高功率微波辐照后大鼠睾丸生精细胞Bcl-2和C-myc蛋白表达改变

目的: 检测高功率微波(HPM)与细胞凋亡相关蛋白Bc1 2和C myc的关系。　方法: 健康成年雄性SD大鼠 125只,随机分为 25组,每组 5只。以S波段平均功率密度分别为 10、20mW/cm2的HPM辐照实验组大鼠 5、10min,分别于照后 6、24、48、72、120h取睾丸组织,应用免疫组化SP法检测Bc1 2和C myc蛋白表达改变。对照组不经HPM辐照。　结果: HPM辐照后, 24h组Bc1 2和C myc蛋白表达升高, 20mW/cm2组两者升高较 10mW/cm2组升高明显,差别有显著性(P<0. 01),正常对照组无表达。　结论: HPM辐照大鼠后 24h,促进Bc1 2和C myc蛋白的活化和表达,可能是HPM诱导凋亡的机制之一。     

高功率微波辐照后大鼠睾丸生精细胞Bc1-2和C-myc蛋白表达改变

目的: 检测高功率微波(HPM)与细胞凋亡相关蛋白Bc1 2和C myc的关系。　方法: 健康成年雄性SD大鼠 125只,随机分为 25组,每组 5只。以S波段平均功率密度分别为 10、20mW/cm2的HPM辐照实验组大鼠 5、10min,分别于照后 6、24、48、72、120h取睾丸组织,应用免疫组化SP法检测Bc1 2和C myc蛋白表达改变。对照组不经HPM辐照。　结果: HPM辐照后, 24h组Bc1 2和C myc蛋白表达升高, 20mW/cm2组两者升高较 10mW/cm2组升高明显,差别有显著性(P<0. 01),正常对照组无表达。　结论: HPM辐照大鼠后 24h,促进Bc1 2和C myc蛋白的活化和表达,可能是HPM诱导凋亡的机制之一。     

高功率微波辐射所致大鼠睾丸损伤的病理学研究

目的:探讨高功率微波(HPM)辐照后睾丸组织的病变特点、动态变化规律。方法:165只二级雄性W istar大鼠经0、3、10、30、100 mW/cm2HPM辐照5 m in,于照后6 h,1、3、7、14、28、90 d,采用光镜、电镜观察睾丸组织形态学及附睾精子畸形的变化。结果:3~100 mW/cm2HPM辐照均可引起大鼠睾丸生精细胞损伤,主要病变为生精细胞变性、坏死、脱落,多核巨细胞形成,精子减少,间质水肿。生精细胞损伤历经死亡脱落期、“空虚”期和再生修复期,具有局灶性、不均一性、阶段性等特点,且功率密度越大,病变越严重,3 mW/cm2辐照后1 d见散在生精小管生精细胞变性、坏死、脱落;10 mW/cm2辐照后6 h与3 mW/cm2辐照后1 d病变相似,但出现多核巨细胞;1~7 d时上述病变明显加重;30、100 mW/cm2辐照后6 h,不仅见生精小管生精细胞的变性、坏死脱落明显增加,还可见单个生精小管内灶性坏死及精子明显减少或缺失。在3 mW/cm2辐照后3 d,10 mW/cm2辐照后1~7 d,30、100 mW/cm2辐照后6 h~7 d附睾畸形精子率显著性增加(P<0.01或P<0.05)。结论:HPM辐照可引起大鼠睾丸生精细胞损伤,其损伤存在剂量效应和时间效应关系。     

诊断超声照射后大鼠睾丸生殖细胞的凋亡变化

目的　探讨诊断超声照射对大鼠睾丸组织细胞凋亡的影响。　方法　应用HP 85 0 0彩色多普勒超声诊断仪 ,对 72只大鼠固定持续照射睾丸。随机分为 10min组、2 0min组、30min组和空照组 ,根据取材时间不同随机分为 12h组、2 4h组和 48h组。应用原位末端标记技术 (TUNEL)检测各组凋亡细胞。　结果　各实验组凋亡细胞数均大于空照组 ,以持续照射 30min、2 4h组凋亡细胞数最多 ,达 (12 .86± 3.18)个 /HP 10 0 0×油镜 ,48h各组凋亡细胞开始下降 ,但仍高于空照组。　结论　诊断超声在同一切面持续照射 10min以上 ,可引起大鼠睾丸生精细胞凋亡 ,照射后取材时间不同 ,凋亡细胞量也不同。     

