HPLC-MS/MS测定鱼腥草和复方鱼腥草合剂中马兜铃酸类化合物含量

目的 建立HPLC-MS/MS同时测定鱼腥草药材和复方鱼腥草合剂中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ和马兜铃内酰胺Ⅰ含量的方法。方法 采用Phenomenex Kinetex C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm);流动相为乙腈和0.2%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1,柱温为30℃;采用电喷雾离子源,以多反应离子监测模式进行质谱检测。结果 马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ和马兜铃内酰胺Ⅰ分别在11.91～1 985 ng·mL^-1(r=0.995 3)、 16.87～2 812 ng·mL^-1(r=0.995 7)和3.404～567.4 ng·mL^-1 (r=0.996 6)内有良好的线性关系。各化合物平均回收率为85%～111%,RSD为0.2%～6.7%。马兜铃酸Ⅰ检测限为2.395 ng·mL^-1、定量限为7.984 ng·mL^-1;马兜铃酸Ⅱ检测限为3.389 ng·mL^-1,定量限为10.50 ng·mL<...     

液质联用法测定齿痛消炎灵颗粒中马兜铃酸Ⅰ和马兜铃内酰胺Ⅰ

目的:建立齿痛消炎灵颗粒中马兜铃酸Ⅰ和马兜铃内酰胺Ⅰ的液质联用检测分析方法。方法:采用Agilent SB-C₁₈(2.1 mm×50 mm, 1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1;多反应监测模式,马兜铃酸Ⅰ为m/z 359.0→298.1(定量)和m/z 359.0→296.1(定性),马兜铃内酰胺Ⅰ为m/z 294.0→278.9(定量)和m/z 294.0→251.1(定性),建立齿痛消炎灵颗粒中2个马兜铃酸类成分的液质联用检测方法,在方法学验证的基础上对所有样品进行检测分析。结果:马兜铃酸Ⅰ和马兜铃内酰胺Ⅰ进样量分别在51.849～1 036.984、1.842～36.848 pg范围内线性关系良好,R~2≥0.999 5,定量限分别为26.91、0.69 pg,平均加样回收率分别为107.2%～107.4%(RSD 0.50%～2.1%)、98.9%～105.5%(RSD 1.3%～2.9%)。16批齿痛消炎灵颗粒样品中均未检出马兜铃酸Ⅰ,马兜铃内酰胺Ⅰ的检出量为0.063～0...     

高效液相色谱法测定人血清中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的含量

目的建立以高效液相色谱法测定人血清中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ含量的方法。方法色谱柱为C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(72∶27∶1),检测波长为250nm,流速为1.0ml/min。结果马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ检测浓度线性范围分别为0.84~13.50μg/ml(r=0.9997,n=5)、2.03~32.50μg/ml(r=0.9994,n=5),最低检测浓度分别为0.3、0.1μg/ml。结论本方法简便、易行,可为临床诊治马兜铃酸肾病提供依据。     

鼻炎胶囊质量标准研究

目的建立鼻炎胶囊的定性鉴别和含量测定的方法。方法川TLC法定性鉴别鼻炎胶瞧中白芷、川芎;用HPLC法测定细辛中马兜铃酸A含量;KromasilC,8色谱柱;甲醇-1％冰乙酸（60：40）流动相洗脱;检测波长250nm。结果薄层鉴别荧光斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰;马兜铃酸A进样量任0．044～0．22μg范围内峰面积线性关系良好（r=O．9999）;对两批细辛药材进行检测,其马兜铃酸A含越为34．3μg／g,并对3批样品进行检测,未检出马兜铃酸A。结论所建立的定性、限量测定分析方法可用于鼻炎胶囊的质量控制。     

