多重耐药鲍曼不动杆菌耐药谱及耐消毒剂qacEΔ1基因分析

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌的临床分布、耐药谱特征及耐消毒剂基因qacEΔ1的携带情况,为医院感染防控提供实验室依据。方法收集2013年10月至2014年8月临床标本中分离的鲍曼不动杆菌共56株,分别采用微量肉汤稀释法和聚合酶链反应(PCR)进行药物敏感性试验和耐消毒剂基因qacEΔ1的检测;随机抽取qacEΔ1基因阳性标本进行序列测定。结果临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌主要分离于痰液和分泌物标本,分别占70.7%和15.5%;病区主要来自重症监护病房和呼吸内科,分别占41.1%和17.9%。药敏试验除对头孢哌酮/舒巴坦(32.1%)的耐药率较低外,对其余抗菌药物普遍耐药。耐消毒剂qacEΔ1基因检测出50株阳性标本,携带率为89.3%。测序结果与GeneBank中相应基因序列相比较,同源性为98%。结论多重耐药鲍曼不动杆菌以呼吸道为主要感染途径且病区集中趋势明显。耐消毒剂qacEΔ1基因携带率高,加强监测多重耐药鲍曼不动杆菌的消毒剂抗性,对临床科学使用消毒剂具有重要意义。     

大肠杆菌耐消毒剂基因检测与消毒剂抗性研究

目的研究临床分离的多重耐药大肠杆菌耐消毒剂基因携带状况及其对消毒剂抗性水平。方法采用聚合酶链反应(PCR)法和体外抗菌试验方法进行实验室检测。结果在检测的8株临床分离的大肠杆菌中,检出3株携带qacE△1基因,检出率37.5%。含氯消毒剂对3株qacE△1基因阳性大肠杆菌的MIC值均高于标准菌株。碘伏消毒剂和戊二醛消毒剂只对1株qacE△1基因阳性大肠杆菌的MIC值高于标准菌株,其他均与标准株相同。结论临床分离的多重耐药大肠杆菌qacE△1基因阳性率较高,携带qacE△1基因阳性的大肠杆菌对含氯消毒剂有产生抗性的倾向。     

多重耐药鲍曼不动杆菌中耐消毒剂基因qacE△1的存在现状及其阳性菌株的同源性分析

目的探讨分析多重耐药鲍曼不动杆菌中耐消毒剂基因qacE△1的存在现状及其阳性菌株的同源性。方法对80株多重耐药鲍曼不动杆菌采用聚合酶链反应和序列分析方法分析其耐消毒剂基因qacE△1,然后采用重复序列聚合酶链反应技术分析qacE△1基因阳性菌株的同源性。结果本研究中,80株多重耐药鲍曼不动杆菌检测阳性42株,阳性率为52.5%,其中A型30株,B型5株,C型3株,D型2株,E型2株,可见A型为主要流行类型,所占比例为71.43%。42株阳性多重耐药鲍曼不动杆菌中,心胸外科为8株,约占19%,神经外科7株,约占17%,中心重症监护病房(ICU)6株,约占14%。当最小抑菌浓度(MIC)为300mg/L时,抑制菌株量最多,当MIC为500mg/L时,抑制菌株中阳性菌株所占比例最高,为83.33%。结论多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药性增强与耐消毒剂基因qacE△1具有相关性,且在临床上存在5种分型,主要为A型,心胸外科、神经外科和中心ICU应该作为主要感染控制对象。     

肠球菌耐万古霉素基因及耐消毒剂基因检测的研究

目的 利用PCR技术检测南昌地区肠球菌所携带的耐万古霉素基因(vanA、vanB、vanC)和耐消毒剂基因(qacE△1-sul 1)的存在状况.方法 收集81株南昌市各三甲医院临床分离的肠球菌株,用纸片琼脂扩散法筛选出耐万古霉素肠球菌(VRE),从敏感、中介和耐受各组菌中,采取等比例分层抽取方式共抽取16株细菌,E-test法测定耐万古霉素肠球菌的MIC,PCR检测各菌株耐万古霉素基因(vanA、vanB、vanC)和耐消毒剂基因(qacE△1-sul 1).结果 16株细菌中药敏实验检出万古霉素耐受菌1株,而PCR检测出vanB阳性2株,vanA、vanC、qacE△1-sul 1均阴性.结论 南昌地区首次发现2株vanB阳性VRE,尚未发现耐消毒剂基因(qacE△1-sul 1)肠球菌,应引起医院感染监控部门高度重视.     

