环状RNA在急性髓系白血病中的研究进展

急性髓系白血病(AML)是多种信号通路共同参与的血液系统恶性疾病,患者长期生存率低,因此迫切需要寻找新的检测方法和治疗手段,从而改善预后.环状RNA(circRNA)是新近发现的非编码RNA,其具有高度的稳定性和特异性,在基因的转录、翻译和表观遗传学修饰等过程中起重要作用,并参与调控肿瘤增殖、浸润及转移等恶性发生及发展...     

分化抑制因子1基因在急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中的表达

目的: 探讨分化抑制因子1（inhibitor of differentiation 1,ID1）基因在急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者骨髓单个核细胞中的表达及其临床意义。方法: 应用实时定量PCR方法检测153例初诊AML患者骨髓单个核细胞ID1基因的转录本水平。结果： ID1基因的表达范围为0.000～3.536（中位为0.030）。以中位数值为界将AML患者分为高表达组和低表达组,两组AML患者性别、外周血小板计数以及常见基因突变无统计学差异（P>0.05）,外周血白细胞计数、外周血血红蛋白、FAB分型、WHO分型、核型分组及核型危险程度分组趋近统计学差异（P<0.10）。ID1高表达患者年龄以及骨髓原始细胞比例显著高于ID1低表达患者（P=0.033、0.035）。ID1高表达组患者经治疗后完全缓解率低于ID1低表达组（P<0.01）,且定量分析显示经1～2个疗程诱导化疗获得完全缓解的AML患者初诊时ID1表达水平显著低于未获得完全缓解的AML患者（P=0.001）。生存分析显示在全部患者、非M3患者或正常核型AML患者中,ID1高表达患者总体生存时间均明显短于ID1低表达患者（P=0.002、0.008和0.050）。 结论： ID1基因表达水平可作为AML患者化疗反应以及预后判断的分子标志。     

Ang 2 mRNA在急性髓系白血病患者骨髓细胞的表达及临床意义

目的 观察Ang2mRNA在急性髓系白血病患者骨髓细胞的表达并对其临床意义做出简要评价.方法 选择白血病患者80例,根据患者临床表现、免疫分型、细胞形态学以及遗传学特征等分为初治组、复发组、难治组、缓解组,各20例,另择取20名健康体检者设为对照组.对比各组之间Ang2mRNA表达水平差异,并对其临床意义做出简要评价.结果 初治组患者Ang2mRNA水平为5.46,复发组为1.54,难治组为8.66,初治组Ang 2 mRNA水平显著高于对照组与缓解组(P<0.05);复发组与难治组Ang 2 mRNA水平亦高于对照组与缓解组(P<0.05);初治组、复发组与难治组之间Ang 2 mRNA水平比较差异无统计学意义.患者初治时白细胞计数中位数为11.88,范围为0.29~417,血红蛋白中位数为76.54,范围为2.8~125,外周血原幼稚细胞比例中位数为40.01,范围为0~99,白细胞计数、血红蛋白、外周血原幼稚细胞比例不存在显著相关性.结论 Ang2mRNA表达水平在不同患者中具有显著差异,可将其作为判断缓解率的有效标准.     

miR126在成人急性髓系白血病患者骨髓中的表达

目的 探讨miR126在成人急性髓系白血病(AML)患者骨髓中的表达及与临床变量的相关性.方法 应用实时定量PCR方法检测47例AML患者及9名正常人骨髓中miR126的相对表达水平,分析其与患者性别、年龄、血象、亚型分类和基因型的关系.结果 AML患者骨髓中miR126相对表达水平较正常对照组增高,但差异无统计学意义(P＞ 0.05);miR126在M3型AML患者中表达水平明显低于非M3型(P＜0.05);正常基因型与异常基因型间miR126表达无统计学差异(P＞0.05);伴有t(15;17)或PML/RaRa阳性的AML患者miR126表达水平低于其他基因型AML患者(P＜0.05);本研究中AML患者miR126表达水平与初诊时骨髓原始细胞百分数呈负相关(r =-0.352,P=0.018),与初诊时外周血白细胞数、年龄、性别均无相关性.结论 miR126在M3型AML患者中表达低于非M3型,伴有t(15;17)或PML/RaRa阳性的AML患者miR126表达水平较其他核型表达水平低,提示miR126可用于区分AML亚型.     

bcl-2基因在急性髓系白血病细胞中的表达及意义

采用链霉亲和素过氧化酶免疫组织化学方法 (S -P法 )检测 30例初发成人急性髓系白血病(AML)患者的骨髓细胞bcl - 2蛋白表达 .结果 :( 1)AML患者骨髓细胞中bcl - 2蛋白阳性表达率为( 55 12± 2 3 78) % ( 19%～ 93% ) ,显著高于正常对照 (P <0 0 1) . ( 2 )AML按FAB分型各亚型间比较 :bcl- 2蛋白表达在M1,M2 型阳性率较高 ( 60 58± 19 0 5) % ;M3 型则较低 ( 2 1 50± 6 2 2 ) % ;M4 ,M5型最高( 69 64± 14 96) % . ( 3)经标准诱导治疗后 ,完全缓解 (CR)组的bcl- 2蛋白表达显著低于未缓解 (NR)组 (P <0 0 5) .提示 :bcl- 2蛋白在AML细胞中呈高表达 ,并为白血病化疗耐药的预后指标之一 .     

