WT1基因表达与白血病

WTl基因是从Wilms瘤(Wilms tumor)细胞中分离出来的一种能编码含锌指状多肽的抑癌基因。本文就WT1基因的结构、功能和近年来WT1基因在白血病中的表达及其与预后关系等方面的研究进行了综述。     

WT1基因与白血病

ＷＴ１基因能抑制生长因子和生长因子受体的转录,因此被归类为肿瘤抑制基因,但在人类白血病细胞ＷＴ１基因呈高表达,基表达水平与预后呈负相关,ＷＴ１基因的反义核苷酸可抑制白血病细胞增殖、诱导细胞凋亡,野生型的ＷＴ１转染组系祖细胞后,可使细胞失去受粒细胞集落刺激因子的诱导分化,而代之以持续增殖。这些现象揭示,在造血祖细胞ＷＴ１基因可能起癌基因的作用。     

白血病患者WT1基因表达的研究

目的：探讨WT1基因与白血病发病的关系和临床意义。方法：采用逆转录－巢式聚合酶链反应（RT－巢式PCR）方法检测了K562和HL－60两个白血病细胞系、49例急性白血病（AL）患者、33例慢性髓系白血病（CML）患者和25例正常对照的WT1基因表达。结果：K562和HL－60两个白血病细胞系、29例初治或复发AL患者中有21例、20例完全缓解（CR）期AL中有1例、18例CML急变期中有15例、5例CML加速期中有1例、10例CML慢性期患者中有1例表达WT1基因。WT1基因表达见于所有AL亚型，其相对水平与急性白血病的CR率有相关性。≥1．0的患者CR率低及生存期短。在CML中WT1基因表达表现出明显的阶段性，与慢性粒细胞白血病临床阶段及病情进展有关。结论：WT1基因表达与白血病发生有关，WT1基因高表达的患者CR率低、无病生存期短，可作为判断急性白血病预后和监测微量残留病的一项指标，也可作为CML急变的一项诊断指标。     

WT1基因在白血病中的表达及意义

ＷＴ１基因在白血病中的表达及意义吴晓雄综述汪月增裴雪涛审校Ｗｉｌｍｓ肿瘤基因（Ｗｉｌｍｓ＇ｔｕｍｏｒｇｅｎｅ，ＷＴ１）是最早发现的与Ｗｉｌｍｓ肿瘤的发生、发展有关的基因，其等位基因的功能缺失可导致Ｗｉｌｍｓ肿瘤。ＷＴ１可以抑制胰岛素样生长因子Ⅱ、集落...     

儿童白血病WT1 MRP基因表达及临床意义

目的　探讨WT1基因、多药耐药相关蛋白基因 (MRP)表达与儿童急性白血病的关系及意义。方法　应用逆转录—聚合酶链反应 (RT -PCR)法测定 4 8例不同类型儿童急性白血病及 10例正常儿童WT1、MRP基因的表达。结果　 4 8例儿童急性白血病患者中 15例WT1基因表达阳性。WT1基因表达阳性患者的完全缓解率 (CR)低于表达阴性者 (分别为 4 4 %和81 8% ,P <0 0 5 )。 10例正常儿童WT1基因表达阴性。MRP基因表达阳性者 18例 ,MRP基因表达阳性者CR低于表达阴性者 (分别为 33 3%和 80 % ,P <0 0 5 )。 10例正常对照基因表达阴性。WT1基因表达阳性患者的MRP阳性率与WT1基因表达阴性者无明显差异 (分别为 5 5 %和 4 2 86 % ,P >0 0 5 )。统计学提示 :WT1与MRP之间无相关性。但同时表达时 ,多数发展成为难治性白血病。结论　儿童急性白血病的发生、发展、转归与WT1、MRP过度表达有关。二者均可作为临床指导治疗和判断预后的指标。     

