番茄红素对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的 研究番茄红素对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法 取对数生长期人肝癌HepG2细胞,分别给予不同浓度番茄红素(5、10、20 μg/ml)和顺铂(40 μg/ml)进行干预,48 h后通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率,通过流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡状况,采用Western blotting技术检测Bax、Bcl-2、激活型Caspase-3蛋白表达.结果 干预48 h后,空白对照组人肝癌HepG2细胞增殖抑制率为0,番茄红素(5、10、20 μg/ml)组和顺铂组分别为(21.3±4.2)％、(40.5±7.6)％、(63.8±9.1)％和(37.8±5.9)％,差异有统计学意义(F=37.905,P=0.000);它们分别与空白对照组比较,差异均具有统计学意义(t=208.124,P=0.000;t=394.637,P=0.000;t=628.592,P=0.000;t =257.168,P=0.000).番茄红素(10、20μg/ml)组细胞周期G0-G1期比例分别为(54.0±2.9)％、(67.3±3.6)％,与空白对照组(37.9±1.5)％比较,差异有统计学意义(t =4.508,P=0.024;t=10.673,P=0.006);番茄红素(10、20 μg/ml)组G2-M期比例分别为(8.5±0.6)％、(4.7±0.5)％,与空白对照组比较(18.4±0.8)％,差异有统计学意义(t=9.975,P=0.008;t=13.864,P=0.003).番茄红素组(5、10、20 μg/ml)和顺铂组细胞凋亡指数分别为(19.5±4.8)％、(43.0±9.2)％、(67.6±10.1)％和(36.9±6.8)％,与空白对照组[(3.6±1.7)％]比较均显著升高,差异有统计学意义(t=18.617,P=0.001;t=34.295,P=0.000;t=51.437,P=0.000;t =29.804,P=0.000).番茄红素(10、20 μg/ml)组和顺铂组Bel-2、Bax表达及Bax/Bcl-2比值分别为0.42±0.09、0.43 ±0.14、1.02±0.39,0.27±0.08、0.76 ±0.19、2.81 ±0.85和0.34 ±0.11、0.31 ±0.09、0.91 ±0.40,与空白对照组(0.59 ±0.17、0.18 ±0.06、0.31 ±0.12)比较,Bcl-2表达显著下调,差异具有统计学意义(t=4.327,P=0.023;t=11.064,P=0.006;t =5.182,P=0.018),Bax表达显著上调,差异具有统计学意义(t=9.837,P =0.008;t=17.349,P=0.001;t=10.165,P=0.007),Bax/Bcl-2比值显著升高,差异均具有统计学意义(t=11.521,P=0.006;t=18.194,P=0.001;t=9.537,P=0.008).番茄红素(5、10、20 μg/ml)组和顺铂组激活型Caspase-3蛋白表达分别为0.25 ±0.07、0.34 ±0.11、0.46 ±0.18和0.17 ±0.05,与空白对照组(0.08±0.03)比较,差异具有统计学意义(t=8.307,P=0.009;t=13.067,P=0.006;t=16.218,P=0.003;t=5.202,P=0.019).结论 番茄红素能够通过抑制细胞增殖并促进其凋亡而对人肝癌HepG2细胞生长起到一定的抑制作用,其机制可能与番茄红素能够影响细胞周期进程并调节凋亡相关基因蛋白表达有关.     

磁微球对肝癌HepG2细胞增殖影响的研究

目的:观察不同浓度的磁性纳米颗粒对肝癌HepG2细胞生长的影响.方法:化学共沉淀法制备磁流体,以浓度0、4和8 mg/mL的磁微球分别作用于HepG2细胞,48 h后流式细胞仪检测细胞凋亡情况.以不同浓度的磁微球作用于HepG2细胞不同时间,MTT检测其增殖率的变化.电镜观察磁微球作用于肝癌HepG2细胞后的形态学变化.结果:制备的磁流体为黑色胶体混悬液,透射电镜观察发现,颗粒以椭圆形和球形居多,颗粒大小多为70 nm左右.4 mg/mL磁流体作用于HepG2细胞48 h后的凋亡率为(32.73±4.80)％,8 mg/mL磁流体作用于HepG2细胞48 h后的凋亡率为(53.87±5.35)％,与HepG2细胞自身凋亡率的(21.15±1.06)％相比,差异均有统计学意义,P值均＜0.05.磁微球浓度为4 mg/mL分别作用HepG2细胞24和48 h的细胞抑制率分别为17.97％和20.22％、8 mg/mL则为35.93％和35.27％,与磁微球浓度为0 mg/mL作用相同时间的抑制率比较差异均有统计学意义,t值分别为2.237,2.483,2.985和3.173,P值均＜0.05.结论:磁微球可对抑制肝癌HepG2细胞增殖,但不成剂量时间依赖关系.     

