rhG-CSF和间充质干细胞移植治疗心肌梗死的比较研究

目的 比较分析rhG-CSF和MSCs移植对梗死心肌的修复作用,并分析其可能作用机制.方法 选择纯种大白兔45只(死亡10只),分为rhG-CSF组(n=12)、MSCs移植组(n=10)和对照组(n=13),于心肌梗死后30d,分别检测其心功能、梗死心肌的形态学以及新生毛细血管密度.结果 与对照组相比,rhG-CSF组和MSCs移植左心室收缩末期内径、舒张末期内径明显降低,心功能提高,室壁厚度增加,心肌梗死面积缩小,而梗死区和梗死边缘区新生毛细血管密度增加,具有统计学意义.结论 rhG-CSF应用和MSCS移植治疗兔心肌梗死,可明显改善心功能,缩小梗死面积,增加梗死心肌新生毛细血管密度.     

新型砷剂与5-Fu对HL-60细胞增殖抑制作用的比较

目的 探讨新型砷剂(AsI_3Cys)对HL-60细胞增殖的抑制作用。方法 通过细胞增殖、活力检测、形态学观察、蛋白定量及碱性磷酸酶(AKP)活性测定,观察新型砷剂与5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu)对HL-60细胞增殖的影响。结果 AsI_3Cys对HL-60细胞的抑制作用与5-Fu比较有明显抑制作用;AsI_3-Cys与5-Fu联合使用能增强单药对HL-60细胞的杀伤作用。结论 AsI_3Cys可作为治疗急性髓系白血病的药物选择,AsI_3-Cys与5-Fu联合应用比单用AsI_3-Cys具有更好的治疗效果。     

重组人粒细胞集落刺激因子对急性白血病不同剂量化疗后粒细胞缺乏的影响

目的 :观察重组人粒细胞集落刺激因子 (G -CSF) /重组人粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (GM -CSF)不同剂量、不同给药时间 ,对急性白血病大剂量、普通剂量和较低剂量化疗后粒细胞缺乏的治疗作用。方法 :设立治疗组和对照组 ,观察急性白血病 30例 ,共 6 8个疗程化疗。结果 :所有治疗组较对照组感染减轻 ,粒细胞缺乏时间缩短 ,骨髓造血恢复加快。不规则治疗组和对照组比较 ,粒细胞缺乏持续时间、感染程度、骨髓造血恢复无差异。结论 :G -CSF/GM -CSF能缩短急性白血病化疗粒细胞缺乏 ,防治感染 ,促进造血恢复。     

珠子参对人早幼粒白血病HL-60细胞增殖抑制和诱导分化的研究

目的观察珠子参对人早幼粒白血病HL-60细胞增殖抑制和诱导分化作用.方法采用HL-60细胞株体外培养,MTT法观察不同作用时间的直接细胞毒作用;细胞涂片观察细胞形态学改变;试剂盒检测酸性磷酸酶(ACP)含量.结果珠子参血清和珠子参煎液均有明显的细胞毒作用,72 h时抑制率分别为31.27%、34.23%,与5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用后,达72.9%、75.22%.作用72 h后ACP活性高于对照组,分别为13.6107、16.0122(U/gprot.min)(P＜0.01),细胞形态学观察以中幼粒及晚幼粒为主,分别占36.8%、75.8%,向成熟细胞方向分化.结论珠子参在体外对HL-60细胞株有细胞毒作用,且能提高5-FU的敏感性而与化疗药物起协同作用;珠子参有诱导HL-60细胞分化的功能.     

维甲酸与粒-巨噬系集落刺激因子对温热诱导HL-60细胞凋亡的影响

应用温和热处理诱导人急性髓系白血病细胞系ＨＬ－６０细胞发生凋亡，观察到典型的细胞形态学改变和特征性的ＤＮＡ梯型；维甲酸可促使细胞凋亡，而重组人粒－巨噬系集落刺激因子的抑制作用轻微。用斑点杂交法检测温和热处理组及维甲酸加温和热处理组细胞的ｃ－ｍｙｃ基因ｍＲＮＡ表达水平，二者明显低于对照组     

抗8-AG和HGPRT缺失的人早幼粒白血病细胞突变株(HL-60-AR)的建立

用MNNG处理HL-60细胞和8-AG软琼脂集落形成方法,成功地筛选出一株抗高浓度8-AG和完全缺失HGPRT活性的人早幼粒白血病细胞突变株,命名为HL-60-AR。该株细胞能抵抗8-AG的毒性作用,对HAT选择培养基十分敏感,检测不到HGPRT活性,不能参入~3H-次黄嘌呤。HL-60-AR细胞基本上保持了野生型HL-60细胞的生物学特征。突变细胞已在体外培养11个月,传100多代,遗传标记仍然稳定。     