高功率微波辐射对大鼠血睾屏障的影响

目的:探讨高功率微波(HPM)辐射对血睾屏障(BTB)结构与功能的影响。方法:166只二级雄性Wistar大鼠经0、10、30、100mW/cm2HPM辐射5min,于辐射后6h,1、3、7、14d,采用镧醛(含20g/L硝酸镧,50mg/L戊二醛)心脏灌注和2%伊文思蓝(EB)尾静脉注射,经光镜、电镜和激光共聚焦显微镜(LSCM)观察BTB结构变化及硝酸镧和EB分布。结果:10～100mW/cm2HPM辐射后大鼠睾丸间质水肿伴血管充血、出血;生精小管近腔室内血浆蛋白和红细胞积聚,病变在辐射后6h出现,1～7d明显加重,范围扩大,14d有所减轻;30、100mW/cm2辐射组明显重于10mW/cm2辐射组。电镜下见各辐射组硝酸镧颗粒于近腔室内精母细胞、精子细胞和精子之间沉淀。LSCM观察见生精小管近腔室内弥散分布的EB颗粒。结论:HPM辐射可引起BTB结构破坏,通透性增加。     

高压氧对睾丸扭转/复位后生精细胞凋亡的作用

目的 探讨单侧睾丸扭转/复位后睾丸细胞凋亡状况和高压氧(HBO)的干预作用。方法 32只青春期 Wistar大鼠随机等分为 4组,1组为对照组,2～4组制成单侧睾丸扭转/复位模型(扭转 720°、2 h后复位),3组、4组分别于睾丸复位前和复位后立即予以 60 min HBO治疗。术后48 h获取双侧睾丸,原位缺口末端标记法(TUNEL)观察细胞凋亡,常规染色观察病理学改变。结果 与1组比较,2组扭转侧睾丸生精细胞凋亡增加(P<0.01)、病理损害明显;对侧睾丸生精细胞凋亡增加(P<0.01)。3～4组尤其是4组扭转侧睾丸生精细胞凋亡较2组明显减少(P<0.01)、病理损害减轻;对侧睾丸细胞凋亡较1组无明显变化(P>0.05)。结论 单侧睾丸扭转复位后,双侧睾丸生精细胞凋亡增加,复位前和复位后早期HBO治疗能明显减少细胞凋亡的发生。     

睾丸局部热作用对幼鼠生精细胞凋亡的影响

目的探讨睾丸局部热作用对幼鼠生精细胞凋亡的影响。方法48只健康幼年期SD雄性大鼠随机分为热处理组(43℃,15min)和对照组(22℃,15min):分别按睾丸局部处理后2h,6h,24h,14d分成4个亚组。应用电镜和原位末端标记法(TUNEL)检测各亚组幼鼠睾丸生精细胞凋亡情况,并在光镜下观察睾丸组织学变化。结果电镜显示热处理组除2h外各组均出现生精细胞凋亡表现;TUNEL法检测结果用生精细胞凋亡指数(AI)表示;热处理组2hAI与对照组相比无统计学意义,热处理组6hAI高于对照组(P<0.05),热处理组24h和14dAI明显高于对照组(P<0.01)。结论睾丸局部热作用导致幼鼠生精细胞凋亡增加。     

微波长期辐射对雄性生殖的影响研究

目的:探讨微波长期辐射对雄性大鼠生殖的影响。方法:100只二级雄性Wistar大鼠经平均功率密度为0、2.5、5和10 mW/cm2微波辐射4周(5次/周、6 min/次),于辐射后6 h、7 d、14 d、28 d和60 d,动态观测血清睾酮,睾丸指数、组织学和超微结构及附睾精子畸形率的变化。结果:2.5、5 mW/cm2微波辐射28 d[(10.20±4.31))ng/ml,(5.56±3.47)ng/ml]和10 mW/cm2辐射后28 d[(7.53±4.54)ng/ml]及60 d[(15.95±9.54)ng/ml]血清睾酮浓度较对照组[(23.35±8.06)ng/ml,(31.40±9.56)ng/ml]明显降低(P<0.05或P<0.01);3种剂量微波辐射后6 h～60 d,睾丸指数未见明显变化,但均出现不同程度生精细胞变性坏死脱落、生精上皮变薄、精子减少或缺失等改变,以辐射后28 d及60 d明显;5 mW/cm2辐射后7 d和60 d,超微结构见各级生精细胞线粒体肿胀、空化,精原细胞和Leydig细胞染色质凝集边移;附睾精子畸形率均呈增加趋势,其中2.5 mW/cm2辐射后7 d,5 mW/cm2辐射后60 d,10 mW/cm2辐射7 d、28 d、60 d附睾精子畸形率明显增加(P<0.01或P<0.05)。结论:微波长期辐射可引起雄性大鼠生殖损伤,与辐射剂量呈正相关,并具有明显的远后效应。     