铜绿假单胞菌耐消毒剂-磺胺基因及β内酰胺类抗生素耐药相关基因研究

目的了解临床分离的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)耐消毒剂-磺胺基因(qacEΔ1-sul I)及β内酰胺类抗生素耐药相关基因存在状况。方法自临床分离的40株PA,采用聚合酶链反应(PCR)检测qacEΔ-su1I基因及12种β内酰胺类抗生素耐药相关基因(TEM、SHV、OXA-10群、CTX-M-1群、PER、VEB、GES、CARB、IMP、VIM、DHA和oprD2)。结果40株中qacEΔ1-su1I基因阳性19株(47.5%),CARB基因阳性18株(45.0%),oprD2基因缺失35株(87.5%),其余基因均阴性。结论临床分离的铜绿假单胞菌多重耐药严重,qacEΔ1-su1I基因及CARB基因携带率高,oprD2基因缺失严重。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对84消毒液抗性的试验研究

摘要 目的 研究临床分离出的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）对84消毒液的抗性,为做好医院环境消毒提供参考。方法 通过基因测定和最小杀菌浓度测定方法,对某医院临床分离的CRKP抗消毒剂基因携带情况和84消毒液抗性进行观察。结果 从临床分离的77株CRKP检出84消毒液抗性株为8株,阳性率为10.4%;从70株普通肺炎克雷伯菌中检出84消毒液抗性株为3株,阳性率为4.3%。84消毒液抗性菌株中抗消毒剂基因qacEΔ1-sul1阳性率为54.5%,非抗性菌株中该基因阳性率为10.5%。结论 部分CRKP已对84消毒液产生了轻度的抗性。抗消毒剂基因qacEΔ1-sul1与84消毒液的抗性之间存在一定的相关性。     

186株革兰阴性菌耐消毒剂基因携带情况及抗药性观察

目的研究临床分离的革兰阴性杆菌耐消毒剂基因及抗药性。方法用基因扩增技术和药敏试验方法,对临床分离的革兰阴性菌携带qacEΔ1-sull基因与耐药性进行了检测。结果分离自浙江省部分医院环境和病人感染标本的186株革兰阴性杆菌中,有81株携带qacEΔ1-sull基因,携带率为45.5%;其中鲍曼不动杆菌的携带率为70.0%。这些菌株对氨苄西林等19种临床常用抗菌药物耐药率均达60%以上,对美罗培南和阿米卡星耐药率分别为48.39%和30.65%。结论临床分离的革兰阴性菌耐消毒剂基因携带率较高,对临床常用抗菌药物普遍耐药。     

耐消毒剂基因qacEΔ1-sul1在CRE中的流行病学分析及其机制研究

摘要：目的 检测耐碳氢酶烯类药物的肠杆菌科细菌（以下简称CRE）中的的qacEΔl-sull基因，并对该基因在CRE的流行情况进行分析 方法 采用全自动微生物分析系统 VITEK 2-COMPACT 的鉴定卡、药敏卡进行细菌鉴定和药敏试验， 应用PCR 扩增法对qacEΔ1-sul1基因进行扩增，并测序分析 结果 检测15株耐碳氢酶烯药物的肺炎克雷伯杆菌中有14株携带 qacEΔl-sull耐消毒剂基因，检出率的阳性率为93%（14/15） 结论 耐消毒剂qacEΔl-sull基因极高的检出率表明肠杆菌科细菌对消毒剂的抗性极高,这种高抗性可导致医院常规消毒剂在正常规定使用浓度下无效,从而对环境耐药菌造成污染严重，此现象应引起医务人员对消毒剂浓度使用和医院感染的高度重视     

