坐骨神经损伤与修复过程中相应脊髓神经元变化的形态学观察

目的探讨坐骨神经损伤与再生修复过程中相应脊髓前角运动神经元的形态学变化和嗅被膜细胞(OECs)对神经元的保护作用。方法采用硅胶管套接切断的大鼠坐骨神经实验模型,将30只大鼠随机分为两组,治疗组硅胶管内注射OECs悬液,对照组注射生理盐水(SAL),应用尼氏法对术后7d、14d、30dSAL组与OECs组脊髓前角运动神经元进行形态学观察,比较两组同类神经元的存活率。结果OECs组治疗侧脊髓前角外侧核大、中型运动神经元的形态结构和存活率与对照组有明显差别。术后7d,OECs组治疗侧神经元数目较SAL组伤侧丢失减少,存活率上升。术后14d和30d,OECs组治疗侧神经元数目较SAL组伤侧明显增加,存活率明显升高,大多数神经元轮廓清楚,尼氏体清晰。结论OECs能减少坐骨神经损伤后相应脊髓前角运动神经元的退行性变。     

坐骨神经损伤后相应脊髓前角运动神经元的形态学变化

目的 探讨坐骨神经损伤与修复过程中相应脊髓前角外侧核运动神经元的形态学变化，并对神经元尼氏染色法的应用价值进行评估。方法 采用硅胶管套接切断的大鼠坐骨神经模型，应用焦油紫染色、甲苯胺蓝染色和硫堇染色等3种尼氏法对伤后7、14、30d脊髓前角运动神经元进行形态学观察。结果 应用3种染色方法均观察到坐骨神经伤侧脊髓前角外侧核大、中型运动神经元的形态结构和存活率与对照侧有明显差别。与对照侧比较，伤后7d伤侧脊髓神经元数目减少，存活率降低；伤后14d和伤后30d，尤其是伤后30d，伤侧脊髓神经元数目减少更显著，存活率下降更明显，有些神经元轮廓不清且尼氏体模糊。结论 随着大鼠坐骨神经损伤时间的延长，其相应脊髓前角运动神经元的损伤程度逐渐增加，尤其是伤后30d退变非常明显。焦油紫染色方法是显示神经元尼氏体及反映神经元生活状态的简捷有效的方法。     

坐骨神经损伤后相应脊髓前角运动神经元的形态学变化

目的探讨坐骨神经损伤与修复过程中相应脊髓前角外侧核运动神经元的形态学变化,并对神经元尼氏染色法的应用价值进行评估。方法采用硅胶管套接切断的大鼠坐骨神经模型,应用焦油紫染色、甲苯胺蓝染色和硫堇染色等3种尼氏法对伤后7、14、30d脊髓前角运动神经元进行形态学观察。结果应用3种染色方法均观察到坐骨神经伤侧脊髓前角外侧核大、中型运动神经元的形态结构和存活率与对照侧有明显差别。与对照侧比较,伤后7d伤侧脊髓神经元数目减少,存活率降低;伤后14d和伤后30d,尤其是伤后30d,伤侧脊髓神经元数目减少更显著,存活率下降更明显,有些神经元轮廓不清且尼氏体模糊。结论随着大鼠坐骨神经损伤时间的延长,其相应脊髓前角运动神经元的损伤程度逐渐增加,尤其是伤后30d退变非常明显。焦油紫染色方法是显示神经元尼氏体及反映神经元生活状态的简捷有效的方法。     

胎脑提取液对坐骨神经损伤大鼠脊髓神经元的保护作用

目的：研究大鼠坐骨神经损伤后，胎脑提取液对脊髓运动神经元酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）活性的影响。方法：Wistar大鼠54只，随机分为实验组、对照组和正常组，前两组再随机分成术后4个时间组。无菌条件下制作坐骨神经钳夹损伤模型，酶组织化学方法结合显微图像分析，观察各组大鼠脊髓运动神经元ACP活性的变化。结果：ACP反应产物的光密度值正常组为0.28&;#177;0.03；对照组术后1d为0.35&;#177;0.05，术后1周为0.40&;#177;0.05，术后2周为0.47&;#177;0.06，术后3周为0.38&;#177;0.04；实验组术后1d为0.30&;#177;0.04，术后1周为0.38&;#177;0.04，术后2周为0.34&;#177;0.05，术后3周为0.30&;#177;0.06。结论：胎脑提取液对坐骨神经损伤后脊髓前角运动神经元具有保护作用。     

电针对大鼠坐骨神经损伤后的修复作用

电针对大鼠坐骨神经损伤后的修复作用邵水金１单宝枝１严振国１周围神经损伤后提高神经功能恢复是临床治疗的目的。迄今为止，神经断裂性损伤后的肢体功能恢复率仍不理想。因此，如何进一步提高神经轴索的再生率，促进神经再生，加快神经损伤后的功能恢复仍是神经科学研究...     