Graves病患者外周血淋巴细胞功能的临床实验研究

作者以~3H-TdR掺入淋巴细胞转化法为观察指标,研究了正常人和Graves病(GD)患者外周血淋巴细胞对不同致有丝分裂原的反应性,并使用非特异性酯酶染色法对GD患者外周血T淋巴细胞(Tc)进行了检测。结果表明:正常人、GD患者Tc对PHA的反应性显著大于ConA;GD患者对PHA、ConA的反应性与正常人无明显差异;GD患者外周血Tc数目也未见有异常;GD患者初发组B淋巴细胞(Bc)对SPA菌体的反应能力明显高于正常对照组,且与GD临庆转归具有一定规律性。本研究提示:Graves病患者外周血Bc功能存在免疫学异常,而Tc从功能、数量上均未见有明显异常改变。     

长期传代后HL-60细胞内脱氧胞苷激酶与阿糖胞苷耐药性的关系

 目的  通过观察人早幼粒白血病细胞系(HL-60)及其耐药细胞株(HL-60/R)经过长期传代后细胞内脱氧胞苷激酶(deoxycytidine kinase, dck) mRNA表达及其酶活性的变化规律,探讨dck与阿糖胞苷(Ara-C)疗效及耐药现象发生的相关性。方法  分别采用实时PCR方法和核素液闪法测定HL-60和HL-60/R细胞内dck的mRNA表达水平及其酶活性水平。通过体外培养传代,观察2种细胞株经长期传代(5、10、20、30、40、50代)后细胞内dck的mRNA表达及酶活性的变化规律。结果  传代初期结果显示,HL 60和HL 60/R两组细胞株之间的mRNA表达水平分别为0.37±0.03和0.17±0.03,活性值分别为0.069±0.006 nmol·min-1·mg-1 protein和0.019±0.007 nmol·min-1·mg-1 protein,HL-60的dck mRNA表达水平和酶活性均明显高于HL-60/R(P<0.01)。并且两组细胞株之间的显著性差异(P<0.01)持续存在于各传代过程中。HL-60和HL-60/R两组各传代节点(10、20、30、40和50代)的dck mRNA表达水平与酶活性与本组第5代细胞相比,则无明显变化(P>0.05)。结论  HL-60及HL 60/R两组细胞株间的dck mRNA表达和酶活性在传代初期存在显著差异,且两组间的差异持续存在。但与各自的初期传代相比,长期传代后的dck mRNA表达和酶活性变化并不明显,提示dck仅与Ara-C的初期疗效明显相关,而与Ara-C耐药现象的发生可能无关。     

碘化砷-硫脲对白血病HL-60细胞增殖及survivin基因表达的影响

目的:探讨新型砷剂配合物砷化砷-硫脲(AsI3-Tu)对白血病HL-60细胞增殖及survivin基因表达的影响。方法:以不同浓度的砷化砷-硫脲作用于HL-60细胞,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性,原位末端标记(TUNEL)法观察细胞凋亡,RT-PCR半定量检测细胞中sur-vivin mRNA表达。结果:①各实验组AsI3-Tu均能抑制HL-60细胞增殖,并与时间和剂量相关。②TUNEL法观察细胞凋亡,可见AsI3-Tu各浓度组凋亡细胞数明显增多。③AsI3-Tu各浓度组细胞中survivin mRNA表达水平降低,且表达水平与AsI3-Tu剂量呈负相关。结论:AsI3-Tu能有效抑制白血病细胞系HL-60细胞的增殖,诱导其凋亡,机制可能与抑制HL-60细胞中survivin基因表达有关。     

rhGM-CSF对60Co照射小鼠外周血细胞和骨髓细胞动态变化的影响

目的: 探讨重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF) 对受照小鼠外周血和骨髓细胞的影响. 方法:采用6.0 Gy 60Co-γ照射小鼠造成造血功能损伤,采尾静脉血计数外周血白细胞及其分类, 取一侧股骨骨髓计数骨髓有核细胞,取另侧骨髓制片观察骨髓粒系分裂池、存贮池、成熟池骨髓细胞绝对值动态变化. 结果:Leucomax与rhGM-CSF 不能使受损血细胞恢复常态,但能动员外周造血器官与贮备池血细胞加速释放, 在骨髓严重受抑后,能使骨髓细胞粒系增殖提前,分裂池细胞分化增殖,诱导贮备池不成熟的细胞发育成熟细胞. 结论:rhGM-CSF对60Co 辐射小鼠的粒细胞和单核细胞具有增殖和动员作用.     

