外周血生存素的表达与结肠癌相关性研究

目的探讨外周血生存素的表达与结肠癌的关系。方法以逆转录-聚合酶链反应-酶联免疫吸附测定(RT-PCR-ELISA)方法检测95例结肠癌患者外周血生存素mRNA的表达,比较其是否与肿瘤部位、浸润深度、分化程度、淋巴结转移和临床分期具有相关性。结果 35例(36.8%)结肠癌患者外周血生存素mRNA表达阳性。肿瘤高、中分化及低、未分化生存素mR-NA表达率分别为31.0%、45.0%。浸润深度达浆膜层者外周血生存素mRNA表达率(44.0%)高于侵及黏膜下层及肌层的表达率(20.0%),淋巴结有转移者外周血表达率为47.5%,高于无淋巴结转移的表达率(19.4%)。结论生存素mRNA在外周血的表达与肿瘤分化、浸润深度、淋巴结转移和临床分期均有明显相关性,但与肿瘤部位无明显相关。     

胃癌组织E-钙粘蛋白和β-连环素检测及临床价值

目的:探讨胃癌组织中E-钙粘蛋白(E-cad)和β-连环素(β-Cat)的表达及其临床价值。方法:免疫组化法检测85例胃癌组织和30例胃良性病变组织中E-cad和β-Cat表达。结果:胃良性病变组织中E-cad和β-Cat阳性表达率均为100%,而胃癌组织E-cad和β-Cat阳性表达率分别仅为41.2%和34.1%,两者对照均有极显著性差异(p<0.01)。随着胃癌浸润深度增加、有淋巴结转移以及分期晚者β-Cat阳性表达率愈低(p<0.05)。结论:E-cad和β-Cat在胃癌组织中表达下调。检测胃癌组织中β-Cat表达有助于在术前判断胃癌的浸润转移及TNM分期。     

巢式PCR检测胃癌患者外周血CK19 mRNA的临床意义

目的：对外周血CK19 mRNA基因表达的检测,探讨对胃癌患者微转移的诊断价值。方法：采用巢式RT-PCR方法检测63例胃癌患者,20例健康志愿者外周血CK19 mRNA的表达情况。结果：胃癌患者外周血中CK19 mRNA的阳性检出率为36.5%,并与肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度有关（P〈0.05）,而与年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤大小、有无淋巴结转移无关（P〉0.05）,而健康志愿者外周血中CK19 mR-NA无1例阳性表达。结论：CK19 mRNA可以作为判断胃癌患者外周血微转移的肿瘤标志物。     

细胞角蛋白18基因诊断胃癌淋巴结微转移

目的:建立RT-PCR检测细胞角蛋白-18（CK18）mRNA表达的方法,判断胃癌淋巴结内微转移状况,探讨18 mRNA表达在胃癌患者淋巴结微转移中的临床意义。方法:以细胞角蛋白18 mRNA为标志基因,用RT-PCR法检测35例胃癌的298枚淋巴结及良性胃病变的淋巴结20枚。结果:对照的良性胃病变淋巴结无CK18 mRNA表达,胃癌组的298枚淋巴结病理检查阳性99枚（33.2%）,而RT-PCR法检测细胞角蛋白阳性133枚（44.6%）,差异有显著性（P<0.05）。病理检查为阴性的199枚中,经CK18 mRNA RT-PCR法检测有34枚阳性（17.1%）。 结论:用RT-PCR法检测胃癌淋巴结CK18 mRNA是诊断胃癌淋巴结微转移敏感而特异的方法,对判断预后、指导术后治疗有重要意义。     

外周血血管生成素-2表达与胃癌淋巴结微转移及预后的关系

目的:检测淋巴结阴性胃癌患者术前外周血血管生成素-2(Ang-2)mRNA表达量的变化,探讨其与淋巴结微转移及预后的关系。方法:应用实时荧光定量RT-PCR检测20例淋巴结阳性胃癌患者和61例淋巴结阴性胃癌患者术前及30位健康者外周血Ang-2mRNA的表达量,同时检测淋巴结组织CK20表达以评价淋巴结微转移,随访术后,分析术前外周血Ang-2mRNA表达量与淋巴结微转移及预后的关系。结果:淋巴结阳性胃癌患者外周血Ang-2mRNA表达量显著高于淋巴结阴性胃癌患者[(9.02±3.74)比(4.30±2.59),P<0.01],两者均显著高于正常对照组(P<0.01);淋巴结微转移阳性患者外周血Ang-2mRNA表达量显著高于淋巴结微转移阴性患者[(5.41±2.25)比(3.95±1.83),P<0.05]。术前外周血Ang-2mRNA表达量与淋巴结阴性胃癌的肿瘤大小、分化程度、浸润深度呈正相关(P<0.05或<0.01),与肿瘤组织类型无关,与术后生存期、术后复发转移及术后生存率呈负相关(P<0.05)。多因素回归分析显示术前外周血Ang-2mRNA表达量是影响淋巴结阴性胃癌患者预后的重要因素。结论:术前外周血Ang-2mRNA表达量可能成为评价淋巴结阴性胃癌患者淋巴结微转移和预后的有价值的临床指标,有助于指导治疗。     