N-乙酰基转移酶10基因与急性髓系白血病病人预后的关系分析

目的：探究N-乙酰基转移酶10(N-acetyltransferase 10,NAT10)与急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)预后的关系。方法：选取2015年9月至2018年1月收治的84例初治AML病人(初治组)、20例复发AML病人(复发组)、20例AML完全缓解病人(缓解组)和20名健康人(对照组)为研究对象。用RT-PCR检测受试者骨髓单个核细胞中NAT10 mRNA的表达。ROC曲线分析NAT10 mRNA早期诊断AML的价值,计算曲线下面积(AUC)、灵敏度和特异度。以NAT10 mRNA中位表达水平将84例AML病人分为高表达组和低表达组,比较2组病人的生存预后。结果：初治组和复发组骨髓单个核细胞中NAT10 mRNA相对表达量均高于缓解组和对照组(P<0.05～P<0.01)。NAT10 mRNA早期诊断AML的AUC为0.827(95%CI:0.723～0.930,P<0.01),灵敏度和特异度分别为83.6%和82.6%。COX多因素分析显示,FLT3-ITD/TKD突变和NAT10 mRNA高表达是AML病人...     

急性髓系白血病骨髓单个核细胞EphrinB2基因表达及其临床意义

目的: 探讨急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者骨髓EphrinB2基因的表达情况并分析其临床意义。方法: 应用实时定量PCR（real time quantitative PCR,RQ PCR）技术检测91例AML患者（观察组）及32例非恶性血液病患者（对照组）骨髓单个核细胞标本的EphrinB2表达水平。结果： AML患者中EphrinB2表达水平比对照组明显下调（P0.05）,但低表达患者的年龄明显低于高表达患者（P=0.011）。接收者操作特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）分析表明, ROC曲线下面积0.812（95% CI：0.726～0.898;P0.05）。结论： EphrinB2表达下调是AML患者中的一个常见分子事件,但对患者预后并无明显影响。     

微RNA在急性髓细胞白血病中的研究进展

近十年来,微RNA(miRNAs)已成为生物科学领域的一个研究热点。miRNAs在造血细胞分化以及包括急性髓细胞白血病(AML)等血液恶性肿瘤中起到了非常重要的作用。miRNAs的异常表达与AML特异性的基因异常以及AML患者的临床结局密切相关,且miRNAs与AML的发病机制和预后密切相关。另外,由于miRNAs既可作为致癌基因又可作为肿瘤抑制基因,因此miRNAs可作为AML诊断和治疗的新型标志物。     

急性髓系白血病患者BAALC的表达及其临床意义

目的:检测急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者BAALC(brain and acute leukemia,cytoplasmic)基因的表达并探讨其临床意义。方法:收集93例初诊AML患者(研究组)和36例非恶性血液病患者(对照组)骨髓,应用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)法检测骨髓单个核细胞中BAALC转录本水平。采用ROC曲线根据其表达水平对AML患者再次分组并比较组间临床参数的异同,分析其临床意义。结果:AML患者BAALC表达水平明显高于对照组(P<0.001)。AML患者的BAALC表达水平根据临界值2.107(ROC曲线敏感度51%、特异性100%)分为高表达组和低表达组。两组患者的性别、年龄、外周血白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量和基因突变差异无统计学意义(P>0.05),但FAB分型、WHO分型、不同核型以及染色体危险程度分型差异有统计学意义(P<0.05),BAALC高表达组原始细胞计数明显高于低表达组(P<0.001)。BAALC高表达组治疗后完全缓解率低于BAALC低表达组(P=0.087);BAALC高表达组患者总体生存时间明显低于BAALC低表达组(P=0.031),正常核型AML患者中BAALC高表达组总体生存时间也明显低于低表达组(P=0.043)。结论:BAALC高表达是AML患者预后不良的影响因素,可作为AML辅助诊断的参考标志。     