PPARγ基因静默抑制肝癌HCCLM3细胞增殖并诱导其凋亡

目的:观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ(peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)基因静默对肝癌细胞增殖与凋亡的影响.方法:构建靶向PPARγ的短发夹状RNA真核表达载体并转染HCCLM3细胞,采用RT-PCR、Western印迹法检测HCCLM3细胞中PPARγ的表达;MTT法检测细胞增殖;TUNEL法及FCM法检测细胞的凋亡;免疫细胞化学法检测PCNA、野生型p53的表达.结果:shPPARγ转染组PPARγmRNA表达下调80.5%.转染后48 h,pshPPARγ组细胞增殖抑制率为71.5%;40 h时,PCNA阳性率为(23.8±7.2)%;TUNEL法检测凋亡率为(24.2±4.7)%,FCM法检测凋亡率为(23.2±4.2)%,2种方法的检测结果一致;shPPARγ转染组细胞被阻滞干G0/G1期,G2/M期细胞减少,与阴性对照和空白对照组比较(P<0.01)差异有统计学意义,且野生型p53表达增加.结论:PPARγ基因静默能诱导HCCLM3细胞凋亡,抑制增殖;与促进野生型p53表达相关.     

去甲斑蝥素对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡和survivin表达的影响。方法:MTT法检测NCTD对HepG2细胞增殖的影响,Hochest33258染色、AnnexinV/PI染色、DNA琼脂糖电泳检测NCTD对HepG2细胞凋亡的影响,Western blotting检测NCTD对HepG2细胞survivin蛋白表达的影响。结果:NCTD可显著抑制HepG2细胞的增殖,呈质量浓度(5、10、20和40μg/ml)依赖性,40μg/ml NCTD作用48h时HepG2细胞抑制率达(81.27±3.25)%。NCTD作用HepG2细胞24h后,荧光显微镜下可见HepG2细胞出现核固缩和核裂解现象;DNA琼脂糖电泳显示,基因组DNA呈现典型的凋亡梯状图形;流式细胞术结果显示,5、10、20和40μg/ml NCTD作用后,HepG2细胞的凋亡率分别为(7.33±0.25)%、(18.23±1.19)%、(32.5±2.30)%和(48.23±1.17)%。Western blotting结果显示,随着NCTD作用剂量的增加,HepG2细胞中survivin蛋白的表达逐渐减少。结论:NCTD能抑制HepG2细胞增殖并促进其凋亡,其凋亡的发生与下调survivin蛋白的表达有关。     

YM155对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨YM155对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:采用CCK-8法检测细胞生长抑制率；应用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化；Western blot法检测细胞中蛋白表达的变化，实时定量RT-PCR检测survivin mRNA表达的变化。结果:YM155对人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用呈现剂量和时间依赖性。流式细胞术结果显示，HepG2细胞凋亡率明显升高,呈现剂量依赖性。YM155可引起survivin mRNA及蛋白表达下降，而caspase-3、caspase-9和PARP蛋白表达上升。结论:YM155可以抑制人肝癌HepG2细胞的增殖并促进其凋亡，其机制可能是通过激活caspase凋亡途径来实现。     