大鼠睾丸局部热作用对生精细胞凋亡的影响

目的 :研究大鼠睾丸局部受热后生精细胞凋亡的情况。　方法 :70只雄性SD大鼠随机分为热处理组 ( 43℃ )和对照组 ( 2 2℃ ) ,分别按睾丸局部处理后 12h、1d、3d、6d、10d、5 0d和 80d分成 7个亚组。应用电镜、流式细胞术和原位末端标记法 (TUNEL) ,检测各亚组大鼠睾丸生精细胞凋亡情况。　结果 :电镜显示热处理各组均出现生精细胞凋亡表现 ;流式细胞术检测发现热处理各组亚单倍体细胞百分率明显升高 (P <0 .0 1) ;TUNEL法显示热处理各组生精细胞凋亡率明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,各类生精细胞对热的敏感性不同。　结论 :大鼠睾丸局部受热后生精细胞凋亡增加 ,初级精母细胞受热后最敏感 ,其次为精子细胞和精子 ,并且精原细胞凋亡在受热后一个长时期内均有增加     

手机频率电磁辐射对大鼠睾丸超微结构损伤的研究

目的:观察手机频率(900 MHz)电磁辐射对雄性大鼠睾丸组织超微结构和生精细胞凋亡的影响。方法:将30只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为3组:正常组、辐射2 h组和辐射4 h组,每组10只。正常组不辐射,辐射2 h组和辐射4 h组每天暴露于900 MHz手机频率分别辐射2、4 h,连续辐射30 d。透射电镜观察睾丸组织超微结构的变化,原位末端标记(TUNEL法)检测生精细胞凋亡。结果:与正常组比较,辐射2 h组大鼠生精小管基膜肿胀,支持细胞紧密连接分开,细胞间隙明显增大,部分线粒体内出现空泡,见线粒体髓样化,生精细胞凋亡增多[(25.62±1.33)%vs(18.71±1.76)%,P0.05],以初级精母细胞凋亡为主;与辐射2 h组比较,辐射4 h组生精小管基膜肿胀,支持细胞紧密连接分开,细胞间隙明显增大,精原细胞胞膜不完整,可见胞质碎片、胞核固缩和切迹,核周隙轻度扩张,细胞内线粒体畸形,内有空泡,结构模糊,部分嵴融合或消失,其损伤程度增加,生精细胞凋亡增多[(29.93±1.46)%vs(25.62±1.33)%,P0.05],精原细胞、初级精母细胞和次级精母细胞均有凋亡。结论:手机频率电磁辐射可造成大鼠睾丸组织超微结构损伤,生精细胞凋亡增加,有时效关系;生精细胞凋亡可能与线粒体损伤有关。     

微波辐射致小鼠GC-2spd细胞损伤效应研究

目的:探讨微波辐射对小鼠GC-2spd细胞的影响。方法:培养的GC-2spd细胞经平均功率密度为0、10、30mW/cm2微波辐射15min,于辐射后1~24h,应用MTT法、光镜、电镜、流式细胞术和ELISA法观测细胞增殖活力、细胞形态学和超微结构、细胞凋亡及cAMP含量的变化。结果:10、30mW/cm2微波辐射后1~24h(除30mW/cm2辐射后12h外),GC-2spd细胞增殖活力较对照组明显下降(P0.01或P0.05),光镜见部分细胞突起变短,数目减少,胞内空泡增多;辐射后6h,细胞凋亡率(%)明显增加(14.59±1.09、8.48±1.73 vs 4.56±2.09,P0.05或P0.01),电镜见细胞核染色质凝集边移或核膜破裂,内质网明显扩张;辐射后6h和24h,细胞内cAMP含量(nmol/g)明显降低(1.65±0.17、1.96±0.10 vs 2.77±0.24,2.13±0.33、1.69±0.27 vs 3.02±0.47,P0.05或P0.01)。结论:10和30mW/cm2微波辐射可引起GC-2spd细胞损伤,表现为细胞内cAMP含量降低,细胞增殖活力下降,细胞凋亡增加。     

低强度微波辐射对大鼠神经细胞死亡率影响的实验研究

目的 探讨低强度微波辐射对大鼠神经细胞死亡率的影响。方法 在对体外新生大鼠(0～1天)皮层神经细胞进行原代培养的基础上,以频率900MHz,功率密度分别为0．025mW／cm^2、0．05mW／cm^2、0．1mW／cm^2的低强度微波辐射4、8、12、16、20、24小时。检测细胞死亡率。结果 和对照组相比,0．05mW／cm^2功率密度组辐射12小时、0．1mW／cm^2功率密度组辐射8小时后均可引起神经细胞细胞死亡率增高,且随着辐射时间的延长,细胞死亡率也逐渐上升,0．025mW／cm^2功率密度组未见明显改变。结论 长期连续的低强度微波辐射对培养大鼠神经细胞存在损伤作用。     