多重耐药革兰阴性杆菌耐药谱及其抗消毒剂基因检测

目的了解临床感染标本分离的多重耐药革兰阴性杆菌对临床常用抗菌药物耐药谱及其抗消毒剂基因携带状况。方法采用K-B试验法和聚合酶链反应检测法,对临床分离的多重耐药革兰阴性杆菌进行了药敏试验和qacE△1-sul1基因检测。结果临床分离的252株革兰阴性杆菌对常用抗生素耐药率普遍较高,且耐药谱广。在252株革兰阴性杆菌中,有197株qacE△1-sul1基因检测阳性,总阳性率为78.71%。结论临床感染标本分离的多重耐药革兰阴性杆菌qacE△1-sul1基因携带率比较高,对临床常用抗生素普遍耐药,应加强防范。     

医院感染铜绿假单胞菌耐消毒剂基因研究

目的:了解医院感染多重耐药铜绿假单胞菌的消毒剂与磺胺类抗生素耐药相关基因存在状况,探讨铜绿假单胞菌对医院常用消毒剂的耐药机制.方法;琼脂稀释法测定50株多重耐药铜绿假单胞菌及标准菌株对医院常用消毒剂的最低抑菌浓度,并用PCR法检测消毒剂耐药基因qacE△1-sul1.结果:50株多重耐药铜绿假单胞菌对医院常用消毒剂苯扎溴铵的最低抑菌浓度为8～32 pg/mL,高于标准菌株最低抑菌浓度(P<0.01);消毒剂耐药基因qacE△1-sul1阳性率100%.结论:铜绿假单胞菌对医院常用消毒剂苯扎溴铵耐药;消毒剂与磺胺类等抗生素耐药相关基因qacE△1-sul1携带率较高,细菌携带qacE△1-sul1基因是消毒剂耐药主要因素.     

社区和医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及耐消毒剂基因的检测

摘要 目的 〖JP3〗了解伤口分泌物分离的社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)与医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)的耐药特点,探讨其耐药基因及耐消毒剂基因的携带情况。方法 收集某院2016年1月-2017年12月伤口分泌物分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)76株,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测其耐药基因和耐消毒剂基因。结果 共分离到MRSA 76株,其中CA-MRSA 52株,HA-MRSA 24株。52株CA-MRSA对四环素、庆大霉素、红霉素的耐药率分别为36.54%、1.92%、86.54%,24株HA-MRSA对四环素、庆大霉素、红霉素的耐药率分别为50.00%、12.50%、75.00%,HA-MRSA和CA-MRSA中，耐药基因tetM、ermA及耐消毒剂基因(qacA/B)的携带率均较高。结论 伤口分泌物分离的CA-MRSA与HA-MRSA菌株耐药严重,均可携带多个耐药基因和耐消毒剂基因,应引起重视。     

鲍曼不动杆菌耐消毒剂-磺胺基因qacE△1-sulI的研究

目的研究临床分离鲍曼不动杆菌耐消毒剂qacE△1-sulI携带情况,探讨其传播机理。方法采用聚合酶链反应(PCR)分析方法,对某医院临床分离鲍曼不动杆菌携带qacE△1-sulI基因状况进行分析。结果从临床分离的92株鲍曼不动杆菌中,检出84株质粒上携带qacE△1-sulI基因,阳性率为91.3%。质粒接合实验结果显示,84株耐消毒剂基因阳性菌株中,有56株菌质粒为可接合质粒,其质粒均存在qacE△1-sulI基因。结论临床分离的鲍曼不动杆菌耐消毒剂基因携带率高,其质粒上携带可接合传递的qacE△1-sulI基因,提示耐消毒剂基因可通过质粒传播。     

