中医促进ABCA1表达抗动脉粥样硬化研究进展

胆固醇过多聚积于动脉管壁可致动脉粥样硬化,胆固醇逆转运(Reverse cholesterol transport,RCT)是目前唯一能清除多余胆固醇的途径,大量的动物实验及临床试验已经证实促进胆固醇逆转运可预防及治疗动脉粥样硬化,三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ATP-binding cassette transporter atherosclerosis A1,ABCA1)作为胆固醇逆转运的"启动子",是关键的起始环节,为动脉粥样硬化的治疗提供了新的突破点,而中医在此方面也做了颇多研究及贡献,现就中医通过干预ABCA1治疗动脉粥样硬化做一综述。     

几种常见天然化合物对ABCA1表达影响的研究进展

动脉粥样硬化是心血管疾病的主要病理基础,细胞内胆固醇蓄积引起的泡沫细胞形成是导致动脉粥样硬化发展的重要因素。三磷酸腺苷结合盒运转体A1(ABCA1)在胆固醇代谢中有着重要作用。许多天然化合物如葛根素、姜黄素、芍药醇等能够增加ABCA1的表达,促进胆固醇流出,减少细胞内胆固醇蓄积,抑制泡沫细胞形成。本文主要综述了天然化合物对ABCA1表达调控及动脉粥样硬化的影响,为心血管疾病的预防与治疗提供新的思路。     

ABCA1在胆固醇代谢和动脉粥样硬化中的作用

血脂异常与冠状动脉粥样硬化（AS）密切相关,血脂异常患者存在着血管内皮功能障碍、C反应蛋白（CRP）增高等致动脉粥样硬化的多种危险因素。胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、甘油三酯（TG）和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL—C）增高是冠心病的危险因素,其中以LDL-C最为重要,而低高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）则被认为是冠心病的保护因素,     

ABCA1基因C69T多态与冠心病关联研究

目的　探讨ATP BindingCassetteTransporter 1(ABCA1)基因C69T多态与汉族冠心病(CHD)的关系。方法　以2 64例CHD患者和2 78例性别、年龄匹配的正常人为对象进行病例 对照研究;采用PCR RFLP技术对ABCA1基因C69T多态位点进行分析。结果　ABCA1基因C69T多态在CHD组与对照组分布无显著性差异(P >0 .0 5 ) ;CC基因型和T等位基因携带者间各项血脂水平及心血管事件发生率比较均无差异显著性。结论　ABCA1基因C69T多态性与汉族人群CHD不存在关联。     

慢性肾功能不全通过下调ABCA1表达影响巨噬细胞内胆固醇含量

目的 探讨慢性肾功能不全患者巨噬细胞内胆固醇含量的变化及ATP结合盒受体A1(ATP binding cassette transporter-A1,ABCA1)的表达情况.方法 选取2010年8月至2012年3月重庆医科大学第一附属医院住院的慢性肾功能不全(chronic renal failure,CRF)患者30例和健康对照组20例.分离外周血单核细胞诱导贴壁巨噬化,油红O染色鉴定,应用酶法测定巨噬细胞内胆固醇含量,应用real-time PCR与Western blot方法测定细胞ABCA1的mRNA及蛋白表达.结果 慢性肾功能不全患者巨噬细胞内胆固醇含量明显高于健康对照组(P＜0.01),ABCA1在慢性肾功能不全患者巨噬细胞中的mRNA与蛋白表达显著低于健康对照组(P＜0.01).结论 慢性肾功能不全患者巨噬细胞的胆固醇含量明显增加,胆固醇含量增加与慢性肾功能不全患者ABCA1的表达下调有关.     

