肝病患者外周血HIF-1α定量检测的临床价值分析

目的：定量检测肝病患者外周血缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达水平,以探讨血HIF-1α浓度作为肝细胞性肝癌（HCC）诊断及预后监测的临床价值。方法：收集不同肝病患者外周血220份及正常健康对照外周血27份,以酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测肝病患者血清HIF-1α表达水平,与AFP对照分析其临床意义。结果：在肝病发展过程中,血清HIF-1α表达呈梯度增加,HCC患者血HIF-1α表达显著高于良性肝病患者（P〈0.001）,与肿瘤大小、有无肝外转移明显相关（P〈0.05）,与患者的年龄、性别、AFP浓度及HBsAg阳性与否间差异无统计学意义（P〉0.05）。受试者工作曲线显示,血HIF-1α面积水平为0.909,血HIF-1α表达水平异常,有助于HCC的诊断。结论：HIF-1α过表达与HCC的发生、发展相关,外周血HIF-1α异常是HCC诊断和转移监测的良好标志物。     

肝癌患者手术前后外周血AFP mRNA定量检测的临床意义

目的：研究肝细胞肝癌患者手术前后外周血AFP mRNA表达量的变化，分析其作为微转移标记物的可行性及与复发转移的关系．方法：使用实时荧光定量RT—PCR检测64例肝细胞癌患者手术前后外周血AFP mRNA表达量，并进行平均6mo以上的随访；同时以8例肝硬化患者、4例肝增生患者、8例肝血管瘤患者和10例健康志愿者作为对照组，对比检测其外周血单核细胞AFP mRNA的表达量．结果：复发34例．HCC组的术前AFP mRNA表达量明显高于对照组．术前外周血AFP mRNA相对HCC的灵敏度为85．9％，特异性为90．3％，准确率为87．4％．HCC患者术后外周血AFP mRNA表达量明显高于术前．HCC组外周血术前、术后AFP mRNA水平表达量与术后复发转移有明显相关性，与TNM分期、血管癌栓或侵犯有相关性，但与术时肿瘤数目、癌细胞分化程度、包膜完整性均与血清AFP浓度无相关．术后HCC组外周血AFP mRNA表达量与肿瘤大小有相关性．结论：实时荧光定量RT—PCR法检测HCC患者外周血AFP mRNA表达量有很高的敏感性和特异性，可以反映HCC患者血中是否存在肝癌细胞．手术可促进部分HCC细胞脱落人血．监测外周血AFP mRNA水平对术后早期复发转移有预测价值．     

Mcl-1在肝硬化和肝癌组织中的表达及临床意义

目的：分析髓样细胞白血病-1（Mcl-1）在原发性肝癌（HCC）和肝硬化（LC）组织中的表达及其临床意义.方法：免疫组化法分别检测50例HCC、50例LC和50例对照组肝组织中Mcl-1的表达,并分析其与肝癌临床病理学特征的相关性.结果：与对照组比较,Mcl-1在LC和HCC组中的表达增强（P＜0.05）;肝癌组织中Mcl-1的表达与肿瘤直径、Edmonson grade分级、肝内外转移、复发、静脉浸润相关（P＜0.05）;Mcl-1高表达患者与低表达患者生存时间差异有统计学意义（P＜0.05）;多因素分析显示,Mcl-1表达、肿瘤大小和血清AFP值分别是影响肝癌预后的独立因素.结论：Mcl-1的过表达可能与HCC的发生、发展有关.Mcl-1表达影响肝癌患者预后.     

肝细胞癌及癌旁肝组织HBsAg,AFP研究

目的：研究HBsAg、AFP在肝细胞癌（HCC）及癌旁肝组织中的表达情况,探讨二者之间的关系。方法：对43例附癌旁肝组织的HCC标本用免疫组化S－P法检测HBsAg、AFP的表达,结果：HBsAg、AFP阳性细胞棕色颗粒主要存在于细胞浆中。43例HCC和癌旁肝组织中,HBsAg阳性率分别为69．8％（30／43）和90．7％（39／43）,两者间差异有显著性（P,0．05）;AFP阳性率分别为72．1％（31／43）和69。．8％（30．43）,两者差异无显著性（P＞0．05）HCC及癌旁肝组织中,HBsAg阳性者AFP阳性率明显高于HBsAg阴性者（P＜0．05）。结论：HBsAg可诱发肝细胞产生AFP,促发肝细胞癌。     

