穗花杉双黄酮调控miR-140-5p介导脂多糖致急性肺损伤的机制研究

目的 探究穗花杉双黄酮对脂多糖（lipopolysaccharides ,LPS）致大鼠急性肺损伤（acute lung injury ,ALI）的保护作用及机制研究。方法 将60只大鼠随机分为4组：对照组、模型组、阳性对照组、实验组。模型组、阳性对照组和实验组大鼠均通过气道滴注3.00 mg/kg LPS 100μl,空白对照组气道滴注等体积的生理盐水,6 h后阳性对照组大鼠腹腔注射地塞米松（2.5 mg/kg）,实验组大鼠腹腔注射穗花杉双黄酮（2.5 mg/kg）,对照组和模型组注射等体积生理盐水。48 h后称重测定大鼠肺组织湿/干比;苏木精-伊红染色( hematoxylin-Eosin staining,HE )观察各组大鼠肺组织病理结构;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin 6,IL-6）和白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）水平;RT-PCR检测miR-140-5p在肺组织中的表达情况;蛋白印迹法（western Blot,WB）检测肺组织中Toll样受体4（Toll Like Receptor 4,TLR4）、核因子活化B细胞κ轻链增强子（nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells,NF-κB）蛋白表达水平。RT-PCR检测肺组织中miR-140-5p的表达情况。利用LPS刺激肺上皮细胞A549,加入穗花杉双黄酮RT-PCR检测miR-140-5P的表达,利用LPS刺激肺上皮细胞A549,加入miR-140-5P抑制剂、mimic-NC干预,RT-PCR检测TLR4、NF-κB的表达。结果 实验组肺组织湿/干比明显低于模型组（P＜0.05）;HE染色结果显示实验组大鼠肺组织结构相比于ALI模型组大鼠炎症细胞明显减少,肺泡间隔明显减轻;ELISA结果显示实验组大鼠肺组织中TNF-α、IL-6和IL-1β水平均明显低于模型组（P＜0.05）;WB结果发现实验组大鼠肺组织中TLR4、NF-κB表达量明显低于模型组;RT-PCR结果显示实验组大鼠肺组织和细胞中miR-140-5P表达均明显高于模型组（P＜0.05）,而miR-140-5P mimic能明显抑制TLR4、NF-κB的表达（P＜0.05）。结论 穗花杉双黄酮能明显缓解LPS诱导的大鼠ALI,降低肺损伤病理进程中血清TNF-α、IL-6和IL-1β的含量,对ALI起保护作用,其作用机制可能是通过促进了miR-140-5P的表达,从而减低ALI炎症过程中关键炎症信号TLR4、NF-κB的表达。     

灯盏花素注射液对脂多糖致大鼠急性肺损伤保护作用机制的研究

目的探讨灯盏花素注射液对脂多糖致大鼠急性肺损伤的保护作用。方法健康雄性SD大鼠30只随机分为对照组、脂多糖组(LPS组)和灯盏花素干预组(Bre组)各10只。对照组静脉注射生理盐水0.1 ml/kg;LPS组和Bre组静脉注射脂多糖5 mg/kg;Bre组在注射脂多糖前后30 min分别腹腔注射灯盏花素50 mg/kg。观察三组SD大鼠肺组织病理形态学改变及肺组织中超氧化物歧化酶活性(SOD)、丙二醛含量(MDA)及细胞间粘附分子-1(ICMA-1)的表达变化。结果与对照组比较,LPS组与Bre组SOD降低(P<0.05)、MDA增多(P<0.05)、ICMA-1表达增高(P<0.05);与LPS组比较,Bre组SOD升高(P<0.05)、MDA减少(P<0.05)、ICMA-1表达减少(P<0.05)。结论灯盏花素注射液可能通过提高机体抗氧化能力、降低细胞间粘附分子-1的表达来减轻脂多糖致大鼠急性肺损伤。     

黄芪注射液对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的保护作用及机制

目的 探讨黄芪注射液对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的保护作用及机制.方法 将36只SD大鼠按随机数字表分为3组,各组注药均从尾静脉注入.对照组注入生理盐水1ml;模型组应用LPS 5mg/kg溶解于1ml生理盐水注入;干预组在模型组基础上应用黄芪注射液治疗.3组于24h抽取腹主动脉血行血气分析;抽取尾静脉血离心,留取血清测...     