二苯乙烯苷通过影响APP 代谢途径减少斑块沉积进而影响学习记忆功能

目的：评价二苯乙烯苷（2,3,4’,5-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside,TSG）在长期给药过程中对APP/PS1 小鼠学习记忆功能的影响及其对阿尔茨海默病病理改变的影响,同时比较其与多奈哌齐药效学及药理作用的不同。方法：给APP/PS1 小鼠灌胃给药（TSG,50 mg·kg-1,100 mg·kg-1;donepezil,1 mg·kg-1）在给药后用Morris 水迷宫实验,新物体识别实验,自主活动,评价小鼠的学习记忆功能及小鼠的活动性。硫磺素染色和Aβ40/42 免疫荧光共定位观察全脑斑块沉积,免疫组化染色观察皮层和海马部位斑块沉积情况,ELISA 方法检测脑内可溶及不可溶Aβ42 的含量,用Western Blot 方法检测皮层及海马部位Aβ生成及代谢途径的关键酶的含量,以此来判断TSG 药物在改善老年痴呆的作用及其作用的关键点。结果：Morris 水迷宫实验结果显示APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比逃避潜伏期明显延长,给药后逃避潜伏期明显缩短,TSG 与DON 相比,逃避潜伏期更短。新物体识别实验显示APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比分辨指明显缩短,给药后分辨指数提高,TSG 与DON 相比,分辨指数明显提高。硫磺素染色与Aβ40/42 免疫荧光共定位,斑块能够完全重合,说明斑块的主要成分是Aβ40/42,实验结果统计分析APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比脑内斑块显著,给药后全脑斑块减少,以小剂量最为显著,Don 也能减少斑块沉积,减少程度较TSG 稍差。免疫组化染色皮层斑块沉积,APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比皮层斑块显著,给药后皮层斑块减少;免疫组化染色海马斑块沉积,APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比海马斑块显著,给药后海马斑块减少。另外Western Blot 检测了Aβ代谢通路,前体蛋白和关键代谢酶,给药后APP,BACE-1,PS1 表达量减低。用ELISA 方法检测脑内可溶及不可溶性Aβ42 的含量,结果显示APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比可溶性Aβ42 含量明显增高,给药后有一定程度减低;不可溶性Aβ42,APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比明显增加。给药后不可溶性Aβ42明显减低,DON 对不可溶性Aβ42 的脑内含量减低,效果与TSG 相比不明显。结论：TSG 在长期给药后能够改善小鼠的空间学习记忆功能,对斑块所导致的记忆功能减退,有显著的提高作用,而与TSG 相比DON 的改善学习记忆能力更为显著。TSG 对小鼠的活动能力无不良影响。TSG 能够减少斑块沉积,其中不可溶性Aβ42 减低最为明显。进一步研究Western Blot 结果显示TSG 能够减少APP 的表达,在板块生成途径能够影响关键代谢酶BACE-1 和PS1。TSG 长期药效优于DON。     

miR-19b对巨噬细胞ABCA1表达的影响

目的观察miR-19b对巨噬细胞ABCA1表达的影响。方法在THP-1源性巨噬细胞中转染miR-19b模拟物（mimic）和抑制物（inhibitor）,荧光定量PCR检测ABCA1 mRNA,Western blot检测ABCA1蛋白水平。结果转染miR-19b mimic后,巨噬细胞ABCA1 mRNA及蛋白水平均显著下调;转染miR-19b inhibitor后ABCA1蛋白则明显上调,但ABCA1 mRNA无变化。结论 miR-19b下调巨噬细胞ABCA1的表达。     

汉族冠心病与ABCA1基因C69T多态性的相关研究

目的 探讨ATP-Binding Cassette Transporter 1(ABCA1)基因C69T多态与汉族冠心病(CHD)的关系.方法 以264例CHD患者和278名性别、年龄匹配的正常人为对象进行病例-对照研究;采用PCR-RFLP技术对ABCA1基因C69T多态位点进行分析.结果 ABCA1基因C69T多态在CHD组与对照组分布差异无统计学意义(P＞0.05);CC基因型和T等位基因携带者患者间各项血脂水平及心血管事件发生率比较差异均无统计学意义.结论 ABCA1基因C69T多态性与汉族人群CHD不存在关联.     

