虎杖甙对正常人血管平滑肌细胞内钙和膜电位的调节作用

目的和方法：观察虎杖甙（ＰＤ）对人脐带动脉平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）内游离钙、细胞膜电位的变化,以探讨ＰＤ对血管平滑肌的调节机制。用Ｆｌｕｏ－３－ＡＭ、ＤｉＢＡＣ４（３）标记培养的ＶＳＭＣ,在激光共聚焦显微镜上测定细胞内游离钙和膜电位变化。结果：给ＰＤ（０５ｍｍｏｌ／Ｌ）１０ｍｉｎ后,ＶＳＭＣ内游离钙浓度升高５６％±５６％。当ＰＤ加入前用维拉帕米和ＥＧＴＡ预处理后,则游离钙不再升高;ＥＧＴＡ和肝素预处理也抑制ＰＤ的升钙作用,而ＥＧＴＡ和普鲁卡因预处理则使细胞内钙显著升高。ＰＤ还可使ＶＳＭＣ膜电位去极化,加入钠通道阻断剂河豚毒素（２５μｍｏｌ／Ｌ）可完全阻断ＰＤ的去极化作用：加甲氰咪胍、维拉帕米、优降糖和利及丁预处理不能阻断ＰＤ去极化作用。结论：：ＰＤ可通过细胞外钙内流来增加细胞内游离钙浓度,并促进细胞外钠离子内流而导致细胞去极化     

克山病病区粮饲养豚鼠的冠状动脉平滑肌细胞膜电位的研究

本文应用细胞内微电极方法,研究了克山病病区粮喂饲豚鼠的冠脉平滑肌细胞膜电位变化,取得如下结果:(1)实验动物冠脉平滑肌细胞静息膜电位为-49.80±5.3mV,对照组动物为-49.98±6.2mV(P>0.05)。(2)硒可使实验组动物冠脉平滑肌细胞膜电位去极化,其程度明显小于对照动物。(3)氯化钾和乙酰胆碱可分别引起实验动物冠脉平滑肌细胞膜电位去极化和超极化,且较对照动物的变化明显增大。这些结果提示:在低硒状态下,冠脉平滑肌的功能状态发生明显变化,使之对刺激的敏感性增加,因而认为血管因素在克山病病区粮饲养动物的心肌坏死灶产生过程中起着重要作用。     

血管内皮超极化因子

血管内皮超极化因子中国医学科学院基础所生理室（１００００５）张翠华，郑永芳综述关键词血管；肌，平滑；内皮；内皮超极化因子Ａｃｈ可引起血管平滑肌膜内皮依赖性超极化，从而使血管舒张［１，２］。介导这一内皮依赖性超极化的物质被称之为内皮超极化因子（ｅｎｄｏ...     

球囊损伤血管内皮后平滑肌细胞凋亡及相关基因表达的变化

目的:探讨球囊损伤血管内皮后平滑肌细胞(SMC)凋亡的机制。方法:采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法(TUNEL)和免疫组织化学技术检测球囊损伤内皮后血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡及Bax/Bcl-2蛋白的变化。结果:球囊损伤内皮后第3d,血管中层出现凋亡的SMC;损伤后第7d,内膜和中层SMC凋亡率最高,凋亡的SMC主要分布在内膜层;以后逐渐降低,至损伤后第28d,仅内膜层有少量凋亡的SMC。Irbesartan显著增加SMC凋亡(P＜0.01)。球囊损伤内皮后第3d,血管中层Bax/Bcl-2表达显著高于假手术组(P＜0.01);损伤后第7d血管中Bax表达最高,是假手术组的3倍,以后表达减少。球囊损伤内皮后Bcl-2表达逐渐增多,至第28d表达最高。Bax/Bcl-2也在损伤后第7d达最高,至第28d降至基础水平以下。Irbesartan使Bax表达增高、Bcl-2表达降低、Bax/Bcl-2升高。结论:Bax/Bcl-2参与了球囊损伤内皮后VSMC凋亡的调节。     