地塞米松对脂多糖致大鼠急性肺损伤的治疗作用

目的:探讨急性肺损伤(Acate lung injury,ALI)发生早期给予地塞米松的治疗作用.方法:大鼠尾静脉注射5mg/kg脂多糖(Lipopolysacharide,LPS),造成ALI模型.于注射LPS 1 h后,腹腔注射地塞米松(10 mg/kg),1 h后采集标本,分别测定血清蛋白含量、肺泡灌洗液(Broncho alveolar lavage fluid,BALF)中蛋白、TNF-α、IL-8、ICAM-1的含量,计算肺通透指数(Lung alveolar permeability index,LPI)、肺湿/干重比,检查肺组织病理学变化情况.实验平行设置生理盐水对照组和LPS损伤组.结果:肺组织病理切片检查表明,LPS组肺间质水肿、出血,大量炎性细胞浸润,而地塞米松组肺组织损伤显著轻于LPS组.地塞米松组肺湿/干重比、BALF中PMN比、LPI均显著低于LPS组(P<0.05),与正常对照组相比没有显著差异.LPS组BALF中TNF-α、IL-8、ICAM-1浓度高于正常对照组(P<0.05),而地塞米松组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05 ).结论:在ALI发生早期给予大剂量地塞米松,可以减轻肺组织损伤,减少肺组织液渗出和中性粒细胞聚集.     

异丙酚对内毒素致大鼠急性肺损伤的保护作用及机制

目的探讨异丙酚对内毒素致大鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用及机制。方法Wistar大鼠随机分成3组,每组20只。对照组（C组）：股静脉输注生理盐水5mL在1．5h内输注完毕;内毒素（LPS）对照组（L组）：经股静脉输注生理盐水3mL/h,然后再输注LPS8mg／kg（溶于2mL生理盐水中）,30min内输注完毕;异丙酚处理组（LT组）：异丙酚20mg／kg溶于3mL生理盐水中,经股静脉1h内输注,然后输注LPS（方法如上）。6h时取大鼠肺组织标本,HE染色后观察肺组织形态学的变化;检测肺组织湿/干重（W／D）比、肺水含量、血管壁通透性（EB渗出）、肺通透指数（LPI）等指标反映肺损伤程度;检测丙二醛（MDA）、NO、诱导型NO合成酶（iNOS）、超氧化物歧化酶（SOD）及髓过氧化物酶（MPO）的活性来反映氧自由基的代谢;Kaplan—Meier曲线分析4、6、8、10、12h生存率。结果L组W／D比、EB渗出、LPI、MDA、NO、iNOS、MPO显著高于C组、LT组（P〈0．01）,而SOD较LT组明显下降（P〈0．01）：结论异丙酚增强SOD活性,抑制iNOS、MPO活性,减少了内毒素致ALI后肺部的炎性反应及氧化应激反应,从而减轻了肺损伤程度。     

芦丁对脂多糖致小鼠急性肺损伤的保护作用

目的探讨芦丁对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）小鼠的保护作用及可能机制。方法30只C57BL/6小鼠随机分为
对照组,模型组（LPS组）和治疗组（LPS+芦丁组）。利用HE染色观察肺组织病理变化,测量肺湿/干重比（W/D）,ELISA法检测
支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF-α和IL-1β水平,利用RT-PCR法和Western blot法检测α-ENaC的表达水平。结果病理检查
示模型组肺组织有明显的炎症充血水肿,治疗组较模型组炎症充血水肿明显减轻。模型组W/D值,BALF中TNF-α和IL-1β含
量均较对照组明显增高,而α-ENaC mRNA和蛋白表达水平较对照组显著降低。与模型组相比,治疗组W/D值,BALF中TNF-α
及IL-1β含量明显降低,而α-ENaC mRNA和蛋白表达水平明显增加。结论芦丁能够抑制急性肺损伤炎症反应,增加肺泡上皮
钠通道蛋白表达,有效减轻LPS所致的小鼠急性肺损伤。
     