E-钙粘附素和基质金属蛋白酶的表达与胃癌侵袭、转移的关系

目的探讨E-钙粘附素(E-cadherin)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloporoteirnase-2,MMP-2)在胃癌组织中的表达与胃癌浸润转移的相关性.方法收集住院胃癌手术病例83例,同时记录相关临床资料.20例胃良性病变手术病例.采用S-P免疫组化染色,检测组织的E-cadherin和MMP-2的表达情况,同时行HE染色对胃癌进行组织学分型.结果正常胃黏膜E-cadherin呈强阳性表达,胃癌组织中E-cadherin表达率明显减低,阳性表达率为16.9%(14/83),E-caherin表达减低与胃癌细胞分化差、浸润深度、弥漫性生长、淋巴结转移密切相关(P＜0.05);而与TNM分期及肿瘤大小未见明显相关性.MMP-2在正常胃黏膜中呈阴性表达,在胃癌组织中表达呈阳性,阳性率为78.3%(65/83),MMP-2表达强度与胃癌分化程度、淋巴结车瞄、浸润深度、弥漫性生长、TNM分期显著相关(P＜0.05);而与肿瘤大小未见明显相关性.结论E-cadherin的表达下调和MMP-2表达上调将促进胃癌浸润和转移,二者在癌组织中表达的高低是胃癌细胞重要的恶性生物学特征,有助于对胃癌转移及病人预后的判断.     

胃癌患者CD44v6 mRNA的表达

目的探讨CD44v6在胃癌发展、转移中的作用.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测64例胃癌患者胃癌及其正常胃黏膜CD44v6 mRNA表达.结果胃癌患者胃的正常黏膜有少量CD44v6 mRNA表达;胃癌组织CD44v6 mRNA的表达阳性率高于其正常黏膜.胃癌组织CD44v6mRNA表达阳性率在淋巴结转移患者(75.56%)高于无淋巴结转移者(36.84%),有远处转移者(92.86%)高于无远处转移组(41.87%),患者性别、肿瘤长径＜5cm与≥5cm、肿瘤发生部位、大体类型、组织类型、组织学分化程度、浸润深度和TNM分期与CD44v6表达阳性率无关.结论胃的正常黏膜有少量CD44v6表达,胃癌组织CD44v6表达明显增多,CD44v6表达较多提示淋巴结转移和远处转移的可能.     

外周血表皮生长因子受体mRNA表达对胃癌微转移和预后的价值

目的：分析检测胃癌和胃良性病患者外周血中表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor EGFR）的表达情况，探讨其对胃癌微转移和预后的价值。方法：应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测57例胃癌，及40例胃良性病变患者外周血EGFR mRNA。结果：40例胃良性病变患者对照组外周血EGFR均为阴性。胃癌患者组EGFR mRNA表达阳性为42.1％（24／57）。EGFR mRNA表达阳性在胃癌TNM分期中为I期27.3％（3／11），Ⅱ期15.8％（3／19），Ⅲ期61.9％（13／21）及Ⅳ期83.3％（5／6），（P〈0.05）。EGFR mRNA表达阳性在低未分化及中高分化癌间有显著差异（P〈0.05）。结论：胃癌患者中外周血中EGFRmRNA可以作为检测胃癌患者外周血微转移的分子标志，可作为胃癌微转移及预后的参考指标。     

CEA mRNA检测诊断胃周围淋巴结癌细胞微转移

目的：评估癌胚抗原（CEA）mRNA在诊断胃癌细胞淋巴结微转移方面的应用价值。方法：以胃周围淋巴结为检测标本,用反转录套式聚合酶链反应技术（RT-NP-PCR）检测CEA mRNA,用常规病理学方法检查癌细胞。结果：胃癌组胃周围淋巴结38.8%CEA mRNA阳性,病理学检测17.9%癌细胞阳性;良性胃病组胃周围淋巴结均阴性。RT-NP-PCR检测CEA mRNA与病理学检查癌细胞的结果比较,有非常显著性差异（P〈0.01）。结论：CEA mRNA指标诊断胃癌细胞淋巴结微转移的敏感性较高,具有较高的应用价值,可以在病理学诊断胃癌淋巴结转移时开展应用。     