高血糖症对大鼠血管平滑肌细胞表型转变的影响

目的：复制高血糖症大鼠模型,研究高糖对大鼠血和平滑肌细胞表型转变的影响及其机制。方法：采用组织培养及放射免疫分析方法测定各指标。结果：（１）设备在糖组血浆ＮＯ２含量、血管壁ＮＯＳ活性及ＣＧＭＰ含量明显低于对照组;（２）高血糖组血清胰钫 含量１、血管平滑肌细胞的「＾３Ｈ」－ＴｄＲ掺入率明显高于对照组。结论：长期高血压糖症可引起血管平滑肌细表型发生转变,从而促进了血管平滑肌细胞的增殖。     

缺氧内皮细胞培养液对肺动脉平滑肌细胞表型的影响

用细胞培养和形态定量分析方法观察缺氧对肺动脉平滑肌细胞表型的影响。结果显示，缺氧性内皮细胞条件培养液组肺动脉平滑肌细胞的二倍体细胞和α－ｓｍ－ａｃｔｉｎ含量均少于常氧性内皮细胞条件培养液组（Ｐ＜０．０５），尤以肌丝成份减少最明显；粗面内质网和线粒体却显著增多。而直接缺氧组与常氧组无明显差异。提示：缺氧可促使内皮细胞产生和释放某种促平滑肌细胞表型转化的物质或因子，从而改变了肺动脉管壁细胞之间的正常调控关系，导致平滑肌细胞肥大，合成细胞外基质增多。     

ET-1和bFGF促进大鼠血管平滑肌细胞增殖的协同作用及其机制研究

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和内皮素-1(ET-1)促进血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的协同作用,并进一步研究可能的机制。方法:5-溴-2’-脱氧尿嘧啶(BrdU)掺入法和细胞计数法观察对VSMC增殖的影响,Western免疫印迹法观察ET-1对VSMCbFGF和成纤维细胞生长因子受体-1(FGFR-1)蛋白表达的影响。结果:bFGF和ET-1能协同促进VSMCBrdU掺入和细胞增多,并且在一定剂量和时间范围内呈量效、时效关系。同时ET-1剂量依赖性上调bFGF和FGFR-1蛋白,表达高峰分别为24和48h,二丁酸佛波脂(PDBU)预耗竭细胞内蛋白激酶C(PKC)后该上调作用显著下降。结论:bFGF和ET-1对VSMC增殖具有协同作用,与ET-1上调bFGF和FGFR-1蛋白有关,上调作用呈PKC依赖性。     

血管紧张素Ⅱ2型受体对大鼠血管平滑肌增殖的影响及其机制

目的：观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）2型受体（AT2R）对培养的大鼠血管平滑肌细胞 （VSMC）增殖的影响。方法： 将AT2R cDNA转染到培养的大鼠VSMC中， 分别观察AngⅡ、AngⅡ＋losartan、AngⅡ+PD123319等不同处理因素处理对VSMC的 细胞数目以及PCNA、 NOS表达的影响。 结果：losartan 处理组细胞数目和PCNA表达量少于AngⅡ处理组，NOS表达量高于AngⅡ处理组， 而PD123319处理组细胞数目和PCNA表达量显著高于AngⅡ处理，NOS表达量较之为少。结论： 激活AT2R能拮抗AngⅡ的由AT1R介导的促细胞增殖作用，这种作用可能与激活AT2R后NOS表达增多使 NO合成增多有关。     

S-亚硝基谷胱甘肽对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠血管平滑肌细胞增生的影响

目的：探讨脂溶性NO前体药物S-亚硝基谷胱甘肽（GSNO）对血管紧张素-Ⅱ（AT-Ⅱ）诱导的培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法：体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,用同位素掺入法测定其增殖率的变化,观察不同浓度AT-Ⅱ对血管平滑肌细胞增殖的影响以及不同浓度的GSNO对AT-Ⅱ作用的预防和逆转作用。结果：AT-Ⅱ可以使血管平滑肌细胞的吸光度A值（MTT法测定）、[³H]-胸腺嘧啶核苷（[³H]-TdR）的掺入量、细胞数量明显高于对照组（P<0.05）。而用GSNO干预后,与对照组相比AT-Ⅱ的上述作用被明显抑制（P<0.05）。结论：GSNO可以抑制AT-Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖。     