miR-146a促进动脉粥样硬化斑块形成调控机制研究

目的 探讨miR-146a对动脉粥样硬化斑块的影响及其机制。方法 利用miR-146a增强剂（miR-146a mimic）和miR-146a拮抗剂（miR-146a inhibitor）转染大鼠外周血单核巨噬细胞,转染成功后予巨噬细胞泡沫化。油红O染色和脂质染色的半定量分析miR-146a对细胞的脂质堆积情况的影响。Western blot检测胆固醇酯水解酶（cholesteryl ester hydrolase,CEH）、ABCA1和ABCG1的表达情况。结果 Western blot检测显示,miR-146a mimic转染组的CEH表达明显降低,miR-146a inhibitor转染组的ABCA1和ABCG1表达量较对照组和miR-146a mimic转染组明显增多。油红O染色显示miR-146a mimic转染组、对照组和miR-146a inhibitor转染组的阳性细胞比例分别为82.1%±3.1%、73.2%±0.16%和16.25%±2.1%。结论miR-146a能够抑制大鼠外周血单核巨噬细胞细胞内CEH的表达,进而阻碍游离胆固醇的外流,最终导致动脉粥样硬化斑块的形成。     

可可粉抑制雌性ApoE-/-小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块的形成

目的研究可可粉对雌性ApoE-/-小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块形成的影响。方法以雌性ApoE-/-小鼠为研究对象,按照随机对照表将小鼠（45只）随机分为3组:对照组（高脂高胆固醇饮食）、低剂量组（高脂高胆固醇+0.2%可可粉饲喂）、高剂量组（高脂高胆固醇+2%可可粉饲喂）,每组各15只。相应饮食饲喂小鼠12周,观察各组小鼠体重、肝脏重量、肝脏重量/体重;检测小鼠血浆血脂指标（TG、TC、LDL-C和HDL-C）的水平;HE和油红O染色分析小鼠主动脉的病理变化及斑块面积。结果 3组小鼠的体重、肝脏重量、肝脏重量/体重、TG、TC和主动脉根部斑块面积差异均无统计学意义（P>0.05）;与对照组比较,低、高剂量组的HDL-C水平显著升高,LDL-C水平显著降低,主动脉斑块面积显著减少。结论可可粉能够有效抑制雌性ApoE-/-小鼠主动脉动脉硬化斑块形成,这可能与其改善机体血脂水平有关。     

褪黑素通过PPARγ-LXRα调控THP-1巨噬细胞ABCA1表达

目的 研究褪黑素对巨噬细胞ABCA1受体表达的影响及作用机制.方法 使用THP-1细胞体外培养PMA诱导分化为巨噬细胞,给予不同浓度的褪黑素(0、50nmol/L、100nmol/L、500nmol/L和1μmol/L)干预细胞,RT-PCR和Western blot法分别检测巨噬细胞ABCA1和LXRα 的mRNA和...     

连翘苷对H1N1病毒株感染小鼠的作用

目的 研究连翘苷对H1N1病毒株感染小鼠的影响。方法 60只H1N1病毒株感染小鼠经随机数字法分为感染组、连翘苷组、连翘苷+罗唑利宾(Loxoribine)[Toll样受体7(TLR7)/髓样分化因子88(MyD88)信号通路激活剂]组,各20只;20只健康小鼠滴鼻等体积0.9%氯化钠溶液,设为正常组。流式细胞仪检测外周血CD4＋、CD8＋T淋巴细胞占比;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测肺组织病毒相对表达量;Western blot法检测肺组织TLR7、MyD88蛋白表达量。结果 与感染组比较,连翘苷组外周血CD8＋T淋巴细胞占比、肺组织病毒相对表达量、TLR7、MyD88蛋白表达量降低,外周血CD4＋T淋巴细胞占比、CD4＋/CD8＋升高(P＜0.05);与连翘苷组比较,连翘苷+Loxoribine组外周血CD8＋T淋巴细胞占比、肺组织病毒相对表达量、TLR7、MyD88蛋白表达量升高,外周血CD4＋T淋巴细胞占比、CD4＋/CD8＋降低(P＜0.05)。结论 连翘苷可抑制H1N1病毒株感染小鼠病毒复制,改善肺功能及免疫功能,可能通过抑制TLR7/MyD88信号通路活性降低炎性细胞因子水平,从而保护H1N1感染小鼠。     

ABCA1与PPARs在胆固醇流出中的作用及相关性

巨噬细胞内胆固醇代谢障碍是动脉粥样硬化(atheroscle-rosis,AS)的重要发病机制。胆固醇从周围组织中的清除是预防AS的关键步骤。ATP结合盒转运体A1(ATP-binding cassettetransporter A1,ABCA1)是ATP结合盒转运体(ABC)超家族的成员之一。ABCA1能促进细胞内胆固醇流出而参与胆固     