坐骨神经切断后脊髓神经细胞的凋亡变化

目的：研究一侧坐骨神经切断后，脊髓第7腰段的神经细胞的凋亡变化。方法：用DNA原位末端标记法。结果：在坐骨神经切断1d后脊髓后角内的神经胶质细胞开始出现凋亡，到第2天达到最大值，白质内的胶质细胞也发生凋亡；脊髓灰质后角感觉神经元的凋亡指数大于前角运动神经元的凋亡指数。结论：坐骨神经切断后的第1天脊髓神经细胞发生凋亡，传入神经元的凋亡大于传出神经元的凋亡，神经胶质细胞在细胞凋亡过程中发挥重要作用。     

苦参碱对小鼠坐骨神经损伤后脊髓运动神经元的影响

目的探讨BALB/c小鼠坐骨神经损伤后应用苦参碱后对坐骨神经相应脊髓节段中gap-43的表达变化。方法健康成年BALB/c小鼠320只,单侧坐骨神经切断吻合后,随机分组给药,不同时间获取L4-6脊髓节段,用Real time-PCR检测坐骨神经相应脊髓节段gap-43的表达变化,同时进行髓鞘LFB染色观察坐骨神经的恢复情况。结果 Real time-PCR结果显示高剂量和中剂量组12h,24h3d5d1w,2w,4w,gap-43表达量明显高于低剂量组和空白对照组,8w各组比较无明显差异。LFB染色表明高中剂量组坐骨神经恢复情况明显优于低剂量组和对照组。结论坐骨神经损伤后应用苦参碱对坐骨神经脊髓相应节段细胞中gap-43的活化起到促进作用,减少炎症细胞的浸润从而达到促进神经再生的目的。     

脂肪干细胞移植治疗坐骨神经损伤的研究进展

坐骨神经损伤后的神经再生及功能恢复一直是基础研究和临床治疗的热点与难点。最大程度地实现神经修复与再生是改善坐骨神经损伤患者功能恢复的治疗关键。脂肪干细胞(ADSCs)被认为是最具有临床应用前景的成体干细胞之一。目前ADSCs用于治疗坐骨神经损伤的实验研究已多见报道。本文通过综合近二十年来对ADSCs移植促进坐骨神经损伤修复和神经再生的研究进展进行综述,探讨ADSCs移植治疗坐骨神经损伤可能的机制,为今后的基础与临床实验研究提供新思路。     

电针对大鼠坐骨神经损伤后感觉神经元的保护作用

目的：探讨电针对周围神经损伤后感觉神经元的保护作用。方法：取Wistar大鼠40只，行左侧坐骨神经切断外膜缝合。实验组每天穴位电针20min。分别于术后2周观察脊神经节内感觉神经元乙酰胆碱脂酶(AChE)的变化；测量脊神经节神经元的存活百分率、乙酰胆碱酯酶的平均灰度及感觉神经电生理。对照组不作任何处理。结果：两组的乙酰胆碱脂酶较正常神经元有显著性的变化，两组间神经元的存活百分率及乙酰胆碱酯酶的平均灰度的差异也存在非常显著性意义(P&;lt;0．01)。电针组神经元存活率为(88．4&;#177;1．7)％，平均灰度181．1&;#177;9．2；模型组神经元存活率为(71．3&;#177;2．6)％，平均灰度130．4&;#177;10．4。电针组感觉潜伏期、感觉传导速度、波幅及H反射明显由于模型组。结论：电针对周围神经损伤后脊神经节感觉神经元有保护作用。     

