As_2O_3对消化道肿瘤的VEGF、nm23表达的影响

目的通过观察消化道肿瘤术前短时间、小剂量三氧化二砷（As2O3）应用,探讨As2O3对消化道肿瘤的VEGF、nm23表达的影响。方法分别在手术前给8例确诊为消化道肿瘤的患者As2O3治疗3天。在用药前内镜下和手术中提取患者的病理组织。利用免疫组织化学法检测6例胃癌和2例肠癌组织中的VEGF、nm23表达情况。结果应用As2O3注射液化疗后与用药前比较,肿瘤组织中VEGF表达下调,nm23表达上调。结论体内实验证实,As2O3可以通过下调VEGF及上调nm23抑制肿瘤的浸润与转移。     

As2O3影响慢性粒细胞白血病细胞VEGF,MMP-2 mRNA表达的实验研究

目的研究As2O3对慢性粒细胞白血病（CML）骨髓单个核细胞，血管内皮生长因子（VEGF），基质金属蛋白酶2（MMP-2）mRNA及培养上清VEGF蛋白表达的影响作用，从而对白血病的发病机制及As2O3的作用机制进行探讨。方法用RT—PCR技术检测20例CML患者与5例正常人骨髓细胞MMP-2，VEGFmRNA的表达。用ELISA方法检测20例CML患者骨髓单个核细胞经As2O3作用前、后培养上清液VEGF水平的变化，用RT—PCR法检测VEGF，MMP-2mRNA表达阳性患者骨髓单个核细胞mRNA含量的变化。结果CML患者VEGF，MMP-2mRNA水平明显高于正常对照者，5×10^-6mol／L As2O3可明显下调CML患者骨髓单个核细胞培养上清VEGF蛋白的表达（P〈0．05）；As2O3对骨髓单个核细胞VEGF，MMP-2mRNA的表达有下调作用，并为剂量依赖性。结论CML中VEGF与MMP-2mRNA表达异常增高。As2O3下调白血病细胞VEGF，MMP-2的表达可能是其抗白血病作用的机制之一。     

三氧化二砷对人胃癌细胞株nm23、P53基因表达的影响

目的 观察三氧化二砷（As2O3）对人胃癌细胞株nm23、P53基因表达的影响。方法 以As2O3作用于体外培养的人胃癌细胞株，通过免疫组化技术对nm23和P53基因编码蛋白的表达进行检测。结果 经As2O3作用的人胃癌细胞株nm23、P53基因编码蛋白表达减少（P〈0．05）。结论 As2O3具有下调nm23、P53基因编码蛋白表达作用。     

大肠癌患者VEGF、nm23及COX-2表达的临床意义

目的：探讨人大肠癌组织中VEGF、nm23和COX-2表达与临床意义。方法：应用免疫组化方法．检测60例大肠癌组织中VEGF、nm23和COX-2表达，分析其与大肠癌患者预后的关系。结果：VEGF、COX-2表达依大肠癌临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期顺序而上升（P〈0.05），同时与大肠癌有无淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。VEGF、COX-2阴性表达患者3、5a生存率高于阳性表达组（P〈0.05）。VEGF、COX-2阴性表达组nm23表达高于阳性表达组（P〈0.05）。结论：VEGF、nm23、COX-2可作为估计大肠癌预后的指标。     

三氧化二砷对人胃癌细胞株转移基因表达的影响

目的：研究三氧化二砷对人胃癌细胞株nm23、P53反PCNA基因表达的影响，从而探讨其抗肿瘤作用。方法：以As2O3作用于体外培养的人胃癌细胞株，通过免疫组化技术时nm23和P53反PCNA基因编码蛋白的表达进行检测。结果：经As2O3作用的人胃癌细胞株nm23、P53反PCNA基因编码蛋白表达减少。结论：As2O3具有下调nm23、P53反PCNA基因编码蛋白表达，具有抗肿瘤的作用。     

