细胞内寄生原虫诱导的凋亡抑制

细胞内寄生原虫虽能逃避宿主免疫系统的直接攻击和破坏,但被感染的细胞可通过启动自身的死亡,即程序性细胞死亡(凋亡),破坏病原体的生存环境。由于凋亡细胞能被巨噬细胞识别和吞噬,病原体有被一并消灭的趋势。近十年已证实细胞内存在凋亡抑制的信号旁路。病毒和细菌感染诱导凋亡抑制的分子机制,已有广泛研究,但是近几年才开始聚焦于原虫。     

应用细胞凋亡抑制因子评估心力衰竭患者心肌细胞凋亡水平

研究心力衰竭患者细胞凋亡抑制因子水平变化,评估衰竭心肌细胞凋亡状态。方法采取链霉亲和素－生物素ＥＬＩＳＡ法测定６０例心力衰竭患者和５２例正常对照组血清Ａｐｏ－１／Ｆａｓ,白细胞介素－６和肿瘤坏死因子α水平,并测定心力衰竭患者左室身血分数,了解ＥＦ变化与Ａｐｏ－１／Ｆａｓ间的关系。     

雄性激素抑制感染杜氏利什曼原虫的巨噬细胞的凋亡

目的：研究雄性激素对Ｃ５７ＢＬ／６ｊ雌性小鼠骨髓巨噬细胞凋亡的影响。方法：溴化丙锭染色及透射电镜观察凋亡特征性形态学变化。来自雄性激素和油处理过的小鼠骨髓巨噬细胞分别用杜氏利什曼原虫（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａｄｏｎｏｖａｎｉ）攻击２４ｈ后,检测特征性的ＤＮＡ凋亡梯形。结果：在培养基中去掉Ｍ－ＣＳＦ后可以诱导骨髓巨噬细胞的凋亡。ＤＮＡ片段电泳提示：①在雄性激素和油处理组间凋亡细胞的量没有区别,然而②经杜氏利什曼原虫攻击后,雄性激素处理组的凋亡细胞数明显低于油处理组。结论：雄性激素可以抑制感染了杜氏利什曼原虫的巨噬细胞的凋亡,不感染利什曼原虫时,这种抑制作用并不出现。雄性激素对骨髓巨噬细胞凋亡的抑制作用可能在雄性激素诱导的免疫抑制作用中发挥着重要的作用     

细胞凋亡抑制因子在慢性心力衰竭中的临床研究

本研究采用ELISA方法 ,在 5 8例慢性心力衰竭(心衰 )患者血清中定量测定细胞凋亡抑制因子(Fas/APO 1) ,对细胞凋亡在慢性心衰中的作用进行初步探讨 ,并观察血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)福辛普利 (商品名 :蒙诺 )和 β受体阻滞剂比索洛尔治疗对Fas/APO 1的影响。一、资料与方法1.对象 :心衰 5 8例 ,符合Framingham心衰诊断标准 ,排除内分泌及自身免疫性疾病。随机分为 :(1)常规治疗组 2 0例 ,年龄 38～ 72 (5 5 5 6± 14 79)岁 ;其中男 16例 ,女 4例 ;心功能NYHA 2～ 3级 12例 ,4级 8例 ;扩张型心肌病 10例 ,缺血性心脏病 6例 ,…     

一氧化氮诱导细胞凋亡

细胞调亡（apoptosis）也称为编程性细胞死亡（progr。mDedcelld6。th），是多细胞有机体为保持自身组织的稳定，调控自身细胞的增殖和死亡之间的平衡，由基因控制的细胞主动性死亡过程“’。它以质膜发泡、细胞质固缩、核染色体裂解和调亡小体的形成为特征，因此与病理情况下的细胞坏死有本质的区别。细胞调亡参与诸多生理与病理过程，如胚胎发育、衰老造血细胞的清除、肿瘤发生与人类免疫缺陷清江（HTV）就染等。细胞调亡过程受细胞外微环境因素和细胞内遗传物质的调控．其中，一氧化氛（NO）作为反应性氛中间物（RNI）的代表，是各种…     

多克隆抗胸腺细胞球蛋白对白血病细胞增殖抑制及凋亡诱导作用

目的:探讨多克隆兔抗人胸腺细胞球蛋白(ATG)对白血病细胞的生长抑制以及诱导凋亡作用。方法:体外培养Jurkat、Raji、HL-60、NB4、K562、U937细胞株以及15例患者原代白血病细胞。用50、100、150、200、250μg/mL终浓度的ATG在不同时间分别作用于以上细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)比色法检测细胞增殖抑制率,应用流式细胞术测定细胞凋亡率。结果:ATG对Jurkat、Raji、HL-60细胞有明显的增殖抑制以及诱导凋亡作用,且高浓度ATG抑制作用更强。ATG对NB4、K562、U937细胞增殖抑制与诱导凋亡作用均不明显。15例初发白血病患者中7例的原代细胞经ATG作用后明显凋亡,凋亡率均>30%。结论:ATG具有广谱抗白血病作用,尤其是对淋巴细胞白血病作用较强,为其在异基因造血干细胞移植中的应用提供了实验依据。     