FQ-RT-PCR检测胃癌腹腔冲洗液沉渣CK20 mRNA的临床意义

目的评估实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（FQ-RT-PCR）方法检测胃癌腹腔冲洗液沉渣中CK20mRNA的表达,探讨其对预测胃癌腹膜微转移的临床意义。方法回顾性分析42例胃癌和12例胃良性病变患者腹腔冲洗液沉渣及临床病理资料。结果胃癌CK20 mRNA的阳性检出率为61.9%,明显高于腹腔冲洗液细胞学（PLC）的19.0%（〈0.05）,且PLC检查阳性的8例患者CK20 mRNA检测结果均为阳性;且CK20mRNA的检测阳性率与浆膜浸润与否、胃癌浸润深度、组织学分化程度、淋巴结转移情况及病期进展有关（〈0.05）。胃良性病变两项检查结果均为阴性。结论 FQ-RT-PCR检测胃癌腹腔冲洗液沉渣中CK20 mRNA,可提高检测腹腔游离癌细胞的灵敏性,适用于预测胃癌患者腹膜微转移,有助于指导术后治疗及判断预后。     

E-钙黏素和环氧合酶-2在胃癌中表达的相关性及其与淋巴结转移的关系

目的 检测E-钙黏素(E-cadherin)和环氧合酶(COX-2)在胃癌组织中表达的相关性及探讨其与淋巴结转移的关系.方法 应用免疫组化技术(S-P法)检测60例胃癌组织和5例胃正常组织中E-cadherin和COX-2的表达及其在淋巴结中的表达情况.结果 正常胃黏膜E-cadherin呈阳性表达,而胃癌组织中E-cadherin的阴性表达率为83.3%(50/60);E-cadherin表达阴性与胃癌细胞分化程度、浸润深度以及淋巴结转移密切相关,但与性别、生长方式和肿瘤直径无明显相关.正常胃黏膜未见COX-2表达,癌组织中阳性表达明显升高,阳性表达率为61.7%(37/60);COX-2表达阳性与胃癌细胞分化程度、肿瘤生长方式、浸润深度以及淋巴结转移密切相关,但与肿瘤部位、直径和患者的性别无明显关系.结论 E-cadherin表达能抑制肿瘤细胞的侵袭和转移,COX-2可能参与了胃癌的侵袭和转移;E-cadherin表达下调和COX-2的高表达可能共同参与了胃癌的侵袭和转移.     

胃癌组织中KiSS-1和基质金属蛋白酶-9蛋白及mRNA的表达

目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1及基质金属蛋白酶9（MMP-9）与胃癌侵袭、转移的关系。方法采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测40例胃癌及40例正常胃黏膜组织中KiSS-1及MMP-9蛋白和mRNA的表达情况,分析其与胃癌患者各临床病理特征的关系及二者的相关性。结果胃癌组织中KiSS-1蛋白的阳性表达率（52.5%）低于正常胃黏膜组织（95.0%）（P〈0.05）,并且其低表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。胃癌组织中MMP-9蛋白的阳性表达率（77.5%）高于正常胃黏膜组织（52.5%）（P〈0.05）,并且其高表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移相关（P〈0.05）。胃癌组织中KiSS-1 mRNA的阳性表达率及表达水平（57.5%,0.869±0.063）均低于正常胃黏膜组织（92.5%,1.103±0.152）（P〈0.05）,并且其低表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。胃癌组织中MMP-9 mRNA的阳性表达率及表达水平（75.0%,1.083±0.137）均高于正常胃黏膜组织（47.5%,0.902±0.035）（P〈0.05）,并且其高表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。KISS-1与MMP-9蛋白和mRNA的表达均呈负相关（P〈0.05）。结论 KiSS-1的低表达和MMP-9的过表达可能与胃癌的浸润、转移有关。二者有望成为判定胃癌侵袭和转移能力的指标。     

EphA4在胃癌胃镜标本和术后标本中的表达与胃癌生物学行为的关系

目的研究EphA4在胃癌胃镜标本和术后标本中的表达,分析其与胃癌生物学行为的关系,探讨其临床价值。方法应用免疫组织化学方法对50例胃癌患者的胃镜标本、术后标本和癌旁组织及淋巴结,正常胃粘膜20例,胃良性病变18例,进行EphA4的检测。结果胃癌组织中EphA4表达水平明显高于癌旁和正常胃组织。EphA4表达与胃癌临床分期、浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。结论 EphA4在胃癌组织中的表达状态与胃癌的浸润深度和转移关系密切,为胃癌的临床诊断提供了有效的参考。     

