实时荧光定量PCR法在检测3种泌尿生殖道病原微生物中的应用

目的探讨实时荧光定量PCR法在检测3种泌尿生殖道病原微生物（沙眼衣原体（CT）、解脲支原体（UU）、淋病奈瑟菌（NG））中的应用。方法 512例门诊和住院疑似泌尿生殖道感染女性患者阴道宫颈分泌物标本,采用实时荧光定量PCR法检测CT、NG、UU,同时用胶体金法检测CT,用培养法进行NG、UU检测。结果 512例疑似泌尿生殖道感染女性患者中,实时荧光定量PCR法和胶体金法检测CT的阳性率分别为10.1%和7.4%。实时荧光定量PCR法和培养法检测UU的阳性率分别为33.4%和23.9%。实时荧光定量PCR法和培养法检测NG的阳性率分别为8.7%和6.1%。阳性检出率为UU〉CT〉NG,阳性率比较,差异均有统计学意义,实时荧光定量PCR法对CT、NG、UU的检出率高于胶体金法和培养法。结论实时荧光定量PCR法在敏感度、特异度及报告周期上均优于胶体金法和培养法,对STD诊断提供了重要依据,但无法提供药敏报告,可与常规检测方法互相补充。     

实时荧光定量聚合酶链反应对结核性胸膜炎的诊断价值

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测胸腔积液结核分枝杆菌DNA对结核性胸膜炎的诊断价值。方法对88例结核性胸膜炎患者和32例恶性胸腔积液标本行实时荧光定量PCR检测结核分枝杆菌DNA。结果88例患者胸腔积液实时荧光定量PCR检测阳性36例(40.91%),32例恶性胸腔积液实时荧光定量PCR检测阳性1例(3.13%)。2组阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论胸腔积液实时荧光PCR检测对结核性胸膜炎早期诊断有重要仍价值。     

实时荧光定量PCR技术检测妊娠晚期GBS感染的临床价值分析

目的:探讨实时荧光定量PCR技术检测妊娠晚期B型链球菌(GBS)感染的临床价值。方法:选择2018年1月～12月在某院产检的200例单胎初产妇,取阴道拭子,分别使用普通细菌培养法与实时荧光定量PCR法检测是否合并GBS,记录入组孕妇GBS携带情况、分析细菌培养法与实时荧光定量PCR法检测GBS阳性率,并比较GBS阳性与阴性者母婴妊娠结局。结果:200例孕妇GBS携带率为10.50%(21/200);实时荧光定量PCR法检测GBS阳性率明显高于细菌培养法,差异有统计学意义(P0.05);GBS阳性组孕妇不良妊娠结局总发生率、新生儿不良结局总发生率高于GBS阴性组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:GBS会增加孕妇与新生儿不良结局的发生,实时荧光定量PCR可快速准确筛查GBS,指导临床及时给予产妇干预措施,改善母婴结局。     

实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析

目的分析实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测在人巨细胞病毒(HCMV)感染中的应用价值。方法选取363例疑似HCMV感染患儿及50例健康儿童,均采集血样进行实时荧光定量PCR检测。分析荧光定量PCR检测结果 ,并比较不同性别、不同年龄HCMV感染的阳性检出情况。结果实时荧光定量PCR检测显示, HCMV感染患儿中32例为阳性,阳性率为8.82%;健康儿童中1例为阳性,阳性率为2%。阳性患儿的HCMV载量在5.0×102~1.0×104 copies/ml。HCMV感染患儿阳性率高于健康儿童,差异具有统计学意义(P<0.05)。188例男性CMV感染患儿的阳性率为9.04%(17/188), 175例女性CMV感染患儿的阳性率为8.57%(15/175),不同性别HCMV感染患儿阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。152例年龄<1岁CMV感染患儿的阳性率最高,为14.5%;其次为1~3岁患儿,阳性率为6.9%;109例>3岁患儿的阳性率最低,为2.8%;不同年龄段CMV感染患儿的阳性率比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 <1岁儿童由于机体的免疫力和抵抗力较弱,容易出现HCMV感染的情况,因此需要借助实时荧光定量PCR技术进行筛查,从而尽早诊断和治疗,能够避免严重并发症的出现。     