姜黄素对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的保护作用

目的观察姜黄素对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用。方法 Wistar大鼠随机分为6组：空白组、模型组、地塞米松组和姜黄素三个不同剂量组（50、100、200mg.kg-1）。LPS气管滴注复制ALI模型,6h后收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,检测TNF-α、IL-1β浓度及蛋白含量;称重法检测肺组织湿/干重比和肺含水量。结果姜黄素剂量依赖性降低LPS所致ALI模型BALF中TNF-α、IL-1β及蛋白量增加,降低肺湿/干重比、肺含水量。结论姜黄素对LPS所致ALI有保护作用,其可能的机制为调节炎症介质的产生有关。     

银杏叶提取物注射液对脂多糖致大鼠急性肺损伤肺组织的保护作用

目的 观察银杏叶提取物注射液（GBE）对脂多糖（LPS）致大鼠急性肺损伤（ALI）肺组织的保护作用及其可能机制。方法 24只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、LPS组和GBE组,每组8只。尾静脉注射LPS建立ALI模型,光镜下观察大鼠肺组织形态学改变;检测肺组织中超氧化物歧化酶活性（SOD）和丙二醛（MDA）含量及血清中白细胞介素-6（IL-6）的表达变化。结果 与对照组相比,LPS组肺组织中SOD活性降低、MDA含量增加、血清中IL-6含量增加（P<0.05）;应用GBE后,肺组织SOD活性升高、MDA含量减少、血清中IL-6含量减少（P<0.05）。结论 GBE可有效减轻ALI肺组织的炎症反应,其机制可能与其提高大鼠抗氧化能力、升高血清中IL-6的含量有关。     

姜黄素对急性肺损伤大鼠的保护作用及分子机制研究

目的探讨血红素加氧酶（HO-1）在姜黄素减轻脂多糖（LPS）所致急性肺损伤（ALI）中的作用。方法将大鼠随机分为5组：正常组、ALI模型、LPS＋姜黄素组、LPS＋姜黄素＋氯血红素（Hm）组以及LPS＋姜黄素＋锌原卟啉（ZnPP）组。给药后进行肺组织的形态学观察,并测定丙二醛（MDA）的含量以及HO-1的活性;RT-PCR和Western blot检测HO-1 mRNA和蛋白的表达情况。结果用LPS成功复制出ALI模型,同时,肺组织中MDA含量、HO-1蛋白活性、HO-1 mRNA以及蛋白水平均高于阴性对照组（P均〈0.05）;姜黄素＋LPS组、姜黄素＋LPS＋Hm组肺组织损伤程度、MDA含量低于LPS模型组,但HO-1活性、mRNA和蛋白水平高于相应LPS组（P均〈0.05）。LPS＋姜黄素＋ZnPP组肺损伤程度、MDA含量高于LPS组,而HO-1活性、mRNA和蛋白水平低于LPS组（P〈0.05）。结论姜黄素对ALI的保护作用可能通过增强HO-1活性、上调mRNA和蛋白表达水平而实现的。     