Role of endogenous cannabinoids in ischemia/reperfusion injury following testicular torsion in rats

Objectives:   The role of endogenous cannabinoids in ischemia/reperfusion induced germ cell apoptosis in rats was investigated.
Methods:   Baseline group was for basal normal values. The Sham operated group served as a control group. The torsion/detorsion (T/D) group underwent torsion (1 h) and detorsion; AN1, AN2, and AN3 groups received anandamide (10 mg/kg) 30 min before torsion, 30 min after torsion, and just after detorsion, respectively. In the AM251 group, AM251 (0.5 mg/kg) was injected 45 min before torsion and in the AN/AM group, AM251 and anandamide were injected 45 and 30 min before torsion, respectively. Lipid peroxidation, antioxidant enzymes, and germ cell apoptosis was determined.
Results:   Malondialdehyde (MDA) levels in the T/D group were significantly higher than the control group. Moreover, MDA values in the AN1, AN2, and AN3 groups were significantly lower than T/D. There were significant decreases in catalase and superoxide dismutase activities in the T/D group versus the control group. These values in the AN1, AN2, and AN3 groups were significantly higher than T/D. It was also shown that MDA levels in the AN/AM group were significantly higher than the AN1 group. In the AN/AM group, catalase and superoxide dismutase activities were significantly lower versus the AN1 group. The mean germ cell apoptosis scores in all animals with testicular T/D were significantly higher than the control group. There was no difference between the apoptotic indices in the AN1, AN2, AN3, and T/D groups. Apoptosis scores in AM251 and AN/AM were significantly higher compared with the T/D and AN1 groups.
Conclusions:   Although anandamide increased antioxidant markers, it failed to reduce germ cell apoptosis. AM251 worsened the antioxidant defense system, which is reflected as higher germ cell apoptosis.     

Effect of insulin-like growth factor-1 on apoptosis of rat testicular germ cells induced by testicular torsion

OBJECTIVE: To investigate the possible protective role of insulin-like growth factor-1 (IGF-1, reported to have a protective effect in experimental models of hypoxic ischaemia), and the involvement of apoptotic cell death in a model of torsion/detorsion of the rat testis. MATERIALS AND METHODS: Adult male Wistar rats were divided into five groups of five rats each. Group 1 underwent a sham operation as a control; in group 2 the testis was twisted and in group 3 then untwisted; in group 4 IGF-1 was injected subcutaneously just before bilateral torsion, and then the right testis removed after 4 h and the left after 24 h; in group 5, IGF-1 was injected immediately after bilateral detorsion and then the testes removed as in group 4. Both testicles were examined histologically, with apoptosis detected using the in situ DNA fragmentation (TUNEL) system, with combined enzymology and immunohistochemistry techniques. RESULTS: In groups 2 (torsion) and 3 (detorsion), light microscopy of the testis showed some degenerative changes in the germ cells. Compared to group 1, apoptosis was more significant in group 3 than in the other groups. Group 4 (torsion/IGF-1) had a similar number of apoptotic germ cells as in group 2 (torsion) after 24 h, but fewer than the same group after 4 h. In group 5 (detorsion/IGF-1), apoptosis was reduced by IGF-1 significantly more than in group 3 (P < 0.05). Apoptosis was significantly less in spermatids in group 5 than in group 3 (P < 0.05). CONCLUSIONS: IGF-1 seems to lower the levels of germ cell apoptosis, which may be important for protecting the testes from torsion/detorsion injury. Further clinical studies are needed to evaluate this protective effect in testicular torsion/detorsion.     

微波辐射对大鼠睾丸闭锁蛋白和连接黏附分子-1表达的影响

目的:探讨微波辐射后大鼠血睾屏障紧密连接闭锁蛋白(occludin)及连接黏附分子-1(JAM-1)表达的改变及意义。方法:80只雄性Wistar大鼠经平均功率密度为0、10、30、100mW/cm2微波辐射5min,于辐射后6h,1、3、7、14d,采用Western印迹和图像分析技术检测闭锁蛋白和JAM-1蛋白表达的动态变化。结果:10、30和100mW/cm2微波辐射后分别在3～7d、6h～7d和6h～14d闭锁蛋白表达明显下调(P<0.05),而JAM-1蛋白分别于辐射后3～7d、1～7d和1～14d表达亦明显下调(P<0.05)。结论:闭锁蛋白及JAM-1蛋白表达减少可能在微波辐射致血睾屏障损伤中发挥重要作用。