克山病病区糖饲养豚鼠的冠状动脉平滑肌细胞膜电位的研究

本文应用细胞内微电极方法，研究了克山病病区粮喂饲料喂饲豚鼠的冠脉平滑肌细胞膜电位变化，取得如下结果：（１）实验动物冠脉平滑肌细胞静息膜电位为－４９．８±５．３ｍＶ，对照组动物为－４９．９８±６．２ｍＶ（Ｐ＞０．０５）。（２）硒可使实验组动物冠脉平滑肌细胞膜电位去极化。其程度明显小于对照动物。（３）氯化钾和乙酰胆碱可分别引起实验动物冠脉平滑肌细胞膜电去极化和超极化，且较对照动物的变化明显增大。这些结     

丹参对血管平滑肌细胞抑制内皮细胞分泌的纤溶酶原激活物活性的影响

培养的猪内皮细胞(EC)产生和分泌纤溶酶原激活物(PA),血管平滑肌细胞(SMC)的无血清条件培养液(SMC-CM)与EC的无血清条件培养液(EC-CM)混合后,后者的PA活力明显减弱。EC与SMC复合培养时,其产生的PA活力亦降低(降低70.7%)。以上结果提示SMC产生纤溶酶原激活物抑制剂PAI抑制了EC分泌的PA活性。SMC-CM经SDS-PAGE后作反向纤维蛋白自显影显示PAI的分子量范围在49,000—62,000,与Laug(1985)报道的相似(55,000)。我们研究了中药丹参(Radix Salviae Miltiorrhizae,RSM)对SMC分泌PAI活性的影响。结果表明,培养的SMC经丹参作用后,其CM对尿激酶及内皮细胞产生的PA活性的中和作用明显减弱(P<0.05、P<0.01或P<0.001)。     

肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道的研究

目的：观察肺动脉高压大鼠（PHR）肺动脉平滑肌细胞膜电容(Cm)、膜电流(I)、电流密度(pA/pF)及I-V曲线，并与正常SD大鼠进行比较。观察盐酸埃他卡林对正常血压及肺动脉高压大鼠动脉平滑肌钾通道的影响。方法：SD大鼠,置于常压缺氧（10%O2）舱内，每天6 h，每周6 d，持续4周,使之平均肺动脉压升高,建立肺动脉高压大鼠模型。急性分离大鼠肺内动脉平滑肌细胞，用全细胞记录（whole cell recording）技术记录细胞钾电流、膜电容并计算电流密度。结果：PHR肺动脉平滑肌细胞Cm值、细胞膜钾电流值均显著高于正常血压SD大鼠（P<0.05）；PHR肺动脉平滑肌细胞钾电流密度值显著低于正常血压大鼠(P<0.05)。与正常SD大鼠比较，PHR钾电流I-V曲线下移。盐酸埃他卡林在10 μmol·L-1浓度下，可显著增强正常血压SD大鼠及PHR动脉平滑肌钾电流(P<0.05)。结论：PHR肺动脉平滑肌细胞的膜电容、膜钾电流比正常血压SD大鼠高；钾电流密度比正常血压SD大鼠低，I-V曲线下移。盐酸埃他卡林对正常血压大鼠及肺动脉高压大鼠动脉平滑肌钾电流都有增强作用。     

氟伐他汀抑制高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的:探讨氟伐他汀对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用。方法:培养自发性高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞,不同浓度血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血小板源生长因子(PDGF)、氟伐他汀及甲羟戊酸干预后,行细胞计数和[³H]-TdR掺入率测定。结果:①氟伐他汀呈浓度依赖性抑制10^-6mol/LAngⅡ和10μg/LPDGF刺激诱导的血管平滑肌细胞数和[³H]-TdR掺入率增加;②10^-3mol/L甲羟戊酸几乎完全逆转氟伐他汀对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用。结论:氟伐他汀抑制AngⅡ和PDGF诱导的高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖;甲羟戊酸代谢途径可能参与血管平滑肌细胞增殖过程。     

