他莫昔芬对肝癌HepG2细胞脂质代谢的影响

目的:研究他莫昔芬对肝癌HepG2细胞脂质代谢的影响。方法:体外培养HepG2细胞,MTT法检测0.5、1、5、15、30μmol/L他莫昔芬对HepG2细胞增殖的影响;油红O染色检测0.5、1、5μmol/L他莫昔芬和200μmol/L棕榈酸(阳性对照)对HepG2细胞内脂质沉积的影响;荧光定量聚合酶链式反应法检测5μmol/L他莫昔芬对HepG2细胞内脂肪酸(FA)合成酶(FAS)、固醇调节元件结合蛋白1c(Srebp-1c)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的表达和FA氧化相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)、解偶联蛋白2(UCP-2)表达的影响;蛋白印迹法检测5μmol/L他莫昔芬对HepG2细胞内ACC蛋白表达及其磷酸化(P-ACC)水平的影响。以上检测结果均与空白对照组进行比较。结果:与空白对照组比较,0.5、1、5μmol/L他莫昔芬对HepG2细胞增殖无明显影响(P>0.05),15、30μmol/L他莫昔芬能明显抑制HepG2细胞的增殖(P<0.05);5μmol/L他莫昔芬能明显增加细胞内脂质沉积,且与阳性对照相似,0.5、1μmol/L他莫昔芬对细胞内脂质沉积无明显影响(P>0.05);细胞内FASmRNA表达明显增强、P-ACC水平明显降低(P<0.05),其余基因和蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论:他莫昔芬能诱导HepG2细胞脂质沉积增加,可能与细胞内P-ACC水平降低、FASmRNA表达上调有关。     

雷公藤红素激活AMPK信号通路抑制肝癌HepG2细胞增殖的作用研究

摘要：目的:研究雷公藤红素（celastrol, Cel）抑制肝癌HepG2细胞增殖的作用并探讨其作用机制。方法:CCK-8法检测不同浓度(0.5,1,2.5,5,10,25,50μmol·L-1)Cel抑制肝癌HepG2细胞增殖的作用;流式细胞术检测不同浓度(1,2.5,5μmol·L-1) Cel对肝癌HepG2细胞周期分布的影响;Western blot法检测Cel对肝癌HepG2细胞中周期蛋白依赖性激酶2 （CDK2）、周期素A2抗体（Cyclin A2）等增殖相关蛋白和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α（p-AMPKα, Thr172）、固醇调节元件结合蛋白-1（SREBP-1）、脂肪酸合酶（FASN）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）等脂代谢相关蛋白表达的影响;在蛋白激酶B（Akt）/原癌基因c-Met过表达肝癌HepG2细胞中运用AMPK抑制剂Dorsomorphin （Compound C）干预,确证Cel抑制肝癌HepG2细胞增殖的机制。结果:Cel对肝癌HepG2细胞增殖具有抑制作用,且具有剂量-时间依赖效应;与对照组比较,不同浓度(1,2.5,5μmol·L-1) Cel能够阻滞肝癌HepG2细胞周期于S期,并显著降低CDK2、Cyclin A2等细胞周期调控蛋白表达水平;同时,Cel能够升高p-AMPKα（Thr172）蛋白表达水平,降低SREBP-1、FASN、ACC等脂代谢关键蛋白的表达水平;在Akt/c-Met过表达肝癌HepG2细胞中,Cel同样能够激活p-AMPKα（Thr172）并降低SREBP-1、FASN、ACC、CDK2、Cyclin A2等脂代谢与增殖相关蛋白的表达水平,但是运用AMPK抑制剂干预后能够逆转Cel对HepG2细胞脂代谢及增殖相关蛋白表达的影响。结论:Cel可能通过激活AMPK信号通路抑制脂代谢及增殖信号活化从而抑制肝癌HepG2细胞增殖。     

