温热对BGC—823细胞抑制作用及Hsp70、Bcl—2、Bax表达的影响

目的 观测温热对人胃癌细胞BGC－823的抑制作用及Hsp70、Bcl-2、Bax表达的影响。方法 通过MTT法，测定41℃100min、42℃100min对BGC－823细胞的抑制作用；运用免疫组化ABC法染色，观察42℃100min作用后0、8、16、32h，BGC－823细胞Hsp70、Bcl-2、Bax的表达。结果（1）BGC－823细胞在41℃及42℃温热作用后，均受到一定抑制；42℃温热比41℃对细胞的抑制作用较强且持久（P＜0．01）；（2）42℃温热作用后细胞Hsp70、Bcl－2表达均明显增加，16h表达达到高峰，且主要分布于核区；Bax表达也增加，但低于Bcl－2。结论 温热对BGC－823细胞有一定抑制作用，Hsp70、Bcl-2表达增加可能与细胞自身修复或自身保护有关，Bcl-2的胞核分布与温热对细胞的抑制有关。     

环孢素A对人胃癌BGC823细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究环孢素A(CsA)对人胃癌BGC823细胞的生长增殖以及凋亡的影响.方法 MTT法检测不同浓度CsA处理24、48、72 h后对BGC823细胞增殖抑制率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期、活性氧(ROS)含量及细胞线粒体膜电位(△Ψm)改变;Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率.结果 CsA在5～20 μmol/L浓度范围内和24 ～ 72 h时间范围对BGC823细胞增殖有显著抑制作用,与药物剂量、作用时间呈现量效和时效的依赖性;FCM结果显示CsA浓度依耐性使细胞周期阻滞于G0/G1期,与对照组相比差异有统计学意义(F=33.45,P＜0.05,P＜0.01);细胞凋亡率随CsA作用浓度增加而增加;5～ 20μmol/L CsA浓度范围细胞内ROS含量显著增加(F =46.17,P＜0.01),细胞线粒体膜电位明显降低.结论 CsA对BGC823细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与阻滞细胞生长周期、细胞内ROS含量增加以及线粒体膜电位下降相关.     

光辉霉素A对人胃癌BGC823细胞增殖、凋亡、迁移的影响及其机制

目的观察光辉霉素A（MIT）对人低分化胃癌BGC823细胞增殖、凋亡、迁移的作用,以及对转录因子Sp1和乙酰肝素酶（heparanase,Hpa）表达的影响,并探讨其可能的机制。方法采用不同浓度的MIT作用于胃癌BGC823细胞,以Cell Counting Kit-8（CCK8）法测定对细胞增殖的影响;以流式细胞仪测定对细胞凋亡的影响;以细胞划痕法观察对细胞迁移能力的影响;以实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）法定量测定细胞内Sp1和Hpa mRNA表达的变化。结果 MIT抑制胃癌BGC823细胞增殖的效应呈浓度和时间依赖性（P均〈0.05）;不同浓度（0、0.15、0.30、0.60μmol/L）的MIT作用于胃癌BGC823细胞24 h后,细胞的凋亡率随药物浓度的增加而增加,分别为（2.100±0.985）、（13.533±0.777）、（21.533±0.874）、（27.500±0.964）%,即MIT促进胃癌BGC823细胞的凋亡呈浓度依赖性（P〈0.05）;MIT对胃癌BGC823细胞迁移的抑制作用具有量效和时效性;胃癌BGC823细胞Sp1和Hpa mRNA表达量随MIT浓度的增加而降低（P均〈0.05）。结论 MIT对胃癌BGC823细胞增殖、凋亡、迁移影响可能通过抑制Sp1、Hpa的表达而实现。     