依布硒啉对大鼠脂多糖诱导的急性肺损伤的保护作用

目的探讨依布硒啉对内毒素性急性肺损伤大鼠肺功能的保护作用及对肺组织中相关细胞因子表达的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分成6组:正常对照组,模型组,地塞米松对照组,依布硒啉30、15和7.5 mg/kg治疗组。通过大鼠尾静脉注射脂多糖(5 mg/kg)建立急性肺损伤模型,治疗大鼠组于造模前30 min腹腔注射给药,对照组和模型组分别注入等量溶剂。造模后6 h,麻醉抽取动脉血并放血处死动物,检测动脉血氧分压(PaO2)和二氧化碳分压(PaCO2),取肺组织,测定肺湿/干质量比,收集支气管肺泡灌洗液,检测其中总蛋白水平。分别检测肺组织中丙二醛(MDA)、TNF-α含量及核因子E2相关因子(Nrf2)蛋白表达。结果与模型组相比,依布硒啉15和30 mg/kg剂量组大鼠动脉血中PaO2明显增高、PaCO2明显降低,肺湿/干质量比降低,肺组织MDA和TNF-α含量显著减少,而Nrf2表达明显增高。结论依布硒啉对内毒素性急性肺损伤有一定保护作用,其机制可能与诱导Nrf2表达有关。     

肢体缺血预处理对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的保护作用

目的：研究非创伤性肢体缺血预处理(non-wounded limb ischemic preconditioning,N-LIP)对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤（acute lung injury, ALI）的保护作用。方法：将15只SD雌性大鼠随机分为对照组、急性肺损伤组（ALI组）、急性肺损伤+非创伤性双下肢缺血预处理组(ALI+N-LIP组),检测N-LIP后ALI大鼠肺功能的变化、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白细胞数量和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平,血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyd,MDA)含量,免疫组织化学方法检测肺组织内肺泡表面活性物质-A（pulmonary surfactant-associated protein A,SP-A）表达水平, HE染色观察肺组织病理改变。结果：乙酰甲胆碱（methacholine,Mch）激发后ALI+N-LIP组大鼠气道阻力(airway resistance,AR)的增高程度（P<0.01）、动态顺应性（dynamic compliance,Cdyn）的减弱程度(P<0.01)均明显小于ALI组; ALI+N-LIP组BALF中的白细胞数和LDH含量均明显小于ALI组(P<0.05); ALI+N-LIP组血清中SOD活力高于ALI组(P<0.05),MDA含量明显小于ALI组(P<0.05);免疫组织化学显示：ALI+N-LIP组肺组织中SP-A含量最高,其次为对照组,ALI组肺组织内SP-A含量最低;肺部HE染色显示：ALI+N-LIP组损伤程度明显轻于ALI组,但较对照组要严重。结论：N-LIP对脂多糖诱导的ALI有保护作用,其作用机制可能与其促进SP-A表达和抗氧化作用有关。     

金线莲提取物对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究

目的观察金线莲提取物对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）模型小鼠的疗效并探讨其作用机制。方法60只健康ICR小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组和金线莲低、中、高剂量组。地塞米松组给予5.0mg/kg地塞米松溶液腹腔注射,金线莲低、中、高剂量组分别给予1.3、2.6、5.2g/kg的金线莲提取物灌胃,对照组和模型组给予0.9%氯化钠溶液灌胃,连续给药2d。第3天对照组给予0.9%氯化钠溶液气管滴注,其余各组均给予5.0mg/kgLPS构建ALI模型。造模后各组再给药1次。12h后颈椎脱臼处死小鼠,获取肺组织及肺泡灌洗液。HE染色观察肺组织病理学变化,测定肺湿干比,ELISA法测定肺泡灌洗液中IL-6、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、IL-12/p70、IFN-γ、TNF-α和IL-10的水平,免疫组化法检测肺组织中髓过氧化物酶（MPO）、磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）、人核因子κB抑制蛋白α（IκBα）和磷酸化人核因子κB抑制蛋白α（p-IκBα）的蛋白表达水平,Westernblot法检测肺组织中细胞外信号调节激酶（ERK）、p-ERK、c-Jun氨基末端激酶（JNK）、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）、p38、磷酸化p38（p-p38）、腺苷酸-活化蛋白激酶α（AMPKα）、磷酸化腺苷酸-活化蛋白激酶α（p-AMPKα）、MPO蛋白相对表达量。结果与对照组相比,模型组小鼠肺组织出现炎性病理变化,肺泡灌洗液中IL-6、MCP-1、IL-12/p70、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平均显著升高（均P＜0.01）。与模型组相比,金线莲高剂量组肺组织湿干比明显降低（P＜0.01）,肺泡灌洗液中IL-6、MCP-1、IL-12/p70、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平均显著降低（均P＜0.05）,肺组织MPO、p-ERK、p-IκBα蛋白表达水平均显著降低（均P＜0.05）,p-ERK、p-JNK、p-p38、p-AMPKα、MPO蛋白相对表达量均显著降低（均P＜0.05）。结论一定剂量金线莲提取物可有效保护LPS所致ALI,其作用机制可能与调节丝裂原活化蛋白激酶信号通路、减轻炎症反应有关。     