医院环境分离致病菌对常用消毒剂的抗性

摘要 目的 研究医院环境中分离出的致病菌株对常用消毒剂的敏感性,为科学选择有效消毒剂提供依据。方法 检测苯扎溴铵、含氯消毒剂和碘伏对临床分离的致病菌株的最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）,与标准范围比较判断致病菌的抗消毒剂情况;采用聚合酶链反应（PCR）检测抗性基因qacE△1-sul1的携带情况。结果 自医院内环境中分离的多重耐药菌包括铜绿假单胞菌30株、肺炎克雷伯杆菌10株、鲍曼不动杆菌6株。其中铜绿假单胞菌占65.2%,远高于其他两种致病菌。25株铜绿假单胞菌检出qacE△1-sul1抗性基因,携带率为80.33%;肺炎克雷伯杆菌2株检出qacE△1-sul1抗性基因,携带率为20.00%,鲍曼不动杆菌抗性基因未检出。三者差异的比较具有统计学意义。结论 医院外环境中有多重耐药致病菌株的存在,部分菌种或个别菌株对常用消毒剂存在抗性。建议临床根据监测情况对消毒剂的时间浓度做适时调整,及时更换产生耐药菌株较多的消毒剂,做好环境清洁和手卫生消毒,减少致病菌耐药菌株的产生。     

临床分离肺炎克雷伯杆菌对消毒剂耐药性观察

摘要 目的 观察临床分离的肺炎克雷伯杆菌对常用消毒剂的耐药情况及抗消毒剂基因携带状况。方法采用琼脂扩散法和聚合酶链反应法,对96株临床肺炎克雷伯杆菌抗消毒剂和抗性基因携带情况进行检测。结果3种季铵盐和三氯生对96株肺炎克雷伯杆菌的MIC值均高于标准菌株,氯己定对96株肺炎克雷伯菌中的93株MIC值高于标准株。临床分离的肺炎克雷伯菌qacEΔ1和qacE携带率均为76.0%;qacE-qacEΔ1携带率为70.8%。qacE、qacEΔ1和sugE(c)阳性菌株对三氯生、溴化铵、苯扎氯铵和醋酸氯己定等消毒剂抗性较阴性菌株强。结论该医院临床分离的肺炎克雷伯杆菌对3类低效消毒剂显示出抗力增强的趋势,消毒剂抗性基因携带率也比较高,提示慎用低效消毒剂消毒关键性物品。     

大肠埃希菌连续分离株对消毒剂-磺胺耐药基因的研究

目的了解大肠埃希菌连续分离株对消毒剂-磺胺耐药基因存在情况和耐药性。方法应用聚合酶链反应法对大肠埃希菌耐药株对消毒剂和磺胺耐药基因进行检测与分析。结果经对连续分离的68株大肠埃希菌中,检测出消毒剂-磺胺耐药基因(qacE△1与sulⅠ)阳性41株,检出率为60.3%。结论临床连续分离大肠埃希菌耐药株消毒剂-磺胺耐药基因检出率较高,提示临床抗药菌株可能同时对消毒剂存在抗药性。     

葡萄球菌耐消毒剂基因qacA／B检测及临床意义

目的 了解临床分离的葡萄球菌mecA基因及耐消毒剂基因qacA/B的存在状况.方法 临床分离的40株葡萄球菌,分别用头孢西丁(30 μg)筛查法和聚合酶链反应(PCR)法检测mecA基因,同时采用PCR法检测其耐消毒剂基因qacA/B.结果 40株葡萄球菌中36株mecA基因阳性,占90.0%(36/40);11株检出qacA/B基因者均为mecA阳性葡萄球菌,其中10株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),1株为耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS),qacA/B阳性率为27.5%(11/40).结论 含qacA/B基因的葡萄球菌全部为mecA基因阳性,提示对临床常用消毒剂耐药的金黄色葡萄球菌同时也对甲氧西林耐药.因此检测葡萄球菌耐消毒剂基因,对合理选用消毒剂,控制葡萄球菌感染传播具有临床意义.     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌Ⅰ类整合子遗传标记及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因研究