反相高效液相色谱法测定甘露消毒丸中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定甘露消毒丸中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的含量。方法采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水-冰醋酸(68∶32∶1)为流动相,检测波长为250 nm,流速为1.0 mL.m in-1。用超声提取法提取甘露消毒丸中的马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ。结果马兜铃酸Ⅰ在0.135~27.000μg.mL-1(r=0.999 8,n=5),马兜铃酸Ⅱ在0.325~65.000μg.mL-1(r=0.999 9,n=5)线性关系良好。马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的最低检测浓度分别为0.081,0.065μg.mL-1,平均回收率分别为98.50%,99.12%,RSD分别为2.30%,3.50%。结论该方法简便、快速、灵敏。     

中药材（饮片）中马兜铃酸的含量分析及初步风险评估

目的 分析中药材（饮片）中马兜铃酸类成分的含量特征,并开展初步风险评估。方法 基于近10年的文献数据,从分布情况、相关性、样品差异等角度,分析了12个品种478批中药材（饮片）中马兜铃酸类成分的含量特征。按照危害识别、危害特征描述、暴露评估和风险描述的步骤,明确了计算公式和具体参数,采用靶标危害系数法对细辛中马兜铃酸Ⅰ的安全风险进行评估。结果 12个品种478批中药材（饮片）中共检出25种马兜铃酸类成分,整体含量马兜铃酸Ⅰ最高,马兜铃内酰胺F1最低,部分成分含量之间存在相关性。含马兜铃酸的药用植物的果实中马兜铃酸类成分远高于其他部位,各药材经炮制后马兜铃酸含量显著降低。按法定用药部位统计,各品种中马兜铃酸I和马兜铃酸П含量存在显著性差异,朱砂莲最高,鱼腥草最低。风险评估结果显示,11批细辛药材中有1批样品中马兜铃酸Ⅰ的靶标危害系数（THQ）大于1,提示其用药存在安全风险。结论 获得的中药材（饮片）中马兜铃酸类成分的含量现状和建立的风险评估方法,可为含马兜铃酸中药材（饮片）的质量控制和安全用药提供参考。     

瑶药天钻的水分及马兜铃酸A含量测定

目的考察天钻中水分及马兜铃酸A的含量,为药材的安全使用提供参考。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,对采集或收集到的11批瑶药天钻药材中的水分及马兜铃酸A进行含量测定。色谱柱为Phenomenex Gemini C18柱(250 mm×4.60 mm,5μm),流动相为乙腈-含0.34%三乙胺和0.94%乙酸的水溶液(梯度洗脱),流速为0.8 mL/min,检测波长为260 nm。结果 11批天钻药材中,水分含量为12.9%~15.5%,马兜铃酸A含量为0.017 4%~0.206 4%。结论该含量测定方法简便、结果准确可靠,药材中马兜铃酸A含量差异较大,最高者比最低者高12倍,应关注其肾毒性。     

肾毒性成分马兜铃酸Ⅰ在木通马兜铃不同部位中的动态累积

目的测定不同采收期木通马兜铃(Aristolochia manshuriensis Kom.)不同部位中马兜铃酸Ⅰ的含量,考察马兜铃酸I的动态累积规律。方法采用HPLC法,色谱柱为DiamonsilTMC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-体积分数0.05%磷酸水溶液,梯度洗脱,检测波长260 nm,进样量10μL,流速1.0 m L·min-1,柱温30℃。结果从5月中旬到6月中旬,木通马兜铃根和叶中马兜铃酸Ⅰ含量均呈上升趋势,6月中旬叶中马兜铃酸Ⅰ含量达到顶峰后呈现下降趋势,而根中马兜铃酸Ⅰ含量继续呈现上升趋势,至7月下旬根中马兜铃酸Ⅰ含量达到峰值,从7月下旬到9月下旬根中马兜铃酸Ⅰ含量呈现下降趋势,而叶中马兜铃酸Ⅰ含量趋于平稳;从5月中旬到9月下旬,木通马兜铃茎、果实中马兜铃酸Ⅰ含量变化处于平稳趋势。结论木通马兜铃中马兜铃酸Ⅰ的分布具有组织特异性和时效性,为马兜铃酸类化合物生合成途径的研究提供重要的科学依据。     

