缺血预处理对兔离体心脏长期保存的心肌保护作用

目的　观察缺血预处理对离体心脏长期保存的心肌保护作用。方法　将 2 4只家兔随机分为 4组 ,每组 6只 ,分成空白对照组、预处理组、保存组和预处理后保存组。离体兔心脏用Langendorff装置灌注稳定后 ,分别给予缺血预处理后再灌注、心脏保存 1 8h后再灌注及缺血预处理后再经 1 8h保存后再灌注 60min ,观察左室收缩功能的恢复率、冠脉回流液中碱性磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶 (LDH)的浓度以及心肌形态结构改变。结果　预处理组同空白对照组相比 ,各项指标差异无显著性 (P >0 .0 5)。单纯保存组同对照组相比 ,左室收缩功能明显减弱 ,冠脉回流液中心肌酶的漏出明显增加 ,光镜及电镜观察心肌损伤严重。而经预处理后再保存组 ,左室收缩功能的恢复率较单纯保存组有明显提高 [(51 .9± 7.5) %比 (36 .6± 4 .9) % ,P <0 .0 5] ,心肌酶漏出明显减少 [CK :(31 2± 52 )IU/L比 (642± 1 0 8)IU/L ;LDH :(2 9± 9)IU/L比 (76± 1 0 )IU/L ,P <0 .0 5] ,光镜及电镜观察 ,心肌损伤程度明显减轻。结论　缺血预处理过程本身对心肌细胞无明显损伤 ,是比较安全的 ;缺血预处理对离体心脏长期保存有明显的保护作用     

环磷酸腺苷信号通路在二氮嗪预处理中对离体鼠心肌的保护作用

目的研究离体大鼠心肌经二氮嗪预处理(DPC)后环磷酸腺苷(cAMP)及环磷酸腺苷依赖蛋白激酶(PKA)表达的变化,探讨cAMP信号通路在DPC心肌保护作用中可能的机制。方法将40只Wistar大鼠建立离体心脏Langendorff灌注模型,随机分成4组,缺血再灌注组(I/R组,n=10):在心脏平衡灌流30 min后,缺血30 min再灌注K-H液1 h;二氮嗪预处理组(DPC组,n=10):在心脏平衡灌流10 min后,给予含二氮嗪(100μmol/L)的K-H液灌注5 min,再复灌不含二氮嗪的K-H液5 min后,再给予含二氮嗪的K-H液灌注5 min,再复灌不含二氮嗪的K-H液5 min,然后缺血30 min,再灌注K-H液60 min;空白对照组(对照组,n=10):用等量盐水代替二氮嗪,过程同DPC组;二甲基亚砜组(DMSO组,n=10):用DMSO代替二氮嗪,过程同DPC组。取缺氧前和复灌30 min后的冠脉流出液,测定肌酸激酶(CK)的活性,心肌丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,比较各组心肌梗死范围、心肌组织cAMP和环磷酸腺苷PKA含量的变化。结果心肌组织中MDA含量DPC组较I/R组明显减少(8.28±2.04 nmol/mg vs.15.52±2.18 nmol/mg,q=11.761,P0.05),SOD含量明显增加(621.39±86.23 U/mg vs.477.48±65.20 U/mg,q=5.598,P0.05);复灌30 min后DPC组冠脉流出液CK活性较I/R组明显减少(82.55±10.08 U/L vs.101.64±19.24 U/L,q=5.598,P0.05);心肌梗死面积明显减少(5.63%±9.23%vs.17.58%±5.76%,q=6.176,P0.05)。心肌组织cAMP含量DPC组较I/R组明显增加(0.64±0.07 pmol/g vs.0.34±0.05pmol/g,q=14.738,P0.05);PKA含量DPC组较I/R组明显增加[17.13±1.57 pmol/(L.min.mg)vs.12.85±2.01 pmol/(L.min.mg),P0.05]。I/R组与DMSO组、对照组上述指标比较均差异无统计学意义(P0.05)。结论 DPC能增加心肌组织中cAMP、PKA的产生和释放,拮抗氧自由基,减轻心肌I/R损伤,cAMP信号通路可能参与DPC保护机制的触发过程。     