尼莫地平对HL-60细胞凋亡的影响及其机制

目的研究尼莫地平(NMDP)对HL-60细胞的作用及其机制。方法取对数生长期HL-60细胞并调整细胞浓度为5×108/L,分为对照组和实验组,置24孔板培养,每孔加入HL-60细胞培养液1.5 mL,实验组各孔再加NMDP 0.01 g/L。分别培养0、8、16、24 h,通过倒置显微镜观察细胞的动态变化;采用Giemsa染色光学显微镜下观察细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测DNA的碎片;流式细胞仪检测DNA含量;细胞免疫组化方法检测细胞凋亡相关基因bcl-2、bax的蛋白表达。结果实验组细胞从培养8 h起,可见不同程度的变形、出泡,细胞和小泡仍保持膜的完整性,随着培养时间延长,出泡细胞增加,细胞体积变小,部分细胞裂解;对照组细胞一直无形态学变化。Giemsa染色可见实验组细胞核膜裂解,染色质呈紫红色或蓝紫色,分割成块状,浓缩、靠近核膜,呈边集现象,并有典型的凋亡小体形成;对照组细胞保持大小一致,胞内染色质呈紫红色或蓝紫色,分布均匀。DNA凝胶电泳显示,实验组在8、16、24 h出现典型的梯形带。实验组细胞的凋亡率随时间延长而增加,自8 h起与对照组差异有显著意义(t=15.06~20.75,P<0.01)。实验组Bcl-2蛋白表达下降,16、24 h与对照组比较差异有显著意义(t=3.66、5.62,P<0.05);Bax蛋白表达升高,与对照组比较,162、4 h有显著性差异(t=4.13、7.55,P<0.01)。Bcl-2/Bax蛋白表达比值逐渐下降,与对照组比较,8、16、24 h差异皆有显著性(t=5.32~7.76,P<0.05)。结论NMDP可诱导HL-60细胞凋亡。Bcl-2/Bax蛋白比值下降,可能是NMDP诱导HL-60细胞凋亡的机制之一。     

GM_3对HL－60细胞的诱导分化作用及细胞膜流动性的影响

作者将纯化得到的神经节音脂ＧＭ３加到人早幼粒白血病细胞系（ＨＬ－６０）ＤＭＥ／Ｆ１２培养液中，终浓度为５０μＭ，细胞的增殖明显受到抑制，并按单核－巨噬细胞途径定向分化成熟，表现为细胞吞噬功能显著增强，非特异性酯酶活性升高等。细胞的形态也呈现与这种分化相一致的变化。在此基础上，作者探讨了以ＤＰＨ为探针测定ＨＬ－６０细胞膜流动性的实验条件，研究了促分化剂神经节耷脂ＧＭ３、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）和佛波酯（ＴＰＡ）对ＨＬ－６０细胞膜流动性的影响，结果表明：ＧＭ３、ＤＭＳＯ和ＴＰＡ均可降低ＨＬ－６０细胞膜流动性。     

GM_3对HL－60细胞的诱导分化作用及细胞膜流动性的影响

作者将纯化得到的神经节音脂ＧＭ３加到人早幼粒白血病细胞系（ＨＬ－６０）ＤＭＥ／Ｆ１２培养液中，终浓度为５０μＭ，细胞的增殖明显受到抑制，并按单核－巨噬细胞途径定向分化成熟，表现为细胞吞噬功能显著增强，非特异性酯酶活性升高等。细胞的形态也呈现与这种分化相一致的变化。在此基础上，作者探讨了以ＤＰＨ为探针测定ＨＬ－６０细胞膜流动性的实验条件，研究了促分化剂神经节耷脂ＧＭ３、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）和佛波酯（ＴＰＡ）对ＨＬ－６０细胞膜流动性的影响，结果表明：ＧＭ３、ＤＭＳＯ和ＴＰＡ均可降低ＨＬ－６０细胞膜流动性。     

紫杉醇诱导HL—60细胞凋亡的研究

目的：观察抗微管药紫杉醇对急性白血病细胞株HL－60是否具有凋亡诱导作用,并进一步研究bcl－2基因在此过程中的作用。方法：（1）以紫杉醇处理HL－60细胞,观察细胞生长抑制作用的时间效应和剂量效应,在光镜和电镜下观察细胞形态变化;（2）用流式细胞仪检测药物孵育前后细胞凋亡率（AP）的变化;（3）用RT－PCR法检测药物孵育前后bcl-2基因的表达水平。结果：（1）在一定剂量和时间范围内紫杉醇能抑制HL－60细胞生长;（2）紫杉醇能诱导HL－60细胞凋亡,并显示剂量效应：（3）在紫杉醇诱导HL－609细胞凋亡过程中,bcl－2基因表达水平下调。结论：紫杉醇能诱导HL－60细胞凋亡;bcl-2基因参与了紫杉醇诱导HL－60细胞凋亡的调控。     