紫花牡荆素抑制氧化应激诱导的HUVEC细胞凋亡

目的　研究紫花牡荆素（CAS）对H₂O₂　氧化应激诱导的HUVEC细胞凋亡的影响及其可能机制。方法　体外培养HUVEC细胞,在添加H₂O₂　氧化应激诱导之前先加入不同浓度的CAS　（5、10和20　μmoL/L）　预孵30　min,用MTT法观察各组细胞生长活性;用AO/EB染色和FCM法检测HUVEC细胞凋亡情况及其凋亡率;用Western　blot检测细胞凋亡相关蛋白表达活性。结果　MTT提示与H₂O₂组相比较,CAS呈浓度和时间依赖性增加H₂O₂氧化应激诱导的HUVEC细胞的生长活性（P<0.05）,降低HUVEC细胞的凋亡数量及凋亡率（P<0.05）;同时下调Cytochrome　C、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达降低（P<0.05）,激活Bcl-2蛋白表达（P<0.05）,而Bax蛋白表达不变（P>0.05）,Bcl-2/Bax上升（P<0.05）。结论　CAS拮抗H₂O₂氧化应激诱导的HUVEC细胞凋亡可能与其调节内源性线粒体凋亡途径有关。     

抑制 RhoA 基因表达诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究

目的：探讨抑制RhoA基因表达诱导乳腺癌（ BC）细胞凋亡的作用。方法通过已建立的RhoA腺病毒载体系统,感染BC MCF -7细胞。经过细胞培养、病毒滴度等,将收集的样本分别用Western blot、RT-PCR技术检测RhoA 蛋白表达和基因表达变化;对感染Adsi RNA-RhoA的BC 细胞进行MTT检测及细胞内DNA片段化检测。结果腺病毒siRNA-RhoA感染BC细胞能明显抑制RhoA基因表达（抑制率为75．64％）,降低RhoA基因的mRNA转录水平69．44％。 MTT检测结果表明,感染腺病毒Adsi RNA-RhoA组的肿瘤细胞生长、增殖被明显抑制。 TUNEL检测显示,抑制RhoA基因表达能明显导致BC细胞凋亡。结论利用siRNA抑制BC细胞中RhoA基因表达,能诱导BC细胞凋亡。     

XAF1抑制肝癌细胞增殖和诱导凋亡的实验研究

目的 X-染色体相关凋亡抑制蛋白（XIAP）相关因子1（XAF1）可与XIAP直接结合并拮抗其抗凋亡作用。本研究探讨XAF1基因在裸鼠体内抑制肝癌细胞增殖和诱导其凋亡的作用。方法应用免疫组织化学、TUNEL方法检测稳定高表达质粒DNA的肝癌细胞克隆Bel7404／XAF1、Bel7404／XAF1-AS和Bel7404／vector在体内的增殖和凋亡。结果Bel7404／XAF1组裸鼠肿瘤组织生长速度明显慢于其余两组的瘤组织（P〈0．05）,组成性高表达XAF1可以抑制裸鼠移植瘤的形成;TUNEL法检测Bel7404／vector的凋亡率为2．18％,Bel7404／XAF1凋亡率为7．09％,Bel7404／XAF1-AS凋亡率为2．91％（P〈0．05）。结论XAF1能够在体内抑制肝癌细胞增殖和诱导其凋亡,XAF1有可能成为肝癌基因治疗的新靶点。     

C-myc反义寡脱氧核苷酸抑制类风湿滑膜细胞增生诱导滑膜细胞凋亡

目的 研究硫代磷酸化修饰的c—myc反义寡脱氧核苷酸(antisens phosphorothioate oligodeoxynucleotides，ASP-ODN)在血清存在条件下对培养的人类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)滑膜B型细胞增生的影响及诱导凋亡的作用。方法 培养RA滑膜B型细胞，合成c—myc AS P-ODN，以阳离子脂质体。lipofectin为载体转染滑膜B型细胞，用显微镜观察和四唑盐(MTT)法检测对细胞增生的抑制作用，用荧光染色、荧光显微镜、流式细胞仪检测诱导细胞凋亡和c—myc蛋白表达的变化。结果c—myc AS P-ODN呈序列特异性抑制滑膜B型细胞增生并下调c—myc蛋白表达，诱导滑膜B型细胞凋亡。结论 c—myc AS P-ODN可能对RA的滑膜增生性炎症具有潜在的治疗作用，c—myc原癌基因可能成为反义核酸技术治疗RA的靶基因。     

