卡介苗和尘螨对哮喘儿童外周血单个核细胞表达CD80的影响

目的 研究卡介苗(BCG)和尘螨(Dp)对哮喘儿童外周血单个核细胞(PBMC)表达CD19、CD80的影响,探讨CD80在哮喘发病中的作用。方法 收集哮喘儿童15例PBMC,在BCG和Dp刺激后用流式细胞术双标法检测CD19 CD80 细胞百分率结果 BCG组CD19 CD80 细胞降低(27.06±14.40)％,Dp组CD19 CD80 细胞增加(50.29±9.95)％,与对照组(34.83±16.56)％比较有显著差异。结论 CD80在哮喘发病中起重要作用,BCG抑制其表达,Dp促进其表达。 实用儿科临床杂志,2004,19(12):1026-1027     

卡介菌多糖核酸对哮喘患儿外周血单个核细胞Th1/Th2细胞因子分泌的调节作用

为观察卡介菌多糖核酸（BCG－PSN）对哮喘患儿外周血单个核细胞（PBMC）Th1/Th2细胞因子分泌的调节作用，并与地塞米松作比较。对25例哮喘患儿，取外周血分离单个核细胞。其中21例患儿的PBMC同时分成对照组和BCG－PSN组；19例患儿的PBMC同时分成对照组和地塞米松组，培养48小时。ELISA法测定培养上清液中的γ干扰素（TFN－γ）、白细胞介素4（IL－4）的水平。结果显示，BCG－PSN可明显增高TFN－γ的分泌水平，地塞米松则抑制之；BCG－PSN对IL－4的分泌无明显影响，而地塞米松明显抑制IL－4分泌；BCG－PSN通过高Th1型细胞因子（TFN－γ），而地塞米松通过抑制Th2型细胞因子（IL－4）的分泌，两者均提高Th1/Th2(TFN－γ／IL－4）比值。提示BCG－PSN可使Th1/Th2平衡向Th1型转化，调节免疫失调，从而起到治疗哮喘的作用。     

灭活卡介苗经皮接种治疗婴幼儿哮喘对IgE ECP IFN-γ IL-4水平的影响

目的　为进一步探讨灭活卡介苗治疗婴幼儿哮喘的免疫学作用机制 ,应用灭活卡介苗经皮接种 ,观察患儿机体IgE、嗜酸性细胞阳离子蛋白 (ECP)、IFN γ、IL 4的水平变化及改变程度。方法　将哮喘患儿随机分为常规治疗组 (常规组 )与灭活卡介苗治疗组 (卡介苗组 ) ,进行 6个月的治疗后 ,观察患儿在治疗前后的IgE ,ECP ,IL 4 ,IFN γ的变化 ,另设 2 0例正常儿童作为对照组。结果　①治疗前卡介苗组和常规组IgE ,ECP与IL 4均高于对照组 ,IFN γ低于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;卡介苗组与常规组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;②卡介苗组治疗后ECP与IL 4低于治疗前 ,IFN γ较治疗前有升高 ,其差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ,IL 4和IFN γ呈明显负相关 ,且IFN γ与IL 4的变化各自均有明显的线性关系。IgE在治疗前后无显著性差异 (P >0 .0 5 )。常规组治疗前后IgE ,ECP与IL 4水平差异无显著性 ,但IFN γ水平治疗后增加 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　灭活卡介苗治疗能刺激婴幼儿哮喘患儿IFN γ生成增多 ,下调IL 4水平 ,可能与干预治疗能诱导TH1细胞的优势分化 ,调节TH1 TH2平衡有关 ;同时 ,能降低ECP水平 ,减轻气道慢性炎症反应 ;但短期内对IgE水平未发现有显著影响。     

新生期卡介苗接种对实验性哮喘小鼠肺Th17细胞和IL-17的影响

目的：通过实验性哮喘小鼠模型探讨新生期卡介苗（bacillus Calmette-Guérin,BCG）接种对肺Th17细胞和IL-17的影响。方法：新生期小鼠分3组：对照组,卵白蛋白组（OVA）,BCG干预组（BCG/OVA）。除对照组外,其余两组均给予OVA致敏和激发。观察支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中细胞总数及分类,ELISA法检测BALF中IFN-γ、IL-17含量,流式细胞术检测肺Th17细胞。结果：两哮喘组BALF中细胞总数、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞比例均明显高于对照组,而BCG/OVA组上述细胞均显著低于OVA组。两哮喘组BALF中IFN-γ水平明显低于对照组,IL-17显著高于对照组,同时BCG/OVA组IL-17水平明显低于OVA组。流式细胞术显示,两哮喘组Th17细胞比例均明显高于对照组,但两哮喘组间差异无统计学意义。结论：Th17细胞/IL-17在实验性哮喘小鼠发病中起作用,新生期BCG接种可抑制气道IL-17的产生,其抑制的IL-17可能并非主要由Th17细胞产生,而来源于其他细胞。［中国当代儿科杂志,2010,12（8）：650-653］     