片仔癀调控膜联蛋白A1/VEGF通路对人肝癌细胞系HepG2作用的影响

目的研究片仔癀对人肝癌细胞系HepG2作用的影响,并探讨其作用机制。方法培养人肝癌细胞HepG2,将细胞分为空白对照组(Normal)、片仔癀不同浓度剂量组(浓度分别为1、10、100 mg·L~(-1)),药物作用24 h后,收集细胞进行以下相关检测:MTT比色法检测不同浓度片仔癀对HepG2细胞活性的影响;集落形成实验观察细胞存活能力;Western blot法检测凋亡相关指标Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9的表达,膜联蛋白A1/VEGF通路相关指标(ANXA1、VEGF、VEGFR、NF-κB p50);结果与空白对照组比较,不同浓度片仔癀能够抑制体外人肝癌细胞株HepG2细胞活性,抑制细胞集落形成,促进HepG2细胞凋亡蛋白表达,促进细胞ANXA1蛋白表达,抑制VEGF、VEGFR表达,及抑制核蛋白NF-κBp50表达;结论片仔癀能够抑制体外人肝癌细胞株Hep G2活性,其主要作用机制与促进Hep G2细胞凋亡蛋白,促进细胞ANXA1蛋白,抑制VEGF/VEGF受体,及NF-κB信号通路相关。     

漆树黄酮逆转人肝癌细胞HepG2上皮间质转化的实验研究

目的研究漆树黄酮对人肝癌细胞HepG2上皮间质转化的影响及其可能机制。方法用不同浓度的漆树黄酮(50、100、200μmol.L-1)处理HepG2细胞;MTT法检测漆树黄酮对HepG2细胞的细胞毒作用;用Transwell小室法检测漆树黄酮对HepG2细胞侵袭能力和趋化运动能力的影响,RT-PCR法检测p38MAPK、E-cadherin和vimentin mRNA表达,Western blot检测p38MAPK、E-cadherin和vimentin蛋白表达。结果漆树黄酮作用细胞24 h后能抑制HepG2细胞体外趋化运动和侵袭能力。漆树黄酮能引起HepG2细胞形态学的变化,能降低p38 MAPK和vimentin mRNA和蛋白表达,但不能改变E-Cadherin的表达。结论漆树黄酮能逆转人肝癌细胞HepG2的上皮间质转化,其抗肿瘤侵袭运动的机制可能与抑制p38MAPK的表达有关。     

薯蓣皂苷下调ABCC1表达对人肝癌细胞HepG2/ADM耐药的影响

目的:探究薯蓣皂苷对人肝癌细胞HepG2/多柔比星(ADM)耐药性的影响及其可能的作用机制。方法:采用含0,10,20,30,40,50μmol·L^-1薯蓣皂苷的培养液培养HepG2、HepG2/ADM细胞,CCK法检测细胞增殖抑制率;MTT检测薯蓣皂苷对HepG2/ADM细胞、HepG2细胞半抑制浓度(IC50)值的影响;流式细胞术检测HepG2、HepG2/ADM细胞摄取ADM的能力。薯蓣皂苷联合ABCC1抑制剂处理HepG2/ADM细胞,MTT检测细胞IC50值变化;流式细胞术检测细胞摄取ADM的能力、细胞凋亡情况,免疫印迹法检测细胞人多药耐药相关蛋白1(ABCC1)、半胱天冬酶(caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况。结果:HepG2/ADM细胞中ABCC1蛋白表达显著高于HepG2细胞(P<0.05)。薯蓣皂苷0~30μmol·L^-1对HepG2/ADM细胞、HepG2细胞毒性小。随着薯蓣皂苷处理浓度的升高,HepG2/ADM细胞IC50值均降低,摄取ADM量明显升高,具有剂量依赖性(P<0.05)。薯蓣皂苷联合ABCC1抑制剂处理HepG2/ADM细胞后能够进一步降低细胞IC50,提高细胞ADM摄取量,加速细胞凋亡,上调caspase-3、Bax蛋白表达,下调ABCC1、bcl-2蛋白表达(P<0.05)。结论:薯蓣皂苷能够逆转HepG2/ADM细胞耐药性,逆转效果与作用剂量相关,其机制可能与下调ABCC1表达,诱导细胞凋亡有关。     

大黄素调控组蛋白乙酰化促进HpG2肝癌细胞焦亡及凋亡的发生

目的 研究天然产物大黄素是否能够影响HpG2肝癌细胞中组蛋白乙酰化水平,进而加速肝癌细胞焦亡和凋亡,为肝癌的治疗提供新的靶点。方法 CCK-8法检测不同浓度大黄素对Hp G2细胞活力的影响;生物信息学分析TCGA数据库中肝癌患者组蛋白乙酰化相关基因表达情况,验证候选基因赖氨酸乙酰基转移酶2A(KAT2A)与细胞凋亡通路的相关性;实时荧光定量PCR(q PCR)检测Hep G2细胞与L02细胞KAT2A m RNA水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大黄素对Hp G2细胞中组蛋白乙酰转移酶(HAT)、组蛋白去乙酰转移酶(HDAC)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18的影响;流式细胞术检测大黄素对肝癌细胞凋亡的影响;Western blot检测细胞凋亡、细胞焦亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2-相关X蛋白质(Bax)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(Caspase-1)、Gasdermin家族成员D N端(GSDMD-N)及KAT2A的表达情况。结果 大黄素能降低Hp G2细胞活性,半抑制浓度(IC₅₀)95%置...     