抑癌基因FHIT和PTEN在肝细胞癌中的表达及其意义

目的：探讨FHIT和PTEN基因在肝细胞癌（HCC）中的表达及其意义。方法：采用免疫组化Envision二步法检测FHIT蛋白及PTEN蛋白在44例HCC组织及10例正常肝组织中的表达。结果：44例肝细胞癌组织中FHIT和PTEN蛋白的阴性表达率分别为38.6%（17/44）和47.7%（21/44）,10例正常肝组织中FHIT和PTEN蛋白的阴性表达率均为0,两种抑癌基因在肝细胞癌组织与正常肝组织中的阴性表达率之间差异有统计学意义（P＜0.05）。在HCC中FHIT基因的阴性表达率与HCC的病理分级、TNM临床分期和肿瘤直径有关（P＜0.05）,与AFP水平、HBsAg（＋）和有无包膜无关（P＞0.05）。PTEN蛋白的阴性表达率与病理分级显著相关（P＜0.05）,与TNM分期、肿瘤直径、AFP水平、HBsAg（＋）和有无包膜无关（P＞0.05）。相关性分析发现,FHIT和PTEN在HCC中的阴性表达呈正相关（rs=0.427,P＜0.01）。分别比较FHIT和PTEN在HCC中蛋白阳性和阴性表达者的术后1、3年生存率,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：FHIT和PTEN蛋白的异常表达与HCC的发生、发展有关,两者可能存在协同作用。FHIT可能是判断HCC恶性程度、侵袭能力和不良预后的重要指标,PTEN可能是判断HCC恶性程度和不良预后的指标。     

人肝癌相关抗原SMP-30在肝癌中的表达及意义

目的：通过免疫组化方法检测人肝癌（HCC）中衰老标记蛋白-30（SMP-30）的表达,探讨其在HCC发生、发展中的作用及临床意义。方法：制备48例人HCC及相应的癌旁组织、6例正常人肝组织和1例正常人肾组织的石蜡切片。采用免疫组化SABC法,检测SMP-30在HCC和癌旁组织中的表达,结合临床资料进行统计分析。结果：初步发现HCC癌旁组织的SMP-30表达高于HCC组织（P〈0．05）。SMP30的表达与HCC患者性别、年龄、肿瘤大小、病理分级、肝硬化背景、HBsAg和AFP检测情况未见相关性（P〉0．05）。结论：SMP-30与HCC的发生、发展有关,其过度表达可能是HCC的早期性、保护性事件。     

肿瘤-睾丸抗原SSX1和SSX4 mRNA在肝细胞癌中的表达

目的 检测肿瘤-睾丸抗原（CTA）SSX1和SSX4 mRNA在肝细胞癌（HCC）及外周血中的表达,探讨CTA抗原SSX1和SSX4 在HCC中表达有无特异性.方法 应用逆转录-聚合酶链反应（PT-PCR）方法对35例HCC患者癌组织和相应的癌旁组织SSX1和SSX4 基因表达进行检测,对其中6例PT-PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定：HCC确诊后第2周对30例患者外周血中SSX1基因进行检测. 结果 35例HCC患者中,SSX1和SSX4 的表达率分别为77.1%（27/35）和65.7%（23/35）;癌旁组织,12例肝硬化和15例正常肝组织未检测到SSX1和SSX4 的表达.6例DNA序列测定结果显示PT-PCR产物为SSX1和SSX4 的cDXA.SSX1和SSX4 的表达与患者年龄,性别,肿瘤大小,血清甲胎蛋白（AFP）水平,乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）感染无相关关系（均P＞0.05）.外周血中未检测到SSX1表达.结论 SSX1和SSX4在HCC中呈高度特异性表达,是制备HCC疫苗理想的靶向分子,多种CTA联合表达为多效价疫苗治疗HCC提供了理论基础.     