穆坪马兜铃化学成分的研究

自穆坪马兜铃(Aristolochia moupinensis Franch)根、茎中分得十三个化合物,其中化合物Ⅰ～Ⅻ经鉴定分別为马兜铃酸Ⅰ(aristolochic acid Ⅰ)(Ⅰ),尿囊素(allantoin)(Ⅱ),紫丁香酸(syringic acid)(Ⅲ),香豆酸(P-coumaric acid)(Ⅳ),马兜铃酸Ⅳ(aristolochic acid Ⅳ)(Ⅴ),β-谷甾醇(Ⅵ),木兰碱(magnoflorine)(Ⅶ),马兜铃酸Ⅳ甲醚aristolochic acid Ⅳ methyl ether(Ⅵ),棕榈酸(Ⅸ),马兜铃酸Ⅱ(aristolochic acid Ⅱ)(Ⅹ),N(Phydroxyphenethy1)P-coumaramide(Ⅺ),马兜铃酸Ⅳ甲醚甲酯(aristolochic acid Ⅳ methyl ether methyl ester)(Ⅻ),化合物ⅩⅢ为新化合物,经光谱分析和化学合成等方法证明其结构为N(P-hydroxyphenethyl)-ferulamide,命名为穆坪马兜铃酰胺(moupinamide)。 初步药理试验表明穆坪马兜铃酰胺体外有抑制血小板聚集和影响血小板内前列腺素合成的作用。     

健骨舒筋片中马兜铃酸A限量测定

目的建立健骨舒筋片中马兜铃酸A限量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱;乙腈-甲醇-水-冰乙酸（30∶30∶39∶1）为流动相;检测波长为390nm;进样量为10μL。结果马兜铃酸A浓度在0.017～0.52μg线性范围内与峰面积线性关系良好（r=0.9999）;两批细辛药材的马兜铃酸A含量较低,3批样品均未检出含马兜铃酸A。结论该法精密度高、重复性良好,可作为健骨舒筋片中马兜铃酸A的限量测定方法。     

穆坪马兜铃化学成分的研究

自穆坪马兜铃(Aristolochia moupinensis Franch)根、茎中分得十三个化合物,其中化合物Ⅰ～Ⅻ经鉴定分別为马兜铃酸Ⅰ(aristolochic acid Ⅰ)(Ⅰ),尿囊素(allantoin)(Ⅱ),紫丁香酸(syringic acid)(Ⅲ),香豆酸(P-coumaric acid)(Ⅳ),马兜铃酸Ⅳ(aristolochic acid Ⅳ)(Ⅴ),β-谷甾醇(Ⅵ),木兰碱(magnoflorine)(Ⅶ),马兜铃酸Ⅳ甲醚aristolochic acid Ⅳmethyl ether(Ⅵ),棕榈酸(Ⅸ),马兜铃酸Ⅱ(aristolochic acid Ⅱ)(Ⅹ),N(Phydroxyphenethy1)P-coumaramide(Ⅺ),马兜铃酸Ⅳ甲醚甲酯(aristolochic acid Ⅳmethyl ether methyl ester)(Ⅻ),化合物ⅩⅢ为新化合物,经光谱分析和化学合成等方法证明其结构为N(P-hydroxyphenethyl)-ferulamide,命名为穆坪马兜铃酰胺(moupinamide)。初步药理试验表明穆坪马兜铃酰胺体外有抑制血小板聚集和影响血小板内前列腺素合成的作用。     

瑶药天钻的质量标准研究

目的:建立瑶药天钻药材的质量标准。方法:分别对天钻药材进行显微鉴别和薄层色谱(TLC)鉴别;按照《中国药典》方法进行水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物检查;采用高效液相色谱法测定药材中马兜铃酸的含量:色谱柱为Phenomenex Gemini C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(含0.34%三乙胺、0.94%乙酸,梯度洗脱),检测波长为260 nm。结果:天钻药材的显微特征明显;TLC图中能清晰显现与马兜铃酸A对应的点;马兜铃酸A的质量浓度在1.703¹09.000μg/ml范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率分别为97.54%、101.16%、101.15%,RSD分别为0.22%、0.63%、0.39%(n=3)。结论:所建标准可用于天钻药材的质量控制。产自广西、云南的11批天钻药材在显微、外观等方面质量相对稳定,但马兜铃酸A的含量差异较大。     