乙肝病毒x蛋白结合蛋白抑制阿霉素诱导HepG2细胞凋亡的机制研究

目的探讨乙型肝炎病毒x蛋白结合蛋白(hepatitis Bvirus x-interacting protein,HBXIP)抑制阿霉素(doxorubicinhydrochloride,DOX,adriamycin,ADM)诱导HepG2肝癌细胞凋亡的作用及可能的分子机制,为研究肝细胞癌的临床耐药性奠定基础。方法以建立的稳定高表达HBXIP基因的HepG2细胞系为研究对象,分别用不同浓度的DOX处理高表达HBXIP组及对照组细胞,MTT法检测细胞的生存率,DAPI染色及Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡,免疫印迹法检测蛋白表达水平。结果 MTT结果表明,DOX能够抑制HepG2细胞的存活,但HBXIP对DOX诱导的HepG2细胞凋亡作用具有明显的拮抗效应,并抑制DOX诱导的caspase-3、caspase-9及其底物PARP的活化,同时促进Bcl-2蛋白的表达。结论 HBXIP蛋白能够抑制化疗药物DOX诱导的HepG2细胞凋亡,其机制可能与调节胱天蛋白酶家族关键因子的活性相关。     

Notch1表达对肝癌细胞HepG2生物学行为的影响

目的研究Notch1基因对Hes1、Hes2表达水平以及肝癌细胞HepG2生物学行为的影响。方法将HepG2细胞分为Notch1受体胞内段质粒(A)组、Notch1干扰RNA(B)组、空载体(C)组和未处理HepG2细胞(D)组。采用MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术测定细胞周期,RT-PCR和Western blot法分别检测Notch1、Hes1、Hes2mRNA和蛋白的表达。结果与C组和D组相比,A组细胞增殖能力减弱,G1期细胞以及Notch1、Hes1、Hes2mRNA和蛋白表达均明显增加(P<0.05),而B组细胞增殖能力增强,G1期细胞以及Notch1、Hes1、Hes2mRNA和蛋白表达均明显减少(P<0.05)。结论上调Notch1的表达能促进Hes1与Hes2表达水平并抑制肝癌细胞HepG2增殖。     

大叶茜草素对人肝癌细胞生物学行为的影响及作用机制

目的 探讨大叶茜草素对人肝癌细胞生物学行为的影响及作用机制。方法 将HepG2细胞分为对照组、大叶茜草素低、中、高浓度(40、60及80 mmol/L)组、SN50(36μmol/L)组、大叶茜草素高浓度(80 mmol/L)+LPS(2.5μmol/L)组。采用细胞计数-8法、克隆形成实验、流式细胞术以及Transwell染色法检测HepG2细胞的增殖、凋亡及侵袭迁移情况;蛋白质印迹法检测HepG2细胞中蛋白表达情况。结果 与对照组相比,大叶茜草素低、中、高浓度组及SN50组的细胞增殖抑制率、凋亡率、兔抗半胱天冬酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤2相关X蛋白(B-cell lymphoma 2 associated x protein,Bax)、核因子κB抑制蛋白-α(inhibition of nuclear factor-κB,IκB-α)以及Bax/B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)均升高(P<0.05);克隆细胞数、侵袭和迁移细胞数、Bcl-2、基质金属蛋白酶(ma-trix metalloproteinase,MMP)-2、MMP...     

