、12、18 Gy组间分别比较,差异用统计学意义(t=2.7425、.225、6.824,均P<0.05),放疗组肿瘤体积增长速度明显慢于对照组。HE染色示放疗组肿瘤组织内大片糜烂坏死,对照组肿瘤组织内坏死灶不明显。结论兔VX2肺移植瘤三维适形放疗过程中行18F-FDGPET/CT显像动态观察,T/L短期内显著降低,可在CT形态学改变之前评估放疗早期疗效。     

姜黄素通过抗应激作用改善脑缺血再灌注大鼠工作记忆

目的：探讨姜黄素预先给药对大鼠全脑缺血再灌注后空间工作记忆改善作用的机制.方法：成年雄性SD大鼠120只,经T迷宫训练后按随机数字表法分成5组：假手术组（SHAM组）、脑缺血再灌注组（IR组）、姜黄素组（CUR组）、皮质酮组（CORT组）和姜黄素＋皮质酮组（CUR＋ CORT组）,每组24只.各组给予相应药物、溶媒注射,1h后全脑缺血10 min后再灌注,于再灌注7d行T迷宫检测工作记忆,于再灌注2h、1、3、7d采血清和脑组织标本,TUNEL法检测海马CA1区神经元凋亡情况,ELISA检测血清皮质酮（CORT）和海马脑源性神经营养因子（BDNF）的表达.结果：与SHAM组比较,IR组CORT水平增加（164±36 vs 92±24,P＜0.05）,海马BDNF含量降低（8.7±2.8 vs 19.4±5.1,P＜0.05）,海马CA1区凋亡神经元数目增加（233±22 vs 21±4,P＜0.01）,T迷宫正确率降低（65％±7％ vs 87％±9％,P＜0.05）;与IR组比较,CUR组CORT水平降低（102±18,P＜0.05）,海马BDNF含量增加（13.3±3.3,P＜0.05）,海马CA1区凋亡神经元数目减少（163±11,P＜0.05）,T迷宫正确率增高（79％±10％,P＜0.05）;与IR组比较,CORT组海马BDNF降低（4.4±1.2,P＜0.05）,海马CA1区凋亡神经元数目增加（332±35,P＜0.05）,T迷宫正确率降低（58％±6％,P＜0.05）;与CORT组比较,CUR＋ CORT组海马BDNF含量增加（10.5±2.3,P＜0.05）,海马CA1区凋亡神经元数目降低（211±27,P＜0.05）,T迷宫正确率增高（71％±12％,P＜0.05）.结论：姜黄素预先给药可通过抑制应激反应改善大鼠全脑缺血再灌注后空间工作记忆.     

组织蛋白酶S抑制剂对兔血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 研究组织蛋白酶S抑制剂对培养的兔血管平滑肌细胞凋亡的影响及其机制.方法 获取兔主动脉组织,传代培养血管平滑肌细胞,将细胞分为对照组、单药组(血管紧张素Ⅱ)、联合组(组织蛋白酶S抑制剂+血管紧张素Ⅱ);采用流式细胞术和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测血管平滑肌细胞凋亡,蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤基因-2蛋白、B细胞淋巴瘤基因-2相关蛋白X及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3的表达.结果 ①流式细胞术检查及TUNEL染色结果均显示,联合组血管平滑肌细胞晚期凋亡数量明显低于单药组;TUNEL染色10 h和12 h时点,单药组与联合组差异有统计学意义[ 10 h:(23607±176)比(36058±269)个,12 b:(29813±205)比(39146±263)个,均P＜0.05];②蛋白质印迹检测结果显示,与单药组相比,联合组B细胞淋巴瘤基因-2相关蛋白X/B细胞淋巴瘤基因-2蛋白明显下降,组间差异有统计学意义(P＜0.05);联合组半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3表达明显降低,组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 组织蛋白酶S抑制剂可能通过下调B细胞淋巴瘤基因-2相关蛋白X、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3表达减轻血管平滑肌细胞凋亡.     

