急性白血病患者骨髓细胞体外培养及其临床意义

作者报告了４８例急性白血病患者的骨髓髓系白血病细胞集落（ＡＭＬＣＦＵ）和粒－单核细胞集落（ＧＭ－ＣＦＵ）体外培养的结果。结果表明，急非淋白血病治疗前ＡＭＬ－ＣＦＵ数比缓解组高，而ＧＭ－ＣＦＵ比缓解组低，差异显著。观察１４例急非淋白血病患者治疗前ＡＭＬ－ＣＦＵ数与预后的关系，发现ＡＭＬ－ＣＦＵ丛／集比值具有判断预后的价值，ＡＭＬ－ＣＦＵ数与此无关。本文还提出，ＡＭＬ－ＣＦＵ培养用于微小残余白血病的诊     

急性白血病患者骨髓细胞体外培养及其临床意义

作者报告了４８例急性白血病患者的骨髓髓系白血病细胞集落（ＡＭＬ－ＣＦＵ）和粒－单核细胞集落（ＧＭ－ＣＦＵ）体外培养的结果。结果表明，急非淋白血病治疗前ＡＭＬ－ＣＦＵ数比缓解组高，而ＧＭ－ＣＦＵ比缓解组低，差异显著。观察１４例急非淋白血病患者治疗前ＡＭＬ－ＣＦＵ数与预后的关系，发现ＡＭＬ－ＣＦＵ丛／集比值具有判断预后的价值，ＡＭＬ－ＣＦＵ数与此无关。本文还提出，ＡＭＬ－ＣＦＵ培养用于微小残余白血病的诊断必须结合形态观察。     

骨髓细胞体外长期培养前后特性比较及其临床意义

目的通过体外骨髓细胞的培养，观察其细胞特征，为临床治疗疾病提供新的帮助。方法对10例急性白血病患者和5例正常人进行体外长期骨髓细胞培养：结果获得了3株与基质细胞共生的有长期生存力的造血细胞，其形态原始，这些细胞均有造血干细胞标记，其细胞化学、细胞表面免疫标记及超微结构与培养前细胞相比均发生了很大的变化，其中1例急性白血病原有核型异常者经培养后只出现正常核型。这些细胞在体外可以增殖，培养3个月足够达到骨髓移植所需细胞数。结论初步分析这些细胞为正常造血细胞，可用于目前所进行的造血干细胞移植，为今后造血干细胞移植开创一个新的方法。     

豚鼠骨髓滋养层对CFU-F的影响及其最佳作用时间的研究

本文研究了受60Gy照射的豚鼠骨髓细胞作滋养层对正常小鼠骨髓细胞造血基质祖细胞(CFU-F)体外培养成集落的影响,优选了滋养层与骨髓细胞的最佳作用时间。种植骨髓细胞当天或次日添加滋养层细胞后继续培养7～10天则CFU-F数最多;种植骨髓细胞当天加滋养层而次日通过换液去掉未贴壁细胞则CFU-F数最低;骨髓细胞培养4天后再加滋养细胞则不起成集落刺激作用;不论在集落数及集落所含细胞数上,加滋养层者都比不加者为多。     

急性粒细胞白血病细胞体外软琼脂培养的集落形成及其组成细胞的形态观察

本文应用体外软琼脂培养技术,以PHA-LCM条件培养液作为白血病细胞集落形成刺激因素,对10例急性粒细胞白血病患者进行了L-CFU培养。结果10例患者的骨髓细胞均有L-CFU形成。培养7天后L-CFU形成达到高峰。每1×10~6骨髓细胞可形成74～451个集落,细胞丛197～1,015个。7例患者进行了外周血L-CFU培养,结果亦都有L-CFU形成。L-CFU数为26～700个,细胞丛83～976个。为了解L-CFU组成细胞性质,进行了培养前后的细胞化学染色及电镜等观察,结果表明,培养后所形成集落的组成细胞均出现幼稚细胞特征。2例在培养前后的幼稚细胞中均见到了Auer小体。从上述观察推定集落来源于白血病细胞。     

成人急性白血病体外化疗药物细胞毒试验及其临床意义

对９６例成人急性白血病作体外细胞毒试验，发现急淋和急非淋白血病细胞对柔红霉素，长春新碱，氨甲喋呤，高三尖杉酯碱，阿糖胞苷及ＶＰ１６－２１３敏感性无统计学差异；临床常用化疗方案细胞杀伤率积分与骨髓原始细胞下降数和完全缓解率呈正相关，≥９分患者率明显高于〈９分者。     