超极化心脏保存液对离体大鼠心脏低温保存的保护作用

目的　探讨含K 通道开放剂的心脏保存液(HCS液)对大鼠离体心脏的保存作用。方法　将24只SD大鼠随机平均分为 3 组,分别用 HCS液、UW液、K H液对心脏进行保存。采用Langendorff心脏灌注和工作模型装置进行心脏功能测定,比较 24h后心功能恢复率以及细胞酶学、心肌含水量、pH值变化和能量变化,观察心肌超微结构改变。结果　心脏保存24 h后, K H组左心室功能损伤严重,UW组及HCS组左心室功能损伤较轻。HCS组冠状动脉流量(CF)恢复率较 K H组、UW组好;HCS组冠脉回流液中乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CPK)含量及心肌含水量与UW组比较,差异无统计学意义;HCS组 pH值变化最小, ATP含量最高;HCS组心脏复跳时间与UW组基本相同; HCS组心肌保存良好。结论　HCS保存液对大鼠心脏的保存在 24 h内有明显的保护作用,心脏功能恢复率能达到UW液的水平,在能量保护、改善酸中毒方面则优于UW液。     

应用钙离子拮抗剂保护离体肾的实验研究

目的 探讨钙离子拮抗剂对离体肾的保护作用。方法 以3月龄的日本纯种大耳兔为实验对象,分为正常组、实验对照组和实验组,实验对照组将肾脏置于4℃高渗枸橼酸盐腺嘌呤器官保存液（HC－A）中保存24h,实验组将肾脏置于4℃含维拉帕米的HC－A液中保存24h。正常组肾切取即刻测定肾细胞线粒体内钙离子及肾组织中三磷酸腺苷（ATP）的含量;实验对照组和实验组保存24h后测定肾细胞线粒体内钙离子及肾组织中ATP的含量。结果 与肾脏切除后立即检测组相比,实验对照组肾细胞线粒体内Ca∧2＋含量明显上升（P＜0．01）,ATP明显下降（P＜0．01）;实验组上述改变可得以显著改善（P＜0．01）。结论 在离体肾保存中,应用钙离子拮抗剂维拉帕米可阻止Ca∧2＋进入细胞线粒体内,防止能量消耗,从而保护离体肾。     

11,12-EET对未成熟离体兔心的长时间保存作用

目的 观察11，12-EET(11，12-epoxyeicosatrienoic acid)液对未成熟兔离体心脏的保护作用。方法 将48只未成熟离体兔心按随机分配原则分成对照组(24只)和EET组(24只)，对照组保存心脏采用St.Thomas No.2液为停搏液及保存液，EET组采用St.Thomas No.2液 11，12-EET为停搏液及保存液，分别保存心脏8h、16h、24h。利用非循环式Langendorff灌注装置测定各组心脏保存前及保存后再灌注30min(37℃)的左心室变化压(LVDP)、舒张末期压(LVEDP)、最大压力变化速率( dp/ptmax)和冠状动脉流量(CBE)，并测定心律失常评分、心肌肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)含量及观察心肌超微结构的改变等指标。结果 (1)EET组各保存时间的心功能恢复率、心肌水肿程度、心律失常评分均好于相应对照组；CK、LDH及心肌超微结构的改变亦明显优于对照组。(2)心脏保存16h后，EET组的心功能恢复率、心律失常评分基本接近心脏保存之前的测定值，而对照组则明显减低。(3)心脏保存24h，EET组心脏全部复跳，对照组5只心脏不能复跳。结论 St.Thomas No.2液中加入11，12-EET可延长对未成熟兔离体心脏的保存时间并增强其保存效果。     