急性白血病患者WT1基因的表达及其与预后的关系

WT1基因是对遗传性肾胚胎肿瘤( Wilm s tumor)的分子遗传学进行研究时而发现的 ,研究表明 11p13的基因缺失与 Wilms肿瘤相关。1990年 Call等克隆了此相关基因的 c DNA并命名为Wilms瘤基因 1( WT1)〔1〕。WT1基因已被认为在肿瘤的发生中起一定的作用。近年的研究集中于 WT1基因在白血病发病中的意义 ,但其在急性白血病 ( AL)预后方面的作用研究尚不多见。我们就此进行探讨 ,报告如下。1　对象和方法1.1　研究对象 :患者组选择 1999年9月— 2 0 0 2年 7月收治的住院及门诊AL 者 ,79例中男 34例 ,女 45例 ;年龄4～ 6 9岁 ,平均 37.78岁…     

WT1基因与白血病研究现状

WT1是Wilms’瘤抑癌基因,在人类白血病细胞中表达水平很高,对其生长分化有重要作用。本文综述了WT1基因的结构、功能以及与白血病的关系。     

WT1基因与白血病研究现状

ＷＴ１是Ｗｉｌｍｓ’瘤抑癌基因,在人类白血病细胞中表达水平很高,对其生长分化有重要作用。本文综述了ＷＴ１基因的结构,功能以及与白血病的关系。     

白血病患者WT1基因表达及其临床意义观察

目的：观察WT1基因在白血病细胞中的表达及其临床意义，初步探讨WT1基因表达与白血病疗效关系。方法：采用逆转录～聚合酶链法(RT-PCR)检测治疗前47例各类型和白血病患者WT1基因的表达，并观察缓解后患者WT1基因表达的变化，并对33例WT1表达阳性者进行单链构象多态性分析(SSCP)分析。结果：急性白血病37例中30例(81．08％)WT1表达阳性，其中急性髓细胞白血病16／19例(84．21％)阳性，急性淋巴细胞白血病14／18例(77．78％)阳性；慢性粒细胞白血病(CML)急变期3／5例阳性，CML慢性期5例均阴性。WT1表达阳性对治疗缓解率无明显影响。对WT1表达阳性的21例急性白血病治疗后WT1表达动态观察，当获得完全缓解时，WT1表达转阴性；在白血病复发前及复发时，WT1表达转阳性。SSCP分析33例WT1阳性表达者第7～10外显子区PCR产物，未发现泳动异位条带。结论：WT1在急性白血病中表达阳性率较高；慢性粒细胞白血病慢性期未见WT1表达，急变期阳性率增高；WT1表达阳性对治疗完全缓解无明显影响。WT1基因作为泛白血病标志用于白血病微小残留病灶的检测有重要实用价值。     

WT1基因与白血病靶向治疗

WT1基因编码一种双向转录因子,对人类泌尿生殖系统的发育和wilms’瘤的发生发展有重要意义。WT1基因也参与人类的造血调控,参与造血细胞增殖、分化、凋亡等各个过程及白血病的形成,在多种白血病中均有异常高表达,故被认为是一种新的白血病抗原,用于制备白血病疫苗、表达WT1白血病细胞的体外净化及体内抗原特异性治疗,近年来利用反义RNA技术进行反义基因治疗也有较快发展。WT1成为白血病基因治疗和特异性免疫治疗的新靶点。     

急性白血病患者WT1基因表达及其临床意义

目的 观察WT1基因在白血病细胞的表达及其临床意义,探讨WT1基因表达与白血病疗效关系。方法 用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测初治及复发急性白血病患者73例治疗前WT1基因的表达,结合临床观察WT1表达阳性与急性白血病治疗疗效关系,并观察缓解后患者WT1基因表达的变化。结果 73例急性白血病患者WT1阳性53例（72．6％）,其中46例急性髓细胞白血病阳性32例（69．6％）,23例急性淋巴细胞白血病阳性17例（73．9％）。3例急性混合细胞白血病及1例急性浆细胞白血病均表达阳性。在急性淋巴细胞白血病和非M3型急性髓细胞白血病中,WT1表达阳性对治疗缓解率无明显影响。对21例患者治疗后动态观察,当完全缓解时,WT1表达转阴性;复发时WT1表达又转阳性。结论 WT1在急性白血病阳性率较高,但阳性与否对临床疗效无明显影响。WT1基因作为白血病标志用于急性白血病微小残留病的检测有重要价值。     