胃癌组织中血管生成素-2基因的表达和微血管密度研究

目的探讨血管生成素-2（Ang-2）基因在胃癌组织中的表达、微血管密度（MVD）与胃癌生物学行为之间的关系。方法采用免疫组化SP方法,检测64例胃癌组织、22例癌旁正常组织、20例胃良性疾病组织中血管生成素（Ang-2）,以CD34作为血管内皮细胞标记物,对CD34阳性血管进行MVD计数。结果 Ang-2在胃癌组织中的阳性表达率为68.75%,在癌旁正常组织和胃良性病变组织中的阳性表达率分别为22.27%、40.00%,差异有统计学意义（P〈0.01）;Ang-2表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移、远处转移、临床分期呈正相关（P〈0.05）,Ang-2阴性表达者5年总生存期明显高于Ang-2阳性表达组（分别为50.00%及18.75%,P〈0.05）;胃癌组织、癌旁组织和胃良性病变组织中MVD分别为33.69±11.60、10.65±3.00和17.20±1.98,3者比较差异有统计学意义（P〈0.01）;MVD与浸润深度、淋巴结转移、远处转移及临床分期呈正相关（P〈0.01）,而与肿瘤大小、分化程度、有无脉管侵犯无相关（P〉0.05）;MVD≤33的胃癌患者总生存期较MVD〉33患者明显延长（分别为45.45%及16.67%）,差异有统计学意义﹙P〈0.05）。经相关分析,Ang-2阳性表达率与MVD呈正相关（r=0.618,P〈0.01）。结论 Ang-2的表达和MVD与胃癌的生长、浸润、转移及预后有一定的相关性。     

细胞角蛋白20和生存素基因在老年结肠癌患者外周血中的表达及其意义

目的 检测老年结肠癌患者外周血中细胞角蛋白20(CK20)和生存素(survivin)基因的表达,探讨二者与肿瘤诊断、转移的关系.方法 选取老年结肠癌患者72例、癌前病变者54例及正常对照者42例,用实时定量反转录聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)检测CK20和生存素基因的转录,并分析二者与临床病理因素之间的关系.结果 正常对照组外周血中未检测到CK20和生存素mRNA的转录;癌前病变者外周血生存素mRNA的转录率为7.4%(4/42),平均拷贝数为(2.22±0.86);结肠癌患者外周血CK20和生存素mRNA转录率分别为47.2%(34/72)和73.6%(53/72),二者的转录量与Dukes分期及淋巴结转移有关.生存素mRNA高转录者5年生存率(58.6%)显著低于低转录者(90.7%),差异有统计学意义(P＜0.01).回归分析发现,生存素的表达、淋巴结转移及Dukes分期是影响患者预后的独立因素.结论 CK20 mRNA和生存素mRNA在老年结肠癌患者中过表达,可作为诊断微转移和评估预后的客观指标.     

生存素在胃癌组织的表达及临床意义

目的　探讨生存素在胃癌组织中的表达及其临床意义。　方法　应用免疫组织化学 SP法检测 1 0 5例胃癌组织中生存素的表达 ,分析生存素表达与临床病理学特征及预后的关系。　结果　胃癌组织中生存素表达的阳性率为4 7.6 %。生存素的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期呈正相关性 (r分别为 :0 .2 83,0 .2 30和 0 .2 34,P<0 .0 5 ) ,与患者年龄、性别、肿瘤部位、Borrm ann分型及组织分化未见相关。生存素表达阳性者的 5年生存率 (30 .0 % )明显低于表达阴性者 (5 6 .4 % ,P=0 .0 0 7)。Cox回归模型显示 ,生存素表达与胃癌预后密切相关 (P<0 .0 5 ) ,是影响胃癌预后的独立因素。　结论　生存素在胃癌组织中高表达 ,且与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及临床分期密切相关 ,是影响胃癌预后的重要分子指标     