树突状细胞与原虫感染

树突状细胞 (ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌ,ＤＣ)是一类专性抗原递呈细胞 (ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇｃｅｌｌ,ＡＰＣ) ,因其有膜样或树突状突起而得名。ＤＣ起源于体内的多能造血干细胞 ,经血流分布到全身各处。研究表明 ,ＤＣ有较强的递呈抗原和辅助混合淋巴细胞反应的能力 ,其在原虫感染发病机制中的重要作用越来越受到人们的重视。本文简要概述ＤＣ在杜氏利什曼原虫、枯氏锥虫和恶性疟原虫等原虫感染免疫中的功能。1　ＤＣ的功能除ＤＣ外 ,具有抗原递呈能力的细胞还有活化的Ｂ细胞、巨噬细胞 ,但ＤＣ是最主要而专一的。ＤＣ不…     

树突状细胞诱导的抗肿瘤免疫诱导移植瘤细胞凋亡并抑制其增殖

目的研究树突状细胞(DC)体外诱导的细胞免疫能否抑制裸鼠移植瘤生长及其机制.方法联合应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及白介素-4(IL-4)直接从肝癌患者外周血中培养出DC,以源于人肝癌细胞系HepG2肿瘤细胞的肿瘤抗原粗提物刺激DC,DC激活同源的T淋巴细胞产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL),建立裸鼠人肝癌细胞系HepG2移植瘤模型.以CTL治疗裸鼠HepG2移植瘤并观察治疗效果,检测移植瘤标本肿瘤细胞凋亡情况.结果DC诱导的CTL通过诱导肿瘤细胞凋亡并抑制其增殖而抑制移植瘤生长.结论经肿瘤抗原激发的DC有可能在肿瘤的治疗中发挥重要作用.     

脑出血后的抑制细胞凋亡干预

脑出血后血肿周围组织可发生继发性损伤。研究表明，细胞凋亡在脑出血后继发性损伤中起着重要作用。抑制细胞凋亡可显著改善脑出血后的神经功能缺损。     

病毒感染对细胞凋亡影响的研究进展

病毒感染与宿主细胞凋亡之间存在着密切的关系。宿主细胞主动性凋亡引起被感染细胞死亡,同时达到清除病毒的效果,在机体防御病毒感染中起重要作用;病毒亦主动诱导或抑制宿主细胞凋亡,从而达到在机体内复制产生更多子代病毒并完成生活周期的目的,并造成持续性感染或肿瘤发生。本文对细胞凋亡与病毒感染关系相关研究进行综述,为病毒感染性疾病的发病机制、治疗和抗病毒制剂研究提供新思路。     

树突状细胞诱导肺癌细胞凋亡的研究

许多研究证实，冷冻不仅可局部杀灭肿瘤细胞，还可通过增强细胞免疫和体液免疫的方式激发局部和全身的免疫反应。但对免疫作用的机制仍不十分清楚。我们将冻融癌细胞、体外培养的树突状细胞(DCs)、致敏T淋巴细胞共同体外培养，观察其对靶细胞的凋亡作用。     

XAF1基因在肝癌细胞凋亡中的诱导作用

背景：X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）与凋亡抑制和肿瘤细胞耐药现象密切相关。目的：研究XIAP相关因子1（XAF1）基因抑制人肝癌细胞株Bel-7404和HepG2增殖和诱导凋亡的作用。方法：以腺病毒Ad5／F35为载体,构建重组腺病毒Ad5／F35-XAF1、对照空病毒Ad5／F35-Null和报告病毒Ad5／F35-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）,分别以相同感染复数（MOI）感染人肝癌细胞株Bel-7404和HepG2,并设立空白组作为对照。作用48h后,以荧光显微镜检测Ad5／F35-EGFP的感染效率;分别以逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和蛋白质印迹法检测XAF1 mRNA和蛋白表达;以MTT法检测细胞活力;以Annexin V—FITC／PI双染法和原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡率。结果：Ad5／F35-EGFP感染48h后,几乎所有Bel-7404和HepG2细胞均表达EGFP。Ad5／F35-XAF1感染48h后,两种肝癌细胞中XAF1 mRNA和蛋白表达均明显增高．细胞活力呈剂量依赖性地降低,细胞凋亡率显著增加。结论：重组腺病毒Ad5／F35-XAF1在人肝癌细胞株Bel-7404和HepG2中的感染效率高,XAF1在不同的肝癌细胞株中恢复表达后,能显著抑制肝癌细胞增殖并促进其凋亡,有可能成为肝癌基因治疗的新靶点。     

寄生原虫的ABC蛋白与耐药性

ＡＴＰ结合盒蛋白也参与疟原虫,利什曼原虫,痢疾阿米巴等寄生原虫的耐药性。由于ＡＢＣ转运器也局限于细胞内小细胞器中,因此认为耐药性的机理,除了有向细胞外排泄的模式外,也有对细胞内小细胞的隔离模式。为了应付各种各样的原虫虫种与虫株,必需考虑药物选择性与生理功能的多样性来制定克服耐药性的策略。