谷胱甘肽对内毒素致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 观察谷胱甘肽(GSH)在急性肺损伤(ALI)治疗中的保护作用,并探讨损伤与凋亡相关基因bcl-2及fas的可能机制.方法 动物随机分对照组、损伤纽、还原型谷胱甘肽干预组,每组6只;对照组及损伤组分别从股静脉注射生理盐水及脂多糖(LPS),并于注射前及后30,60,120 min时采集血样及肺组织样品;还原型谷胱甘肽干预组:注射LPS前1 h、即刻及后30 min股静脉注射还原型谷胱甘肽,余同内毒素组.检测各肺损伤指标,观察病理形态并作免疫组化染色.结果 各项指标干预组均较损伤组减轻;且越早应用GSH对肺脏的保护作用越强;肺组织匀浆中的GSH含量增高(P＜0.01).正常肺组织bcl-2及fas均有基础低表达,LPS致伤后较正常组表达增高,经GSH处理后表达减弱.结论 谷胱甘肽可能通过诱导bcl-2基因表达增高(P＜0.01)及抑制fas基因使其表达减少(P＜0.05),从而逆转凋亡,保护肺组织.     

肺康益气颗粒对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤保护作用及免疫作用研究

目的 探讨肺康益气颗粒对脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及免疫调节作用,为新型冠状病毒肺炎(COVID-19)恢复期的临床治疗提供理论依据.方法 采用气管内滴注LPS(5 mg/kg)构建ALI模型,将大鼠随机分为正常组,假手术组,模型组,肺康益气颗粒低(2.7 g/kg)、中(5.4 g/kg...     

不同剂量原儿茶酸对脂多糖致急性肺损伤小鼠的作用及其机制研究

目的：探索不同浓度原儿茶酸（ PCA ）对脂多糖（ LPS ）诱导的急性肺损伤（ ALI ）小鼠的保护作用,并探讨其对TLR4信号通路的作用。方法将60只小鼠分为6组：正常对照组、LPS模型组、PCA高剂量组、PCA中剂量组、PCA低剂量组、地塞米松阳性对照组。模型组以5mg· kg -1 LPS腹腔内注射诱导ALI。观察小鼠肺组织病理学变化;用BCA法检测肺泡灌洗液中总蛋白浓度;用ELISA检测肺泡灌洗液及血清中炎症因子TNF-α,IL-1β的表达,Western Blot 检测肺组织中TLR4蛋白的表达水平。结果与模型组相比,PCA治疗组肺组织损伤程度显著减轻,且与PCA给药浓度有关,高浓度组减轻显著;BALF及血清中TNF-α,IL-1β含量出现明显下降, PCA高剂量组差异显著（ P＜0．05）;BALF中蛋白浓度与模型组相比出现明显下降,PCA高剂量组差异显著（ P＜0．01）;TLR4蛋白表达量较LPS模型组相比显著降低（P＜0．01）,并随浓度的增高而降低。结论 PCA对脂多糖所致急性肺损伤的保护作用与浓度有关,高浓度组作用显著,其作用机制可能与其抑制TLR4信号通路有关。     

牛磺酸对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用机制

目的 脓毒症引起的肺损伤发病机制复杂,而牛磺酸具有抗炎和抗氧化作用,文章探讨牛磺酸(Taurine)在脓毒症大鼠急性肺损伤(ALI)中的保护作用,并阐明其作用机制.方法 SD雄性大鼠48只,随机数字表法分为3组,每组16只:正常对照组、脓毒症急性肺损伤组(ALI组)和ALI+Taurine组.盲肠结扎穿孔法建立脓毒症大...     