高压氧和三氧化二砷对K562细胞增殖抑制及相关机制研究

本研究旨在探讨高压氧联合三氧化二砷(As2O3)对K562细胞增殖、凋亡及低氧诱导因子-1a(HIF-1a)、血管内皮生长因子(VEGF)及caspase-3 mRNA表达的影响。用MTT法检测各组K562细胞在药物作用各时间点(24、48、72 h)的增殖率;AnnexinⅤ/PI荧光标记法检测K562细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR检测K562细胞HIF-1a、VEGF、caspase-3 mRNA的表达。结果表明:与单用As2O3比较,As2O3联合高压氧可使K562细胞的增殖抑制率增加,凋亡作用明显加强,并可明显下调HIF-1a、VEGF的表达,上调caspase-3的表达,两者联用具有协同作用,效果明显优于单用As2O3(P<0.05)。结论:高压氧联合As2O3对K562细胞抑制增殖及加速凋亡的作用优于单独应用As2O3;二者联合后HIF-1a、VEGF mRNA的表达减弱,而Caspase-3 mRNA的表达增强。HIF-1a、VEGF、caspase-3mRNA表达的变化可能是As2O3与高压氧联合产生抗白血病细胞协同作用的分子机制之一。     

EGFR、VEGF和nm23在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)、血管内皮生长因子(VEGF)和nm23的表达与非小细胞肺癌(NSCLC)生物学行为的关系。方法采用免疫组化EnVision法检测95例NSCLC肿瘤组织和16例正常肺组织中EGFR、VEGF和nm23的表达,并分析其临床病理特征及相关性。结果 EGFR和VEGF在NSCLC肿瘤组织中的阳性率分别为52%(49/95)和37.9%(36/95),均明显高于正常肺组织的6.25%(1/16)和6.25%(1/16)(P<0.05);NSCLC肿瘤组织中nm23阳性率为62.1%(59/95),显著低于正常肺组织93.8%(15/16)(P<0.05)。EGFR阳性率在有/无吸烟史、不同病理类型(鳞癌与腺癌)、不同TNM分期及有/无淋巴结转移的NSCLC中差异显著(P<0.05);VEGF和nm23阳性率在有/无淋巴结转移的NSCLC中差异显著(P<0.05);EGFR与nm23之间呈负相关性(r=-0.236,P<0.05)。结论 NSCLC组织中EGFR和VEGF常常为高表达,nm23蛋白的表达下调;EGFR表达与吸烟史、病理类型、淋巴结转移及TNM分期相关,VEGF和nm23与淋巴结转移有关,EGFR与nm23之间呈负相关关系。     

丙戊酸钠联合三氧化二砷对NB4细胞株血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的 探讨丙戊酸钠(VPA)联合三氧化二砷(As2O3)对急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)NB4细胞株血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-1表达的影响.方法 实验分空白对照组、As2O3组、As2O3+VPA组,采用反转录聚合酶链反应方法检测VEGF、Flt-1 mRNA的表达,应用蛋白印迹法(Western-blot)检测VEGF、Flt-1蛋白的表达.结果 NB4细胞在As2O3作用下VEGF mRNA、VEGF蛋白、Flt-1 mRNA和 Flt-1蛋白表达水平明显增高,分别为VEGF mRNA 0.426±0.026 vs 0.268±0.023,VEGF蛋白0.648±0.027 vs 0.588±0.031,Flt-1 mRNA 0.922±0.032 vs 0.766±0.030,Flt-1蛋白0.520±0.032 vs 0.320±0.036(P<0.05或<0.01).As2O3+VPA组VEGF mRNA、VEGF蛋白、Flt-1 mRNA和 Flt-1蛋白比对照组和As2O3组均明显降低(均P<0.01).VEGF mRNA表达水平降至0.129±0.028,VEGF蛋白表达水平降至0.328±0.029,Flt-1 mRNA表达水平降至0.522±0.025,Flt-1蛋白表达水平降至0.124±0.024.结论 As2O3诱导NB4细胞VEGF、Flt-1表达增高,VPA可下调As2O3引起的VEGF、Flt-1表达增高.     