急性白血病患者WT1基因异构体的研究

ＷＴ1基因是Ｗｉｌｍｓ瘤的候选基因。近年来研究发现它在白血病中有异常的高表达 ,提示ＷＴ1与造血系统恶性疾病有密切的关系。为了研究在白血病中ＷＴ1四种异构体相对比例的改变对造血系统疾病发生和预后的意义 ,我们使用ＲＴ ＰＣＲ方法联合核酸扫描定量技术 ,对 4 6例ＷＴ1表达阳性白血病患者骨髓细胞进行了分析研究。对象和方法1　研究对象　 4 6例ＷＴ1基因表达阳性的初治白血病患者的骨髓标本 ,其中急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ) 8例 ,急性髓细胞白血病 (ＡＭＬ) 38例 (Ｍ15例、Ｍ2 10例、Ｍ3 13例、Ｍ42例、Ｍ58例 )。临床治疗方案 :…     

正常人骨髓不同细胞群中WT1基因表达及其异构体比例研究

本研究探讨WT1基因在正常人骨髓不同分化阶段造血细胞中的表达程度及异构体间比例关系。采用实时荧光定量RT-PCR方法检测18例正常人骨髓标本中CD34^＋CD38^-、CD34^＋CD38^＋、CD15^＋CD11b^＋、CD33＋CD14^＋、CD20^＋CD5^-和CD20^-CD5^＋细胞群中总WT1、WT1（＋17AA）及WT1（＋KTS）的表达。结果表明：与K562细胞相比,CD34^＋CD38^-、CD34^＋CD38^＋、CD15^＋CD11b^＋和CD33^＋CD14^＋细胞群中均存在WT1基因的低表达,且依次逐渐降低;在CD20^＋CD5^-和CD20^-CD5^＋细胞群中未检测到WT1基因表达。在分化程度较低的CD34^＋CD38^-和CD34^＋CD38^＋细胞群中以＋17AA,＋KTS及WT1（＋/＋）异构体为主,而较成熟的CD15^＋CD11b^＋和CD33＋CD14^＋细胞群中以-17AA、-KTS及WT1（-/-）异构体为主。结论：在正常人骨髓细胞中WT1基因的表达随着细胞分化程度提高而降低,造血细胞可能通过其4种异构体比例的调整而发挥抑制或促进分化的作用。     

WT1介导的转录调控通路与白血病

WT1基因编码的锌指转录因子能调控下游基因的转录，其中很多靶基因涉及调节细胞周期和增殖分化，而WT1本身也接受其上游基因的调控，如NF-кB和GATA-1等，这样便构成WT1介导的转录调控通路，参与造血系统发育的调控，如果转录因子的表达脱调控以及随之而来的正常基因表达态势受干扰，常会引起造血细胞的增殖，分化及凋亡动态平衡的紊乱，最终导致白血病，本就WT1介导的转录调控通路与白血病的关系作一综述。     

白血病细胞WT1基因启动子区DNA甲基化研究

目的：研究白血病细胞WT1启动子区DNA甲基化与其表达的关系。方法：采用RT-PCR技术、硫化PCR结合限制性内切酶技术检测白血病细胞系及正常人外周血单个核细胞WT1基因的表达及其启动子区DNA甲基化水平。结果：正常人外周血单个核细胞及U937细胞不表达WT1基因，而HL-60、K562和KG1细胞高表达WT1基因，HL-60细胞WT1基因无甲基化。结论：WT1基因启动子区DNA甲基化不能抑制其表达，尚存在其他调节WT1基因表达的因素。     

脆性组氨酸三联体基因与白血病

脆性组氨酸三联体（FHIT）基因是1996年Ohta等克隆的抑癌基因,定位于染色体3p14.2,含有脆性部位FRA3B。FHIT mRNA长约1.1Kb,由10个外显子构成,外显子5－9为编码区,编码16.8KD的Fhit蛋白。Fhit蛋白是一种Ap3A水解酶。FHIT基因具有抑癌基因活性,在白血病中有异常表达或表达缺失。     