肝细胞癌中乙酰肝素酶与NM23的表达及其临床意义

目的：探讨乙酰肝素酶（HPA）和NM23在肝细胞癌（HCC）中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学方法检测72例HCC,62例肝硬化及23例正常肝组织HPA和NM23的表达水平,并分析其与HCC临床病理特征的关系。结果：HPA阳性率在HCC中明显高于肝硬化组（P=0．000）及正常肝组（P=0．001）;在临床TNM分期中Ⅰ、Ⅱ期明显低于Ⅲ、Ⅳ期（P=0．001）;无转移组明显低于转移组（P=0．000）;在AFP≥400μg／L组、有门脉癌栓组和多个肿瘤结节组分别明显高于AFP〈400ptg／L组（P=0．01）、无门脉癌栓组（P=0．000）和单个肿瘤结节组（P=0．000）。NM23阳性率在HCC中明显低于肝硬化组（P=0．009）及正常肝组（P=0．000）;在TNM分期Ⅰ、Ⅱ期明显高于Ⅲ、Ⅳ期（P=0．001）;在无转移组明显高于转移组（P=0．000）;在AFP≥400μg／L组和有门脉癌栓组分别明显低于AFP〈400μg／L组（P=0．02）和无门脉癌栓组（P=0．005）。HPA与NM23表达呈负相关（r=-0．271,P=0．001）。结论：HPA高表达与NM23低表达在HCC的发生发展及转移中起重要作用,联合检测HPA与NM23蛋白指标有助于HCC诊断和判断患者预后。     

ERK2蛋白在肝癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨肝癌组织中ERK2的表达。方法：用免疫组化快捷法检测50例肝癌组织和15例正常肝组织中ERK2蛋白的表达,并分析与肝癌临床病理特征,侵袭性的关系。结果：HCC中ERK2阳性表达率明显高于正常肝组织,其与HCC组织侵袭性有关（p〈0.05）,而与HCC组织分化程度、性别、术前AFP水平无关（P〉0.05）。结论：ERK2的表达一定程度上反映HCC侵袭性强弱。     

肝细胞癌和癌旁肝组织中PTEN蛋白表达及其临床意义

目的：探讨肝细胞癌（HCC）和癌旁肝组织中PTEN蛋白表达及其临床意义。方法：利用SP免疫组织化学技术检测PTEN蛋白在HCC及其癌旁肝组织的表达。结果：PTEN蛋白在HCC中的阳性率和阳性强度均低于癌旁肝组织（P＜0．01）,HCC中PTEN蛋白的表达强度与患者的性别和肿瘤的大小无关（P＞0．05）,但与肿瘤细胞的分化程度明显相关（P＜0．01）,分化愈差,表达愈强。结果：提示检测PTEN蛋白可能对判断HCC的预后具有一定意义。     

原发性肝癌患者外周血中肝细胞特异性AFP mRNA检测及意义

【目的】寻找一种敏感的方法以检测原发性肝癌患者外周血中肝细胞特异性AFPmRNA。【方法】巢式RT PCR检测外周血有核细胞成分中AFPmRNA。【结果】 49例肝癌中 17例检出AFPmRNA ,阳性率 35 % ,其中 9例证实有转移的 6例阳性 (6 7% )。 19例肝硬化、6例急性肝炎、8例慢性肝炎、5例肝良性肿瘤、6例肝内胆管癌、11例肝转移癌、13例健康对照组均为阴性。外周血细胞AFPmRNA的存在与肝内肿癌灶的数目、是否有门静脉癌栓形成、远处器官转移与肿瘤的TMN分期密切相关 ,与血清AFP浓度无关。【结论】检测肝癌患者外周血AFPmRNA ,可帮助早期发现肝癌细胞的血行播散。     

RT-PCR法检测肝癌患者周围和肝静脉血AFP mRNA及其临床意义

目的：通过对外周静脉因和肝静脉血AFPmRNA表达检测的比较，旨在寻找一种比较好的监测肝癌细胞转移的方法，并了解肝癌细胞在体内的转移机制。方法：抽取肝癌患者外周及肝静脉血，采用RT－PCR方法检测AFPmRNA，比较二者的阳性率。结果：在肿瘤直径＞5cm的肝癌患者，其外周血，肝静脉血AFPmRNA表达差异无显著性（P＝0．618），而在直径＜5cm的肝癌患者，其二处血AFPmRNA表达差异有显著性（P＝0．028）。结论：肝癌直径＜5cm的患者，直接检测肝静脉血能更准确地反映肝癌细胞肝内播散的情况。肝癌直径＞5cm的患者中，外周血，肝静脉血AFPmRNA表达差异无显著性，这部分患者的外周血AFPmRNA可代表其肝静脉血中AFPmRNA的状况。     