孟鲁司特对幼年哮喘气道重塑大鼠感觉神经肽受体NK1R表达的影响

目的：探讨孟鲁司特对幼年哮喘气道重塑大鼠中感觉神经肽受体NK1R表达的影响。方法：24只Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为对照组、哮喘组和孟鲁司特组,每组8只。应用卵白蛋白（OVA）雾化吸入法建立哮喘大鼠模型,对照组大鼠应用生理盐水代替致敏液和1%OVA,孟鲁司特组于每次激发前2 h以孟鲁司特（15 mg/kg）灌胃,共持续8 周。采用免疫组化、real-time PCR和Western blot等方法,从mRNA和蛋白水平动态观察NK1R在哮喘大鼠气道重塑中的表达水平及孟鲁司特对其表达的影响。结果：哮喘组NK1R mRNA及蛋白的表达水平均较对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);孟鲁司特干预后NK1R mRNA及蛋白表达水平较哮喘组减少(P<0.05),但仍高于对照组(P<0.01)。结论哮喘：诱发大鼠气道NK1R的表达增加,孟鲁司特能够下调哮喘大鼠气道重塑中NK1R的表达水平。     

黄芪多糖对炎症性肠病模型大鼠NFATC4表达的影响

目的观察黄芪多糖(APS)对炎症性肠病（IBD）模型大鼠结肠黏膜NFATC4表达及受损结肠黏膜的修复作用。方法采用三硝基苯磺酸诱导IBD大鼠模型。45只大鼠随机分为假手术组、IBD模型组、APS低剂量组(100 mg·kg-1)、APS高剂量组(200 mg·kg-1)和地塞米松对照组(地塞米松0.3 mg·kg-1)。分别给予相应药物腹腔注射,每日1次。给药7 d后,乙醚麻醉下处死大鼠,取结肠组织进行形态学及病理组织学评分,实时PCR和ELISA法检测结肠组织NFATC4 mRNA和蛋白表达。结果各组大鼠结肠组织形态学肉眼评分为：假手术组0分、IBD模型组（5.67 ± 0.87）分、APS低剂量组（3.56 ± 0.89）分、APS高剂量组（1.56 ± 0.53）分、地塞米松对照组（0.89 ± 0.78）分,组间差异总体上有统计学意义（F=69.195,P<0.001）。病理学评分为：假手术组（0.11± 0.08）分,IBD模型组（5.67 ± 1.15）分、APS低剂量组（3.33 ± 0.58）分、APS高剂量组（1.33 ± 1.15）分、地塞米松对照组（1.67 ± 1.52）分,组间差异总体上有统计学意义（F=13.34,P<0.01）。组织病理学检查显示APS可修复IBD模型大鼠受损结肠黏膜。NFATC4 mRNA表达APS高剂量组、APS低剂量组与地塞米松对照组均显著高于IBD模型组（P<0.01）;仅APS高剂量组与地塞米松对照组NFATC4蛋白表达较IBD模型组显著增加（P<0.001）。结论APS可增加IBD模型大鼠NFATC4表达,对损伤结肠黏膜有修复作用, APS对NFATC4调控机制尚有待进一步研究。     

细菌脂多糖对哮喘小鼠血清IL-4、IL-8及肺组织VEGF表达的影响

目的：观察细菌脂多糖（LPS）对支气管哮喘小鼠血清IL-4、IL-8及肺组织血管内皮生长因子（VEGF）的影响,探讨LPS在哮喘发生过程中的调节作用。方法：27只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组和LPS干预组,每组9只。采用ELISA法检测哮喘小鼠血清IL-4、IL-8的浓度,免疫组织化学染色法检测肺组织中VEGF的表达。结果：哮喘组血清IL-4和IL-8水平明显高于对照组（P<0.05）;而LPS干预组IL-4和IL-8水平明显低于哮喘组（P<0.05）,但仍高于对照组（P<0.05）。哮喘组气道VEGF表达显著高于对照组（P<0.05）;LPS干预组其表达明显低于哮喘组（P<0.05）,但仍高于对照组（P<0.05）。结论：LPS可能通过降低哮喘小鼠血清IL-4和IL-8水平及气道VEGF表达,减轻气道炎症,减少气道血管重塑的发生。     

