HPLC柱前衍生法测定舒血宁注射液中四种氨酸的含量

[目的]建立舒血宁注射液中4种氨基酸(天门冬氨酸、苏氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸)的高效液相色谱(HPLC)柱前衍生化法,为舒血宁注射液的质量控制提供方法。[方法]以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,乙腈-水(5∶1)-乙酸铵缓冲溶液(p H 6.5)为流动相,梯度洗脱,检测波长为254 nm,测定舒血宁注射液中天门冬氨酸、苏氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸的含量。[结果]4种氨基酸的分离及线性关系良好,精密度,重复性,稳定性RSD均都小于5%,平均回收率在95.6%~98.9%之间且RSD小于5%。舒血宁注射液中4种氨基酸总含量为1 738.47μg/mL。其中甲硫氨酸含量最高,丙氨酸的含量最低。[结论]本方法简便、准确、可靠,适用于舒血宁注射液中氨基酸含量的测定。     

柱前衍生化HPLC法测定复方布洛芬缓释胶囊中精氨酸的含量

目的建立柱前衍生化HPLC法测定复方布洛芬缓释胶囊中精氨酸的含量。方法采用Waters Symmetry-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾2.0 g,加水1 000 ml溶解后,加磷酸0.45 ml,三乙胺3.0 ml,摇匀,经0.45μm滤膜过滤）-四氢呋喃（995∶5）-乙腈-甲醇=747.5∶2.5∶75∶175为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为330 nm。结果精氨酸浓度在50~200μg/ml范围内,色谱线性响应良好（r=0.9998）,缓释胶囊中精氨酸含量测定的平均回收率为100.61%,精密度良好（RSD=2.01）。结论柱前衍生化HPLC法测定复方布洛芬缓释胶囊中的精氨酸含量结果准确、可靠、重现性好。     

OPA-FMOC联用柱前衍生法测定复方氨基酸注射液中氨基酸的含量

随着生物工程及医药工业的蓬勃发展,氨基酸制剂的品种越来越多,因此氨基酸分析的重要性日益增加。目前已见报道的几种方法各有其优点,但不可避免的存在这样或那样的缺陷。以异硫氰酸苯酯(PITC)作为衍生化试剂不仅毒性大,且需要专门的衍生装置在无水状态下进行;另一种衍生剂4-(二甲氨基)偶氮苯-4′-硫酰氯(Dabsyl-EL)同氨基酸反应速度相对较慢,甚至需要升高温度,对于实现自动化。本文采取OPA和FMCC为衍生化试剂,分别与一级、二级氨基酸进行定量柱前衍生化反应,再用HPLC分离测定。     

柱前衍生化HPLC测定中药材氨基酸的含量

目的:建立中药材有效成份氨基酸柱前衍生HPLC分析测定方法。方法:从常见中药材党参和山楂中提取氨基酸,邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生,反相高效液相色谱分离测定,以保留时间定性,面积外标法定量。结果:水解温度108℃,提取24 h,可有效提取药材中的氨基酸;梯度洗脱程序为(t,C%):(t:保留时间C:甲醇):(0,0);(9,30);(16,45);(25,60);(28,65);(32,80),二种药材中的十六种氨基酸得到较好分离和定性定量结果,其中天冬氨酸和胱氨酸的平均加样回收率分别为101.0%和94.4%。结论:采用HPLC柱前衍生分离分析党参和山楂中十六种氨基酸的方法灵敏、简便、快捷、高效,适于推广应用,可为解决中药材氨基酸分离测定难题提供参考。     

柱前衍生化HPLC法测定复方甘油注射液中甘油的含量

目的建立一种测定复方甘油注射液中甘油含量的方法。方法采用Diamonsil C18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相:缓冲液(0.01mol/L磷酸二氢钾,磷酸调pH至2.5)-乙腈(65∶35,v/v),流速1mL/min,柱温25℃,检测波长227nm,以对甲苯磺酰异氰酸酯(TSIC)为衍生化试剂,将甘油衍生化后进行含量测定。结果在该色谱条件下,甘油线性方程为y=327.74x+18.64(r=0.999 7,n=7)。加样回收率为97%~103%(n=3),RSD<3%(n=3)。衍生化样品在12h内稳定。测得样品中甘油为97%~103%。结论该方法简便,快速,结果准确,重现性好。     