Explora FDCA制备^18F-FDG、质量控制及影响因素探讨

目的研究正电子药物^18F-FDG的制备与质量控制以及影响^18F-FDG合成效率的因素。方法使用医用回旋加速器,通过^18O（p,n）18F核反应,采用Explora FDG4全自动合成系统制备了^18F-FDG静脉注射液,对于制备的药物进行质量控制与影响因素分析。结果Explora FDG4合成效率65％,^18F-FDG放化纯度99％^18F-FDG其他指标符合药典质量要求,反应体系中残留的水等影响合成效率。结论制备的^18F-FDG静脉注射液使用临床PET-CT检查。     

CDK9抑制剂F200对乳腺癌细胞MCF7凋亡的影响

目的研究细胞周期依赖性激酶（cell cycle dependent kinase,CDK）CDK9抑制剂F200对乳腺癌细胞MCF7凋亡的影响。方法 MCF7细胞培养于含0.01 mg·mL^-1人重组胰岛素及10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中,待对数生长期时接种细胞进行实验,24 h贴壁后给药：分为阴性对照组（0.5%DMSO）、阳性对照组（R-Roscovitine 5.66μM）及药物组（F200 0.1μM,0.71μM）,给药48 h后利用TUNEL法染色观察细胞凋亡DNA断裂情况及细胞凋亡形态学变化、流式细胞技术检测细胞的凋亡比率、免疫印迹法检测凋亡标志蛋白PARP的表达情况。结果 TUNEL结果显示,随着F200浓度增加,细胞出现明显的固缩变圆,细胞核可见深染致密颗粒,细胞核质分界明显等凋亡表现;流式细胞仪结果显示,0.71μM的F200能够诱导32.6%的细胞凋亡;Western Blot结果显示,随着F200浓度增加,PARP蛋白剪切水平明显增加。结论 F200能有效促进乳腺癌细胞MCF7的凋亡。     

乳腺癌MCF-7细胞系中侧群细胞分选及其生物学特性

目的 分离乳腺癌MCF-7细胞系中的侧群细胞(SP)并观察其生物学特性.方法 利用流式细胞荧光分选法将乳腺癌MCF-7细胞系分成SP和非SP细胞两个亚群.对两个亚群细胞采用软琼脂克隆形成实验观察其增殖能力.结果 MCF-7细胞株中分选出SP细胞占(6.5±0.4)％;SP细胞的体外克隆形成率为(38.5±9.4)％,高于非SP细胞的(8.4±2,6)％(t=5.34,P＜0.05).结论 乳腺癌MCF-7细胞中的SP细胞富集了乳腺癌于细胞,其增殖能力强于非SP细胞,表明SP表型的肿瘤细胞在乳腺癌的生长中具有重要的地位.     

LC-MS/MS法测定人血浆中替米沙坦的浓度及其人体生物等效性研究

目的:建立以高效液相色谱串联质谱电喷雾(LC-MS/MS)法测定人血浆中替米沙坦浓度的方法,并考察2种替米沙坦片的生物等效性。方法:人血浆样本以乙腈沉淀蛋白后,选用Zorbax SB-C_(18) Narrow Bore色谱柱,以甲醇-10mmol.L~(-1)乙酸铵(含0.5%甲酸)(80∶20)为流动相,流速为0.4mL.min~(-1);选用API3200型三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行监测,电喷雾离子化源,正离子方式,选择监测离子反应分别为m/z515.2→276.2(替米沙坦)和m/z748.5→m/z158.2(克拉霉素,内标)。结果:替米沙坦和克拉霉素的保留时间分别为1.51、1.25min。替米沙坦血药浓度在1.00～1500ng·mL~(-1)范围内线性关系良好(r=0.9985),定量下限为1.00ng·mL~(-1);日内、日间RSD均≤6%,相对偏差(RE)均在±7%的范围以内;平均提取回收率为(93.0±3.9)%。替米沙坦片受试制剂与参比制剂平均药动学参数分别为:t_(1/2)(25.5±12.5)、(26.5±11.8)h,t_(max)(1.50±0.78)、(1.59±1.16)h,c_(max)(358±212)、(389±298)ng·mL~(-1),AUC_(0～96h)(2383±1146)、(2411±1192)ng.h.mL~(-1)。替米沙坦片受试制剂的平均生物利用度为(101.3±22.6)%。结论:该方法高效、灵敏、专属性强;2种替米沙坦片等效。