NPM1基因在急性髓细胞白血病中的表达及其临床意义

目的探讨急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)野生型NPM1基因的表达及临床意义。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测59例AML患者,分析NPM1基因表达水平与患者性别、年龄、外周血细胞数、骨髓原始幼稚细胞数及临床疗效的关系,并对部分患者NPM1表达水平进行动态观察。结果初治AML患者中NPM1阳性表达率为73.8%,难治复发组NPM1阳性率为100%,完全缓解组NPM1阳性表达率为66.7%,对照组NPM1阳性表达率为60%,但各组之间阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。分析表达水平显示,难治复发组NPM1中位表达水平(0.798 8)高于初治组(0.541 0)、完全缓解组(0.483 6)及对照组(0.371 8)(P<0.05)。NPM1高表达组患者有效为63.1%,低于低表达组(88.9%)和不表达组患者(100%)(P<0.05)。NPM1表达强度与外周血白细胞数和骨髓原始细胞数呈正相关(P<0.05)。对12例初治时NPM1基因高表达患者进了动态观察,1个疗程化疗后获完全缓解5例,其表达水平达正常中位水平以下,其余7例为未缓解患者,NPM1表达水平未见明显变化。结论 NPM1基因在AML中均存在不同程度的过度表达现象,NPM1高表达者提示预后差,完全缓解率低,可作为AML预后不良的指标,PCR动态检测AML患者治疗前后NPM1表达水平,可作为判断AML预后和监测微小残留病(MRD)的一项指标。     

急性髓系白血病中乳腺癌耐药蛋白基因表达与临床意义

目的  研究急性髓细胞白血病（AML）患者乳腺癌耐药蛋白（BCRP）基因的表达以及在预后判断中的意义。方法  构建实时定量PCR检测BCRP基因表达的技术,定量检测20例初治组AML患者、20例完全缓解组AML患者及20例难治复发组AML患者BCRP基因的表达水平,分析其在AML患者和非血液系统恶性肿瘤患者中的差异及与临床疗效的关系。结果  急性髓系白血病患者中BCRP的表达高于对照组（P <0.01）,初治组、完全缓解组、难治复发组的BCRP表达均存在差异（P <0.01）,其中难治复发组表达最高,初治组次之,完全缓解组最低。结论  BCRP基因在急性髓系白血病患者中表达增高,BCRP的表达水平可能是疾病进展的重要标志,可能是AML的独立危险因素。

     

血管内皮生长因子在急性髓系白血病骨髓上清、血浆中的表达及意义

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)在急性髓系白血病(AML)骨髓上清、血浆中的表达及意义.方法 选取23例初诊未治的AML患者作为研究对象.抽取枸橼酸钠抗凝的外周血2 ml、肝素抗凝的骨髓3～5 ml,离心后分别抽取血浆、骨髓上清,贮存于-20℃冰箱待用.采用ELISA方法检测骨髓上清、血浆中VEGF的表达水平.骨髓上清VEGF对照选取8例非何杰金淋巴瘤无骨髓浸润患者,血浆VEGF对照选取5例健康体检者.结果 初诊未治的AML患者骨髓上清、血浆VEGF的水平均明显高于对照组(P均<0.05);且骨髓上清水平明显高于血浆水平(P<0.05),二者呈正相关(r=0.484,P=0.031).AML患者化疗后完全缓解组(n=6)与未缓解组(n=4)血浆VEGF水平均较治疗前明显升高(P均<0.05),但完全缓解组与未缓解组比较差异无统计学意义(P>0.05).化疗后完全缓解组与未缓解组骨髓VEGF水平均较治疗前略有下降,但差异无统计学意义(P>0.05);未缓解组与缓解组比较差异亦不显著(P>0.05).结论 初诊未治的AML骨髓上清、血浆VEGF的表达水平均明显升高,且骨髓上清明显高于血浆,具有诊断价值,可能为AML的治疗提供新的途径,但化疗后VEGF的变化不能作为判断疗效的指标.     

CDX2基因在成人急性髓细胞白血病中的表达及临床意义

目的：研究尾型同源盒基因2（CDX2）在急性髓细胞白血病（AML）患者中的表达及临床意义。方法通过 RT‐PCR方法检测114例初发AML患者及56例诱导化疗后患者骨髓和（或）外周静脉血单个核细胞CDX2基因表达,19例随访患者每3个月定期检测CDX2基因表达。8名健康者外周静脉血和5名缺铁性贫血患者骨髓作为对照。结果114例A M L患者和13名对照的骨髓和（或）外周血单个核细胞均检测到CDX2基因表达。以第一个四分位数为界划分低表达组和高表达组,对照组CDX2基因表达水平均在低表达组,114例A M L患者高表达组90例（78．9％）,对照组与A M L患者CDX2基因表达差异有统计学意义（ P＜0．01）。初发患者骨髓和外周静脉血CDX2基因表达呈正相关（ r＝0．656,P＜0．01）。CDX2高低表达组诱导化疗完全缓解（CR）率差异无统计学意义（P＞0．05）。本组 AML 病例 CDX2高表达78．9％。CR患者 CDX2表达量为化疗前的10．3％～86．2％,且随着疗程增加逐步降低,复发时显著升高。随访6个月以上病例19例,两组早期复发率差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 CDX2表达量变化反映患者体内白血病细胞负荷,持续高表达可能是预后不良指标之一,可作为染色体核型正常AML微小残留病监测指标。     