IWP-2对人肝癌Hep3B细胞增殖和凋亡的影响及其机制探讨

目的:研究Wnt/β-catenin抑制剂IWP-2对体外培养的人肝癌细胞Hep3B细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:用终浓度分别为0、20、40、80、160、320μmol/L的IWP-2作用于人肝癌Hep3B细胞,采用CCK-8法检测细胞的增殖抑制率,FCM法检测细胞周期分布与细胞凋亡率,Western blot法检测细胞凋亡蛋白的表达,Western blot法检测细胞中Cyclin D1和survivin蛋白表达的变化,实时定量RT-PCR法检测Cyclin D1和survivin mRNA表达的变化。结果:20~320μmol/L的IWP-2对细胞的增殖均有抑制作用,其抑制作用随IWP-2浓度的升高和作用时间的增长而增强,各组与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）。FCM检测结果显示,IWP-2(20~320μmol/L)能够导致G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降;同时诱导细胞凋亡,凋亡率随IWP-2浓度的升高而上升,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）。IWP-2可引起caspase-3和caspase-7蛋白表达水平的升高,并且可下调肝癌细胞中Cyclin D1和survivin基因和蛋白的表达水平,呈明显的剂量依赖性。结论:IWP-2可抑制Hep3B细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与抑制Cyclin D1和survivin的表达有关。     

鲜壁虎活性组分对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨鲜壁虎活性组分对人肝癌BEL．7404细胞增殖及凋亡的影响。方法将鲜壁虎活性组分冻干粉配制为不同浓度的溶液,并作用于肝癌BEL-7400细胞。以MTT法检测不同浓度的鲜壁虎活性组分对肝癌BEL-7400细胞增殖的抑制作用,流式细胞术分析各组细胞的凋亡情况。结果不同浓度的鲜壁虎活性组分均对肝癌BEL-7404细胞的增殖有抑制作用,且呈剂量．时间依赖效应,实验组的抑制率均较对照组显著提高（P〈0．05）。不同浓度的鲜壁虎活性组分均能诱导肝癌BEL-7404细胞凋亡,高浓度组（2560p,g／m1）的作用更为明显（P〈O．05）。结论鲜壁虎活性组分可显著抑制BEL-7404细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

康莱特注射液诱导肝癌细胞凋亡及其对凋亡蛋白procaspase-3和caspase-9表达的影响

目的:探讨康莱特注射液(Kanglaite)对人肝癌BEL-7404细胞的增殖抑制作用、凋亡诱导作用以及对凋亡蛋白procaspase-3和caspase-9表达的影响.方法:采用MTT法检测康莱特注射液和阳性对照顺铂(cisplatin ,DDP)对BEL-7404细胞的增殖抑制作用,Hoechst 33258染色观察凋亡细胞核的情况,FCM检测细胞凋亡率,Western印迹法检测凋亡蛋白procaspase-3和caspase-9的表达.结果:MTT结果显示,经不同体积浓度康莱特注射液(10、20、40、80及160 μL/mL)作用BEL-7404细胞后,80 μL/mL康莱特注射液作用48 h时对肝癌BEL-7404细胞有明显的抑制增殖作用;Hoechst 33258染色可见细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变;FCM法检测结果提示,空白对照组、DDP 10 μg/mL组和康莱特注射液80 μL/mL组的凋亡率分别为(1.23±0.40)%、(32.53±0.65)%和(3.13±0.32)% (P＜0.01);Western印迹法检测结果提示,康莱特注射液及DDP作用48 h后 procaspase-3蛋白的表达量明显降低 (P＜0.01),caspase-9蛋白的表达量显著升高(P＜0.01).结论:康莱特注射液可抑制肝癌BEL-7404细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与凋亡相关蛋白procaspase-3表达下调及caspase-9表达上调有关.     

苦参碱对人类肝癌细胞HepG2增殖、细胞周期及凋亡的影响

 目的　探讨苦参碱（MT）对人类肝癌细胞株HepG2增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法　用不同质量浓度的MT（0.0125、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 g／L）对培养的HepG2细胞作用不同时间（24、48、72 h）,用四氮噻唑蓝（MTT） 比色法检测MT对细胞增殖的影响;流式细胞术（FCM）检测MT对HepG2细胞周期及凋亡的影响。结果　质量浓度≥0.1 g／L的MT有抑制HepG2细胞增殖的作用,且作用随药物质量浓度的增加及时间的延长而加强（P＜0.01）。FCM检测分析显示,0.8 g／L MT作用48 h能将HepG2细胞阻滞在G1期[（75.3±6.5）%对（64.1±6.3）%]（P＜0.05）,1.6 g／L MT作用48 h能将HepG2细胞阻滞在G2期[（29.1±9.1）%对（11.6±2.1）%]（P＜0.01）。0.4、0.8、1.6 g／L MT作用12、24、48 h对HepG2细胞都有诱导凋亡作用,且作用随药物质量浓度的增加及作用时间的延长而加强（P＜0.01）。结论　MT能够抑制HepG2细胞的增殖、诱导其凋亡并影响其细胞周期,呈时间和剂量依赖性。MT抗肝癌的机制可能与影响肝癌细胞周期、抑制细胞增殖及诱导凋亡有关。     