豚鼠胸腺与骨髓细胞混合培养体外造血的研究

本文对豚鼠胸腺与骨髓细胞混合培养,及其体外造血、上悬液中成纤维细胞集落生成细胞(FCFC)的再次培养,底层贴壁的基质祖细胞(CFU—F)分泌成集落刺激因子(CSF),粒一巨噬系祖细胞(CFU—GM)培养等进行了初步研究,并对胸腺与骨髓混合培养体外违血的作用机制进行了观察和讨论。     

脑脊液白血病细胞三种检测方法比较

<正> 中枢神经系统白血病是白血病患者常见的神经系统并发症,严重地危害着病人生命。在脑脊液中检出白血病细胞是确诊中枢神经系统白血病的最有力证据。本室最近采用常规涂片、微型脑脊液玻片沉淀器及英国产Cytospin—2玻片沉淀制片三种检测方法进行比较,现报道如下: 资料与方法一、资料:本文50例均经临床诊断、骨髓细胞检查确诊的白血病患者。其中急淋33例、急粒8例、急单4例、急性早幼粒2例、慢粒急变1例、慢粒急淋变1例、慢淋1例。男32例、女18例。年龄2岁至58岁。病程3天至(约)4年。所有病例均有不同程度神经系统症状,头     

人参蜂王浆对正常和照射豚鼠造血免疫器官CFU-F影响的实验研究

骨髓及脾细胞体外培养中加不同浓度人参蜂王浆后培养8～12天,计数基质祖细胞集落(CFU-F)数。发现实验组形成的CFU-F小型集落明显高于对照组。培养1Gy照射的骨髓细胞,加入3.10~(-1)～3.10~(-3)g/ml人参蜂王浆后,细胞呈融合生长,认为人参蜂王浆对骨髓和脾细胞体外培养形成的小型CFU-F有成集落刺激作用,而对大型集落则相反。     

造血干细胞体外培养在白血病研究中的应用(综述)

1970年,Pike和Robinson应用双层琼脂培养技术培养人骨髓细胞,在集落刺激因子(CSF)的作用下,生成粒细胞及单核—巨噬细胞集落,生成这类集落的细胞称为粒—单系祖细胞(CFU—C)。近10年来,干细胞体外培养技术得到了广泛的应用,为白血病的研究开辟了新途径,利用于细胞体外培养     

肾母细胞瘤基因衍生肽诱导细胞毒性T淋巴细胞对白血病患者骨髓CD34+细胞的体外杀伤效应

目的 探讨肾母细胞瘤基因(WT1)衍生肽负载树突状细胞(DC)诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对白血病CD34+细胞的体外清除效应.方法 合成一段针对HLA-A*0201锚位的WT19聚肽,体外负载来源于HLA-A*0201*健康人的DC后,诱导产生WT1肽特异性CTL(A组),以噻唑盐(MTT)比色法观察其对WT1表达阳性白血病患者(HLA-A* 0201+者3例,HLA-A*0201-者3例)骨髓CD34+细胞、健康人(HLA-A*0201+者2例,HLA-A*0201-者1例)外周血CD34+细胞和白血病NB4、K562及U937细胞株的体外杀伤效应,粒细胞-巨噬细胞系集落形成试验观察其对白血病患者骨髓CD34+细胞和健康人外周血CD34+细胞粒细胞-巨噬细胞系集落形成单位(CFU-GM)形成的影响.设立单独DC诱导CTL(B组)和IL-2诱导T细胞(C组)作为对照.结果 在效靶比为20:1时,A组CTL对3例HLA-A*0201+白血病患者骨髓CD34+细胞和NB4细胞的杀伤活性(分别为55.3%±2.8%,67.1%±3.2%、49.4%±3.8%和55.0%±3.7%)明显高于对3例HLA-A*0201-白血病患者骨髓CD34+细胞、健康人外周血CD34+细胞及K562、U937细胞的杀伤活性(均<20%),并明显高于B组和C组CTL(均P＜0.01).2例HLA-A*0201+白血病患者骨髓CD34+细胞经A组CTL处理后CFU-GM集落相对形成率分别为17.8%±4.0%和20.8%±3.4%,明显低于经B组CTL处理后(分别为88.9%±3.4%和91.8%±5.7%,均P＜0.01);HLA-A*0201-白血病患者骨髓CD34+细胞、健康人外周血CD34+细胞经A组和B组CTL处理后CFU-GM集落相对形成率差异尤统计学意义.结论 WT1肽特异性CTL能够以HLA-1类抗原限制方式杀伤高表达WT1基因的白血病CD34+细胞,且能特异性抑制其CFU-GM集落形成,WT1基因的表达产物可以作为清除白血病CD34+细胞靶点.     