磁性纳米Fe3O4颗粒对藤黄酸诱导肝癌细胞凋亡的影响

目的研究磁性纳米Fe3O4颗粒(MNP-Fe3O4)对藤黄酸(GA)诱导肝癌HepG2细胞凋亡的作用。方法将HepG2细胞分为GA 0.5μmol/L单药组(A组)、GA 0.5μmol/L和MNP-Fe3O420μg/ml两药联合组(B组)及空白对照组(C组)。采用MTT法检测HepG2细胞增殖的抑制率,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western blot法检测B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)及半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白的表达。结果 GA对HepG2细胞生长的抑制作用呈剂量依赖性。与C组相比,A、B组HepG2细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少(P<0.05),且B组各指标变化更为显著(P<0.05)。结论 MNP-Fe3O4能增强GA对肝癌HepG2细胞的凋亡诱导作用;其机制可能与Bcl-2表达下调及Caspase-3表达上调有关。     

白花丹醌对人肝癌细胞HepG2侵袭和凋亡的影响

目的探讨白花丹醌对人肝癌HepG2细胞侵袭和凋亡的影响。方法人肝癌HepG2细胞进行体外培养,经不同浓度的白花丹醌处理后,MTT法检测细胞的增殖抑制作用;Transwell细胞体外侵袭实验观察细胞的侵袭能力;流式细胞术Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡情况;免疫组化法检测细胞内Bax、Bcl-2蛋白的表达水平。结果 MTT结果显示,与对照组比较,白花丹醌干预组抑制HepG2细胞增殖,并呈剂量-效应关系(P<0.05);Transwell细胞体外侵袭实验显示,随白花丹醌用药浓度的递增,细胞侵袭能力明显下降,尤其以4、8μmol·L~(-1)明显(P<0.01);流式细胞术结果显示,白花丹醌作用HepG2细胞48 h,4、8μmol·L~(-1)组细胞凋亡率均明显高于对照组;免疫组化显示,随着白花丹醌浓度增加,Bax蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,并呈剂量依赖性(P<0.01)。结论白花丹醌能够抑制HepG2细胞增殖,促进HepG2细胞凋亡,同时具有抑制HepG2细胞侵袭的能力。     

拓扑异构酶Ⅱ抑制剂GL331对HepG2细胞体外生长的抑制作用

目的:研究拓扑异构酶Ⅱ抑制剂GL331体外对人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用及其机制。方法:采用MTT法测定GL331对人肝癌HepG2细胞存活率的影响;克隆原形成法检测对细胞集落形成的影响;DAPI染色观察细胞形态学变化;流式细胞术检测细胞凋亡百分率的变化;蛋白免疫印迹技术观察Bax,Bcl-2,Fas,FasL,Akt/p-Akt,caspase-3,clea-caspase等相关蛋白水平变化;caspase-3酶活性检测试剂盒检测对蛋白酶caspase-3活性的影响。结果:GL331可以浓度和时间依赖性地抑制HepG2细胞的增殖,同时促进HepG2细胞凋亡,提高Bax/Bcl-2比率,增加FasL的表达,降低p-Akt的表达。结论:GL331对HepG2细胞的增殖有明显的抑制作用,其作用机制与诱导HepG2细胞发生凋亡,调节凋亡相关蛋白的表达,并抑制存活通路相关蛋白的活化有关。     

晚期糖基化终产物对人肝癌细胞HepG2增殖的影响

目的探讨糖尿病晚期糖基化终产物(AGEs)对肝癌细胞HepG2增殖的影响及其机制。方法体外培养人肝癌细胞HepG2,以终浓度分别为100、200和400μg/ml的AGEs处理细胞24h,并设正常对照组进行比较。运用细胞计数试剂盒8研究AGEs对HepG2增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期的改变,Western blot检测肝癌细胞抗凋亡基因表达。结果 AGEs呈浓度依赖性显著促进HepG2细胞增殖(P<0.05)。与对照组比较,200μg/ml AGEs干预24h后可以减少HepG2细胞G1期百分率,同时增加S期百分率(P<0.05)。AGEs可致细胞抗凋亡基因B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)相关蛋白表达增加。结论 AGEs能促进HepG2细胞的增殖,其机制可能与上调Bcl-2相关蛋白表达,加速细胞G1期向S期转换相关。     