实时荧光定量PCR检测巨细胞病毒两种白细胞提取方法对比分析

目的 比较实时荧光定量PCR技术检测巨细胞病毒两种白细胞提取处理方法.方法 对51例新生儿黄疸患者外周血分别进行淋巴细胞分离液法提取白细胞和0.8%氯化胺裂解红细胞法提取白细胞,然后同时进行实时荧光定量PCR检测.结果 51例样本中两种方法均阳性5例,白细胞抽提液法阳性、氯化胺裂解红细胞法阴性2例;白细胞抽提液法阴性、氯化胺裂解红细胞法阳性4例;两者均阴性40例;氯化胺裂解红细胞阳性率法17.64%,淋巴细胞分离液法阳性率13.72%.经统计学分析,两方法阳性率差异无显著性(χ2＝0.5,P＞0.05).结论 氯化胺裂解红细胞法提取白细胞方法简便、可靠,可用于荧光定量PCR检测巨细胞病毒.     

实时荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌在结核性胸膜炎诊断中的价值

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测结核分枝杆菌在结核性胸膜炎诊断中的价值。方法对362例临床确诊的结核性胸膜炎患者、可疑结核性胸膜炎患者和非结核性胸膜炎患者的胸水标本采用涂片、实时荧光定量PCR两种方法进行检测,对其结果进行对比分析。结果 362例胸水标本中,涂片阳性率为4.42%(16/362),PCR检测阳性率为24.31%(88/362)。胸水涂片、PCR检测102例临床确诊的结核性胸膜炎患者胸水标本阳性率分别为11.76%(12/102)和50.98(52/102);检测160例临床可疑结核性胸膜炎患者胸水阳性率分别为2.50%(4/160)和22.50%(36/160)。两种方法的阳性检测率比较差异有统计学意义(χ2=10.654,P<0.05)。100例非结核性胸膜炎患者胸水标本涂片及PCR检测均为阴性。结论荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)快速诊断结核性胸膜炎与涂片法相比较具有快速、灵敏、高特异性等优点。     

实时荧光定量检测HCV RNA含量的临床价值

目的研究实时荧光PCR定量检测HCV RNA载量与抗-HCV、HCV抗原含量以及丙氨酸转氨酶(ALT)水平之间的相关性与符合性。方法用RFQ-RT-PCR法检测130份怀疑HCV感染的血清中的HCV RNA,同时检测ALT和抗-HCV。结果130份样本中HCV RNA阳性率为53.9%(71/130);抗-HCV阳性率为56.3%(72/130);ALT异常率为50.0%(65/130)。抗-HCV、HCV抗原滴度和ALT异常率随着HCV RNA载量升高而增加。结论用RFQ-RT-PCR-法检测HCV RNA可以确定。①长期高滴度抗-HCV血清具有传染性,并常预示患者肝硬化和肝癌的可能性加大,应该积极治疗。②抗-HCV、HCV抗原含量与HCV RNA之间呈正相关关系,且有符合性和互补性。③对慢性丙型肝炎长期抗-HCV阳性,若出现HCV RNA出现升高1lg10以上可以鉴别活动性、复制性程度。④是选择抗病毒药物和评价抗病毒治疗效果的重要指标。     

实时荧光定量PCR检测乙型肝炎血清DNA的临床观察

目的:探讨乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒DNA定量与乙型肝炎标志物关系.方法:采用荧光探针杂交技术为基础的实时荧光定量PCR检测259例乙型肝炎患者血清中DNA含量,与HBV标志物作对比分析.结果:血清HBeAg阳性组HBV-DNA阳性率为98.6%,HBeAb组阳性率为61.5%;HBeAg组阳性率含量明显高于HBeAb阳性组.结论:实时荧光定量PCR检测具有较高的灵敏度和特异性,定量准确、结果可靠,为临床了解病毒复制情况,制定治疗方案及疗效观察提供了确切依据.     