丁酸钠对胃癌细胞系生长的抑制作用及其机制

目的:观察丁酸钠(NaB)对体外培养的胃癌细胞系BGC823的生长抑制作用,并进一步探讨其作用机制。方法:应用MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞周期分布;Annexin V-FITC染色法检测细胞凋亡率。结果:不同浓度NaB处理胃癌细胞BGC82324~96h后,细胞增殖显著受到抑制,并呈浓度(P<0.01)及时间(P<0.05)依赖性;1.0,3.0,5.0mmol/L NaB处理72h后,BGC823细胞G0/G1期细胞数量显著增加,S期细胞数量显著降低(P<0.01);各浓度组细胞凋亡率均显著增加(P<0.01)。结论:NaB对胃癌细胞系BGC823具有生长抑制作用,其机制与阻滞细胞周期及诱导凋亡有关。     

NDV感染体外诱导胃癌细胞BGC—823的凋亡

目的：研究新城疫病毒在体外抗胃癌细胞尖性及其与细胞凋亡的关系。方法：应用倒置显微镜观察细胞形态、MTT法测NDV在体外对BGC－823的抑制和杀伤作用，同时用流式细胞术检测胃癌细胞凋亡情况及细胞分裂周期各时象的变化。结果：NDV在体外可使BGC－823胃癌细胞形成明显的细胞病变效应、细胞生长抑制及细胞凋亡，且细胞凋亡率与感染时间呈正相关。G2、S期细胞减少，增殖指数（PI）降低，与阴性对照组比较有显著性差异（P＜0.01)。结论：NDV具有显著的抗BGC－823胃癌细胞活性。     

EGCG经PI_3K-AKT信号通路诱导人胃癌BGC-823细胞G1期阻滞

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechin-3-gallate，EGCG）通过PI3K-AKT通路对人胃癌BGC-823细胞周期调控的分子机制。方法采用噻唑蓝比色法（MTT）检测BGC-823细胞的存活率；碘化丙啶（PI）染色流式细胞术（flow cytometry，VCM）检测EGCG处理前后BGC823细胞周期的变化；Western blot检测PI3K-AKT信号传导通路相关蛋白的表达。结果EGCG能够抑制BGC823细胞的生长，且这种抑制作用与诱导BGC823细胞G1期阻滞有关。EGCG可以下调巩K-AKT信号通路蛋白Akt的磷酸化表达，对通路下游周期相关蛋白cyclinD1的表达也有抑制作用。结论EGCG能够通过活化PLK-AKT信号通路发挥诱导人胃癌BGC823细胞G1期阻滞的作用。     

17β－雌二醇和他莫西芬对人胃癌细胞株 BGC －823活力及 ER －α36蛋白表达的影响

目的：探讨17β－雌二醇和他莫西芬对人胃癌细胞株BGC－823细胞活力及ER－α36蛋白表达的影响。方法实验组给予17β－雌二醇及他莫西芬干预人胃癌细胞株BGC－823后,采用WST－1法检测细胞活性,采用Western blot法检测ER－α36的表达水平。对照组不加药物干预。结果 WST－1实验结果显示,17β－雌二醇可显著增加BGC－823细胞活力,且随着干预时间增加,其作用效果更加明显;他莫西芬干预可减弱细胞活力,且与作用时间相关,随着干预时间增加,其抑制作用更加明显。 Western blot检测结果显示,17β－雌二醇作用于BGC－823细胞24 h后,药物浓度为1×10－11 mol／L和1×10－10 mol／L时,ER－α36蛋白表达量显著高于对照组（ P＜0.01）;17β－雌二醇作用48 h后,ER－α36的表达水平均低于对照组（P＜0.01）。他莫西芬处理24 h后,ER－α36的表达量较对照组显著升高（P＜0.01）;而他莫西芬作用48 h后,ER－α36的表达呈浓度依赖性改变,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。结论不同浓度17β－雌二醇和他莫西芬干预可影响BGC－823细胞活力和ER－α36在蛋白质水平的表达,并且细胞活力的改变与ER－α36的表达情况有关,ER－α36可能在BGC－823细胞的增殖与凋亡过程中发挥作用。     