柱前衍生HPLC法测定五谷虫中脂肪酸含量

目的 建立HPLC法测定五谷虫中脂肪酸含量的方法.方法 采用2-溴代苯乙酮作为衍生化试剂,三乙醇胺作为催化剂对脂肪酸进行衍生化使其产生紫外吸收,利用HPLC法进行含量测定.色谱条件为Agilent-C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);检测波长254 nm;流动相为水∶甲醇=10∶90;柱温为20 ℃;体积流量为1 mL/min,进样量为20 μL,内标为十七烷酸.结果 在上述色谱条件下,各脂肪酸衍生物均达到基线分离.亚油酸的含量为131.0 mg/L,软脂酸的含量为194.8 mg/L,油酸的含量为100.6 mg/L,硬脂酸含量为36.6 mg/L.结论 该方法稳定,重现性好,可用于五谷虫脂肪酸含量测定.     

柱前衍生RP-HPLC法测定泽泻中氨基酸的含量

目的 分析不同产地泽泻中氨基酸含量及其特征性。方法 采用邻苯二甲醛(OPA)、氯甲酸芴甲酯(FMOC)联合柱前衍生RP-HPLC测定泽泻中的17种氨基酸。结果 氨基酸质量浓度与峰面积呈良好的线性关系，r均在0．99以上。不同产地泽泻中氨基酸含量有一定差别。结论 该方法适宜泽泻药材中氨基酸含量的测定。     

HPLC／MS法与柱前衍生化HPLC／UV法测定环维黄杨星D有关物质比较

目的：验证柱前衍生化HPLC／UV测定环维黄杨星D有关物质的可行性。方法：环维黄杨星D同异氰酸苯酯反应后,柱前衍生化HPLC／UV测定环维黄杨星D有关物质并与HPLC／MS直接测定环维黄杨星D有关物质比较。结果：衍生化反应后,主峰与有关物质分离好,所测得的有关物质与HPLC／MS直接测定的环维黄杨星D有关物质一一对应。结论：环维黄杨星中含分子量为386,388的杂质,每分子环 内杨星D及有关物质均同2分子异氰酸苯酯定量反应,柱前衍生化HPLC／UV可测定环维黄杨星D腾物质,与HPLC／MS直接测定法相比,本法简单、准确。     

柱前衍生HPLC测定仲辛醇中的辛酮含量

目的：建立一种快速、准确测定仲辛醇产品中微量辛酮的方法，用于仲辛醇的质量控制。方法：采用柱前衍生HPLC法测定了仲辛醇中的辛酮含量，用C8柱分离，乙腈／水作流动相，检测波长为480nm.结果：实验 表明在浓度为6．5－65mg/L的线性范围内，可进行样品的定量分析，最 低检测限为0．16mg/L。结论：该方法应用于仲辛醇中少量的杂质辛酮的测定，结果令人满意。     

高效液相柱前衍生法测定板蓝根胶囊中精氨酸的含量

板蓝根胶囊是有板蓝根片改剂型而来,是由板蓝根药材组成,具有清热解毒,凉血利咽功效。用于肺胃热盛所致的咽喉肿痛、口咽干燥。为了进一步控制其质量,采用高效液相色谱法对制剂中精氨酸含量进行了测定。     

柱前衍生化HPLC法测定注射用帕米膦酸二钠含量

目的:建立9-氯甲酸芴甲酯(9-fluorenyl methyl chloroformate,FMOC-Cl)柱前衍生化高效液相色谱法(HPLC)测定注射用帕米膦酸二钠含量的方法。方法:碱性条件下供试品与FMOC衍生化反应,采用Linksil HPLC ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.4%EDTA(p H=7.2)(25∶75)为流动相,流速1 m L·min-1,检测波长为264 nm。结果:帕米膦酸二钠浓度在2³5μg·m L-1范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9995),检测限为0.5μg·m L-1,平均回收率101.2%(n=9)。结论:本法简单、准确、灵敏,适用于注射用帕米膦酸二钠的含量测定。     

采用高效液相色谱法测定注射用头孢美唑钠含量

目的:建立高效液相色谱法测定注射用头孢美唑钠的含量。方法:采用Diamonsil-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以0.08mol·L-1醋酸铵溶液∶甲醇(80∶20)(混合后,冰醋酸调pH至6.0)为流动相,流速为1.0mL·min-1,检测波长254nm,柱温30℃;以外标法进行含量计算。结果:头孢美唑钠在0.0105~0.8400mg·mL-1浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.9998,方法平均回收率为99.89%,中间精密度RSD为1.41%(n=6)。结论:本法简便、专属、灵敏快速,可用于注射用头孢美唑钠含量的测定。     