肝细胞癌患者血液AFP mRNA检测的临床意义

目的：探讨肝细胞癌患者血液甲胎蛋白（ＡＦＰ）ｍｒＲＮＡ检测的临床意义。方法：取９３例肝癌患者,１５例肝炎后肝硬化患者,１２例慢性肝炎患者及１０例健康人静脉血各５ｍｌ,应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测其周围静脉血中ＡＦＰｍＦＮＡ。结果：在５０个肝癌血标本中检测到ＡＦＰｍＲＮＡ（５３．８％）,而对照组中未检测到１例。ＡＦＰｍＲＮＡ检出率与肝癌分期、血清ＡＦＰ浓度、肝内转移、门静脉癌栓、肿瘤大小及远处转移有明显     

原发性肝癌患者外周血甲胎蛋白mRNA表达水平与临床参数的关系

目的　了解肝细胞癌患者外周血甲胎蛋白 (AFP)mRNA的表达水平与不同临床参数的关系。方法　采用realtimeRT -PCR技术 ,定量检测 5 6例肝细胞癌、17例慢性活动性肝炎、2 1例肝硬化和 2 0名健康志愿者外周血AFPmRNA的表达水平。结果　 5 6例肝癌患者外周血AFPmRNA的平均表达水平为 34 6 44 .6± 9490 5 .4copies/μgRNA ,其中 2 9例为阳性 ;17例慢性活动性肝炎、2 1例肝硬化患者和 2 0名健康志愿者外周血均未检测到AFPmRNA的表达。结论　肝癌患者外周血AFPmRNA表达水平与肝癌分期、门静脉癌栓及肝外转移密切相关 ,与肿瘤直径、数目及血清AFP水平无明显相关 ,可作为预测肝癌发生远处转移的一个可靠指标     

RYBP在原发性肝细胞癌中表达的临床意义

目的：探讨PcG(polycomb group)相关蛋白RYBP在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中差异表达 的临床意义。方法：采用免疫组织化学法检测77例HCC癌组织及癌旁正常组织中RYBP的表达水平,分析其表达水平 与HCC临床病理特征、患者5年生存率及预后的关系。结果：RYBP在HCC癌组织中的表达水平明显低于癌旁正常组 织(P<0.05)。HCC患者RYBP表达水平与HBsAg,ALT,谷氨酰转肽酶(glutamyl transpetidase,GGT)、III型前胶原、肿瘤 大小、远处转移、肿瘤分化程度等临床指标明显相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析表明HCC癌组织中RYBP低表达患者 无复发生存率(recurrence-free survival,RFS)和总体生存率(overall survival,OS)均明显低于RYBP高表达患者(P<0.05)。单因素Cox回归分析提示低龄和RYBP高表达是RFS的保护因素,而GGT、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度和肿瘤大小等指标是RFS的危险因素(P<0.05);RYBP高表达是OS的保护因素,但肿瘤个数,ALT,GGT,甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP),腹膜癌胚抗原(peritoneal carcinoembryonic antigen,pCEA),淋巴结转移,TNM分期和肿瘤大小是危险因素(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示年龄、GGT、淋巴结转移和TNM分期是RFS的独立危险因素(P<0.05),淋巴 结转移和TNM分期是OS的独立危险因素(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析提示：与血清中AFP水平相比,肿瘤组织 中RYBP的表达水平能更好地预测HCC患者的预后。结论：PcG相关蛋白RYBP在HCC组织中表达降低,影响HCC患者 的预后,可能成为HCC治疗的新靶点。     