三氧化二砷下调慢性髓系白血病骨髓细胞VEGF的表达

为了研究三氧化二砷 (As2 O3 )对慢性髓系白血病 (CML)各期患者血管内皮生长因子 (VEGF)表达水平的影响 ,采用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测正常人和CML慢性期、加速期和急变期患者骨髓细胞经As2 O3 作用前、后培养上清液VEGF水平的变化。结果发现 ,2 0例慢性期、8例加速期和 7例急变期患者骨髓细胞培养上清液VEGF水平分别为 6 4 9.16± 382 .2 0 pg/ml,5 6 0 .2 7± 4 0 9.14 pg/ml和 5 87.18± 4 15 .2 8pg/ml,明显高于对照组的15 2 .16± 15 0 .0 9pg/ml(P <0 .0 1) ,但不同病程阶段的CML患者间VEGF水平的差别无统计学意义。慢性期、加速期及急变期CML患者骨髓细胞经浓度为 5× 10 -6mol/L的As2 O3 处理 72小时后 ,VEGF表达水平均出现明显下调 ,分别为 396 .6 6± 2 5 7.4 7pg/ml,36 3.4 2± 2 39.85pg/ml和 4 0 7.4 7± 2 19.38pg/ml,与未加As2 O3 组比较差别显著 (P <0 0 5 )。结论 :VEGF异常增高可能在CML整个发病过程中都发挥一定作用 ,As2 O3 下调白血病细胞VEGF表达可能是其抗肿瘤作用的机制之一     

三氧化二砷对小鼠肺癌移植瘤治疗作用的研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对小鼠肺癌移植瘤的抗肿瘤作用及可能机制。方法建立C57BL/6皮下肺癌移植瘤模型,随机分为三组:对照组、As2O3治疗组、顺铂(DDP)治疗组,观察肿瘤生长情况计算抑瘤率,免疫组织化学法检测肿瘤组织内增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮细胞因子(VEGF)的表达。结果实验表明As2O3组肿瘤生长明显抑制,VEGF和PCNA的表达显著下降。结论 As2O3对小鼠肺癌移植瘤有显著的抑制作用;抑制VEGF、PCNA的表达可能是三氧化二砷的抗肿瘤机制之一。     

As2O3抑制人淋巴瘤Raji细胞增殖及VEGF表达

本研究探讨在As2O3作用下人淋巴瘤Raji细胞的增殖及VEGF mRNA表达的变化.采用改良MTT方法观察As2O3对Raji细胞的增殖抑制效应;采用半定量RT-PCR方法检测As2O3对Raji细胞VEGF121和VEGF165 mRNA表达的影响.结果表明As2O3对Raji细胞的作用表现时间、剂量依赖性的增殖抑制效应,建立回归方程为IR＝0.531dose+0.481time(P＜0.05).半定量RT-PCR方法检测显示,Raji细胞同时表达VEGF121和VEGF165两种剪切变异体,二者的表达水平相当(VEGF1211.17±0.14;VEGF1651.31±0.19,P＞0.05).VEGF121和VEGF165 mRNA表达量与As2O3作用时间呈负相关关系(rsv121=-0.547,P＜0.05;rsv165=-0.632,P＜0.05),且VEGF的各异构体对药物的反应具有差异性,VEGF165 mRNA表达下调早且有持续性.但在所选浓度组中未发现类似的相关关系(P＞0.05).结论As2O3既可抑制Raji细胞生长增殖,亦可通过下调VEGF mRNA表达而产生抗血管新生效应,且小剂量、长时程给药时结果亦然.     

nm23H1和血管内皮生长因子的表达与大肠癌浸润和转移的关系

目的 :探讨 nm2 3H1和 VEGF的表达与大肠癌浸润和转移的关系。方法 :采用免疫组织化学 SP法 ,显示nm2 3H1和 VEGF的表达与大肠癌浸润和转移的相关性。结果 :nm2 3H1的表达与大肠癌的浸润深度 ,及淋巴结转移 (P<0 .0 5 )有关 ,VEGF的表达与大肠癌的浸润深度、肿块大小、肿块的部位及淋巴结转移状况有关 (P<0 .0 5 ) ,二者均是独立的预后因素。结论 :大肠癌组织中 nm2 3H1及 VEGF的表达是判断大肠癌患者预后的有效指标。     