腺苷预处理对心肌细胞能量代谢和超微结构的影响

目的：为寻找更有效的心肌保护方法,观察腺苷预处理时人心肌细胞能量代谢和超微结构的变化。方法：将主动脉阻断时间在６０min以上的心脏直视手术病人１６例,随机均分为腺甘预处理组和对照组。分别于麻醉后,主动脉阻断后６０min 及主动脉开放后３０min取部分心肌组织测定三磷酸腺苷（ATP)及能量储备（ＥＣ）,并观察超微结构变化。结果:腺苷预处理组心肌细胞ＡＴＰ含量及ＥＣ值明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）,电镜见心肌损损亦明显减轻。结论：腺苷能模拟缺血预处理效应,明显减轻缺轿心肌的能量消耗,保护线粒体的结构和功能,从而证实其对缺血心肌具有保护作用。     

硫化氢在兔离体心脏保存中的保护作用

目的 研究硫化氢(H2S)在兔离体心脏低温保存中的作用,并探讨其作用机制.方法 获取40只大白兔的离体心脏,应用Langendorff灌注装置对兔离体心脏分别进行灌注后保存.根据离体兔心灌注和保存液的不同,分为5组,每组8只.对照组:单纯Krebs-Henseleit(K-H)液;硫氢化钠(NariS)组:K-H液中加入1 μmol/L的NariS(H2S的供体);NariS+格列本脲(G1i)组:K-H液中加入1 μmol/L的NariS和10 μmol/L的Gli;G1i组:K-H液中加入10 μmol/L的Gli;STH组:单纯St.Thomas液.各组心脏在灌注和保存6 h后,留取心脏标本,检测各组兔离体心脏低温保存6 h后心功能恢复率、心脏复跳时间、心肌三磷酸腺苷(ATP)含量和含水量变化,使用电子显微镜观察心尖部组织的结构变化.结果 心脏保存6 h后,NariS组心脏复跳时间最短、心功能恢复率、心肌ATP含量最高,均优于STH组,但差异无统计学意义(P＞0.05);与NariS+Gli组、Gli组和对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).NariS组左心室功能和结构损伤较轻,其次是STH组,NariS+Gli组、Gli组及对照组的左心室功能及心肌组织结构损伤严重.结论 硫化氢在兔离体心脏低温保存6 h内具有良好的保护作用.开放KATP通道可能是硫化氢发挥保护作用的重要机制.     

改良FWM心肌保存液对离体鼠心低温保存效果

目的 探讨改良FWM心脏保存液对离体鼠心低温保存效果.方法 20只雄性Wistar大鼠随机分为4组:对照组、改良FWM液组、HTK液组和K-H组.除对照组外,其余各组取大鼠心脏后,立即分别用各自4℃保存液灌注至心脏停搏,并置于相应的4℃心肌保护液中保存8 h,使用Langendorff模型测定心脏功能、检测冠脉流出液的心肌酶、观察心肌的形态学改变以评价各组心肌保护效果.结果 与对照组比较,各实验组心功能指标均有明显下降.HTK组LVDP、dp/dt<,max>、dp/dt<,min>,均低于改良FWN组(P<0.01).而HTK组CF的高于改良FWM组(P<0.05)和K-H组(P<0.01).HTK组GOT、LDH、CK、CTNI、CK-MB、GPT漏出量也高于改良FWM组(P<0.01).电镜显示改良FWM组形态学无明显改变仅偶见内质网扩张;而HTK组心肌肌纤维疏松、线粒体轻度水肿、内质网轻度扩张、间质轻度水肿.结论 离体鼠心低温保存8 h后,心肌功能均有很大程度下降.改良FWM液对离体鼠心的低温保存效果略优于HIK液.     