珠子参体外诱导人肝癌细胞凋亡效应及机制研究

目的观察珠子参体外诱导人肝癌细胞凋亡效应并初探其分子机制。方法体外细胞培养采用人肝癌细胞株SMMC-7721,分为对照(BL)组、珠子参(PJ)组、二甲基亚砜(DMSO)组及5-FU组,采用电镜观察作用后肝癌细胞超微结构改变;流式细胞仪检测肝癌细胞周期和凋亡率;RT-PCR法检测癌基因c-myc、c-fos和抑癌基因p53、p21表达的变化。结果与对照组比较,电镜下珠子参组SMMC-7721细胞染色质浓缩,分解成大小不一有膜包绕团块,内含有新月形DNA物质及细胞器,形成凋亡小体;周期分析可见G0/G1期细胞阻滞,阻止了细胞向S期的转换,并引起细胞凋亡,凋亡率达38.34%;RT-PCR半定量分析珠子参能降低癌基因c-myc表达(P<0.05),增高抑癌基因p53和p21表达(P<0.05)。结论珠子参能诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡,部分作用机制可能与阻滞细胞停留在G0/G1,降低癌基因c-myc和c-fos表达,增高抑癌基因p53和p21表达有关。     

鱼藤素对淋巴瘤Daudi细胞株细胞增殖细胞凋亡的影响及其机制

目的观察鱼藤素对人Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响,并探讨其分子机制。方法四甲基偶氮唑蓝(MTY)法检测细胞增殖活性,Hoechst 33258染色和Annexin-V／PI双标法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期分布,Western blot检测细胞内cyclin D1和pRb的蛋白表达。结果鱼藤素对Daudi细胞具有明显的增殖抑制作用,而对正常人外周血单个核细胞(PBMC)抑制作用不明显。鱼藤素可以诱导Daudi细胞凋亡,Hoechst 33258染色可见典型凋亡小体。Annexin V／PI双标法显示,鱼藤素诱导细胞发生早期凋亡,并呈剂量依赖性,20、40、80 nmol／L鱼藤素作用24 h时,凋亡率分别为15．46％±0．62％、18．48％±2．98％和31．42％±1．43％。鱼藤素作用Daudi细胞后,主要使细胞周期聚积于G0／G1期,G0／G1期细胞比例随鱼藤素剂量增大而逐渐增高,40 nmol／L鱼藤素作用24 h达56．56％;相反,S期细胞比例随鱼藤素剂量增大而逐渐降低,对G2／M期细胞作用不明显。鱼藤素使cyclin D1及pRb蛋白表达降低,呈剂量依赖关系。结论鱼藤素抑制Daudi细胞增殖,使细胞阻滞于G0／G1期,并诱导细胞凋亡。其抗肿瘤机制可能与下调cyclin D1和pRb蛋白表达有关。     

白桦脂酸对Jurkat白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察白桦脂酸对人T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,并探讨其分子机制.方法 以不同浓度的白桦脂酸处理Jurkat细胞,采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTY)法检测细胞的增殖活性,Hoechst 33258染色和Annexin-V/PI双标法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期分布,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Jurkat细胞中cyclin D3和bcl-xlmRNA含量的变化,Western blot法检测cyclin D3和bcl-xl蛋白的表达.结果 白桦脂酸对Jurkat细胞有明显的增殖抑制作用,并呈时间和浓度依赖性.白桦脂酸可诱导Jurkat细胞凋亡,Hoechst 33258染色可见典型的凋亡小体;Annxin-V/PI双标法显示,20、60和100 μmol/L白桦脂酸作用于Jurkat细胞24 h时,细胞的早期凋亡率分别为8.7%±0.3%、28.0%±1.3%和33.6%±2.0%.白桦脂酸可使Jurkat细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期.白桦脂酸可使Jurkat细胞中凋亡相关基因cyclin D3和bcl-xl mRNA及蛋白的含量均明显减少,并呈浓度依赖性.结论 白桦脂酸可抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡,可使细胞阻滞于G0/G1期;其可能通过下调cyclin D3和bcl-xl mRNA及蛋白的表达而发挥抗肿瘤作用.     