尾叶香茶菜丙素对肝癌耐药株 HepG2/ADM细胞体外活性的影响

目的 探究尾叶香茶菜丙素(Kamebakaurin)对HepG2/ADM(肝癌细胞耐阿霉素耐药株)细胞体外活性.方法 通过2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐(CCK-8法)测定尾叶香茶菜丙素和阿霉素(ADM)对HepG2/ADM细胞的生长活力抑制率;通过流式细胞术测定尾叶香茶菜丙素对细胞周期和细胞凋亡的影响;运用Transwell小室实验和划痕愈合实验检验尾叶香茶菜丙素对HepG2/ADM细胞迁移能力影响,用实时荧光定量PCR检测耐药相关基因表达,通过蛋白印迹法(Western blotting)分析PTEN-AKT信号通路.结果 尾叶香茶菜丙素对HepG2/ADM细胞的IC50值为62.96μmol/L,ADM在1 mg/mL(184μmol/L)只有26.5％抑制率,说明HepG2/ADM细胞耐药株对尾叶香茶菜丙素敏感度高于阿霉素;尾叶香茶菜丙素诱导肝癌细胞HepG2/ADM细胞的凋亡,阻滞细胞在G2期,且呈浓度依赖性;尾叶香茶菜丙素具有抑制HepG2/ADM细胞穿过小室的能力和平板愈合能力,显示尾叶香茶菜丙素可抑制其迁移能力;Western blotting显示尾叶香茶菜丙素通过抑制MDR1和PENT-AKT通路发挥以上功能.结论 尾叶香茶菜丙素抑制MDR1蛋白表达从而逆转HepG2/ADM细胞对药物的敏感性,通过抑制PENT-AKT通路的激活从而促进HepG2/ADM细胞的凋亡并抑制其迁移能力.     

Effects of magnetic nanoparticle Fe3O4 on apoptosis of HepG2 cells induced by gambogic acid

目的 研究磁性纳米Fe3O4颗粒( MNP-Fe3O4)对藤黄酸(GA)诱导肝癌HepG2细胞凋亡的作用.方法 将HepG2细胞分为GA 0.5 μmol/L单药组(A组)、GA 0.5μmol/L和MNP-Fe3O4 20μg/ml两药联合组(B组)及空白对照组(C组).采用MTT法检测HepG2细胞增殖的抑制率,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western blot法检测B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)及半胱天冬氨酸蛋白酶3 (Caspase-3)蛋白的表达.结果 GA对HepG2细胞生长的抑制作用呈剂量依赖性.与C组相比,A、B组HepG2细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少(P＜0.05),且B组各指标变化更为显著(P＜0.05).结论 MNP-Fe3O4能增强GA对肝癌HepG2细胞的凋亡诱导作用;其机制可能与Bcl-2表达下调及Caspase-3表达上调有关.     

醉茄素A通过JAK/STAT通路对人肝癌耐药细胞HepG2/ADM凋亡的影响

目的研究醉茄素A通过Janus激酶(JAK)/信号转导与转录激活子(STAT)通路对人肝癌耐药细胞HepG2/阿霉素(ADM)凋亡的影响,并探讨JAK/STAT通路在其中可能的作用机制。方法体外培养HepG2/ADM细胞,分为对照组、醉茄素A 2.5、5.0、10.0μmol/L组。CCK-8法检测细胞增殖情况;Hoechst33342染色法观察细胞形态学变化;Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡情况;Western blotting法检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、cleaved caspase-3以及JAK/STAT通路中磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3(p-STAT3)蛋白表达情况。结果醉茄素A 2.5、5.0、10.0μmol/L组HepG2/ADM细胞增殖受到明显抑制,并呈时间和剂量相关性(P<0.05)。与对照组相比,醉茄素A 2.5、5.0、10.0μmol/L组HepG2/ADM细胞部分细胞核发生碎片化、固缩,荧光强度增大,细胞凋亡指数及凋亡率显著升高(P<0.05),cleavedcaspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05),Bcl-2、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论醉茄素A可促进人肝癌耐药细胞Hep G2/ADM凋亡,其机制可能与抑制JAK/STAT通路活化,下调抑凋亡蛋白表达及上调促凋亡蛋白表达有关。     

