抑癌基因PTEN在口腔颌面部鳞状细胞癌中的突变与缺失

目的：探讨抑癌基因PTEN在口腔颌面部鳞状细胞癌发生、发展过程中的作用。方法：应用聚合酶链反应(PCR)及克隆、基因测序的方法来分析口腔颌面部鳞状细胞癌及正常黏膜组织中PTEN基因第5、第6及第8外显子有无突变及缺失。结果：通过对PTEN基因三个外显子的克隆测序，均未发现有突变及缺失。结论：在DNA水平抑癌基因PTEN在口腔鳞状细胞癌的发生过程中不起作用。     

口腔鳞状细胞癌Rb基因的检测

目的研究Ｒｂ基因异常与口腔鳞状细胞癌发生及临床病理指标的关系。方法应用地高辛高效引物标记Ｒｂ３．６ＫｂＤＮＡ探针，结合抗地高辛抗体碱性磷酸酶显色法，对口腔鳞癌病人中Ｒｂ基因改变进行了研究。结果在７／２８例口腔鳞癌中发现Ｒｂ基因结构异常，其中６例出现５．４、４．１及２．３Ｋｂ片段缺失，１例出现６．２Ｋｂ新片段；Ｒｂ缺失与临床病理指标无显著相关性。结论口腔鳞癌中存在Ｒｂ基因缺失、重排，可能与口腔鳞癌的发生有一定关系     

口腔鳞状细胞癌Rb基因的检测

口腔鳞状细胞癌是最常见的口腔颌面部恶性肿瘤之一 ,其预后较差。抽烟、饮酒及咀嚼槟榔是重要的致癌因素。目前 ,口腔上皮细胞恶性转化的分子机制尚未完全阐明。为了更好地预防及治疗口腔鳞状细胞癌 ,我们应用地高辛标记的ＲｂｃＤＮＡ探针对 30例原发性口腔鳞状细胞癌中Ｒｂ抑癌基因的存在状态进行了研究。1.材料和方法 :(1)标本 :30例口腔鳞状细胞癌标本取自手术切除的新鲜肿瘤组织 ,男性 19例 ,女性 11例 ;年龄 34～ 6 8岁 ,平均5 6 9岁。高度分化鳞癌 10例 ,中度分化鳞癌 18例 ,低度分化鳞癌 2例。 3例对照组标本取自行正颌外科治疗患…     

口腔鳞状细胞癌血清中IL-18的检测及其病理、临床意义

目的 检测IL-18在口腔鳞状细胞癌（oral cavity squamous cell carcinoma，OCSCC）患者血清中的表达，探讨其与口腔鳞状细胞癌的相关性。方法 应用酶联免疫反应（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）方法检测30例口腔鳞状细胞癌和10例正常对照血清中IL-18的表达水平。结果 口腔鳞状细胞癌患者血清中IL-18表达水平高于对照组（P〈0．05）；中、低分化，临床Ⅲ、Ⅳ期，颈淋巴结转移者明显高于高分化，Ⅰ、Ⅱ期，无淋巴结转移者（P〈0．05）；不同年龄、性别、肿瘤发生部位，IL-18表达无差异（P〉0．05）。结论 IL-18的表达水平与口腔鳞状细胞癌的病理分级、临床分期及淋巴结转移密切相关。     