lncRNA ANCR对直肠癌细胞增殖和凋亡能力的影响及机制

目的 探讨长链非编码RNA（lncRNA）抗分化非编码RNA（ANCR）对结直肠癌（CRC）细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法 收集50例CRC患者的癌组织和癌旁组织,通过RT-qPCR检测组织中ANCR和叉头框蛋白O1（FOXO1）的表达水平并进行Pearson相关性分析。利用RNA 拉下和RNA免疫沉淀实验（RIP）确认ANCR是否可与FOXO1相互作用。将经过慢病毒包装的ANCR和FOXO1慢病毒质粒转染至人CRC细胞系SW480细胞中,细胞分为6组：对照组（未转染）,NC组（转染慢病毒质粒空载）,ANCR组（转染 pHRi-ANCR）,sh-ANCR组（转染pHRi-sh-ANCR）,FOXO1组（pHRi-FOXO1）,sh-ANCR + sh-FOXO1组（同时转染pHRi-sh-ANCR和pHRi-sh-FOXO1）。RT-qPCR检测过表达和抑制ANCR后FOXO1的表达水平,5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷（EdU）标记技术和流式细胞术分别检测各组细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡情况。Western blot检测B淋巴细胞瘤-2（BCL-2）、BCL2相关蛋白X（BAX）、细胞周期蛋白D1（cyclin D1）及人P27蛋白（P27）的表达情况。结果 与癌旁组织相比,CRC组织中ANCR表达明显增加,FOXO1表达明显减少（P<0.01）,二者表达水平负相关（P<0.01）。ANCR能够结合并抑制FOXO1表达。与NC组相比,sh-ANCR组和FOXO1组细胞增殖数减少,细胞阻滞于G0/G1期,细胞凋亡数增多,BAX和P27增多,BCL-2和cyclin D1减少（P<0.05）。与sh-ANCR组相比,sh-ANCR + sh-FOXO1组上述指标得到逆转（P<0.05）。结论 lncRNA ANCR在CRC中表达升高并通过调控FOXO1的表达调控CRC细胞的细胞增殖和凋亡。     

NKX6.3对食管癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响及作用机制

目的 探讨NKX6.3对食管癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响及可能的作用机制。方法 人食管癌EC9706细胞分别转染NKX6.3（NKX6.3组）和空白质粒（miR-NC组）,设空白对照组（Control组）。CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞内活性氧、线粒体膜电位及细胞凋亡情况,Transwell 法检测细胞侵袭能力,Western blot检测增殖相关蛋白Ki67、侵袭相关蛋白（Vimentin、E-cadherin及N-cadherin）,凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax及Caspase-3）的表达。结果 Control组、miR-NC组和NKX6.3组食管癌EC9706细胞中NKX6.3表达、细胞增殖能力、细胞内活性氧、线粒体膜电位、细胞凋亡及侵袭能力,以及Ki67、Vimentin、E-cadherin、N-cadherin、Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白表达差异均有统计学意义（P＜0.01）。其中,NKX6.3组NKX6.3表达量、细胞内活性氧,细胞凋亡率,Vimentin、E-cadherin、Bax及Caspase-3蛋白表达水平较miR-NC组升高;而线粒体膜电位、细胞增殖率、细胞侵袭数目、N-cadherin及Bcl-2蛋白表达水平降低（P<0.01）。结论 NKX6.3可抑制食管癌细胞增殖和侵袭,促进细胞凋亡,该作用可能通过调控食管癌细胞中的增殖凋亡相关蛋白表达及活性氧水平实现。     