左旋卡尼汀对离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨左旋卡尼汀增补于停搏液中对离体鼠心再灌注损伤的保护作用。方法将32只SD大鼠随机分为左旋卡尼汀3个剂量(2．5、5．0、10．0 mmol／L)组和对照组。离体鼠心在改良的Langendorff灌注模型上30 min预灌注,120 min缺血、60 min再灌注。缺血前及再灌注期间测定血流动力学指标、心肌超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量和三磷酸腺苷(ATP)水平。电镜观察心肌超微结构。结果再灌注60 min后,左旋卡尼汀5 mmol／L剂量组和10 mmol／L剂量组与对照组相比,冠脉流量(CF)[(68．39±12．71)％、(72．27±6．27)％比(44．94±13．26)％]、左室收缩压(LVSP)[(73．04±3．32)％、(77．8±3．80)％比(62．29±4．14)％]、左室舒张末压(LVEDP)[(0．38±0．01)、(0．36±0．01)比(0．43±0．01)mmHg(1mmHg=0．133 kPa)]、左室压力变化速率(+dp／dt)[(69．66±0．92)％、(71．34±0．66)％比(62．16±1．21))％]、(-dp／dt) [(68．39±12．71)％、(72．27±6．27)％比(44．94±13．26)％],其差异均有统计学意义(P＜0．01)。心肌超微结构的改善,也优于对照组,尤其是10 mmol／L剂量组,2．5 ml／L组没有变化。左旋卡尼汀5 mmol／L剂量组和10 mmol／L剂量组丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(19．04±0．41)、(17．60±0．53)nmol／mg蛋白比(27．36±1．23)nmol／mg蛋白,P＜0．01),超氧化物歧化酶(SOD) [(218．20±14．91)、(238．63±7．61)U／mg蛋白比(141．80±15．17)U／mg蛋白]含量和三磷酸腺苷(ATP)水平[(3．83±0．20)、(5．26±0．18)μmol／L比(1．36±0．08)μmol／L]显著高于对照组(P＜0．01)。结论左旋卡尼汀(5～10 mmol／L)增补于停搏液中可减轻心肌缺血再灌注损伤,具有良好的心肌保护作用并在一定范围内呈剂量依赖性,10mmol／L剂量组心肌保护效果最佳。     

持续低流量灌注对离体鼠心的保护作用

目的 比较低温静置保存和持续低流量灌注对离体鼠心的保护作用.方法 将24只SD雄性大鼠随机分成4组(n=6),根据保存技术和保存液的不同分为H1、H2、F1、F2组.4℃条件下,F1、H1组心脏分别浸于FWM液(阜外改良液)和HTK液中保存8 h;F2、H2组心脏以10cm H2O的压力分别持续灌注FWM液和HTK液8 h.比较复灌后各组心功能恢复率、心肌含水量、心肌酶漏出量及光镜心肌结构.结果 复灌后,F1组心脏均未复跳,心肌含水量和肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)漏出量分别为(84.1±1.2)%、(16.2±7.4)IU/L、(86.1±10.6)IU/L,明显高于其余3组(P＜0.01).H2组心率、左室发展压、心率室内压乘积、冠脉流量恢复率为(80.2±5.3)%、(77.7±3.4)%、(63.8±3.1)%、(54.6±6.0)%,心肌含水量及心肌酶漏出量要低于其余各组(P＜0.05).结论 持续低流量灌注技术对心肌的保护作用优于低温静置保存技术;HTK液对心肌的保护作用优于FWM液.     

细胞内液型胶体液HBS对离体心脏的长期保存作用

探讨自制的含组氨酸、Ｂｉｍａｋａｌｉｍ的细胞内产体液对离体心脏的保存作用。方法：”健康性ＳＤ大鼠１６只，体重２４０－２６０ｇ。随机均分为两组，采用微量灌注技术，分别用ＨＢＳ和托马斯停搏液４℃保存离体鼠心２４小时，再灌注６０分钟进行比较研究。     