大鼠坐骨神经损伤后髓鞘碱性蛋白与神经功能的变化及神经生长因子的影响

目的：探讨大鼠坐骨神经损伤后髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein,MBP)含量和神经功能的变化及神经生长因子（NGF）的影响。方法：Wistar大鼠行单侧坐骨神经切断，断端采用硅胶管桥接，实验分为I组：生理盐水对照；Ⅱ组：硅胶管内给NGF；Ⅲ组：硅胶管内给NGF＋每日肌肉注射NGF（500ng/kg连续2周），结果：（1）MBP含量的变化；治疗组之间比较无统计意义；治疗组与对照组相比较有显性差异（P＜0．01），治疗组24h,2周时较伤前显升高（P＜0．01），4周恢复到伤前水平；（2）神经功能的变化；治疗组与对照组比较脊髓感觉诱发电位（SEP），运动诱发电位（MEP）能较早出现，自切情况减轻，后肢运动功能得到较好改善，结论：NGF治疗能减少MBP含量，对损伤后神经功能的恢复起到一定作用，且以局部应用加肌肉给药治疗的效果最好。     

嗅鞘细胞的生物学特性及其在脊髓损伤再生中的应用

脊髓损伤是一种严重威胁人类生命健康的疾患。既往观念认为，脊髓损伤后，将引起损伤平面以下运动、感觉和括约肌功能全部或部分永久丧失：一旦发生将给患以至整个家庭及社会带来沉重的经济、精神负担。近年来，随着神经生物学，神经解剖学，细胞生物学的飞速发展，使得脊髓损伤与再生的研究有了突破性进展。现在研究认为脊髓损伤后一般治疗效果较差，究其原因主要是中枢神经系统的内在微环境不利于轴突的再生。因此，为了促进中枢神经系统损伤后轴突再生，改善损伤区再生微环境很重要。目前的治疗脊髓损伤主要有以下方法：阻滞抑制分子；清除抑制细胞；胚胎脊髓组织移植；周围神经移植；细胞移植：神经膜细胞，胚胎神经干细胞，嗅鞘细胞，转基因能分泌神经营养因子的细胞。其中嗅鞘细胞因在体外具有促进轴突再生并促进其较长距离延伸，髓鞘化脊髓轴突的能力而使之成为近年来最为吸引人注目的一种治疗脊髓损伤的有力工具。     

大鼠坐骨神经损伤后髓鞘碱性蛋白与神经功能的变化及神经生长因子的影响

目的探讨大鼠坐骨神经损伤后髓鞘碱性蛋白(myelinbasicprotein,MBP)含量和神经功能的变化及神经生长因子(NGF)的影响。方法Wistar大鼠行单侧坐骨神经切断,断端采用硅胶管桥接,实验分为Ⅰ组:生理盐水对照;Ⅱ组:硅胶管内给NGF;Ⅲ组:硅胶管内给NGF+每日肌肉注射NGF(500ng/kg连续2周)。结果(1)MBP含量的变化:治疗组之间比较无统计意义;治疗组与对照组相比较有显著性差异(P<0.01);治疗组24h、2周时较伤前显著升高(P<0.01),4周恢复到伤前水平;(2)神经功能的变化:治疗组与对照组比较脊髓感觉诱发电位(SEP)、运动诱发电位(MEP)能较早出现;自切情况减轻,后肢运动功能得到较好改善。结论NGF治疗能减少MBP含量,对损伤后神经功能的恢复起到一定作用,且以局部应用加肌肉给药治疗的效果最好。     

坐骨神经切断后胶质细胞源性神经营养因子mRNA的表达变化

目的 探讨大鼠坐骨神经切断后，胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)mRNA在两侧断端的表达变化及其意义。方法 采用Trizol一步法提取坐骨神经总RNA，取少量作紫外扫描分析和琼脂糖电泳分析，切断SD大鼠左侧坐骨神经，不同时间、半定量RT—PCR方法，观察两侧断端GDNF mRNA的表达变化。结果 坐骨神经切断前，GDNF mRNA在两侧坐骨神经微量表达，为(6．5&;#177;1．3)％，坐骨神经切断后远断端表达逐渐增加，伤后1d(7．8&;#177;1．9)％，伤后7d(10．3&;#177;2．1)％，伤后14d(11．9&;#177;2．3)％，伤后28d(12．3&;#177;2．4)％，近断端表达逐渐减少，伤后1d(5．8&;#177;1．3)％，伤后7d(4．0&;#177;1．0)％，伤后14d(3．6&;#177;1．1)％，伤后28d(3．1&;#177;1．0)％。伤后1d与伤前比较(P&;gt;0．05，t=1．193，0．879)，伤后7，14，28d与伤前比较(P&;lt;0．01，t=3．762，3．565，5．059，4．083，5．164，4．905)。结论 GDNF在损伤信号的刺激下表达急剧增加，起到修复神经元的作用，为外源性GDNF治疗脊髓损伤提供了理论基础。     