不同剂量血府逐瘀汤对动脉粥样硬化小鼠主动脉斑块负荷及CXCL16和MMP-1表达水平的影响

目的:探讨血府逐瘀汤对动脉粥样硬化小鼠主动脉斑块负荷及炎症因子CXCL16、MMP-1表达的影响。方法:APOE基因敲除小鼠高脂饲料喂养8周后,油红O染色证实造模成功。将30只小鼠随机分为血府逐瘀汤高剂量组、低剂量组、对照组。4周后对每组主动脉根部切片的斑块面积进行测定,检测主动脉组织中CXCL16、MMP-1蛋白及mRNA的表达水平。结果:三组小鼠主动脉根部AS斑块平均面积为(0.047±0.019)、(0.073±0.018)、(0.079±0.011)mm^(2),高剂量组斑块面积小于低剂量组(P<0.05),低剂量组斑块面积小于对照组(P>0.05)。三组CXCL16蛋白的相对水平分别为(0.422±0.065)、(0.640±0.070)、(0.849±0.054),差异均有统计学意义(P<0.001)。MMP-1蛋白的相对水平分别为(0.260±0.031)、(0.535±0.050)、(0.736±0.039),差异均有统计学意义(P<0.001)。CXCL16mRNA相对表达水平分别为(0.407±0.023)、(0.725±0.044)、(0.823±0.038),差异均有统计学意义(P<0.001)。MMP-1mRNA相对表达水平分别为(0.392±0.034)、(0.513±0.033)、(0.668±0.046),差异均有统计学意义(P<0.001)。结论:血府逐瘀汤抑制AS小鼠主动脉斑块CXCL16、MMP-1的表达,高剂量干预下可降低斑块负荷。     

不同血液净化方式终末期肾病患者血清对体外巨噬细胞ABCA1表达的影响

目的 观察终末期肾病维持性透析(MHD)患者血清对巨噬细胞ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达的影响,并探讨不同血液净化方式对其的干预作用.方法 采集血液透析(HD)患者(n=23)、血液透析滤过(HDF)患者(n=17)和健康对照者(n=23)空腹静脉血并制备血清.全自动生化分析仪测量血脂与hs-CRP水平,ELISA法检测血清TNF-α、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、IL-6水平.将血清与THP-1源巨噬细胞共培养,RT-PCR检测ABCA1 mRNA表达,蛋白质印迹法检测ABCA1、STAT3、p-STAT3蛋白表达.结果 MHD患者血高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、载脂蛋白A-Ⅰ (ApoA-Ⅰ)低于对照组(P＜0.05),hs-CRP、TNF-α、MCP-1、IL-6高于对照组(P均＜0.05).HD治疗前及HDF治疗前患者血清干预的巨噬细胞ABCA1、STAT3及p-STAT3水平差异无统计学意义,但两组ABCA1水平均低于对照组(P＜0.05),STAT3及p-STAT3水平与对照组比较差异无统计学意义.HD治疗后与HD治疗前相比,ABCA1、STAT3及p-STAT3水平差异无统计学意义;HDF治疗后与HDF治疗前及HD治疗后比较,ABCA1、STAT3及p-STAT3水平上升,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 HDF治疗较HD更能上调巨噬细胞ABCA1表达,增强其抗炎、促胆固醇流出作用,其作用机制可能与激活STAT3信号通路有关.     

中药抑制动脉粥样硬化MCP-1表达的实验研究进展

单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractantp rotein-1,MCP-1）是趋化因子CC亚家族成员之一,大量研究表明,单核细胞的趋化主要是通过MCP-1实现。多种物质及细胞因子都可以诱导MCP-1表达,而MCP-1也可以在多种细胞尤其是构成动脉粥样硬化病变的3种主要细胞-单核／巨噬细胞、     