HPLC法测定艾迪注射液中紫丁香苷含量

目的:建立用HPLC测定艾迪注射液中紫丁香苷的含量.方法:色谱柱为Symmetry C18(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸-四氢呋喃(8:90:1.5:0.5),柱温为30℃,流速为1.0 ml/min,检测波长为265 nm.结果:紫丁香苷在2.6～26.2 μg/ml范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8,n=6),平均回收率为99.0%,RSD为0.3%.结论:本方法简便、快速、准确,适用于艾迪注射液中紫丁香苷的含量测定.     

柱前衍生高效液相色谱法测定克拉霉素血药浓度

目的采用柱前衍生高效液相色谱法测定克拉霉素血药浓度。方法克拉霉素血浆样品以正己烷-正丁醇混合溶液萃取后,与2,4-二硝基苯肼衍生化后进样。色谱柱为KromasiC18(4.6mm×250mm,5μm),0.05mol/LNH4H2PO4缓冲液(pH=6.5)-乙腈(68:32)为流动相,柱温室温,流速1.0mL/min,检测波长340nm。结果克拉霉素血药浓度在50～3000μg/L范围内,浓度与峰面积比有良好的线性关系(r=0.9998),最低检测浓度为30μg/L。平均方法回收率为(99.2±3.5)%(n=15)。日内RSD≤4.9%,日间RSD≤7.7%。结论本方法简单快速、准确,可用于克拉霉素临床药动学研究。     

HPLC法测定清肝注射液中芍药甙的含量

采用HPLC法测定清肝注射液中芍药甙的含量。用HypersilODS（250mm×4mmID）为色谱柱，以甲醇-异丙醇-冰醋酸-水（30：2：2：66）为流动相，检测波长为233nm。在此条件下，芍药甙的进样量在0．2μg～1．6μg时，与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9941）。平均回收率为98．5％，方法的日内和日间精密度分别为3．46％和4．72％。     

高效液相色谱法测定维生素C注射液含量

目的：建立高效液相色谱法测定维生素C注射液中维生素C含量的方法。方法：采用Phenomenex luna-NH2分析色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为磷酸二氢钾缓冲液-乙腈（1∶1,磷酸调至pH 3.0）;流速：1.0 ml/min;检测波长：245 nm。结果：维生素C的线性回归方程为Y=29 560X-21 310（r=0.999 5）,线性范围为5～30μg/ml,平均回收率为98.30%（n=9,RSD为2.1%）。结论：该方法操作简便,结果准确,可用于测定维生素C注射液中维生素C的含量。     

高效液相色谱法测定布洛芬注射液中精氨酸的含量

目的建立布洛芬注射液中精氨酸的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Global APS-NH2(4.6mm×250mm,5μm),流动相为磷酸盐缓冲液(pH=3.5)-乙腈(45:55);检测波长为205 nm。结果精氨酸在0.074mg/mL-0.37mg/mL范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,r=0.9998,回收率为100.19%。结论该方法简便、准确可靠、精密度良好,可作为布洛芬注射液中精氨酸的含量测定方法。     

高效液相色谱法测定注射用甲磺酸加替沙星含量

目的 建立注射用甲磺酸加替沙星含量测定方法.方法 采用反相高效液相色谱法测定甲磺酸加替沙星含量,色谱柱为C18柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相:三乙胺磷酸溶液-乙腈(82:18);流速:1.0ml/min;检测波长:325nm;柱温:30℃.结果 加替沙星线性范围为78.8～630.4μg/ml(r=0.9999),80%、100%、120%样品溶液平均回收率分别为99.45%,RSD=1.29%(n=3);99.24%,RSD=0.47%(n=3);99.81%,RSD=0.75%(n=3).结论 本方法操作简便,灵敏,准确,重现性好,可用于该产品的含量测定和质量控制.     

HPLC法测定生脉注射液中人参皂甙Re的含量

用HPLC法测定生脉注射液中人参皂甙Re的含量，以C18柱，乙腈-0．05％磷酸（19：81）为流动相，检测波长203um。该方法线性关系良好，平均回收率为97.38％，RSD为1．83％。可作为生脉注射液的含量测定方法。