768例乙型肝炎血清标志物和HBV-DNA载量相关性分析

目的:探讨HBV-DNA载量与乙型肝炎血清标志物之间的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA载量,化学发光法检测HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc五项乙型肝炎血清标志物。结果:在768份血清标本中,HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性组HBV-DNA阳性率为98.70%,HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性组HBV-DNA阳性率为66.02%,HBsAg阳性组HBV-DNA阳性率为43.75%,抗HBs、抗HBe、抗HBc阳性组HBV-DNA阳性率为10.00%,抗HBs、抗HBc阳性组、抗HBs阳性组及五项乙型肝炎血清标志物全阴组HBV-DNA阳性率为0。结论:不同组的乙型肝炎患者HBV-DNA载量阳性率不同,HBV-DNA载量与乙型肝炎血清标志物之间存在相关性。采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA载量是反映HBV复制的可靠指标,结合乙型肝炎血清标志物可以帮助临床了解HBV在体内复制的状况,并为临床评价抗HBV治疗效果提供可靠依据。     

实时定量PCR技术在肺结核诊断中的价值

目的评估实时定量PCR法在肺结核诊断中的价值。方法对412例可疑肺结核患者送检痰液,分别应用痰涂片抗酸染色法、结核杆菌培养法和实时荧光定量PCR法进行检测,并对检测结果进行比较分析。结果痰涂片抗酸染色法、结核杆菌培养法和实时荧光定量PCR法对最终确诊的326例肺结核患者痰样本的阳性检出率分别为24．23％、31．29％、78．22％。3种检测方法差异有统计学意义（P〈0．05）。结论实时定量PCR法具有检出率高,敏感性高,特异性高等优点,在结核病实验室辅助诊断方面有重要的应用价值。     

不同荧光定量PCR技术在HBV检测中的应用评价

【摘要】 目的：评价国产普通荧光定量PCR技术与罗氏内标法荧光定量PCR技术在HBV检测中的意义。 方法：采集安徽医科大学第一附属医院2014年3月-12月HBV患者的血清190份,分别用上述方法进行检测,通过相关性分析和Kappa检验评价两种试剂检测结果之间的差异性及一致性。结果：①190份标本中,罗氏Cobas 试剂与国产试剂检测结果呈线性相关(R2=0.6707,P<0.05）;②分成HBeAg( )与HBeAg(-)两组比较,两组中Cobas 试剂与国产试剂检测均呈线性相关(R2=0.5864,P<0.05;R2 =0.5226,P<0.05）;③根据不同HBeAg状态和抗病毒要求的DNA载量对标本进行一致性分析,HBeAg( )组Kappa值为0.752;HBeAg(-)组Kappa值为0.381。结论：对于HBeAg( )患者,可以应用国产试剂检测患者的HBV-DNA水平,而对于HBeAg(-)患者,建议应用Cobas 试剂检测其患者的HBV-DNA水平。 关键词 肝炎,乙型,慢性;肝炎病毒,乙型; 聚合酶链反应 乙型肝炎病毒标志物     

不同荧光定量PCR技术在乙型肝炎病毒检测中的应用评价

目的 评价普通荧光定量PCR技术与罗氏内标法荧光定量PCR技术在乙型肝炎病毒(HBV)检测中的意义。方法 采集HBV患者的血清190份,分别用两种方法进行检测,通过相关性分析和Kappa检验评价两种试剂检测结果之间的差异性及一致性。结果(1)190份标本中,罗氏Cobas试剂与国产试剂检测结果呈线性相关(R²=0.670 7,P<0.05);(2)分成HBeAg(+)与HBeAg(-)两组比较,两组中Cobas试剂与国产试剂检测均呈线性相关(R²=0.586 4,P<0.05;R² =0.522 6,P<0.05);(3)根据不同HBeAg状态和抗病毒要求的DNA载量对标本进行一致性分析,HBeAg(+)组Kappa值为0.752;HBeAg(-)组Kappa值为0.381。结论 对于HBeAg(+)患者,可以应用国产试剂检测患者的HBV-DNA水平,而对于HBeAg(-)患者,建议应用Cobas试剂检测其患者的HBV-DNA水平。     