Forskolin抑制成骨肉瘤细胞增殖的作用

Forskolin系天然植物中提取到的二萜类化合物，为腺苷酸环化酶的特异激活剂。实验发现它能下调成骨肉瘤细胞的EGF受体，抑制酪氨酸蛋白激酶活性，抑制转化生长因子α（TGFα）的基因表达，抑制3H－TdR参入DNA以及抑制细胞周期的S期，这均支持Forskolin对成骨肉瘤细胞具有抑制增殖的作用。     

EFFECTS OF QUERCETIN ON CELL MORPHOLOGY AND EXPRESSION OF PML mRNA AND PROTEIN OF NB4 AND HL-60 CELLS

R6StUn Obotif Etudier l' activitd de qUehetine sur la mOW cellulaire, l' exI7rhaon dePML W et ta bolhotion de potdine PML des ceIlules W, HL-60. -- In mthe cellu-laire a etd etudide avec coloration de Wright, Asnt fiuorescent, I' extwon de PML mRNA per RTme etIa bolbotion de petdine M per ta metbo d' hamumpuoreasnce. helfats L' aaptOSe tyPque fottrouvde chez les celluIeS M et ar60 wt le traitemet per qUendtine. L' analySe d' imnzumpuorare amontrd qu' wi le traitemet per quercdt…     

威灵仙皂苷对HL-60细胞生长抑制作用的研究

观察中药威灵仙皂苷对人髓系白血病细胞株HL-60生长抑制的作用,并探讨其可能的作用机制,为开发新的抗肿瘤药物提供理论依据,为白血病患者能进一步提高临床疗效,改善生活质量,延长生存时间做探讨。方法：威灵仙皂苷为本实验室根据文献自行提取,运用细胞培养;Wright’s—Giemsa染色各组HL一60细胞,在光学显微镜下观察细胞形态变化并照相：CCK-8的方法观祭不同浓度不同时间威灵仙皂苷对急性白血病HL-60细胞的增殖抑制,对比HL～60细胞在加入不同浓度威灵仙皂苷和作用不同时间后的生长情况和细胞活性并与三氧化二砷作用进行比较,探讨威灵仙皂苷对急性白血病细胞生长抑制的作用。结果：加入不同浓度的威灵仙皂苷作用后,急性白血病细胞受到不同程度的抑制,且呈浓度和时间的依赖性,经形态学检查发现细胞体积变小,细胞核高度浓缩聚集,甚至断裂形成凋亡小体。结论：实验证明威灵仙皂苷有抑制急性白血病细胞生长的作用．日旱浓守和时间的依觞件．高浓度的威灵仙皂苷与三氧化二砷的作用无统计学意义。     

癌基因扩增结构—双微体的扫描电镜观察

本文应用扫描电镜观察了人急性早幼粒细胞白血病细胞系(HL-60)细胞中癌基因扩增的结构双微体,镜下其数量不等,范围在0～43之间,直径一段为0.5～0.8μm,约1/3为单球体。     

HL-60细胞诱导分化过程中酸性磷酸酶活性的变化

研究结果表明,经 DMSO 诱导的 HL—GO细胞酸性磷酸酶活性升高不到2倍,出现第Ⅰ组同工酶;经 TPA 诱导后 AcP 活性升高4～5倍,并出现Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组同工酶。超微结构观察发现,DMSO 处理的 HL—60细胞 AcP 活性局限在溶酶体及粗面内质网;TIPA 诱导的细胞 AcP 反应在溶酶体、粗面内质网、核周界及高尔基复合体膜囊等处均为阳性。结果提示,HL-60细胞 AcP 酶活性变化,对研究白血病细胞诱导分化有重要意义。     

汉防己甲素对HL-60细胞凋亡作用的实验研究

目的：探讨汉防己甲素（ＴＴＤ）作为中药耐药逆转剂是否会引起肿瘤细胞凋亡的作用机制。方法：用琼脂糖凝胶电泳法观察ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ的梯状条带。结果：ＴＴＤ组无梯状条带出现，而柔红霉素组则出现明显的梯状条带。结论：ＴＴＤ在耐药逆转的浓度内，不会引起ＨＬ－６０细胞凋亡的发生