Survivin在威灵仙多糖诱导人胃癌BGC－823细胞凋亡中的基因表达

目的：研究威灵仙多糖诱导人胃癌BGC－823细胞凋亡的作用及其机制。方法：应用荧光显微镜观察不同浓度威灵仙多糖诱导BGC－823细胞凋亡的作用,应用RT－PCR技术检测Survivin表达量的变化。结果：威灵仙多糖具有诱导BGC－823细胞凋亡的作用,降低Survivin基因的表达。结论：威灵仙多糖促进BGC－823细胞凋亡,其机制可能与抑制Survivin基因表达有关。     

细胞黏附肽抑制人胃癌细胞BGC823生长及诱导其凋亡作用

目的:　研究细胞黏附肽（RGD）对人胃癌BGC823细胞生长增殖的影响,探讨RGD诱导BGC823细胞凋亡的作用。方法:　将体外培养的 BGC823细胞分为12.5、25.0、50.0、100.0 mg·L^-1RGD处理组和对照组,RGD处理BGC823细胞24、48、和72 h后,MTT法检测不同浓度RGD作用不同时间对BGC823细胞生长增殖的抑制作用,分别利用光镜、透射电镜、免疫组织化学法、流式细胞术和凋亡细胞的DNA片段方法观察凋亡细胞的形态学变化以及定性、定量检测细胞凋亡。结果:　MTT检测,RGD各剂量组在作用24、48和72 h时, BGC823细胞的抑制率均高于对照组（P<0.01）,且随着RGD浓度增加BGC823细胞的抑制率增加;50.0 mg·L^-1　RGD处理BGC823细胞48 h后,光镜下显示,细胞体积变小,胞核深染,胞浆发红,出现很多的凋亡细胞;透射电镜显示,细胞表面微绒毛消失,异染色质趋边凝聚、聚集在核膜上,形成新月形帽状结构,甚至核膜消失,细胞核碎裂,可见凋亡小体。流式细胞术检测,BGC823细胞发生凋亡,且凋亡峰随着浓度的增加而增高;电泳结果显示,BGC823细胞内的DNA片段断裂为大小不等的小片段,呈现出很清晰的梯状降解条带;免疫组织化学染色结果显示,50.0 mg·L^-1RGD处理BGC823细胞48 h后 Survivin的表达量较对照组明显减少,经图像分析检测,实验组平均灰度值
高于对照组(P< 0.01）,提示实验组细胞发生凋亡。结论: RGD通过诱导BGC823细胞凋亡抑制肿瘤细胞的增殖,其RGD诱导BGC823细胞凋亡的作用机制可能通过线粒体引发这一途径。     

双氢青蒿素对人胃癌细胞BGC-823细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

研究双氢青蒿素（dihydroartemisinin,DHA）对人胃癌细胞BGC-823细胞增殖、凋亡的影响及机制。 方法采用噻唑蓝（methylthiazoletetrazolium,MTT）法检测DHA对人胃癌细胞BGC-823增殖的抑制作用;用流式细胞技术、荧光显微镜、透射电子显微镜检测经DHA处理后BGC-823细胞的凋亡率及形态特征的变化;Western印迹方法检测凋亡相关基因Bax、Caspase-3、Caspase-8表达的变化。 结果MTT分析表明,DHA作用可明显抑制BGC-823细胞的增殖,抑制率随药物浓度的增加而增大,且随着时间的延长而增大,具有显著的剂量和时间依赖性（P＜0.01）,半数抑制浓度(IC50值)为3.4 μmol/L。流式细胞术检测结果显示,随着DHA药物浓度的增加,凋亡峰愈加明显,并呈现出剂量依赖性（P＜0.01）。形态学的观察结果：BGC-823细胞在DHA作用下出现典型的凋亡形态。Western印迹显示：Bax、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达随着DHA给药浓度的增加而增高。 结论DHA对BGC-823细胞增殖有抑制作用;DHA通过上调Bax、Caspase-3、Caspase-8表达促进BGC-823细胞凋亡。     