探讨实时荧光定量PCR在乙型肝炎病毒DNA定量检测中应用价值

目的:探讨实时荧光定量PCR在乙型肝炎病毒DNA定量检测中应用价值。方法:选择2021年4月至2023年4月我院收治的120例疑似慢性乙型病毒性肝炎患者为研究对象，分别采用实时荧光定量PCR与酶联免疫吸附法(ELISA)对所有患者HBV-DNA含量进行检测。以试纸法检测结果为标准，比较实时荧光定量PCR、ELISA检测结果的一致性；比较实时荧光定量PCR、ELISA对慢性乙型肝炎的诊断效能；比较不同HBV感染状态下HBV-DNA含量的差异。结果:120例疑似慢性乙型肝炎患者经试纸法检查确诊为慢性乙型肝炎107例。Kappa检验分析结果显示，实时荧光定量PCR检查结果与试纸法检查结果具有高度的一致性(Kappa值=0.897,P<0.05)。实时荧光定量PCR对慢性乙型肝炎的诊断灵敏度、特异性与准确率均高于ELISA(P<0.05)。大三阳HBV-DNA含量均高于小三阳与急慢性感染期(P<0.05);小三阳HBV-DNA含量与急慢性感染期比较无明显差异(P>0.05)。结论:实时荧光定量PCR在慢性乙型肝炎诊断中的应用价值较高，不但能完成疾病的准确诊断，还能通过对...     

实时荧光定量PCR在肺结核诊断中的临床应用

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应法(FQ-PCR荧光定量)对肺结核诊断的临床应用价值。方法用直接涂片检测抗酸菌法和FQ-PCR法对我院临床诊断为肺结核和疑似肺结核病人的168例痰和57例支刷物中的结核分枝杆菌菌体和基因分别同时检测,对两方法检出率进行统计学比较分析。结果痰直接涂片法阳性率为16.7%,FQ-PCR荧光法阳性率为30.4%,二者比较有显著性差异(P<0.01);支刷物涂片阳性率15.8%,TB-PCR荧光量阳性率31.6%,二者比较有差异(P<0.05)。结论FQ-PCR荧光定量法的检出率显著高于涂片法,提示FQ-PCR荧光定量法特异较强、敏感性较高,可提高诊断的阳性率,在结核的诊治中具有较好的应用价值。     

荧光定量PCR检测痰结核分枝杆菌DNA的应用价值

目的探讨荧光定量PCR技术在痰结核分枝杆菌检测中的应用价值。方法对289例结核病住院患者的同一份痰标本,分别采取荧光定量PCR、抗酸菌涂片染色和改良罗氏培养三种方法进行检测,对结果进行比较。结果荧光定量PCR、抗酸菌涂片染色和改良罗氏培养检测痰中结核分枝杆菌的阳性率分别为72.66%、28.37%、48.10%,荧光定量PCR检测的阳性率最高。结论荧光定量PCR方法检测痰中结核分枝杆菌具有灵敏度高、操作简便、快速的特点,可作为结核病的常规诊断方法,在临床上有重要的应用价值。     

应用国产与进口试剂进行HBVDNA荧光定量检测的结果比较

目的评价国产试剂的实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)在检测乙型肝炎病毒(HBVDNA)中的临床应用。方法基于实时荧光定量应用瑞士罗氏公司的cobastaqman-48仪器和美国应用生物工程公司ABI-7300全自动系统,用国产试剂和进口试剂分别检测乙型肝炎患者血清中HBVDNA含量,比较国产试剂与进口试剂的偏倚及两者的相关性。结果进口试剂与国产试剂两次结果比较有显著差异(P<0.001),国产两次结果比较无差异(P>0.05)。结论本实验的实时PCR仪间的检测值有一定的差异,提示不同型号仪器的检测值不能相互取代,对于同一患者的HBV DNA定量监测及对抗病毒治疗疗效评价时,必须用同一型号的检测仪器(系统)。     