肝细胞癌患者外周血循环肿瘤细胞阳性提示预后不良

目的评价外周血循环肿瘤细胞（CTCs）检测在肝细胞癌临床诊治中的应用价值。方法随机选取2013年7月~2015年1 月期间南方医院肝胆外科收治的肝细胞癌患者296例为肝细胞癌组,并同时收集39例非肿瘤或肝脏良性肿瘤患者为对照组,采 用广州益善生物技术股份有限公司开发的CanPatrolTM CTCs检测技术检测肝细胞癌组及对照组患者外周血中CTCs的分布情 况,并分析外周血CTCs阳性与肝细胞癌患者临床病理参数之间的关系,以及CTCs与肝细胞癌患者术后无瘤生存时间的关 系。结果在对照组患者外周血中未检测到CTCs,在肝细胞癌组中,191例患者外周血中检测到CTCs,阳性率为64.5%,显著高 于对照组（P<0.05）;肝细胞癌患者外周血中CTCs阳性与患者血清甲胎蛋白水平、肿瘤数量、TNM分期、BCLC分期、门静脉癌栓 及转移等显著相关（P<0.05）;在127例接受根治性手术治疗的肝细胞癌患者中,CTCs阳性的肝细胞癌患者术后无瘤生存时间 显著缩短（P<0.05）。结论肝细胞癌患者外周血CTCs阳性提示预后不良,CTCs可以成为监测肝细胞癌患者预后一个较好的 辅助指标。     

p53表达与肝细胞癌临床病理学特征及AFP、HBV感染之间的关系研究

目的:探讨p53与肝细胞癌临床病理学特征和患者预后、AFP、HBV感染之间的关系.方法:应用免疫组化方法,检测70例肝细胞癌和20例肝良性肿瘤标本p53的表达;结合肝细胞癌临床分期、病理分级、门静脉癌栓、术后生存期、血清甲胎蛋白(AFP)、乙型肝炎病毒(HBV)感染等资料进行统计分析.结果:肝细胞癌的p53阳性率显著高于肝良性肿瘤(P＜0.01);p53阳性表达与肝细胞癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、肝硬化、临床分期均无显著性相关(P＞0.05);包膜不完整、并有门静脉癌栓、分化未成熟及血清AFP阳性的肝细胞癌组织的p53阳性率明显高于有完整包膜、无门静脉癌栓、分化较成熟及血清AFP阴性的组织(P＜0.05) ;HBsAg阳性的肝细胞癌p53阳性率显著高于HBsAg阴性者(P＜0.01);p53阳性的肝细胞癌患者术后2年存活率显著低于阴性者 (P＜0.01).结论:p53是评价肝细胞癌恶性程度及预后的一个有价值的生物学指标;它的表达与肝细胞癌患者的血清AFP水平及HBV感染有密切相关性.     

甲胎蛋白在原发性肝癌临床诊断中的应用

目的评价血清甲胎蛋白(AFP)在原发性肝癌(HCC)临床诊断中的应用及其价值。方法分析290例HCC、48例肝硬化及49例健康体检者血清AFP水平,AFP水平与HCC患者肿瘤大小、数目及国际抗癌联合会肝癌TNM临床分期之间的关系,不同诊断阈值下AFP水平在HCC及肝硬化人群中的诊断灵敏度及特异性。结果HCC患者的血清AFP水平显著高于肝硬化患者(P=0.0274)和健康体检者(P=0.0001)。290例HCC患者中,95例(32.8%)血清AFP<20μg/L,195例(67.2%)血清AFP≥20μg/L。AFP诊断阈值设定为20μg/L时,其诊断预测灵敏度为67.2%,特异性为29.2%,阳性预测准确率为85.2%,阴性预测准确率为12.8%。AFP诊断阈值设定为400μg/L时,其诊断预测灵敏度太低(42.8%)而无法为临床使用。不同肿瘤大小(P=0.0009)、TNM分期[TNMⅠ期vs.TNMⅢ~Ⅳ期(P=0.0001);TNMⅡ期vs.TNMⅢ~Ⅳ期(P=0.0003)]及肿瘤数目(P=0.0001)HCC患者血清AFP水平显著不同。结论AFP升高对HCC诊断具有较强的提示作用,结合其他影像学诊断用于高危人群筛查及对于AFP阳性患者术后随访具有重要作用。     

血液AFP mRNA在复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性 …

目的：探讨血液ＡＦＰｍＲＮＡ在复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌中的表达及意义。方法：应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测４０例复发性肝癌及伴有远外器官转移的原发性肝癌血液ＡＦＰｍＲＮＡ。