口腔鳞状细胞癌组织的基因表达

目的研究与口腔鳞状细胞癌（OSCC）发生相关的表达阳性基因,为探究OSCC的发生机制奠定基础。方法采用美国SuperArray公司的肿瘤基因芯片（OHS-802）检测口腔正常组织和OSCC组织的肿瘤相关基因表达差异,进一步使用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法对部分阳性基因进行验证,寻找与OSCC恶变发生、发展相关的基因。基因芯片实验采用化学发光检测试剂盒,X线胶片曝光,图片需保存为灰度（8或16位色）的电子文档,使用综合型GEArray表达分析配套软件进行完整的芯片数据分析。RT-PCR电泳结果采用Kodak凝胶成像分析系统对部分基因的表达水平进行定量,然后将其与芯片分析的数据结果进行相似性分析。结果经Kodak凝胶成像分析系统定量后,证实正常组织和OSCC组织间CLK-3、CTNNB-1、GDF-15、FKBP-8、SOCS-3、NF-1、BCL-2、XRCC-1、ACP-2共9个SupperArray阳性基因的RT-PCR结果,在表达水平上和SupperArray芯片检测方法获得的结果差异有统计学意义（P〈0.05）。OSCC发生的分子机制较为复杂,特别是与细胞周期调控基因、生长因子基因和细胞增殖分化基因关系密切。结论本研究为深入了解OSCC的发生机制奠定了基础。     

口腔鳞癌组织hMSH2外显子突变筛选的初步研究

目的:探讨错配修复基因hMSH2在口腔鳞癌发生发展中的作用。方法:应用PCR-SSCP法检测30例口腔粘膜鳞状细胞癌组织标本中hMSH2外显子5、6、7、8、9、12的突变情况。结果:在30例口腔鳞癌中,hMSH2六个外显子 PCR均扩增到目的DNA片段;SSCP检测未检出hMSH2六个外显子发生突变。结论:口腔鳞癌hMSH2外显子结构改变模式与遗传性肿瘤不同;错配修复基因在口腔鳞癌发生发展中的作用值得探讨。     

口腔鳞状细胞癌与Rb、C-myc基因关系的研究

应用核酸分子杂交技术对28例口腔鳞癌组织中Rb、C—myc基因进行了研究，结果表明:鳞癌组织中6例出现Rb基因缺失、1例重排，分别占样本的21.4％和3．6％；12例出现C—myC基因扩增，1例重排，占样本的42．9％和3．6％，并且C—myc基因扩增与TNM分期有关。提示在口腔鳞癌中存在Rb抑癌基因失活和C—myc癌基因的激活，对鳞癌的发生、发展可能起着一定的作用。C—myc扩增可作为判断鳞癌预后的指标之一。     

Axl基因在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的检测Axl(Anexelekto)在口腔鳞状细胞癌中的表达,探索Axl与口腔鳞状细胞癌发生、发展的关系。方法免疫组织化学法(IHC)检测42例口腔鳞状细胞癌患者的癌组织(口腔癌组)及其相应的癌旁组织(癌旁组)Axl的表达状况。原代培养正常人口腔上皮细胞(HOEC),并培养1株永生化正常口腔角化上皮细胞系(NOK)及2株人舌鳞状细胞癌细胞系(UM1、UM2)。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹分析(Western blot)检测上述4种细胞中的Axl的mRNA和蛋白的表达情况。结果 Axl在口腔鳞状细胞癌组织中的阳性表达率(61.9%)高于其相应的癌旁正常组织(26.2%),差异具有统计学意义(P<0.05),qRT-PCR和Western blot结果示在HOEC、NOK、UM2、UM1中Axl基因的mRNA表达和蛋白表达逐步增高,且在UM2、UM1中明显高于HOEC、NOK。结论 Axl在口腔癌组织及口腔癌细胞株中的表达较口腔正常组织和正常口腔上皮细胞者中高表达,提示Axl基因可能与口腔鳞状细胞癌的发生、发展相关。     

口腔鳞状细胞癌p53基因的免疫组织化学研究

随着肿瘤分子生物学研究的不断深入和发展，癌基因和抗癌基因在肿瘤发生和发展中的作用日益受到重视。Ｐ５３抗癌基因的产物是分子量为５３ＫＤ的核磷酸化蛋白质。已证明发生于１３２～２１５位氨基酸残基之间的突变可导致Ｐ５３蛋白失活，并表现出显性的癌基因转化作用［...     