辣木叶及辣木籽对大鼠CYP450酶3种亚型基因表达影响

目的:研究辣木叶及辣木籽对大鼠肝脏CYP450亚型酶中mRNA及蛋白表达量的影响。方法:将SD大鼠随机分为空白组(0.5%羧甲基纤维素钠混悬溶液)、辣木叶高、中、低剂量组(分别为0.813 8,0.406 9,0.203 5g·kg^-1);辣木籽高、中、低剂量组(分别为1.067 4,0.533 7,0.266 9g·kg^-1)。灌胃给药,给药容量为10mL·kg^-1,2次/天,连续给药14d,取大鼠肝脏,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白免疫印迹(Western-blot)法检测大鼠肝脏中CYP2E1、CYP3A1及CYP1A2的mRNA及蛋白相对表达量。结果:辣木叶高剂量组对CYP2E1的mRNA表达有明显抑制作用(P<0.05);在(0.813 8±0.203 5)g·kg^-1剂量范围内,辣木叶对CYP1A2mRNA表达的抑制作用随给药剂量增加而增加(P<0.05)。本实验剂量范围内的辣木籽对3个酶的mRNA表达都有明显的抑制作用(P<0.05),其抑制效率CYP2E1>CYP3A1>CYP1A2。高剂量组辣木叶及辣木籽对CYP2E1蛋白表达都有明显抑制作用(P<0.01);中、低剂量组的辣木籽对CYP3A1及CYP1A2蛋白表达都有不同程度的抑制作用(P<0.05;P<0.05);中剂量辣木叶对CYP1A2蛋白表达抑制作用显著(P<0.01)。结论:辣木叶及辣木籽对大鼠肝脏中3个亚型酶的mRNA及蛋白表达都有不同程度的抑制作用。     

丹酚酸A诱导HepG2细胞凋亡及抑制c-Met表达

目的通过研究丹酚酸A（salvianol acid A,SalA）对肝癌HepG2细胞株c-Met蛋白表达的影响,探讨SalA抑制肝癌细胞增殖,诱导细胞凋亡的可能作用机制。方法以肝癌HepG2细胞株为研究对象,采用MTT法及流式细胞术检测SalA作用后细胞存活、增殖及凋亡情况;同时运用Westernblot法及PCR法检测HepG2细胞c-Met及其下游信号通路中关键蛋白和基因表达的改变。结果肝癌HepG2细胞经SalA处理后,其细胞增殖显著抑制,细胞凋亡比例亦升高,且呈浓度依赖性;同时HepG2细胞中c-Met及其下游信号分子AKT的磷酸化水平显著下调,凋亡相关蛋白Bax、caspase-3和caspase-9的表达亦明显上调。结论SalA能有效抑制肝癌HepG2细胞的增殖并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与其抑制HepG2细胞中c-Met蛋白及其下游信号通路中AKT蛋白的磷酸化水平有关。     

扁柏双黄酮对肝细胞癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的研究扁柏双黄酮(HF)对肝细胞癌HepG2细胞增殖、凋亡及其作用机制的影响。方法CCK8法检测0、10、20、40、60、80、100、120μmol·L~(-1)浓度梯度的HF对肝细胞癌HepG2细胞活性的影响;平板克隆检测HF对肝细胞癌HepG2细胞增殖的影响;用DAPI染色和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测HF对肝细胞癌HepG2细胞凋亡的影响;荧光探针DCFH-DA流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平;蛋白质印迹检测凋亡相关的蛋白表达水平。结果不同浓度的HF作用于HepG2细胞后,细胞活性随着HF浓度的增加显著降低(P <0.01),并且24 h和48 h的半数抑制浓度(IC50)值分别是(59.77±2.57)μmol·L~(-1)、(48.96±4.187)μmol·L~(-1);DAPI染色显示HF可导致HepG2细胞收缩,核碎裂和染色质凝聚,出现凋亡小体;流式细胞术检测结果显示HepG2细胞早期和晚期凋亡率均随HF浓度的升高而依次升高(P <0.05);进一步的研究表明,HF处理HepG2后,显著增加细胞内ROS水平(P<0.01),并且细胞凋亡通路相关蛋白cleaved-PARP、cleaved-Caspase 3的表达也明显增加(P <0.001)。结论 HF可通过ROS/Caspase信号通路抑制HepG2细胞增殖,促进其凋亡。     

索拉菲尼增强TRAIL 诱导人肝癌细胞凋亡的作用及机制探讨

目的观察索拉菲尼(Sorafenib)是否能增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人肝癌细胞凋亡并探讨其作用机制。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,MTT法测定细胞增殖活性,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)和细胞凋亡ELISA检测试剂盒检测细胞凋亡,Western blotting分析Mcl-1的表达。结果索拉菲尼具有增强TRAIL诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的作用,并呈剂量和时间依赖的方式抑制Mcl-1的表达。Mcl-1过表达能抑制索拉菲尼增强TRAIL诱导HepG2细胞凋亡的作用。结论索拉菲尼通过抑制Mcl-1的蛋白表达增强TRAIL诱导人肝癌细胞凋亡的作用。