成年合成型血管平滑肌细胞的研究进展

The intermediate phenotype of vascular smooth muscle cell in adult is the dedifferentiation state returned from the high differentiation state , appeared on the damaged blood vessels. It is regulated by many factors. Its distribution, the characteristics of morphology and structure, the regulated transform factors and the molecular biological mechanism are introduced, and its functional significance and the role in vascular diseases are also discussed in this article.     

阿司匹林抗大鼠血管平滑肌细胞增生及与细胞周期的关系

目的：研究阿司匹林抑制大鼠血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell，VSMC）增生与细胞周期的关系。 方法： 记数大鼠A10 VSMC在不同浓度阿司匹林处理下细胞增殖数量的变化，测定细胞培养液中乳酸脱氢酶活性以确定有无细胞毒性。用Western免疫印迹技术观察细胞周期中各类分子的变化。 结果： 阿司匹林抑制大鼠A10 VSMC增生，此作用非细胞毒性所致。阿司匹林使p21、p27、非磷酸化 p107和cyclin A 表达增加。 结论： 大剂量阿司匹林能够在体外抑制大鼠VSMC增生，与阻断细胞周期的进程有关，可能有益于血管增生性疾病的防治。     

Canstatin RNA转染对兔血管平滑肌细胞体外增殖的抑制作用

目的:探讨canstatin对体外培养的兔血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响。方法:将阳离子脂质体介导的canstatinRNA转染VSMC,应用细胞计数,[³H]-TdR掺入率测定观察canstatin基因对VSMC增殖的作用。结果:阳离子脂质体介导的canstatinRNA可有效地转染VSMC并能显著地抑制VSMC的增殖及其DNA的合成率。结论:Canstatin基因可抑制体外培养的VSMC的增殖.     

高胰岛素血症对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的: 观察胰岛素、内皮素-1(ET-1)和胰岛素+ET-1对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和形态结构的影响。方法: 体外培养VSMC中分别加入320 mIU/L胰岛素,10^-9 mol/L ET-1,320mIU/L胰岛素加10^-9 mol/L ET-1, 通过细胞计数和[³H]-TdR掺入量反映VSMC增殖情况, 进行细胞形态学观察。结果: ①胰岛素和ET-1都能促进VSMC的增殖(均为P<0.05); ②胰岛素和ET-1的联合应用使VSMC增殖约是对照组的两倍(P<0.01), 二者的联合作用也明显强于胰岛素(P<0.05)或ET-1(P<0.05)的单独作用; ③3组VSMC均有不同程度出现形态结构的改变, 由收缩表型转为合成表型。结论: 高胰岛素血症和/或ET-1水平增加均有助于糖尿病和胰岛素抵抗致动脉粥样硬化等血管病变的发生和发展。     

慢性低氧对肺动脉内皮及平滑肌细胞急性低氧时胞浆游离钙变化的影响

目的和方法:以Fura-2/AM荧光指示剂负载,检测常氧(PO2213kPa)及慢性低氧[PO2(53±07)kPa]培养的大鼠肺内动脉平滑肌细胞及猪肺动脉内皮细胞胞浆游离钙的水平及其对急性低氧刺激反应的变化。结果:慢性低氧条件培养的第6代肺内动脉平滑肌细胞在急性低氧时[Ca²⁺]_i升高的程度明显降低(P<0.05);而慢性低氧条件培养的第5代肺动脉内皮细胞对急性低氧引起的[Ca²⁺]_i升高程度明显增加(P<0.05)。结论:慢性低氧可以减弱肺内动脉平滑肌细胞对急性低氧所致[Ca²⁺]_i升高的反应而增强肺动脉内皮细胞低氧性[Ca²⁺]_i升高的反应。这可能在慢性低氧时肺血管对低氧的反应性降低中起重要作用。