外源性硫化氢在脂多糖致老年大鼠急性肺损伤中的作用

目的:探讨外源性硫化氢(H2S)在脂多糖(LPS)致老年大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用并初探其机制.方法:将48只SD老年大鼠随机分为对照组、LPS组(经气管内滴注LPS复制ALI模型)和NaHS+LPS组(LPS滴注前10 min腹腔注射NaHS),每组16只.分别于给药后4及8 h取8只动物处死,测定肺系数;光镜下观察肺组织形态学改变;检测血浆H2S、NO和CO含量,肺组织丙二醛(MDA)含量.胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)、诱导型-氧化氮合酶(iNOS)和血红素加氧酶(HO)活性;用免疫组织化学法检测肺组织iNOS及HO-1蛋白的表达.结果:给药后4及8 h,LPS组肺系数及IQA大于对照组和NaHS+LPS组,NaHS+LPS组大于对照组(P均<0.001).与对照组比较,LPS组肺组织MDA含量增加;血浆H2S含量和肺组织CSE活性下降;肺组织iNOS活性和iNOS蛋白表达增强,血浆N0含量增加;肺组织HO活性和HO-1蛋白表达增强,血浆CO含量增加(P均<0.05).与LPS组比较,NaHS+LPS组上述措标均有所改香(P均<0.01).结论:CSE/H2S体系的卜调是LPS致老年大鼠ALI发病的机制之一,外源性H2S可通过抗氧化和下调iNOS/NO体系、上调HO-1/CO体系对肺组织发挥保护作用.     

地塞米松对内毒素致急性肺损伤大鼠肺的保护作用

目的:探讨在急性肺损伤(acute lung injury,ALI)病程不同阶段给予小剂量地塞米松干预,对ALI是否具有保护性差异.方法:根据腹腔注射内毒素(lipopolysacharide,LPS)后不同时间肺组织病理改变程度的不同将实验动物分为LPS组、LPS后1 h地塞米松干预组、LPS后3 h地塞米松干预组和生理盐水对照组,对比各组间组织病理学改变、动脉血气、肺湿/干重比、肺泡灌洗液蛋白含量、肺通透指数、IL-8含量及肺内水通道蛋白1(aquaporin-1,AQP1)表达的差异.结果:LPS组、LPS后1 h组、LPS后3 h组和生理盐水对照组的肺湿/干重比例分别为(4.92±0.23),(4.89±0.21),(4.57±0.14)和(4.48±0.23),肺泡灌洗液蛋白含量分别为(291.60±58.58) g/L,(140.36±32.45)g/L,(121.80±40.68)g/L和(194.6±60.36)g/L,肺通透指数分别为(5.73±1.37),(2.40±0.51),(2.15±0.63)和(3.94±1.28),肺内AQP1表达水平分别为(19.92±6.47),(33.47±9.41),(40.70±9.18)和(47.16±10.88).试验结果显示两组地塞米松干预组与内毒素组相比均可显著改善肺湿/干重比、肺泡灌洗液蛋白含量、肺通透指数及肺内AQP1表达水平,差异具有统计学意义;在LPS后3 h地塞米松干预组上述指标改善趋势更明显,但与LPS后1 h地塞米松干预组结果相比差异不具有统计学意义.上述4组的病理评分分别为(12.00±2.22)分,(6.75±2.28)分,(8.00±2.66)分和(2.75±0.79)分,两组地塞米松干预组与LPS组3组间比较差异无统计学意义.结论:ALI典型病理改变出现后再给予糖皮质激素治疗可以改善肺通透性和减轻肺水肿.