不同浓度硫化氢对离体大鼠心脏低温保存效果的研究

目的探讨大鼠离体心脏在含有各种浓度硫化氢（H2S）的HST（H2S St．Thomas Ⅱ）液中的的低温保存效果。方法将32只SD大鼠随机平均分为4组，分别用Ⅰ组（对照组）：托马斯（St．Thomas Ⅱ，STH）液；Ⅱ组：含4×10^-2mmol／L硫氢化钠（NaHS）的HST液；Ⅲ组：含4×10^-1mmol／LNaHS的HST液；Ⅳ组：含4mmol／L NaHS的HST液对心脏进行保存。采用Langendorff心脏灌注和工作模型装置进行心脏功能测定，比较6h后心功能恢复率以及能量变化、心肌含水量，观察心肌超微结构改变。结果心脏保存6h后，Ⅳ组左心室功能损伤严重，Ⅱ、Ⅲ组左心室功能损伤较轻，其中Ⅲ组最轻。Ⅲ组冠状动脉流量（CF）恢复率为（88．05±8．44）％，明显比Ⅰ组（73．17±8．55）％、Ⅳ组（76．95±9．44）％好，差异有统计学意义（P〈0．01）；Ⅰ组心肌中ATP、乳酸（LD）、糖原含量及心肌含水量分别为（4．31±0．34）μmol／g、（28．70±2．32）μmol／L、（23．00±0．32）mg／g、（79．74±5．47）％，与其他3组比较，差异有统计学意义；Ⅳ组心脏复跳时间为（113．38±17．71）s，明显较μ组（63．38±9．20）s为长（P〈0．01）；心肌超微结构Ⅲ组损伤最轻；Ⅲ组心肌保存良好。结论HST保存液对大鼠心脏的保存在6h内有明显的保护作用，效果优于STH液；含4×10^-1mmol／LNaHS的HST液保存效果较好，而高浓度硫化氢对心肌有损害作用。     

细胞外高钾对离体鼠心缺血再灌注损伤的保护作用

为了解高钾抗心肌缺血再灌注（Ｉ－Ｒ）损伤的途径。用离体大鼠心脏行冠脉结扎，松扎后作电镜观察和磷酸盐－焦锑酸盐（ＰＰＡ法）细胞化学钙定位及抗氧自由基检测。结果：１３ｍｍｏｌ／Ｌ高钾保护Ｉ－Ｒ心肌超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力，抑制丙二醛（ＭＤＡ）生成，减少心肌酶的漏出，保存肌膜结合钙的能力，防止钙在线粒体的积聚，减轻心肌超微结构的破坏。实验提示１３ｍｍｏｌ／Ｌ钾能抑制胞内钙超负荷和膜脂质过氧化达到抗Ｉ     

Protective effects of the lazaroid U74500A and lidoflazine on liver preservation with UW solution

The effect of adding a 21-aminosteroid, U74500A, and a Ca²⁺ antagonist, lidoflazine, alone and together to UW solution was assessed in a rat liver preservation model. Following preservation, the livers were reperfused using a closed circuit, and the release of hepatocellular enzymes (ASAT, ALAT, and LDH) into the perfusate was determined with increasing time. Both drugs reduced the amount of enzymes lost from the liver. The combination of the two drugs was better than either drug alone. These data suggest that both agents may be of value in organ preservation for clinical liver transplantation.     

钙预处理对未成熟心肌细胞凋亡与凋亡相关蛋白的影响

目的探讨Ca^2＋预处理对未成熟心肌细胞凋亡和凋亡相关蛋白的影响。方法实验于2000年6月至2001年12月在武汉大学人民医院心血管外科完成。日本长耳大白兔12只,雌雄不限,14~21 d,体重230~300 g。按随机数字表法分为2组,每组6只。缺血-再灌注组（I/R组）：常规建立Langendorff模型,灌注重碳酸氢盐缓冲液（Krebs-Henseleit,KH）20 min,停灌45 min,复灌120 min;钙预处理组（CP组）：建立Langendorff模型,灌注KH液20 min后无钙KH液灌注45 s,反复3次,KH液灌注5 min,停灌45 min,复灌120 min。采用凋亡细胞原位标记和半定量分析检测心肌细胞凋亡率,琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段梯,Western blot法检测bcl-2、bax和fas的表达。结果 CP组的心肌细胞凋亡率低于I/R组（4.53%±1.22%vs.12.30%±2.12%,t=7.780,P=0.000）。CP组琼脂糖凝胶电泳检测的DNA片段梯与I/R组比较明显减弱（光密度值：56460±1640 vs.135212±3 370,t=51.460,P=0.000）。I/R组bcl-2表达与CP组比较明显减少（光密度值：13217±1 770 vs.31790±1 018,t=22.280,P=0.000）,I/R组bax（光密度值：30 176±1025 vs.7954±730,t=43.260,P=0.000）和fas（光密度值：29 197±1 233vs.8140±867,t=34.220,P=0.000）表达与CP组比较均明显增高。结论 Ca^2＋预处理能影响bcl-2、bax和fas的表达,可减少未成熟心肌细胞凋亡。     