PI3K、NF-κB和STAT1在支气管哮喘儿童外周血单个核细胞的表达和临床意义

目的检测PI3K、NF-κB和STAT1在支气管哮喘儿童外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,探讨其在哮喘发病机制的临床意义。方法选取30例急性发作期的支气管哮喘患儿作为哮喘组,随机选取同期健康儿童20例作为对照组。应用RT-PCR和Western blot方法检测PBMC中PI3K、NF-κB和STAT1的m RNA和蛋白表达,肺功能仪检测两组肺功能,并分析支气管哮喘儿童PI3K、NF-κB和STAT1的m RNA水平与其肺功能的相关性。结果哮喘组的PI3K、NF-κB和STAT1的m RNA和蛋白水平均高于对照组(P0.05)。与对照组相比,哮喘组FEV1%、FEV1/FVC、PEF%等肺功能指标均下降(P0.05)。哮喘儿童的PI3K、NF-κB和STAT1的m RNA表达水平与FEV1%、FEV1/FVC、PEF%均呈负相关(P0.05)。结论哮喘患儿的PI3K、NF-κB和STAT1表达上调并与肺功能呈负相关,三者可能共同参与儿童支气管哮喘的发生、发展。     

孟鲁司特钠和细菌溶解产物对支气管哮喘豚鼠气道重塑及TGF-β1、Smad7表达的影响

目的 探讨白三烯受体拮抗剂孟鲁司特钠（MK）和（或）细菌溶解产物（OM-85BV）干预下,对支气管哮喘豚鼠气道重塑及转化生长因子-β1（TGF-β1）、Smad7水平变化的影响及其相关性。方法 将40只Hartley雄性豚鼠随机分成正常对照组、哮喘组、MK组、OM-85BV组和MK+OM-85BV组,每组8只。经腹腔内注射10%卵清蛋白（OVA）致敏并雾化吸入1% OVA激发以制备哮喘气道重塑模型,正常对照组以生理盐水替代;在雾化吸入激发阶段,MK组、OM-85BV组和MK+OM-85BV组给予相应的药物混悬液灌胃,正常对照组和哮喘组给予等量的生理盐水灌胃。激发阶段结束后24 h内,取豚鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）,用ELISA法测定BALF中TGF-β1、Smad7含量;并处死豚鼠,取肺组织病理切片观察气道重塑程度,采用图像分析技术测定肺内支气管基底膜周径（Pbm）、总管壁面积（Wat）及平滑肌面积（Wam）。采用Pearson直线相关对两变量间进行相关分析。结果 哮喘组、MK组、OM-85BV组和MK+OM-85BV组肺组织病理切片显示支气管平滑肌、肺泡壁均较正常对照组明显增厚,标准化的支气管总管壁面积（Wat/Pbm）及平滑肌面积（Wam/Pbm）均较正常对照组增大,TGF-β1水平均高于正常对照组,Smad7水平均低于正常对照组（均P < 0.05）;MK组、OM-85BV组和MK+OM-85BV组肺组织病理切片显示病理损害程度较哮喘组有所改善,Wat/Pbm、Wam/Pbm均较哮喘组降低,TGF-β1水平均低于哮喘组,Smad7水平均高于哮喘组,且MK+OM-85BV组较MK组、OM-85BV组改善得更多（均P < 0.05）。TGF-β1与Smad7表达水平呈负相关;TGF-β1表达水平与Wat/Pbm及Wam/Pbm分别呈正相关;Smad7表达水平与Wat/Pbm及Wam/Pbm分别呈负相关（均P < 0.01）。结论 MK和（或）OM-85BV干预哮喘豚鼠后能减轻气道重塑,其中MK联合OM-85BV干预效果最好;其机制可能是降低TGF-β1和提高Smad7含量,从而改善TGF-β1和Smad7表达水平的失衡,最终减轻气道重塑。     