烟酰胺磷酸核糖转移酶对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)基因表达对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖、凋亡的影响及其相关机制。方法在体外合成针对NAMPT基因的siRNA并转染U266细胞,实验分为si-NAMPT组(转染siRNA-NAMPT的U266细胞)、si-NC组(转染阴性对照siRNA的U266细胞),采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染后U266细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测转染后各组细胞NAMPT、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)、β-catenin表达水平。结果si-NAMPT组转染48、72 h后与si-NC组比较,对U266细胞增殖抑制作用(570 nm处吸光度值)增加(48 h:0.78±0.06比1.62±0.11;72 h:1.23±0.14比2.37±0.18),差异均有统计学意义(t=3.54,P=0.034;t=4.72,P<0.01)。si-NAMPT组与si-NC组相比,细胞早期凋亡率升高[(53.42±0.25)%比(25.98±3.18)%],差异有统计学意义(t=4.41,P<0.01)。与si-NC组相比,si-NAMPT组p-AKT、p-GSK-3β、NAMPT、β-catenin蛋白水平均降低(均P<0.05)。结论沉默NAMPT基因可明显抑制U266细胞增殖并诱导细胞凋亡,其可能通过抑制AKT-GSK-3β-β-catenin信号通路发挥作用。     

miR-194-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制探讨

目的:分析miR-194-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响并探讨其机制。方法:采用生物信息学方法对miR-194-3p的表达情况以及预后信息进行统计分析。采用荧光定量PCR检测胃癌细胞系中miR-194-3p的表达情况;采用CCK-8实验、克隆形成实验和流式细胞技术检测miR-194-3p对胃癌细胞增殖和凋亡能力的影响;Western blot检测过表达miR-194-3p后Caspase3的表达情况。结果:与癌旁组织相比,miR-194-3p在胃癌组织中显著高表达。TCGA预后分析显示,miR-194-3p的高表达与良好的预后相关。与GES-1相比,miR-194-3p在6种胃癌细胞系中均显著低表达。CCK-8和克隆形成实验结果显示,与空载组相比,慢病毒转染过表达miR-194-3p后显著抑制胃癌细胞增殖。流式细胞术显示,miR-194-3p可显著促进胃癌细胞凋亡。Western blot结果显示,Caspase3的表达在miR-194-3p过表达的胃癌细胞中显著增加。结论:miR-194-3p在胃癌细胞中低表达,miR-194-3p的过表达可显著抑制胃癌细胞的增殖,并促进细胞凋亡。其中miR-194-3p促进凋亡的机制可能是通过Caspase3的凋亡相关通路发挥作用。     

氨基葡萄糖对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究氨基葡萄糖对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其分子机制。方法:CCK-8法检测人肝癌HepG2细胞的增殖情况。流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡。Western blot检测ERK及P-ERK蛋白的表达水平。结果:氨基葡萄糖可以抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,且该作用随着药物浓度的增加而逐渐增强。1.0mmol/L氨基葡萄糖作用72h可以使G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低。同时,2.0mmol/L及4.0mmol/L氨基葡萄糖处理72h可以使人肝癌HepG2细胞发生凋亡。另外,随着药物浓度的增加,人肝癌HepG2细胞中ERK蛋白的磷酸化水平逐渐降低。结论:氨基葡萄糖可能是通过降低ERK1/2蛋白的磷酸化水平影响细胞周期,从而抑制人肝癌HepG2细胞的增殖并诱导其发生凋亡。     

海藻色素糖蛋白对小鼠H22肝癌细胞增殖与凋亡的影响

目的：研究麒麟菜海藻色素糖蛋白（seaweed pigment glycoprotein,SPG）对小鼠H22肝癌细胞增殖与凋亡的影响。方法：将不同浓度SPG与小鼠H22肝癌细胞共同培养,用MTT法测定癌细胞增殖活性。建立H22移植瘤小鼠肝癌模型,随机分为SPG高、中、低剂量组,对照组及环磷酰胺组。实验组小鼠每天分别给予不同剂量（100、50、10mg/kg）的SPG灌胃,连续10d,对照组同法给予等量生理盐水,环磷酰胺组小鼠腹腔注射20mg/kg环磷酰胺,隔日一次。各组小鼠均于末次给受试物后24h处死,取肿瘤组织用免疫组化法检测各组Bcl-2和Bax蛋白表达。结果：SPG高剂量组瘤细胞增殖活性（0.545±0.002）明显高于对照组（0.404±0.008）（P〈0.05）;SPG高剂量组Bcl-2和Bax蛋白阳性表达率分别为16.78%和38.1%,对照组分别为65.16%和4.68%,两组间的差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：SPG具有抑制小鼠H22肝癌细胞增殖、促进其凋亡的作用。     