口腔鳞状细胞癌中蛋白酪氨酸磷酸酶基因的突变与表达

目的 探讨抑癌基因蛋白酪氨酸磷酸酶基因(phosphatase and tensin homolog deleted in chromosome 10,PTEN)的突变和基因表达水平变化在口腔鳞状细胞癌发生、发展过程中的作用.方法 应用聚合酶链反应(PCR)、基因测序方法检测42例口腔鳞状细胞癌和癌旁组织中PTEN第3、5、6、8外显子有无突变.应用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测上述病例癌组织及癌旁组织中PTEN mRNA的表达.结果 发现2例口腔鳞状细胞癌组织中PTEN第5外显子发生点突变.42例口腔鳞状细胞癌和癌旁正常组织中均有PTEN mRNA表达,口腔鳞状细胞癌组织中PTEN mRNA表达量[PTEN/磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde phosphate dehydrogenase,GAPDH)]为(0.36±0.12),低于相应癌旁正常组织(0.64±0.09),差异有统计学意义(P＜0.01).结论 PTEN mRNA表达水平降低与口腔鳞状细胞癌的发生有一定关系.     

PTEN、p27在口腔粘膜白斑和口腔癌组织中的表达及意义

目的　探讨抑癌基因PTEN、p2 7在口腔粘膜白斑 (oralleukoplakia ,OLK)和口腔癌 (oralsquamouscellcancer,OSCC)组织中的蛋白表达及意义。方法　应用免疫组化S -P法检测 10例正常口腔粘膜、2 5例口腔粘膜白斑 (其中白斑伴上皮异常增生 15例 ,白斑不伴上皮异常增生 10例 )及 32例口腔癌组织中抑癌基因PTEN和p2 7的蛋白表达情况。结果　正常口腔粘膜和白斑不伴上皮异常增生组织中PTEN和 p2 7蛋白全部阳性表达 ;白斑伴上皮异常增生组织中PTEN和 p2 7蛋白阳性表达率分别为93.3%、73.3%。OSCC组织中PTEN蛋白阳性表达率为71.9% ,其中高、中、低分化OSCC组织中PTEN蛋白阳性表达率分别为 85 .7%、75 %和 33.3% ,统计学分析表明PTEN在OSCC组织中的蛋白表达与组织分化程度明显相关 (P <0 .0 5 )。OSCC组织中 p2 7蛋白的阳性表达率为4 0 .6 % ,其中高、中、低分化OSCC组织中p2 7蛋白的阳性表达率分别为 4 2 .9%、4 1.7%和 33.3% ,统计学分析表明p2 7在OSCC组织中的蛋白表达与组织分化程度无明显相关 (P >0 .0 5 )。结论　OSCC组织中PTEN和 p2 7蛋白的阴性表达率较高 ,说明PTEN和 p2 7基因突变或缺失在OSCC的发生发展过程中起重要作用。     

术前洛铂化疗对口腔鳞癌抑癌基因PTEN表达的影响

目的:研究口腔鳞癌在洛铂术前化疗后PTEN蛋白的表达变化及其临床意义。方法:60例口腔癌患者随机分为2组,术前未行化疗为对照组,术前化疗者为实验组,应用免疫组织化学SP法检测口腔癌患者正常口腔黏膜组织及其癌组织中PTEN蛋白的表达,HE染色法进行临床病理学分析。结果:2组60例正常口腔黏膜组织中PTEN蛋白全部表达,阳性率为100%;对照组中,口腔鳞癌组织中PTEN蛋白的阳性表达率为76.7%,显著低于正常口腔黏膜组织;对照组在高、低分化口腔鳞癌组织中PTEN蛋白的阳性表达率分别为100%、57.1%,差异有统计学意义(P<0.05);PTEN表达阳性率与患者的年龄、性别无显著相关性(P>0.05),与淋巴结转移、病理分级及其临床肿瘤大小之间相关(P<0.05)。实验组口腔鳞癌组织中PTEN蛋白的阳性表达率为100%,显著高于对照组的76.7%(P<0.05),与正常口腔黏膜组织比较无显著相关性(P>0.05)。结论:PTEN基因在口腔鳞癌的发生发展过程起着一定的作用,对判断预后具有一定的意义。术前洛铂化疗可提高口腔鳞癌组织中PTEN的表达。     