MiR-101在乳腺癌中的表达及其意义

目的:探讨miR-101在乳腺癌组织中的表达变化。方法:收集乳腺癌组织及对应的癌旁组织,以qRT-PCR方法测定miR-101在乳腺癌组织中的表达变化。在乳腺癌细胞中转染miR-101 mimics、mimics control,以qRT-PCR方法检测上调效果,MTT方法测定细胞增殖变化,流式细胞术测定细胞凋亡变化,Transwell小室测定细胞迁移和侵袭数目变化,蛋白质印迹法测定细胞中cleaved caspase-3和MMP-2蛋白表达变化。结果:miR-101在乳腺癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05)。与miR-NC比较,miR-101细胞中miR-101表达水平升高,细胞增殖能力降低,细胞凋亡率升高,细胞侵袭和迁移数目下降,细胞内的cleaved caspase-3蛋白水平表达升高,MMP-2蛋白表达水平减少(P<0.05)。结论:MiR-101在乳腺癌组织中表达下调,上调miR-101抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移并诱导细胞凋亡。     

乳腺癌腋淋巴结微小转移与C-erbB-2，nm23基因表达关系的相关性研究

目的：探讨乳腺癌腋淋巴结微小转移与C-erbB-2,nm23基因表达的关系。方法：采用免疫组织化学S—P法对78例淋巴结常规HE染色无癌转移的乳腺癌淋巴结1269枚进行上皮细胞角蛋白（CK19）表达和癌组织进行C-erbB-2,nm23基因表达的检测。结果：淋巴结CK19阳性率为4．25％,其病理阳性率为28．2％,C-erbB-2阳性率为43．6%,nm23阳性率为80．8％,CK19阳性组的C-erbB-2阳性率明显高于CK-19阴性组（P〈0．05）。CK-19阳性组的nm23阳性率明显低于cK-19阴性组（P〈0．05）。CK-19阳性率与患者月经状况、病理类型、临床分期、激素受体状况无关（P〈0．05）。结论：乳腺癌腋淋巴结CK19表达与癌组织C-erbB-2基因表达呈正相关,与癌组织nm23基因表达呈负相关,与患者月经状况、临床分期、病理类型、激素受体状况无关。     

VEGF、MVD、nm-23在人乳腺癌变组织中的表达及其意义

[目的]探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、微血管密度（micro vasculadensity,MVD）和nm-23基因在乳腺恶性增生病变中的表达及意义.[方法]收集经手术切除且病理证实的乳腺癌病例65例,所有患者术前均未经放疗或化疗,记录各患者肿瘤大小,组织学类型,病理分期等临床资料,采用免疫组化S-P法检测标本中VEGF、nm-23和MVD的表达.[结果]VEGF,nm-23和MVD表达与患者的肿瘤大小、组织学类型无关（P〉0.05）.VEGF,nm-23和MVD表达与乳腺癌临床分期和淋巴结转移有关（P〈0.05）.VEGF、MVD两者阳性表达呈正相关,VEGF,nm-23两者阳性表达呈负相关,nm-23与MVD表达无相关性.[结论]3者联合检测可能有助于乳腺病变的病理学分期诊断.     

The effects of acetylsalicylic acid on proliferation,apoptosis, and invasion of cyclooxygenase-2 negative colon cancer cells