荧光定量PCR检测急性白血病患者外周血 WT1基因表达及其临床意义

为研究WT1基因表达与临床疗效和预后的关系,探讨其在白血病微小残留病检测中的作用,用荧光定量RT-PCR方法检测55例初发白血病患者外周血及10例正常人外周血的WT1基因表达,跟踪20例急性白血病患者外周血WT1基因表达。结果显示,白血病初治组(40例ANLL、15例ALL)与正常人外周血WT1基因表达有显著差异(P<0.001)。在急性白血病患者中,WT1≤6.8×10-3组生存期长于WT1>6.8×10-3组(P=0.027);白血病患者初发时WT1呈高度表达,完全缓解后,迅速或缓慢下降至少1个对数级,复发时再次增高。跟踪检测20例急性白血病患者外周血WT1基因表达,结果7例复发,5例在临床复发前2-3月WT1的水平明显增高,至少上升0.8个对数级。结论:荧光定量RT-PCR方法检测白血病外周血WT1表达具有简便易行、准确性高、特异性好的特点。与正常人外周血比较,WT1在各类白血病外周血中呈高度表达,且表达水平与预后负相关;对外周血WT1基因表达进行定量分析,可用于微小残留病的监测。     

白血病患者WT1基因微卫星不稳定性和杂合性缺失的研究

微卫星是一种新型的遗传学标记,构成了第２代基因图谱上的图标。以微卫星作为分子标记检测微卫星不稳定性（ＭＳＩ）和杂合性缺失（ＬＯＨ）,为揭示肿瘤的发病机制及寻找新的抑癌基因开辟了新的途径。ＷＴ１基因是ＷｉｌｍｓＴｕｍｏｒ的相关基因,是一种抑癌基因。在血液系统恶性肿瘤中ＷＴ１基因失活还未见报道。我们利用微卫星标记技术,选用了ＷＴ１基因附近２个微卫星位点检测ＭＳＩ和ＬＯＨ,旨在探索ＷＴ１基因与白血病的关系。１材料与方法１．１病例选择与标本采集共检测成人患者２５例,其中ＡＬ１４例（ＡＭＬ１１例,ＡＬＬ３…     

WT1基因转染增加白血病细胞凋亡的实验研究

为了探讨WT1基因异构体对急性早幼粒细胞性白血病细胞株NB4凋亡的影响及其分子机制,应用电穿孔的方法将携带WT1基因异构体WTA（-17AA/-KTS）全长cDNA的真核表达载体及其对照质粒pCB6^＋转导白血病细胞株NB4,建立WT1基因异构体表达比例改变的单克隆细胞株;用MTT、形态学观察、DNA凝胶电泳、An-nexin V结合力测定等方法观察WT1基因异构体表达比例的转变对白血病细胞NB4诱导凋亡的影响;用RT-PCR方法检测细胞中p21、p53、bcl-2、bcl-XL、和c-myc等凋亡相关基因表达的改变.研究结果表明,MTT显示NB4/WTA细胞对As2O3的IC50值较对照组明显降低;经As2O3作用48小时,NB4/WTA细胞Annexin V结合力较对照组细胞升高,出现更为典型的凋亡形态学改变;在DNA凝胶电泳可见更为明显的DNA梯形条带,RT-PCR检测提示NB4/WTA细胞p21、c-myc基因的表达较对照组高,bcl-2表达下降,p53、bcl-XL基因表达无明显改变.结论：增加外源性WT1基因异构体WTA的表达从而将WT1基因异构体表达的比例由＋17AA/＋KTS优势型转变为-17AA/-KTS优势型,能使NB4细胞对As2O3引起的凋亡更为敏感,这些改变可能与p21、c-myc等基因的表达上调和bcl-2基因的表达下调有关.     

WT1基因与造血系统疾病

ＷＴ１基因作为一种抑癌基因最早在Ｗｉｌｍｓ瘤中发现并克隆,其表达具有组织特异性。近年来发现它在造血组织中也有特异表达,对造血细胞的增殖分化有重要的调节作用,而且它在白血病发病中的作用与在Ｗｉｌｍｓ瘤中有很大差别。本综述了ＷＴ１基因在造血系统中的研究进展。