血管内皮细胞中ABCA1的表达及其在动脉粥样硬化发生中的意义

目的 以人的血管内皮细胞ECV304为靶点，研究Ox-LDL和8-Br-cAMP对ATP-结合盒转运子Al(ABCAl)、细胞间粘附因子-1(ICAM-1)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)基因mRNA和蛋白质表达的影响，阐明ABCAI基因在动脉粥样硬化(AS)形成中的可能机制。方法 复苏培养血管内皮细胞，无血清培养基培养静止12h后．分别加入Ox-LDL(30ng／m1)、8-Br-cAMP(0．5mmol／L)刺激3、6、12、24h，设未加刺激同时孵育24h的细胞为阴性对照组，以RT-PCR和Westem蛋白印迹法检测ABCA1、ICAM-1及MCP-1 mRNA和蛋白质表达量。结果 血管内皮细胞ECV304在给予Ox-LDL刺激后，ABCA1、ICAM-1、MCP-1的mRNA和蛋白质水平均增高，ICAM-1的高峰时间在12h，其余高峰时间在6h；在8-Br-cAMP的刺激下，ABCAl、ICAM-1、MCP-1的mRNA和蛋白质水平也增高。高峰时间均在6h。结论 公认的致AS因素Ox-LDL可通过引起血管内皮细胞ECV304中炎性细胞因子ICAM-1、MCP-1 mRNA及蛋白质水平增加，参与AS的形成，同时抗AS基因ABCA1在Ox-LDL刺激下代偿增加，具有AS保护作用。cAMP不仅可增加ABCA1的表达，而且可增加ICAM-1、MCP-1表达。     

氧化型低密度脂蛋白对巨噬细胞ABCA1表达及功能的影响

目的探讨氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)对巨噬细胞内ABCA1表达及功能的影响。方法分别以100μg/ml乙酰化低密度脂蛋白(acLDL)和oxLDL温育RAW264.7细胞24 h,应用胆固醇外排实验、半定量RT-PCR、Western blot检测oxLDL及acLDL对小鼠巨噬细胞内ABCA1功能、mRNA及蛋白质表达的影响。结果加入载脂蛋白apoA-I 24 h后,acLDL负荷的胆固醇约(37.65±2.29)%被排出细胞,而oxLDL组仅排出(9.78±2.16)%,差异有显著性意义(P<0.05);oxLDL及acLDL均可使ABCA1 mRNA水平升高3倍左右,并分别使其蛋白质表达水平提高(1.57±0.18)倍和(1.26±0.09)倍,两组相比,差异无显著性意义(P>0.05)。结论oxLDL胆固醇负荷对ABCA1表达及功能的影响不一致,推测还存在其他调控ABCA1功能的机制使oxLDL负荷的胆固醇外排障碍。     

血管内皮细胞中ABCA1的表达及其在动脉粥样硬化发生中的意义

目的 以人的血管内皮细胞ECV304为靶点,研究Ox-LDL和8-Br-cAMP对ATP-结合盒转运子A1(ABCA1)、细胞间粘附因子-1(ICAM-1)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)基因mRNA和蛋白质表达的影响,阐明ABCA1基因在动脉粥样硬化(AS)形成中的可能机制。方法 复苏培养血管内皮细胞,无血清培养基培养静止12 h后,分别加入Ox-LDL (30 ng/ml)、8-Br-cAMP (0.5 mmol/L)刺激3、6、12、24 h,设未加刺激同时孵育24 h的细胞为阴性对照组,以RT-PCR和Western蛋白印迹法检测ABCA1、ICAM-1及MCP-1 mRNA和蛋白质表达量。结果 血管内皮细胞ECV304在给予Ox-LDL刺激后,ABCA1、ICAM-1、MCP-1的mRNA和蛋白质水平均增高,ICAM-1的高峰时间在12 h,其余高峰时间在6 h;在8-Br-cAMP的刺激下,ABCA1、ICAM-1、MCP-1的mRNA和蛋白质水平也增高,高峰时间均在6 h。结论 公认的致AS因素Ox-LDL可通过引起血管内皮细胞ECV304中炎性细胞因子ICAM-1、MCP-1 mRNA及蛋白质水平增加,参与AS的形成,同时抗AS基因ABCA1在Ox-LDL刺激下代偿增加,具有AS保护作用。cAMP不仅可增加ABCA1的表达,而且可增加ICAM-1、MCP-1表达。