胃癌腹腔冲洗液肝素酶和存活素的相关研究

目的探讨检测胃癌腹膜转移的方法。方法收集50例胃癌患者及8例胃良性病变患者的腹腔冲洗液。采用流式细胞术（FCM）检测胃癌患者术中腹腔冲洗液肝素酶（HPA）和存活素（Survivin）的表达情况,并采用薄层液基细胞制片术进行腹腔冲洗液细胞学（PLC）检查。结果 50例胃癌患者腹腔冲洗液中HPA阳性表达为52.0%（26/50）;Survivin阳性表达率58.0%（29/50）,HPA和Survivin联合检测阳性率为68.0%（34/50）,两者阳性率皆高于PLC 22.0%的阳性率（P〈0.01）;HPA的阳性率与浸润深度、组织分化程度以及TNM分期呈正相关;Survivin的阳性率与肿瘤浸润深度、组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期呈正相关。8例良性病变患者腹腔冲洗液中HPA和Survivin无阳性表达。结论 （1）腹腔冲洗液HPA和Survivin的检测可作为判断肿瘤恶性程度和预后的一项指标。（2）FCM方法检测腹腔冲洗液HPA和Survivin可能成为临床预测胃癌腹膜转移的一种方法。     

FHIT、β-Catenin在胃癌中表达及其相关性研究

目的 探讨胃癌中FHIT和β-Catenin的表达相关性及其与胃癌发展之间的关系.方法 应用免疫组化法检测50例胃癌组织、10例胃良性病变组织标本中FHIT和β-Catenin表达.结果 胃癌组织FHIT和β-Catenin的阳性表达率分别为22.00%和78.00%.FHIT在胃癌组织中表达缺失,与浸润深度和淋巴结转移关系密切(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关(P>0.05).β-Catenin在胃癌组织中高表达与浸润深度、肿瘤大小及分化程度和淋巴结转移关系密切(P<0.05),与患者的性别、年龄无关(P>0.05).癌组织中FHIT和β-Catenin的表达呈负相关(r=-0.358,P=0.011).结论 FHIT和β-Catenin在胃癌中表达成显著负相关,提示两者在胃癌的发生发展中可能存在重要的协同作用.     

CK20mRNA和hTERTmRNA表达与大肠癌患者外周血微转移的临床研究

目的：检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20（CK20）mRNA和人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标．方法：采用RT-PCR技术检测大肠癌32例、肠道良性病变11例和健康体检者20例的外周血中CK20mRNA和hTERTmRNA的定性和半定量表达．以人胃腺癌细胞株SGC-7901作阳性对照．实验数据采用SPSS13．0forWindows软件包统计分析．结果：①CK20mRNA和hTERTmRNA在大肠癌患者外周血中的阳性表达率分别为50．0％和56．2％,相对系数分别为0．89±0．17和0．88±0．17;在肠道良性病变患者外周血中阳性表达率分别为9．1％和0％,相对系数分别为0．11和0;在健康体检者外周血中阳性表达率及相对系数均为0．大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,CK20mRNA和hTERTmRNA的表达均有统计学差异（P〈0．05）．②CK20mRNA和hTERTmRNA阳性表达率和相对系数与临床分期、远处转移均有关（P〈0．05）;其阳性表达率与浸润深度、淋巴结转移无关,但相对系数与之均有关（P〈0．05）．阳性表达者生存率低于阴性者（P〈0．05）．结论：大肠癌患者外周血中存在CK20mRNA和hTERTmRNA的表达,与临床分期及患者生存密切相关,提示CK20mRNA和hTERTmRNA的表达能预测大肠癌患者外周血微转移,可判断预后．     

胃癌组织中心体相关激酶Nek2的表达及其意义

目的：研究中心体相关激酶Nek2（Nek2）在胃癌组织中的表达,为胃癌的诊断和治疗提供新的靶点.方法：收集外科手术切除的胃癌组织标本及胃切缘组织标本50例,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫组织化学SABC法检测胃癌组织及远癌切端胃组织Nek2的表达情况,分析Nek2表达与临床病理参数之间的关系.结果：胃癌组织Nek2mRNA表达水平（2.29±1.67）显著高于远癌切端胃组织（1.26±0.87）,差异具有统计学意义（P〈0.05）.胃癌组织Nek2mRNA和蛋白表达水平在不同浸润深度、TNM分期、肿瘤分化程度、有无淋巴结转移组中的差异均具有显著性,其中T3＋T4组、Ⅲ＋Ⅳ期组、分化较低组和有淋巴结转移组分别显著高于T1＋T2组、Ⅰ＋Ⅱ期组、分化较好组和无淋巴结转移组,差异具有统计学意义（P〈0.05）.结论：胃癌组织中Nek2分子表达上调,且与肿瘤浸润深度、分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关,提示其参与胃癌的发生发展过程,可作为新的胃癌诊断及判断预后的指标.