脊髓损伤的嗅鞘细胞治疗

实现中枢神经系统(CNS)再生的前景已经发生变化,最近的研究结果表明包括人类在内的几个物种在成年后可以产生神经元。针对这一特性的研究可能被认为是应对中枢神经系统损伤或脱髓鞘疾病的潜在治疗策略。虽然中枢神经系统创伤可能会中断连接神经元与其目标的轴突束,但一些神经元仍然存活,如视神经和脊髓损伤(SCI)。脊髓损伤的毁灭性后果是由于脊柱上行和下行的直接和显著的破坏,导致不同程度的运动和感觉障碍。SCI最近的治疗研究集中在动物模型中的细胞移植,使用能够诱导轴突再生的细胞,如雪旺氏细胞(SchCs)、星形胶质细胞、基因修饰的成纤维细胞和嗅鞘细胞(OECs)。然而,尽管这种基于细胞的治疗策略有所改善,但关于移植成功的机制和任何次要影响的信息仍然很少。因此,需要进一步的研究来澄清这些问题。本综述强调OECs的特性,使它们适合在SCI中实现神经可塑性/神经再生。OECs可以与胶质瘢痕相互作用,刺激血管生成,轴突生长和髓鞘再生,改善损伤后的功能结果。此外,我们提供的证据表明,OECs治疗SCI的细胞疗法在动物模型和SCI患者的临床研究的效果,都为未来的治疗提供了有希望的结果。     

嗅鞘细胞移植修复大鼠脊髓损伤的组织病理学变化

背景:对于脊髓损伤,目前临床尚无有效的治疗对策,近年来嗅鞘细胞移植对脊髓损伤修复取得了一定的进展.目的:观察嗅鞘细胞移植在缓解损伤脊髓的病理反应和超微结构变化,及其在发生发展中的作用.方法:60只大鼠随机分为空白组,模型组,嗅鞘胞移植组和DF12组,每组15只.空白组:仅切开T_(10)全椎板及T_9,T_(11)部分椎板,对脊髓未作其他处理,明胶海绵轻柔压迫止血;模型组:仅切断脊髓,未作特殊处理;嗅鞘细胞移植组和DF12组:切断脊髓后用微量注射器分别注射嗅鞘细胞和DF12培养液,随后缝合切口.脊髓损伤后1,3,7,14,28,42,56 d每组麻醉2只受检大鼠,取材做光镜观察和电镜观察.结果与结论:单纯脊髓横切损伤后,发生了出血、水肿、变性、坏死以及囊腔形成,胶质细胞增生和神经纤维再生.嗅鞘细胞移植后,明显减轻了神经元和神经纤维的坏死变性程度,减轻病理反应,并能对损伤神经元实施保护;防止了胶质细胞过度增生形成瘢痕屏障,明显增加了再生神经纤维的数量.提示嗅鞘细胞移植对损伤脊髓具有减轻病理反应和促进修复的作用.     

复方红芪提取液对坐骨神经损伤大鼠脊液神经元保护作用的实验研究

目的：了解复方红芪提取液对大鼠周围神经损伤后神经元的保护作用。方法：实验选用雄性SD大鼠75只,随机分成5组;空白对照组、神经生长因子（NGF）对照组,中药0．5、1．0和1．5ml组。以钳夹方式民大鼠坐骨神经损伤。1次按组别注射相应药物。于术后3和1、2、4周取L4－6脊髓固定,切片作HE染色,光镜下观察脊髓前角多突起运动神经元的变化。2周、4周取标本前行损伤远近段神经传导速度测定。结果：中药各组及NGF组在2周后其脊髓前角运动神经元数目即明显多于对照组（P均＜0．05）。2周时,中药1．5ml组对脊髓前角运动细胞数量以及对神经纤维传导速度都有明显的促进作用,而在4周时中药1．5ml组和NGF组在两项指标实验中都显示出明显的促进作用,呈正相关关系。结论：复方红芪取液对于周围神经损伤后的再生以及防止神经元坏死与NGF具有同等的作用,并能更早期发挥作用,其效果优于NGF。其原因可能是复方红芪制剂为多因素,多因素共同作用的结果。     