阿帕替尼调控WWOX对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其机制研究

目的:探讨阿帕替尼（Apatinib）是否通过包含氧化还原酶的WW结构域（WWOX）影响子宫内膜癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭。方法:噻唑蓝（MTT）比色法检测4 μmol/L、8 μmol/L、16 μmol/L、32 μmol/L Apatinib作用于子宫内膜癌细胞HEC-1 24 h、48 h、72 h后的细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、WWOX蛋白水平,Transwell小室法检测迁移细胞数、侵袭细胞数。在HEC-1中转染pcDNA3.1-WWOX,或转染si-WWOX并用16 μmol/L Apatinib进行处理,采用上述方法评估细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭情况。结果:Apatinib明显降低HEC-1细胞活性（P＜0.05）,呈剂量、时间依赖性;Apatinib显著增加HEC-1细胞凋亡率及p21、Bax蛋白表达量（P＜0.05）,呈剂量依赖性;Apatinib明显降低Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达量（P＜0.05）,呈剂量依赖性;16 μmol/L Apatinib显著减少HEC-1细胞的迁移细胞数、侵袭细胞数、MMP-2蛋白表达量（P＜0.05）,明显提高E-cadherin、WWOX蛋白表达量（P＜0.05）。过表达WWOX明显降低HEC-1细胞中Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2蛋白表达量、细胞活性、迁移细胞数、侵袭细胞数（P＜0.05）,提高p21、Bax、E-cadherin、WWOX蛋白表达量及细胞凋亡率（P＜0.05）。抑制WWOX表达逆转了Apatinib对HEC-1细胞中Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2蛋白表达量、细胞活性、迁移、侵袭的抑制作用,以及逆转了其对p21、Bax、E-cadherin、WWOX蛋白表达量、细胞凋亡的促进作用。结论:阿帕替尼通过调控WWOX表达,抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭,并诱导细胞凋亡。     

微小RNA-218-5p对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制

目的 探讨miRNA-218-5p对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 将BIU-78膀胱癌细胞分为miRNA-con组(转染miRNA-con)、miRNA-218-5p组(转染miRNA-218-5p mimics)、anti-miRNA-con组(转染anti-miRNA-con)、anti-miRNA-218-5p组(转染anti-miRNA-218-5p)、si-con组(转染si-con)、si-98序列相似的家族成员A(FAM98A)组(转染si-FAM98A)、miRNA-218-5p+pcDNA-con组(共转染miRNA-218-5p和pcDNA-con)、miRNA-218-5p+pcDNA-FAM98A组(共转染miRNA-218-5p和pcDNA-FAM98A).采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNA-218-5p和FAM98A mRNA的表达水平;蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表达;MTT法检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性.结果 相较于正常膀胱组织细胞SV-HUC-1,膀胱癌细胞BIU-78、T24、EJ中FAM98A mRNA和蛋白表达水平均升高,miRNA-218-5p表达水平均降低(P﹤0.05).过表达miRNA-218-5p和敲减FAM98A均可抑制膀胱癌细胞BIU-78增殖,诱导细胞凋亡,抑制cyclin D1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达,促进Bcl-2相关X蛋白(BAX)表达.miRNA-218-5p靶向负调控FAM98A的表达,过表达FAM98A能逆转miRNA-218-5p对膀胱癌细胞BIU-78的增殖抑制和凋亡促进作用.过表达miRNA-218-5p抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路中p-PI3Kp85和p-AKT蛋白的表达,过表达FAM98A能逆转miRNA-218-5p对p-PI3Kp85和p-AKT表达的抑制作用.结论 miRNA-218-5p可抑制膀胱癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与FAM98A及PI3K/AKT信号通路有关,将可为膀胱癌的预防和治疗提供新靶点.