荧光定量PCR法与培养法检测女性不育症解脲支原体的比较评价

目的评价荧光定量PCR与培养法检测女性不育症解脲支原体方法,并筛选解脲支原体感染的治疗药物。方法应用PCR法和培养法检测351例女性不育症患者和201例正常生育妇女的解脲支原体,同时对11种抗菌药物作药敏试验。结果在不育症患者中荧光定量PCR和培养法检测UU阳性率分别为55.3%和42.7%,已生育妇女的UU阳性率分别为30.3%和24.9%。PCR法检出率明显高于培养法,P〈0.01,11种药物敏感试验结果UU培养法阳性者对大环内酯类克拉霉素最敏感为96.4%,对喹诺酮类环丙沙星耐药性最高为60.1%。结论荧光定量PCR对UU检出率高且快,培养法检测虽慢,可同时作药敏试验为临床指导选择用药。     

替比夫定治疗慢性乙型病毒性肝炎患者定量检测HBeAg的意义

目的探讨替比夫定治疗的慢性乙型病毒性肝炎(chronic viral hepatitis B,CHB)患者血清HBeAg水平对抗病毒疗效的预测作用。方法免疫化学发光法和荧光定量聚合酶链反应技术分别检测78例HBeAg阳性患者在替比夫定治疗过程中血清HBeAg、HBV DNA水平的变化,统计学分析基线及治疗期间HBeAg水平与HBV DNA转阴的关系。结果治疗48周,HBV DNA转阴66例(84.6%),HBeAg转阴28例(36.6%);基线HBeAg水平<436 s/co或治疗12周时HBeAg下降>2.5 log10的患者更易发生HBV DNA转阴及HBeAg转阴。结论在替比夫定抗病毒治疗过程中检测HBeAg水平可用于评估抗病毒治疗效果。     

肝炎患者血清HCV—RNA与抗-HCV检测的相关性研究

目的：探讨抗-HCV与HCV—RNA及ALT的相关性及临床应用价值。方法：ELISA方法检测抗-HCV,实时荧光定量PCR检测HCV—RNA。结果：检测可疑HCV感染者200例,其中152例抗-HCV阳性．124例HCV—RNA阳性。HCV—RNA阳性患者中抗-HCV的阳性率显著高于抗-HCV阳性患者中HCV-RNA的阳性率（P〈0．05）。ALT水平与HCV病毒载量呈正相关（r=0．996,P〈0．01）。结论：同时检测抗-HCV和HCV-RNA可提高HCV感染诊断的阳性率,检测HCV-RNA及ALT对抗病毒治疗的疗效评价及治疗时间有重要意义。     

实时荧光定量PCR法测定福州地区高危型HPV感染型别与病毒载量

目的利用实时荧光定量PCR技术进行HPV-DNA分型定量检测,观察HPV亚型感染的分布情况,初步探讨HPV感染主要基因型别及病毒载量与宫颈病变的关系。方法随机收集本院妇科门诊患者108例,建立病历档案,采集患者宫颈脱落细胞样本,进行HPV-DNA分型定量检测。结果108例门诊患者检出HPV阳性14例,阳性率为12.96%,其中单纯HPV次要高危阳性感染9例,占64.28%;单纯HPV-16阳性感染2例,单纯HPV-31阳性感染1例;HPV-16、HPV-31和HPV次高危型三重感染1例,HPV-16和HPV-18/45的二重感染1例。结论本组患者HPV次高危型感染亚型几率最大,HPV高危型和次要高危型的感染与宫颈病变有高度的相关性,且病毒的感染量与病变的程度有一定的相关性,同时也显示HPV实时荧光定量PCR技术是一种有效的HPV检测手段。