电针对大鼠坐骨神经损伤后脊髓运动神经元睫状神经营养因子水平的影响

目的：探讨电针对大鼠坐骨神经损伤后脊髓运动神经元睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor，CNTF)的影响。方法：取Wistar大鼠56只，行左侧坐骨神经切断外膜缝合。电针组每天穴位电针20min，模型组不作任何处理。分别于术后7，14，21和28d测定脊髓前角CNTF阳性神经元计数、神经元平均积分光密度及4周时损伤神经电生理。结果：坐骨神经损伤后损伤脊髓前角CNTF阳性神经元数量明显少于正常对照组，电针组损伤侧脊髓前角内CNTF阳性神经元数量在各时间点明显高于模型组(P&;lt;0．05)，14d时电针组伤侧脊髓前角内CNTF阳性神经元数量为(53&;#177;11)个，模型组为(29&;#177;9)个。同时模型组神经元内CNTF阳性神经元平均积分光密度在各时间点与正常组比较明显降低，在14d最低为273．2&;#177;33．7。而电针组CNTF在各个时间点明显高于模型组(P&;lt;0．05)；28d康复组神经肌肉动作电位、运动神经传导速度均优于模型组(P&;lt;0．01)。结论：电针可提高损伤神经神经元内源性CNTF水平，减少神经元变性、死亡，促进神经电生理的恢复。     

坐骨神经损伤后脊髓前角细胞脑源性生长因子的表达及针刺治疗的作用

目的：探讨坐骨神经不完全性损伤后脊髓前角细胞脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)表达水平变化及针刺对BDNF表达的影响。方法：采用钳夹法制作大鼠左侧坐骨神经损伤模型，分为针刺组和对照组。用原位杂交、免疫组化技术检测相应节段脊髓前角细胞BDNF、的表达水平，观察各组在1，7，4，21及28d的变化。用计算机图像自动处理系统进行定量分析研究。结果：对用原位杂交方法测得的坐骨神经损伤后大鼠脊髓前角BDNFmRNA阳性细胞计数进行分析，组间和不同时间点比较差异均的非常显著性意义(P&;lt;O．01)；计算用免疫组化方法测得的坐骨神经损伤后大鼠脊髓前角BDNFmRNA阳性神经元光密度值，组间和不同时间点比较差异均的非常显著性意义(P&;lt;0．01)；坐骨神经损伤后损伤侧脊髓前角细胞中BDNF表达水平在最初的3周内逐渐下降，然后开始恢复，但至第4周[(45．38&;#177;1．56)个]尚未恢复到健侧[(62．88&;#177;1．23)个]的水平。针刺组损伤侧脊髓前角细胞中BDNF表达水平除1,7d组外其余均高于对照组(P&;lt;0．01)；而健侧BDNF表达水平在各时间点间相比较无明显差异。结论：在正常情况下，BDNF在脊髓前角细胞中能够表达。坐骨神经损伤后，BDNF的表达下降。针刺能促进损伤侧脊髓前角细胞中BDNF表达水平的增加；而对健侧BDNF表达水平无明显作用。     

神经妥乐平对大鼠坐骨神经损伤后脊髓运动神经元的保护作用

目的探讨大鼠坐骨神经损伤后早期应用神经妥乐平对相应脊髓运动神经元的保护作用。方法将108只雄性SD大鼠随机分为A组、B组和C组,每组36只,所有大鼠均行双侧坐骨神经切断后立即行神经外膜端-端吻合术。A组为对照组;B组术后予神经妥乐平治疗;C组术后予生理盐水治疗。按术后1d、4d、9d、14d、21d和28d6个时间点取L₄～L₆脊髓作Bcl-2、Bax免疫组化检测,以及TUNEL检测。结果B组术后9d、14d、21d的Bcl-2/Bax值较A、C组增高;B组与A、C组相比,9d的TUNEL阳性细胞数量有显著性差异(P<0.05),14d的TUNEL阳性细胞达高峰,其中B组的TUNEL阳性细胞数量少于A组和C组(P<0.05～0.01)。结论大鼠坐骨神经切断外膜端-端吻合术后,神经妥乐平可以一定程度地保护脊髓前角运动神经元避免其过度凋亡。