儿童周围血单个核细胞端粒酶活性检测在诊断急性淋巴细胞白血病中的临床意义

目的：寻求一种利用周围血来检测微量的白血病细胞的方法。方法：采用TRAP－ELISA法检测周围血单个核细胞（MNC）端粒酶活性。结果：急性淋巴细胞白血病（ALL）病例组周围血MNC端粒酶活性表达阳性率为92．11％，正常对照组为2．63％。结论：TRAP－ELLSA法检测周围血MNC端粒酶活性可作为诊断ALL一种简单、敏感的方法。     

急性白血病骨髓基质细胞对HL-60细胞增殖、分化的影响

目的 为探讨急性白血病骨髓基质对HL-60细胞的影响。方法 骨髓基质与白血病细胞共培养，采用MTT检测基质对白血病细胞的粘附，流式细胞仪检测粘附的HL-60细胞周期，非特异性酯酶及过氧化物酶染色观察白血病细胞分化及绘制白血病细胞生长曲线。结果 白血病骨髓基质对HL-60细胞的粘附率及粘附的白血病细胞处于G0／G1期比例均明显高于正常骨髓基质；正常骨髓基质对HL-60细胞的生长抑制作用及诱导分化作用均明显强于白血病基质。结论 急性白血病骨髓基质对HL-60细胞的增殖、分化作用均存在异常。     

高热体外净化骨髓白血病细胞的研究

利用台盼蓝拒染试验和祖细胞体外集落培养法对正常造血细胞和ＨＬ６０白血病细胞受热后的存活率做了观察，证实高热对白血病细胞具有选择性杀伤作用，并比较了两种方法所反映的存活率。     

急性髓细胞白血病树突状细胞诱导T细胞对自体白血病细胞毒性作用的研究

目的　研究急性髓细胞白血病 (AML)树突状细胞 (DC)诱导 T细胞对自体白血病的细胞毒性作用。方法　分离 AML 患者外周血单个核细胞 (MNC) ,在含有 GM- CSF、IL- 4、TNF- α等刺激因子的培养体系中培养7～ 14 d,通过形态学和免疫表型鉴定 DC。通过反复冻融的方法获取白血病抗原肽 ,分别以白血病抗原肽及白血病抗原肽 - HSP90复合物方式脉冲 DC,再将 DC与自体 T淋巴细胞共同孵育 ,以乳酸脱氢酶的方法检测经不同抗原方式激活的自体 T淋巴细胞对白血病细胞的杀伤效应。结果　急性白血病患者外周血 MNC中培养出 DC为 (6～11)× 10 4 / 10 6 MNC,经两种抗原方式激活的自体 T淋巴细胞对自体白血病细胞的杀伤活性分别为 (6 2 .0 7±8.2 9) %和 (35 .33± 9.0 4 ) % ;体外培养的 AML 患者外周血 MNC可诱导分化出大量 DC。结论　单纯白血病抗原肽与白血病抗原肽 - HSP90复合物方式脉冲的 DC均能够激活自体白血病特异性 T淋巴细胞 ,但后者具有更强的激活能力。     

Telomerase activity in myelodysplastic syndrome

为了研究骨髓增生异常综合征的骨髓单个核细胞中端粒酶的表达特点 ,并与正常骨髓、急性白血病进行比较。方法　我们用PCR ELISA法对 2 0例正常骨髓、2 1例骨髓增生异常综合征 3 2例急性白血病骨髓单个核细胞的端粒酶活性进行半定量检测。结果　发现正常骨髓细胞端粒酶表达范围 0～ 0 3 0U ,平均 0 1 1± 0 0 8U ,其中仅有 3例阳性。急性白血病骨髓细胞端粒酶表达范围 0～ 0 96U ,平均 0 42± 0 2 6U ,阳性率 78 1 % ,与正常骨髓相比 ,有显著性差异 (P <0 0 1 )。MDS端粒酶表达范围 0～ 0 97U ,平均为 0 2 7± 0 1 9U ,阳性率为 66 7%。与正常相比 ,端粒酶表达均值之间的差别有显著性 (P <0 0 5)。其中高风险组端粒酶表达较高 (P <0 0 5)。IPPS评分等级为INT 1 ,2与HIGH组的MDS骨髓细胞端粒酶活性水平之间差异有显著性 (P <0 0 5)。端粒酶活性与染色体异常程度无明显关系。结论　结果提示正常骨髓细胞具有临界水平的端粒酶活性 ,急性白血病端粒酶活性显著升高 ,而MDS则介于正常与急性白血病之间。其中高风险组、IPPS评分预后差的MDS端粒酶活性较高     