BACKGROUND: Acetylsalicylic acid (ASA, aspirin), the most common nonsteroidal anti-inflammatory drug (NSAID), has been shown to have a protective effect against the incidence and mortality of colorectal cancer. However, the mechanism of its anticancer function remains unclear. The aim of this study was to determine the effects of acetylsalicylic acid on proliferation, apoptosis, and invasion in human cyclooxygenase-2 (COX-2) negative colorectal cancer cell lines. MATERIALS AND METHODS: After treatment with various concentrations of ASA, cell proliferation was measured in the human colon cancer cell line SW480. Apoptotic cells were identified by transmission electron microscopy, acridine orange staining, and flow cytometry. The invasive potential of SW480 cells was detected using an in vitro invasion assay. The production of carcinoembryonic antigen was measured by microparticle enzyme immunoassay. Expression of Bcl2, Bax, CD44v6, and nm23 were evaluated by immunocytochemistry. RESULTS: ASA significantly inhibited the proliferation of SW480 cells and stimulated apoptosis. Production of carcinoembryonic antigen and the invasive potential of SW480 cells were also inhibited by ASA. After treatment with ASA, down-regulation of Bcl2 and CD44v6 expression and up-regulation of nm23 expression were observed in SW480 cells. No obvious effect of ASA was found on Bax expression. CONCLUSION: Our findings reveal that ASA inhibits the proliferation and promotes apoptosis in the human colon cancer cell line SW480. Down-regulation of Bcl2 expression might represent a potential mechanism by which ASA induces apoptosis in this COX-2 negative colon cancer cell line. Our results also suggest that ASA decreases the invasive potential of these colon cancer cells. Decreased CEA content and CD44v6 expression and elevated nm23 expression may contribute to the effect of ASA on invasive potential of SW480 colon cancer cells.     

喉癌淋巴结转移相关因子的Logistic多元分析

背景喉癌可导致患者声音嘶哑,呼吸困难,吞咽困难,喉癌患者出现淋巴结转移后,用一般的手术治疗及生物学治疗往往难以有效,研究喉癌转移的相关因素,寻找能够准确判断喉癌转移的分子标志物以及能够抑制喉癌浸润转移的生物制剂,成为喉癌研究的关键.目的研究基质金属蛋白酶-2,基质金属蛋白酶-9,CD44v6,PCNA,nm23,血管内皮生长因子,p53,Cath-D和E-cadherin与喉癌淋巴结转移的相关性,为喉癌的临床治疗提供有益的指导.设计以病理标本为研究对象的试验研究.对象原发喉癌的标本为哈尔滨医科大学附属第四医院耳鼻喉科2002-02/2003-11住院手术的患者,免疫组化试验由中山大学附属第三医院完成.干预用免疫组化方法检测70例喉癌标本中基质金属蛋白酶-2,基质金属蛋白酶-9,CD44v6,PCNA,血管内皮生长因子,Cath-D,E-cadherin,p53和nm23等的表达.采用Logistic逐步回归的方法对9项与喉癌淋巴结转移有关的指标进行筛选.主要观察指标基质金属蛋白酶-2,基质金属蛋白酶-9,CD44v6,PCNA,血管内皮生长因子,Cath-D,E-cadherin,p53和nm23在喉癌中的表达.结果喉癌中MMP-9表达阳性者,发生淋巴结转移的机率最高(Wald=10.3501,P＜0.05);nm23和E-cadherin表达阴性或低表达者发生淋巴结转移的机率高(Wald=6.1896和6.8632,P均＜0.05).结论喉癌组织中基质金属蛋白酶-9,E-cadherin和nm23的表达情况,可作为术前预测患者淋巴结转移的有效指标,也为预后科学干预提供参考价值.     

三氧化二砷诱导白血病细胞凋亡与核因子-κB活化的关系

为了研究三氧化二砷（As2O3）诱导白血病细胞凋亡与核因子-κB（NF-κB）活化以及血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-9（MMP9）表达的关系,应用流式细胞仪Annexin V FITC法检测白血病细胞系K562-n凋亡;采用免疫组织化学方法半定量分析K562-n细胞NF-κB、VEGF、MMP9表达的动态变化.结果显示：As2O3在诱导K562-n细胞凋亡的过程中可活化NF-κB,而VEGF、MMP9的表达也随之增强.地塞米松（DXM）1μmol/L能显著增加As2O3诱导K562-n细胞凋亡的作用和抑制K562-n细胞NF-κB活化,细胞凋亡增加率为43.04%,（P＜0.05）,NF-κB活化抑制率为31.15%（P＜0.05）,VEGF、MMP9变化与NF-κB一致.结论：As2O3诱导K562-n细胞凋亡的过程中可使NF-κB活化,VEGF、MMP9表达亦随之增强;DXM可通过抑制NF-κB活化增强其诱导K562-n细胞凋亡的作用,VEGF、MMP9的表达也随之下降.