固本祛风颗粒中马兜铃酸Ⅰ的限量检查

目的:建立固本祛风颗粒中马兜铃酸Ⅰ的限量检查方法,保证临床用药安全。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为GL Inertsil ODS-SP(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸(40∶60),流速为1mL·min-1,柱温为28℃,检测波长为320nm。结果:马兜铃酸Ⅰ的进样量在19.44～194.40ng范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9997);平均回收率为98.84%,RSD=0.90%(n=6);最低检测限为1.944ng。3批固本祛风颗粒中均未检出马兜铃酸Ⅰ。结论:该方法简便、专属性强、灵敏度高,可用于固本祛风颗粒中马兜铃酸Ⅰ的限量检查。     

HPLC-MS/MS法同时测定龙胆泻肝丸中高毒成分马兜铃酸Ⅰ与鬼臼毒素

目的 建立液相色谱-质谱联用法同时测定龙胆泻肝丸中高毒成分马兜铃酸Ⅰ与鬼臼毒素的研究方法，为龙胆泻肝丸的质量控制提供技术依据。方法 采用Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.7μm)分离，以0.1%甲酸溶液(含5 mmol·L^-1乙酸铵)-0.1%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱，柱温35℃，流速0.3 mL·min-1，进样量为5μL。在电喷雾离子源正离子模式下，采用多反应监测方式测定，外标法定量。结果 马兜铃酸Ⅰ与鬼臼毒素线性关系良好，线性范围分别为9.5～94.9 ng·mL^-1、10.0～99.7 ng·mL^-1,r均大于0.9950。马兜铃酸Ⅰ与鬼臼毒素平均回收率大蜜丸分别为81.89%(RSD=8.55%)、84.34%(RSD=8.67%)；小蜜丸分别为82.19%(RSD=7.63%)、96.05%(RSD=6.18%)；浓缩丸分别为67.99%(RSD=6.70%)、94.98%(RSD=5.01%)；水丸分别为75.98%(...     

高效液相色谱法测定细辛及其制剂中马兜铃酸A的含量

目的:测定细辛药材及感特灵胶囊中肾毒性成分马兜铃酸A的含量.方法:建立高效液相色谱方法,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,乙腈-1%HAC(39:61,v/v)为流动相;检测波长为390nm;流速为1.0mL·min-1;柱温为室温.分别测定3种细辛样品以及成品制剂感特灵胶囊中马兜铃酸A的含量.结果:高效液相色谱法的平均回收率为101.24%,RSD%为0.27%;结论:细辛药材的根部含马兜铃酸A极少,感特灵胶囊中细辛含量远低于检测限.     

RP-HPLC法测定14种中药材中马兜铃酸A的含量

目的对14种中药材中的马兜铃酸A进行含量测定。方法采用RP-HPLC法。色谱柱为Kromasil ODS柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-体积分数为1%的冰醋酸溶液(体积比70∶30),检测波长为319 nm,流速为1.0 mL.min-1,柱温为25℃。结果14种中药材中马兜铃酸A的含量分别为:苕叶细辛0.22 mg.g-1,万源山慈菇0.18 mg.g-1,宜宾防己0.72 mg.g-1,川细辛0.58 mg.g-1,寻骨风0.52 mg.g-1,广西山慈菇0.13 mg.g-1,短尾细辛0.15 mg.g-1,淮通0.94 mg.g-1,关木通0.49 mg.g-1,广元防己3.00 mg.g-1;平昌防己、冕宁防己、穆平马兜铃、北细辛地上及地下部分中均未检出马兜铃酸A。结论应用本实验中所建立的方法对多种中药材中的马兜铃酸A进行检测,为相关药材及中成药应用提供了科学依据。     