薯蓣皂苷元体内外抑制胃癌增殖的机制

目的: 研究薯蓣皂苷元抑制胃癌增殖及转移的主要途径及其机制。方法: 分别使用1,10,100 μg/mL浓度薯蓣皂苷元处理人血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)和胃癌BGC 823细胞,制作细胞生长曲线,观察薯蓣皂苷元对细胞增殖能力的影响;选取一定浓度的薯蓣皂苷元处理HUVEC和BGC 823细胞,体外成管实验和划线法分别检测药物处理对血管内皮细胞成管能力及肿瘤细胞迁移能力的影响。将BGC 823细胞接种到裸鼠制作皮下肿瘤模型,连续静脉注射薯蓣皂苷元,分析比较其对皮下肿瘤的抑制效果。结果： 与对照组比较,薯蓣皂苷元可明显抑制内皮细胞增殖活性（P＜0.05）,且具有浓度依赖性;而相同处理方式对BGC 823细胞的增殖活性基本无影响;10 μg/mL的薯蓣皂苷元对BGC 823细胞的迁移能力具有明显的抑制作用,能够明显抑制HUVEC细胞体外成管能力;与模型组比较,薯蓣皂苷元给药组肿瘤抑制率明显增高（达38.2%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论： 薯蓣皂苷元可以通过抑制内皮细胞增殖活性影响肿瘤血供,并最终抑制皮下肿瘤模型的增殖,同时,其可通过直接的作用抑制胃癌的迁移。     

阿斯匹林对胃癌细胞株SGC-7901的细胞毒作用及体外增效作用

目的：观察阿斯匹林（ASA）对胃癌细胞株SGC－7901的细胞毒作用以及联用其它抗肿瘤药的增效作用。方法：应用流式细胞仪（FCM）测定细胞周期,噻唑蓝（MTT）法测定药物细胞的抑制率。结果：MTT显示体外ASA对SGC－7901有细胞毒作用,与ASA的浓度和作用时间有显著的相关性。同时可使SGC－7901细胞周期中S期及G2／M期比例升高,G1期比例下降,呈一定的剂量效应关系。低浓度ASA与5－氟脲噻啶（5－Fu)、阿霉素（DOX）和丝列霉素（MMC）合用,可增强它们对SGC－7901的杀伤作用,与各药物有相加或协同作用。结论：ASA体外对SGC－7901有细胞毒作用,可明显阻断SGC－7901细胞在S期和G2／M期;增强上述药物对SGC－7901的杀伤作用。鉴于所试药物对细胞周期的影响不同,提示ASA的体外增效作用可能与此相关。     

不同pH值条件下多柔比星对胃癌BGC823细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

目的 探讨在不同pH值培养条件下多柔比星(doxorubicin,ADM)对胃癌BGC823细胞增殖、凋亡能力的影响及初步机制研究。 方法 采用细胞活性测定试剂盒(CCK-8)法检测不同pH值培养条件下多柔比星对胃癌细胞BGC823增殖活性的影响;应用Annexin V/PI双染法,在荧光显微镜下观察凋亡细胞的形态,用流式细胞仪检测胃癌细胞凋亡率;采用qRT-PCR法检测p-AKT、BCL-2和NF-κB基因在胃癌细胞中的表达。 结果 ①ADM对胃癌BGC823细胞的半数抑制浓度(IC₅₀)值为5.277 μg/mL,考虑化疗药物毒性及后续实验,ADM剂量选择该细胞株IC₅₀值1/4的浓度(即1.319 μg/mL)用于进行后续实验;②随着pH值升高,ADM对BGC823细胞增殖活性的抑制作用增强,当pH达到7.4时,抑制增殖作用最明显;③随着pH值升高,ADM对BGC823细胞凋亡水平明显增加,当pH达到7.4时,促凋亡作用最明显,再提高pH浓度,促凋亡作用能力不明显;④不同pH(pH 6.8～7.6)环境下,ADM处理后,随着pH升高,BCL-2、NF-κB和p-AKT基因表达水平明显降低。 结论 升高细胞外pH值能明显提高ADM对BGC823细胞抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的能力,这种与pH值相关的ADM抗肿瘤效果可能是通过抑制AKT的磷酸化,阻止NF-κB、Bcl-2等抗凋亡基因表达来实现的。      