IL-6及其与其他细胞因子联合应用对白血病细胞体外增殖的影响

目的 观察ＩＬ－６对急性白血病原代细胞体外生长的作用。方法 应用ＭＴＴ、ＣＦＵ－Ｌ及间接免疫荧光法以ＩＬ－６及其与其他细胞因子联合应用对１８例急性白血病鹗２骨髓细胞的作用进行观察。结果 ＩＬ－６体外单独应用对急性白血病原代细胞无明显促增殖及话导分化作用,但与Ｇ－ＣＳＦ联合应用则常可抑制原代白血病增殖。结论 ＩＬ－６与Ｇ－ＣＳＦ联合用于化疗、放疗后的骨髓抑制可能更为安全 。     

生长抑素对白血病患者骨髓细胞CD34抗原表达的影响

目的研究生长抑素八肽类似物奥曲肽(Octreotide,SMS;商品名善得定)对白血病患者骨髓单个核细胞CD34抗原表达的影响,探讨生长抑素对白血病细胞的调控作用.方法采用细胞培养、免疫细胞化学技术及图像分析系统,随机计数CD34阳性细胞数,观察分析SMS在白血病患者骨髓单个核细胞中CD34抗原表达的分布和含量.结果在相差倒置显微镜下,加入SMS组与对照组比较,细胞碎片增多,基质细胞减少;CD34抗原主要表达于细胞膜和核膜;SMS组阳性细胞数显著少于对照组(P＜0.01);图像分析光密度值(OD值)SMS组明显低于对照组(P＜0.01).结论在体外SMS可减少造血干/祖细胞特异抗原(CD34)的表达.提示SMS对白血病细胞的生长具有负性调控作用.     

Acute leukemia in adults: assessment of remission induction with combination chemotherapy by clinical and cell-culture criteria.

Remission induction was assessed by clinical and cell-culture criteria for 65 patients with acute myelogenous leukemia (AML), 11 patients with chronic myelogenous leukemia (CML) in blast crisis and 19 patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL). Cyclophosphamide, cytosine arabinoside and vincristine (CAV) therapy resulted in complete remission in 23 of 50 previously untreated patients with AML and in 3 of the 11 patients with CML. Fourteen patients with ALL responded to vincristine-prednisone induction therapy and two to induction therapy with CAV. The median duration of survival of the responding patients was 2.2 years, compared with 4 months for the patients who did not respond to treatment. Granulopoietic colony formation, assessed by assay of colony-forming units dependent on colony-stimulating activity in culture (CFU-C), was abnormal in 37 of 42 bone marrow aspirates from patients with AML before treatement. CFU-C concentration increased when leukocyte-conditioned medium (LCM) was added to the cultures; 13 cultures had normal or elevated CFU-C concentration with LCM. Marrow cells of patients with ALL or CML in blast crisis demonstrated a similar pattern. Serial studies of marrow CFU-C concentration of 31 patients with AML demonstrated a change to a normal pattern with successful remission induction. Results of this study suggest that administration of purified LCM to leukemic patients might increase granulocyte production from potential but unstimulated granulopoietic precursors. This therapy would lessen the probability of death from infection during remission induction.     

高白细胞性急性髓系白血病细胞基因表达谱的研究

[目的]综合分析高白细胞性急性髓系白血病不同预后患者祖细胞集落形成及对化疗药物的敏感性以及差异表达的基因。[方法]半固体集落形成法观察不同预后患者骨髓祖细胞集落形成及对化疗药物的敏感性。采用Affymetrix公司人类寡核苷酸表达谱芯片检测患者初诊时骨髓单个核细胞基因表达谱,筛选出差异表达数据。[结果](1)患者骨髓祖细胞集落形成和化疗药物的敏感性与预后密切相关,未缓解者的骨髓祖细胞集落明显高于完全缓解患者,且对化疗药物不敏感。(2)完全缓解患者白血病细胞表达上调2倍以上的基因109条,占0.5%。下调2倍以上的基因134条,占0.6%,其中与预后密切相关的为TRIM16、TM4SF1。CD34和DNMT3B。(3)差异表达的基因按功能分成离子通道运输、细胞周期、细胞骨架运动、细胞凋亡等14类。上调的主要为DNA合成修复、细胞凋亡、细胞周期和应激相关等4类;而下调的主要为蛋白翻译合成、信号传导传递、发育相关和细胞骨架运动等4类。[结论]特定的基因表达模式决定患者预后。