QuEChERS-UPLC-MS/MS法快速测定蜂蜜中28个吡咯里西啶生物碱的含量及风险评估

目的:建立基于QuEChERS结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定蜂蜜中28个吡咯里西啶生物碱的快速检测方法,并根据测定结果进行初步的风险评估。方法:采用QuEChERS法对样品进行前处理,ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.8μm),以含0.05%甲酸和2.5 mmol·L^-1甲酸铵的水溶液(A)及含0.05%甲酸和2.5 mmol·L^-1甲酸铵的乙腈溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1,柱温为40℃;电喷雾离子源为正离子多反应监测模式,外标法测定。结果:28个吡咯里西啶生物碱在1～20 ng·mL^-1内线性关系良好,相关系数均大于0.99;平均回收率为71.8%～103.5%,RSD为3.3%～9.2%。28个吡咯里西啶生物碱的定量下限为0.20～0.90 ng·mL^-1;30批样品中有10批样品检出吡咯里西啶生物碱,阳性样品中总含量为4.85～78.34μg·kg^-1     

UPLC-MS/MS测定人血浆中长春西汀和阿朴长春胺酸的含量及其应用

目的 建立和验证UPLC-MS/MS测定人血浆中长春西汀和阿朴长春胺酸的方法，并用于临床样品检测。方法 以长春西汀-d5、阿朴长春胺酸-d4为内标，人血浆样品经蛋白沉淀法沉淀处理，色谱柱为Waters ACQUITY UPLC^?BEH C₁₈(2.1 mm×50 mm,1.7μm)，流动相为乙腈-水(含0.05%甲酸)，梯度洗脱，流速0.35 mL·min^-1；电喷雾离子化源正离子监测模式。结果 长春西汀和阿朴长春胺酸线性范围分别为0.04～20.0 ng·mL^-1(r=0.999 7)、0.50～250 ng·mL^-1(r=0.999 6)，检测限分别为0.01,0.10 ng·mL^-1，待测物与内标提取回收率均为94.81%～105.0%，基质效应为94.51%～105.0%,RSD均<5%；批内、批间精密度RSD均<10%。结论 本法特异性强、快速、准确，重复性好，适用于长春西汀临床生物样品检测及生物等效性研究。     

木通马兜铃化学成分研究

从木通马兜铃(Aristolochia manshuriensis Kom)茎皮中分得一个新化合物(5),经光谱(IR,UV,HRMS,^{1HNMR,NOEDS)鉴定为3,4-二甲氧基-10-硝基菲-1-羧酸甲酯,命名为马兜铃酸BII甲酯。另11个已知化合物是马兜铃酸Ⅰ,Ⅱ,Ⅲa,Ⅳ,Ⅳa,对羟基桂皮酸,β-谷甾醇,豆甾烷-3,6-二酮,6-羟基-豆甾-4-烯-3-酮,胡萝卜甙,二十八酸甘油单酯;其中二十八酸甘油单酯为首次从该属植物中分得。}     

HPLC法测定种子经处理后种植的辽细辛中马兜铃酸A的含量

目的比较不同种子处理方法对辽细辛中马兜铃酸A的含量的影响。方法采用不同方法对同一批辽细辛种子进行处理并种植,采收2年生不同月份的辽细辛植株进行马兜铃酸A的含量测定;采用Diamonsil(钻石)C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),以0.05 mol.L-1磷酸二氢钠水溶液-乙腈(体积比为60∶40)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,柱温为30℃,检测波长为390 nm,进样量为10μL,外标法计算含量。结果种植2年后的辽细辛药材各部位中均含有马兜铃酸A且地上部分含量明显高于地下部分,其含量逐渐减少,到8、9月份已趋于稳定。结论采用水超声处理辽细辛种子的方法可以除去细辛中的部分马兜铃酸,但不能完全除去,为细辛中的马兜铃酸的去除提供了参考依据。