冠状窦堵塞对心脏停搏液灌注压力的影响

目的 探讨主动脉根部顺行灌注加冠状窦堵塞心肌保护时心脏停搏液灌注速度、主动脉根部压、冠状型压间的相互关系。方法 采用改良的Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ离体兔心灌注模型的,将１８只兔按太窦堵塞程度不同分为不堵塞组,并堵塞组和次全堵塞组,每组６只兔,在行主动脉根部灌注心脏停搏有堵塞冠状窦。温血心脏停搏液以２ｍｌ／ｋｇ．ｍｉｎ,４ｍｌ／ｋｇ．ｍｉｎ,６ｍｌ／ｋｇ．ｍｉｎ、８ｍｌ／ｋｇ．ｍｉｎ４种速度主,观察三     

缺血后处理对缺血-再灌注心肌的保护作用及其与线粒体ATP敏感性钾通道的关系

目的探讨缺血后处理（IPo）的心肌保护作用及与心肌线粒体三磷酸腺苷（ATP）敏感性钾通道（mitoKATP）的关系,为药物后处理的研发提供依据。方法40只Wistar大鼠,建立大鼠离体心脏Langendorff灌注模型,采用随机数字表法分为5组,每组8只,正常对照组（NC组）：用K-H液持续灌注100min,不做任何处理;缺血-再灌注（I/R）组：全心缺血40min,再灌注60min;IPo组：全心缺血40min,再灌注10s,缺血10s,反复6次,然后持续再灌注58min;5-羟基癸酸（5-HD）组：全心缺血40min后,先用含5-HD（100μmol/L）的K-H液再灌注15min,再用不含5-HD的K-H液再灌注45min;IPo＋5-HD组：全心缺血40min后,先用含5-HD（100μmol/L）的K-H液再灌注10s,缺血10s,反复6次,再用含5-HD的K-H液持续灌注13min,然后用不含5-HD的K-H液再灌注45min。观察比较各组心功能、冠状动脉流量（CF）、冠状动脉流出液中心肌肌钙蛋白I（cTnI）含量、心肌梗死（AMI）面积和心肌细胞超微结构改变。结果再灌注末IPo组左心室发展压（74.3±3.3mmHgvs.57.1±3.3mmHg,t=13.00,P=0.000）、＋dp/dtmax（1706.6±135.6mmHg/svs.1313.3±96.2mmHg/s,t=6.28,P=0.000）、-dp/dtmax（1132.8±112.1mmHg/svs.575.7±67.7mmHg/s,t=13.48,P=0.000）、CF（6.49±0.30ml/minvs.3.70±0.24ml/min,t=28.60,P=0.000）与I/R组比较均升高;左心室舒张期末内压（10.9±1.7mmHgvs.26.2±1.5mmHg,t=-19.21,P=0.000）,冠状动脉流出液中cTnI含量（0.62±0.01ng/mlvs.0.71±0.01ng/ml,t=-12.00,P=0.000）均降低,AMI面积与I/R组比较减少20.8%（P〈0.05）。IPo＋5-HD组对心肌的保护作用与IPo组相似,但作用轻于IPo组。电子显微镜观察结果表明,IPo和IPo＋5-HD可减轻I/R引起的心肌纤维和线粒体损伤。结论IPo对I/R心肌有保护作用,其作用与mitoKATP的激活有关。