IL-4IL-5及IgE在儿童咳嗽变异性哮喘中的价值

目的：咳嗽变异性哮喘(CVA)是一种与气道炎症相关的疾病,有研究表明IL-4,IL-5与IgE的产生有相关性,而且与哮喘的形成有关,因此推测IL-4,IL-5在CVA发病中起重要作用。该文旨在观察IL-4,IL-5及IgE在咳嗽变异性哮喘中的诊断价值。方法：用酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测咳嗽变异性哮喘患儿、哮喘急性发作期患儿、正常同龄儿童各30例外周血单个核细胞(PBMC)内IL-4,IL-5及血清IgE水平。结果：①咳嗽变异性哮喘患儿发作期PBMCIL-4为91.57±12.19ng/L、IL-5为13.28±0.31ng/mL,显著高于缓解期的74.68±11.54ng/L,6.53±0.28ng/mL及正常对照组70.32±18.16ng/L,5.29±0.36ng/mL,(均P<0.01),但缓解期及正常对照组间差异无统计学意义;②咳嗽变异性哮喘发作期患儿血清IgE水平为279.6±41.3KU/L,显著高于缓解期153.8±37.5KU/L,两组均显著高于正常对照组的90.6±44.8KU/L,(均P<0.01);③咳嗽变异性哮喘患儿发作期IL-4,IL-5及IgE水平与哮喘患儿发作期的92.21±3.12ng/L,15.11±1.37ng/mL,287.5±41.9KU/L之间相比差异无统计学意义。结论：联合检测单个核细胞内IL-4,IL-5及血清IgE水平对咳嗽变异性哮喘的诊断有重要价值;IL-4,IL-5可能在咳嗽变异性哮喘的发病机制中起重要作用;咳嗽变异性哮喘可能存在与哮喘相同的发病机制,是典型哮喘的前驱表现。     

支气管哮喘模型大鼠IL-4 IL-10 IFN-γ的检测

目的　哮喘的发病机理尚不完全清楚 ,近年来 ,细胞因子在哮喘中的作用引起人们的关注。本文旨在探讨支气管哮喘的免疫学发病机理 ,研究细胞因子IL 4、IL 10、IFN γ与哮喘的关系。方法　建立大鼠支气管哮喘模型。将Wistar大鼠随机分为两组 :正常对照组 (n =11)及哮喘组 (n =11) ,以卵白蛋白 (OVA)腹腔注射致敏大鼠 ,两周后雾化吸入OVA发敏 ;发敏后杀鼠 ,取脾 ,制备单个核细胞悬液 ,体外培养 ,并以OVA刺激 ,取不同时间培养上清 ,应用ELISA双抗体夹心法测定其中IL 4、IL 10和IFN γ的水平。结果　支气管哮喘组动物单个核细胞培养上清中IL 4的水平明显高于正常对照组 (6 4 .5 6± 5 .83vs 2 4 .6 6± 3.6 8pg/ml,P <0 .0 5 ) ,IL 10水平明显低于正常对照组 (34.13± 0 .85vs 85 .12± 6 .13,P <0 .0 5 ) ,IFN γ水平明显低于正常对照组 (3.87± 0 .4 8vs14 .5 1± 1.32 pg/ml,P <0 .0 5 )。结论　细胞因子IL 4、IL 10和IFN γ可能参与了哮喘发病的病理生理过程。     

哮喘患儿IL-4、IL-12与IgE水平的初步研究

采用双抗夹心EIASA法测定30例哮喘发作期、12例哮喘缓解期患儿血浆及外周血单个核细胞(PBMC)白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素12(IL-12)与血清IgE的水平,结果表明:哮喘患儿发作期、缓解期血清IgE水平、血浆及PBMC经PHA和LPS刺激后的IL-4水平较正常对照组明显升高(P<0.01),IL-12水平较正常对照组明显降低(P<0.01)。且缓解期IgE、IL-4及IL-12水平较发作期均有明显差异(P<0.05)。提示哮喘患儿发作期及缓解期均存在IgE、IL-4及IL-12水平失衡。     

白细胞介素-4受体基因多态性及IgE水平与哮喘预测指数相关性研究

目的研究新疆维吾尔自治区儿童白细胞介素-4受体(IL-4R)基因多态性及Ig E水平与哮喘预测指数(API)的相关性。方法选取167例API(+)、187例API(-)及203例健康婴幼儿(对照组),应用PCR聚合酶链反应和DNA测序法进行基因分型。同时ELISA法检测三组婴幼儿血清Ig E水平。结果 IL-4R基因Arg551Gln位点各基因型频率分布在API(+)组、API(-)组、对照组三组中差异无统计学意义(P0.05);API(+)组血清Ig E水平明显高于API(-)及对照组(P0.01);API(+)患儿中2岁者血清Ig E水平明显低于≥2岁者(P0.01)。结论 Arg551Gln位点多态性与API结果无相关性,而API阳性与Ig E水平升高存在关联性,年龄≥2岁是API阳性的儿童Ig E水平升高的风险因素。     

IL-4-C-590T locus polymorphism and susceptibility to asthma in children: a meta-analysis