目的 了解临床分离的耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPa)中Ⅰ类整合子及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因存在状况.方法 自临床分离28株IRPa,采用聚合酶链反应及序列分析的方法检测Ⅰ类整合子遗传标记(intI1和qacE△1-sul1基因)及18种β-内酰胺类抗生素耐药相关基因.结果 28株中,intI1、qacE△1-sul1、blaTEM、blaOXA-10群和blaCARB基因阳性株数(%)分别为21株(75.0%)、24株(85.7%)、20株(71.4%)、1株(3.6%)和1株(3.6%),经序列分析分别确认为blaOXA-10(GenBank注册号:AY841859)和blaCARB-3.25株(89.3%)oprD基因缺失,blaIMP、blaVIM、blaSHV、blaPER、blaVEB、blaGES、blaMIR、blaDHA、blaSPM、blaGIM、blaOXA-1群、blaOXA-2群、blaBEL-1、blaCTX-M-1群基因均阴性.结论 临床分离的IRPa中Ⅰ类整合子携带率很高,至少存在blaTEM、blaOXA-10和blaCARB-3种β-内酰胺酶基因,oprD基因缺失突变是其对亚胺培南耐药的主要原因.     

嗜麦芽窄食单胞菌耐消毒剂-磺胺基因和I类整合酶基因的研究

目的 了解临床分离嗜麦芽窄食单胞菌消毒剂-磺胺耐药基因(qacEΔ1-sulI)和I类整合酶基因(intI 1)的存在情况.方法 收集临床分离的27株嗜麦芽窄食单胞菌,采用PCR法检测qacEΔ1-sulI基因和I类整合酶基因.结果 27株嗜麦芽窄食单胞菌检出qacEΔ1-sulI基因4株,检出率为14.8%.I类整合酶基因8株,检出率为29.6%.结论 临床分离嗜麦芽窄食单胞菌携带qacEΔ1-sulI基因和intI 1基因.     

某传染病医院医疗污水中耐药及耐消毒剂基因检测

摘要 目的 了解传染病医院医疗污水中耐药基因及耐消毒剂基因的携带情况。方法 2020年8—9月,采集杭州市某传染病医院污水,对污水过滤富集并提取微生物基因组DNA,经PCR扩增检测医疗机构污水中微生物耐药基因和耐消毒剂基因。结果 该传染病医院医疗污水总余氯和微生物指标均符合GB 18466—2005《医疗机构水污染物排放标准》要求。从医疗污水中检出β-内酰胺类耐药基因IMP-1、Ⅰ类整合子基因intI1阳性,耐消毒剂基因qacEΔ1、qacEΔ1-sul1、merA等阳性。结论 该传染病医院医疗污水中均检出耐药基因和耐消毒剂基因,应加强医疗污水的监测和处理。     

阴沟肠杆菌Ⅰ类整合酶基因及质粒AmpC酶基因检测

目的明确我院临床分离的阴沟肠杆菌中Ⅰ类整合酶基因(int Ⅰ 1)、qacE△1-sul Ⅰ基因和质粒AmpC酶基因(AmpC MIR、AmpC DHA)存在状况.方法采用ATB药敏试验板微量肉汤法测定临床分离的20株阴沟肠杆菌对20种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测耐药基因.结果该20株菌呈现多重耐药,对亚胺培南和美罗培南均敏感,对阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻吩和头孢西丁完全耐药,头孢吡肟和复方新诺明的耐药率分别为25.0%和85.0%,对氨基糖苷类抗生素的耐药率在60.0%～90.0%之间,其余的耐药率在80.0%～95.0%之间.int Ⅰ 1、qacE△1-sul Ⅰ、MIR和DHA基因的阳性株数(%)分别为19株(95.0%)、17株(85.0%)、17株(85.0%)、1株(5.0%).结论我院临床分离的阴沟肠杆菌多重耐药严重,int Ⅰ 1、qacE△1-sulⅠ和MIR基因携带率很高.在阴沟肠杆菌中检出intⅠ 1、qacE△1-sulⅠ以及质粒型AmpC MIR基因在我国大陆均属首次报道.