PI3K与PTEN蛋白在口腔鳞癌中的表达及相关性研究

目的：探讨口腔鳞癌中PTEN、PI3K的表达情况,并对其表达水平与临床特征之间的关系进行相关性分析,探讨其与口腔鳞癌发生、发展和转移的关系。方法采用免疫组化SP法对52例口腔鳞癌石蜡标本及20例癌旁正常组织中PTEN、PI3K蛋白的表达情况进行研究,分析其与临床病理特征的关系。结果 PTEN在口腔鳞癌中表达明显低于癌旁正常组织。PI3K表达明显高于癌旁正常组织。PTEN与PI3K表达与细胞分化、临床分期、淋巴结转移相关。PTEN与PI3K阳性表达之间呈负相关。结论 PI3K在口腔鳞癌中的表达上调, PTEN在口腔鳞癌中的表达下调。PTEN与PI3K蛋白表达呈负相关。     

PTEN在口腔鳞状细胞癌中的定量分析及平阳霉素化疗对其表达的影响

目的探讨抑癌基因PTEN在口腔鳞状细胞癌组织中的定量表达,平阳霉素化疗对该基因表达的作用。方法收集1999~2002年口腔鳞状细胞癌石蜡包埋组织88例,分化疗组44例,未化疗组44例。化疗组为术前3天用平阳霉素48毫克。选择28例正常口腔粘膜组织作为对照组。应用流式细胞术定量分析技术研究PTEN在口腔鳞状细胞癌中的定量表达。结果PTEN在正常粘膜组FI值为1.0±0.03,平阳霉素化疗组FI值为0.8±0.06,未化疗组FI值为0.68±0.03。各组之间FI值均有显著性差异。结论PTEN在口腔鳞状细胞癌组织中呈低表达,平阳霉素化疗使其含量上升。     

PTEN蛋白在舌鳞癌中的表达及意义

目的:研究10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)表达与舌鳞癌(TSCC)临床病理特点的关系。方法:应用免疫组化SABC法检测PTEN蛋白在74例TSCC组织和15例癌旁正常黏膜中的表达。采用SPSS11.5统计软件包,分别应用Mann-WhitneyU法、χ2检验及Fisher精确概率检验,以P<0.05作为差异有显著意义。结果:PTEN阳性表达率在癌旁正常组织及TSCC组织中分别为100%、66.2%,差异有显著性(P<0.05)。PTEN的表达水平与肿瘤T分期、病理学分级无关(P>0.05),与淋巴结转移显著相关(P<0.05)。结论:PTEN蛋白表达与TSCC的淋巴结转移有关。     

口腔癌及癌前病变中PTEN与CXCR4的蛋白表达及相关性研究

目的通过检测抑癌基因PTEN与趋化因子CXCR4在口腔癌及癌前病变中的蛋白表达情况,并分析其相关性。方法收集口腔癌及癌前病变标本共111例,其中正常口腔黏膜15例、单纯上皮增生22例、上皮异常增生16例、口腔鳞癌58例,应用免疫组化SP法检测这些标本中PTEN与CXCR4蛋白表达水平,并对结果进行统计学分析。结果 PTEN在口腔鳞癌中阴性和弱阳性表达占74%(43/58),显著低于正常黏膜、单纯上皮增生、上皮异常增生组(P<0.05);CXCR4在单纯增生、异常增生和口腔鳞癌中阳性或强阳性表达分别占40.91%、43.75%和66.13%,显著高于正常组的表达(P<0.05)。经直线相关分析和Spearman等级相关分析,PTEN与CXCR4之间存在负相关关系(r=-1.000,P<0.001)。结论口腔鳞癌的发生和发展过程中PTEN和CXCR4均起着一定的作用;口腔癌中PTEN与CXCR4的蛋白表达存在负相关的关系。     

Infrequent genetic alterations of the tumor suppressor gene PTEN/MMAC1 in squamous cell carcinoma of the oral cavity