舒林酸抑制胃癌BGC-823细胞生长的实验观察

目的:观察舒林酸对胃癌BGC-823细胞生长的抑制作用,探讨其作用机制.方法:将舒林酸设置不同的作用浓度和作用时间于人胃癌BGC-823细胞共培养.采用MTT比色法检测胃癌细胞抑制率,流式细胞术检测胃癌细胞周期分布,TUNEL法检测细胞凋亡率,免疫组化检测细胞增殖(ki-67)、凋亡抑制基因(survivin)及还氧合酶(COX-2)蛋白的表达.结果:舒林酸使胃癌BGC-823细胞的生长受抑制,出现G0/G1期比例增高,S期比例降低,同时使细胞凋亡率显著上升;而ki-67、survivin及COX-2蛋白表达阳性率显著降低,上述作用均呈时间和剂量依赖性(P＜0.01).结论:舒林酸可抑制胃癌BGC-823细胞生长,其机制涉及影响细胞周期分布、诱导细胞凋亡及抑制COX-2、ki-67及survivin蛋白的表达.     

维甲酸联合低浓度化疗药物对肺腺癌A549细胞的作用

 目的：观察全反式维甲酸和低于临床用药浓度不同剂量的化疗药物吉西他滨、顺铂等及两者联合处理A549人肺腺癌细胞株,以了解不同药物、不同剂量及不同作用时间对A549细胞增殖、细胞周期的影响。方法：用MTT法测定不同药物组相对于对照组的A549细胞增殖抑制率,并用流式细胞学方法检测各药物组及对照组的细胞周期分布。结果：维甲酸联合应用低浓度的顺铂和吉西他滨可显著抑制A549细胞的增殖,随着化疗药物的浓度的增加,抑制率也一并增加,并在达到同样增殖抑制率的效果下降低顺铂和吉西他滨的药物浓度。结论：维甲酸与低浓度化疗药物联合应用有希望显著减少药物的剂量,降低化疗药物的毒性,增强疗效。     

熊果酸诱导胃癌细胞BGC-823凋亡机制的研究

目的:探讨熊果酸(UA)对胃癌细胞BGC-823增殖抑制和诱导凋亡的作用机制。方法:采用MTT法检测UA对BGC-823细胞的增殖抑制效应;用琼脂糖凝胶电泳观察DNA凋亡片段;流式细胞仪检测UA作用后BGC-823细胞的周期分布和凋亡率;用Fas单克隆抗体检测BGC-823细胞表面Fas的表达;Western blot检测BGC-823细胞Bcl-2的表达及caspase-3和caspase-8的活性。结果:UA对BGC-823细胞具有增殖抑制效应,并呈浓度和时间依赖性。UA作用24 h时半数抑制浓度(IC50)为43.10μmol/L。当UA浓度为50和60μmol/L时,琼脂糖凝胶电泳可呈现DNA凋亡梯带。随着UA浓度从20μmol/L递增到60μmol/L,周期检测发现BGC-823细胞出现亚G1峰逐步增高,S期阻滞增加,G1期下降。细胞内Bcl-2表达下降,caspase-3和caspase-8活性增加。BGC-823细胞表面未发现Fas的表达。结论:UA对BGC-823细胞有较强的增殖抑制和诱导凋亡作用,下调Bcl-2的表达及激活caspase-3、caspase-8可能是其诱导凋亡的机制。     

5-氟脲嘧啶及丝裂霉素对人胃癌细胞株BGc-823的相互作用

目的：体外观察5－氟脲嘧啶及丝裂霉素合用对人胃癌细胞株（BGc-823)的相互作用。方法：采用MIT法利用中效原理判定两符合用的效果。结果：两种药单独应用时随着药物剂量增加,其效应也增加;两药大剂量（大于中效剂量）合用时协同作用（CI＜1）,小剂量（小于中效剂量）合用时为拮抗作用（CI＞1）,两药给药时间次序不同不会影响效应大小。结论：上述两种药合用大剂是协同小剂量拮抗,且效应大小与给药时间次序无关。