血管内皮生长因子在急性髓系白血病细胞中的表达

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在成人急性髓系白血病(AML)的发生发展中的作用。方法采用逆转录PCR(RT-PCR)和酶联免疫吸附(ELISA)的方法研究50位AML病人及16位正常人骨髓细胞及血浆VEGF的表达。结果部分正常人和大多数AML病人的骨髓细胞及白血病细胞系均表达VEGF。AML病人骨髓细胞VEGF表达阳性率(82%)明显高于正常人(30.76%)及骨髓移植后的AML病人(41.76%)。难治型和非难治型AML病人血浆中VEGF浓度均显著高于正常人和AML骨髓移植后病人(P<0.01)。除正常人与骨髓移植后AML病人血浆中VEGF浓度比较无统计学差异外(P>0.05),另与其他两者之间均有显著性差异(P<0.01)。难治型和非难治型白血病病人骨髓细胞分泌的VEGF分别比正常人高11.0和7.3倍,且两者之间比较有显著性差异(P<0.01)。结论VEGF在AML病人中存在异常表达,在AML的发病机制中可能起一定的作用,且可能成为判断AML病人预后指标之一。     

基于单细胞测序分析急性髓系白血病患者骨髓免疫微环境的特点

目的 通过单细胞测序技术分析急性髓系白血病(AML)患者骨髓免疫微环境的组成情况,探讨不同类型免疫细胞的不同亚群在AML发生发展中的作用。 方法 检索基因表达数据库(GEO)中符合条件的scRNA-seq数据集(GSE116256),利用R语言的Seurat包对数据进行处理,利用SingleR包并参考既往研究对细胞亚群进行注释,计算不同类型免疫细胞的比例,寻找AML患者与正常对照组存在差异的细胞亚群并计算它们的差异基因(DEGs),对DEGs进行基因本体功能注释(GO)和京都基因与基因组百科全书富集分析(KEGG),明确存在差异的细胞亚群在AML疾病进程中的作用。 结果 与正常对照组相比, AML患者的造血祖细胞、单核细胞、NK/T细胞、树突状细胞和B细胞的亚群比例均发生不同程度改变。通过对差异基因进行功能富集发现,AML的单核细胞、树突状细胞、B细胞以及T细胞的增殖、分化、免疫调控及对肿瘤细胞的杀伤功能出现不同程度损伤。 结论 AML患者与健康人的免疫微环境存在较大差异,这些差异可能与AML的发生发展关系密切。     

BLCAP基因在急性髓系白血病中的表达及意义

目的 探讨膀胱癌相关蛋白(BLCAP)基因在急性髓系白血病(AML)中的表达及其与治疗疗效和预后的关系.方法 收集我院血液科2008年1月至2012年12月收治的138例原发性急性髓系白血病患者的病理资料,利用实时定量PCR(RQ-PCR)法检测AML患者骨髓液BLCAP基因的表达,并分析其表达与AML临床病理指标及治疗疗效、预后的关系.结果 AML患者均表达BLCAP,BLCAP的表达在AML患者不同年龄、白细胞(WBC)、血红蛋白(Hb)等指标间比较差异均有统计学意义(P<0.05);AML治疗后缓解及治疗后无事件生存的患者,其BLCAP表达高于治疗后未缓解及治疗后复发、病情进展及死亡的患者,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 BLCAP基因在AML患者中的表达与其治疗疗效及预后相关,有望成为AML病情评估及疗效预测的指标.但这一结论尚需进一步的研究予以证实.     

儿童急性白血病骨髓细胞PCNA和Bcl-2基因表达及其意义

目的　探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)及原癌基因Bcl- 2在儿童急性白血病 (AL)骨髓细胞的表达及临床意义。方法　应用S -P免疫组化法检测 41例儿童AL骨髓标本PC NA和Bcl- 2。结果　急性淋巴细胞白血病 (ALL)组及急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)组PC NA表达率与对照组比较均有显著差异 (P <0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,ALL标危组显著高于高危组 (P <0 .0 5 ) ;ALL及ANLL组的Bcl- 2表达率高于对照组 (P <0 .0 1) ,标危组显著低于高危组 (P <0 .0 5 )。PCNA高表达者缓解率显著高于低表达者 (P <0 .0 1) ;Bcl- 2阳性表达者 3年无病生存率显著低于阴性表达者 (P <0 .0 1)。结论　PCNA、Bcl- 2基因在儿童AL中存在表达异常 ,二者均参与发病过程 ,但其作用机制可能是独立的 ,联合检测有助于判断预后。