BACKGROUND: Fifty tumor specimens from primarily untreated patients were analyzed to elucidate the involvement of the tumor suppressor gene PTEN/MMAC1 in the development of oral squamous cell cancer. METHODS: Eight microsatellite markers, spanning 10 cM of genomic DNA located centromeric, telomeric or intragenic of PTEN/MMAC1 were used for loss of heterozygosity (LOH) and breakpoint analysis. The microsatellite panel within or in close proximity (1 cM) to the 10q23.3 locus showed a LOH rate of 12%. Complete sequence analysis of the genes coding region was performed in all 10 cases that exhibited LOH in one of the eight microsatellite markers within or around the PTEN/MMAC1 gene. Comparative multiplex PCR reactions served to screen for homozygous deletions. RESULTS: There was no association between allelic loss of the gene, overall patient survival and recurrence-free survival. Sequencing did not reveal any mutation in the coding region of PTEN/MMAC1. Differential PCR analysis failed to detect any homozygous deletion. CONCLUSIONS: We conclude that PTEN/MMAC1 gene alterations do not play a key role in tumorigenesis of oral squamous cell cancers.     

口腔鳞状细胞癌中PTEN、MMP-7和VEGF的表达及相关性研究

目的 探讨人第10号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因（PTEN）、基质金属蛋白酶-7（MMP-7）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达以及相关性。方法 采用免疫组化SP法,分别检测40例OSCC组织和40例正常口腔黏膜组织中PTEN、MMP-7和VEGF 的表达情况,并分析PTEN、MMP-7和VEGF在OSCC中表达的相关性。结果 PTEN、MMP-7和VEGF在OSCC组织中的表达率分别为35.0%（14/40）、65.0%（26/40）和72.5%（29/40）,在正常口腔黏膜组织中的表达率分别为77.5%（31/40）、22.5%（9/40）和25.0%（10/40）,3个指标在两种组织间的表达差异均有统计学意义（P＜0.05）。OSCC组织中,PTEN 表达与MMP-7及VEGF 表达均呈负相关（r分别为-0.406和-0.394,均P＜0.05）;MMP-7表达与VEGF表达呈正相关（r = 0.514,P＜0.05）。结论 PTEN 表达下调和MMP-7、VEGF表达上调与OSCC的发生发展密切相关;联合检测三者的表达对了解OSCC的恶性行为有重要的临床参考价值。     

PTEN和VEGF在口腔鳞状细胞癌发生发展过程中的表达及意义

目的　探讨抑癌基因PTEN和血管内皮生长因子 (VEGF)在口腔鳞状细胞癌 (oralsquamouscellcancer,OSCC)发生发展不同阶段中的蛋白表达及意义。方法　应用免疫组化S -P法检测 10例正常口腔粘膜、10例上皮单纯增生、15例上皮异常增生及 32例口腔鳞状细胞癌组织中PTEN和VEGF的蛋白表达情况 ,比较这两种蛋白表达之间的关系。结果　PTEN蛋白在正常口腔粘膜、上皮单纯增生、上皮异常增生、和口腔鳞状细胞癌组织中阳性表达率分别为 10 0 % (10 / 10 )、10 0 % (10 / 10 )、93.3% (14 / 15 )和 71.9% (2 3/ 32 ) ;口腔鳞状细胞癌组织中PTEN蛋白的阳性表达率显著低于正常口腔粘膜、上皮单纯增生、上皮异常增生组织 (P <0 .0 5 ) ;高、中、低分化口腔鳞状细胞癌组织中PTEN蛋白的阳性表达率分别为 85 .7%、75 %和 33.3% ,统计学分析表明PTEN在OSCC组织中的蛋白表达与组织分化程度明显相关 (P <0 .0 5 )。PTEN蛋白与VEGF蛋白表达呈负相关趋势 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　PTEN蛋白在口腔鳞状细胞癌发生发展过程中的表达呈进行性下调或缺失 ,可能是通过降低细胞粘附、促进血管形成等途径参与口腔鳞状细胞癌的发生和演进过程