ObjectivesThe study aimed to evaluate the link between the IL-4-C590T polymorphism and asthma susceptibility in children by meta-analysis.SourcesThe study collected all the case-control studies found in PubMed, Embase, CNKI, Wanfang, VIP, and other databases until September 2019. Stata v. 15.0 was used to conduct meta-analysis, calculate the combined OR and its 95% CI, and then conduct subgroup analysis.Summary of the findingsSeven studies were included in the study, containing 860 cases and 810 controls. Relative to the C allele, the T allele at the IL-4-C590T locus was associated with susceptibility to asthma in children (OR = 1.45, 95% CI: 1.05–2.01). The results of ethnicity subgroup analysis showed that there was statistical significance, with OR = 1.61 (95% CI: 1.01–2.57) in the Asian population. In the dominant and recessive genetic models, the overall test and the Asian population subgroup analysis were statistically significant. In the homozygous model, there was statistical significance, but no statistical significance in heterozygous model.ConclusionsThe IL-4-C590T polymorphism was associated with asthma susceptibility, and T allele and TT genotype may increase the risk of asthma susceptibility in children, especially in the Asian population.     

吸入糖皮质激素对哮喘豚鼠肺内SP含量及基因表达的影响研究(英文)

目的　P物质 (SP)是气道非胆碱能兴奋性神经的重要递质 ,是导致哮喘气道神经源性炎症产生的一种重要感觉神经肽。糖皮质激素是否有降低肺内SP的效应尚不清楚 ,为此本文研究了吸入糖皮质激素对哮喘豚鼠肺内SP的影响及其分子机制。方法　 30只豚鼠用卵蛋白致敏、诱喘制成哮喘动物模型 ,随机分为哮喘组和治疗组 (每组 1 5只 ) ,另 1 5只豚鼠吸入生理盐水作为对照组。治疗组豚鼠在诱喘前 1天、诱喘当天及诱喘后 2 4h吸入丙酸倍氯米松雾化溶液。哮喘组和治疗组豚鼠均于诱喘后 2 4h取材 ,对照组同期取材 ,分别留取支气管肺泡灌洗液 (BALF)、血浆及肺组织标本。用放射免疫放法检测SP蛋白含量 ;用反转录多聚酶链式反应检测肺组织SPmRNA相对含量。结果　哮喘组豚鼠血浆、BALF及肺组织SP含量 [(1 2 2± 4 6 )pg/mL ,(90± 39) pg/mL ,(78±15 )pg/克蛋白 ]均明显高于正常对照组 [(84± 33) pg/ml,(32± 2 1 ) pg/ml,(4 2± 1 2 ) pg/ml]及激素治疗组 [(5 0±1 3) pg/mL ,(4 7± 2 0 )pg/mL ,(4 0± 1 3) pg/克蛋白 ],其差异均有显著性 (P <0 .0 1 ) ;激素治疗组血浆SP含量低于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,BALF及肺组织SP含量与对照组比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。哮喘组豚鼠肺组织中SPmRNA相对含量明显高于正常     

布地奈德对哮喘大鼠模型肺组织血红素氧合酶-1的调控作用

目的：研究大鼠哮喘模型肺组织血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白及基因表达特点,以及布地奈德(budesonide,BUD)对HO-1蛋白及基因表达的影响。方法：用卵清蛋白(OVA)致敏、激发大鼠建立哮喘动物模型,并在致敏、激发过程中分别经地塞米松(DXM) 、血晶素(Hemin)及BUD处理。分别测定激发后各组动物全血COHb 的百分比含量;计算肺泡灌洗液（BALF）沉渣中细胞总数和分类百分比;进行支气管周围炎性细胞浸润评分;利用免疫组化和RT-PCR检测方式观察HO-1在哮喘大鼠肺组织的蛋白及基因表达。结果：肺组织的病理改变及BALF细胞学检测显示Hemin (H)组、DXM (D)组和BUD (B)组炎性细胞浸润较哮喘(A)组有显著减轻(P<0.01或P<0.05）。与对照(C)组相比,A、H、D和B组HO-1蛋白、基因表达以及碳氧血红蛋白(COHb)含量显著性升高(P<0.01);而与A组相比,H、D和B组HO-1蛋白及mRNA表达亦显著升高(P<0.01或P<0.05）;D组和H组COHb含量显著升高（P<0.05）。结论：哮喘大鼠的肺组织HO-1表达水平及活性显著增加,提示HO-1可能参与了哮喘的发病过程;HO-1对大鼠哮喘模型气道炎症有保护作用;BUD和DXM对大鼠哮喘模型气道炎症有保护作用,可能通过上调肺组织HO-1表达实现。