Pro-Pro-hGHRH(1-44)OH的体外活性分析及其对四氧嘧啶糖尿病大鼠影响的研究

目的:进一步验证Pro-Pro-hGHRH(1-44)OH的生物活性,并观察其对糖尿病(DM)大鼠GHRH-GH-IGF-1轴的影响。方法:(1)取正常大鼠垂体6个,每个垂体分为3份后在体外孵育,将垂体随机分成4组,分别加入0.01、0.1、1.0 mg.L-1的Pro-Pro-hGHRH(1-44)OH和2.0 mg.L-1hGHRH,测定加药前、后GH含量改变。(2)将DM大鼠随机分为GHRH类似物组、GHRH组和DM对照组,分别给予Pro-Pro-hGHRH(1-44)OH 1 mg.L-1、hGHRH(1-44)OH 2 mg.L-1和0.9%生理盐水,另取正常大鼠作为正常对照,测定DM 3组和正常对照组血GH、IGF-1和胰岛素含量。结果:(1)Pro-Pro-hGHRH(1-44)OH体外活性结果示,0.1、1.0 mg.L-1的Pro-Pro-hGHRH(1-44)OH与hGHRH组3组之间比较,均P<0.05。(2)DM 3组和正常对照组血胰岛素含量结果示,正常对照组与DM 3组之间比较,均P<0.01。血IGF-1含量4组之间比较均P>0.05。血GH含量DM对照组与正常对照组之间比较,P<0.05。GHRH组与DM对照、正常对照组3组之间比较,均P<0.05。结论:Pro-Pro-hGHRH(1-44)OH是一种具有强大促GH分泌活性的GHRH类似物,这种活性存在剂量依赖性,当四氧嘧啶DM大鼠给予Pro-Pro-hGHRH(1-44)OH后,能显著增加DM大鼠垂体的敏感性。     

垂体生长激素腺瘤和胚胎垂体细胞的体外分泌效应

为观察垂体生长激素(GH)腺瘤细胞的体外分泌效应,选择8例垂体GH腺瘤和4例胚胎垂体,采用单层细胞培养技术,在给予生长激素释放激素(GHRH)、生长激素释放肽-2(GHRP-2)后,发现胚胎垂体细胞具有明显的分泌效应,肿瘤细胞(gsp癌基因阳性和阴性)的分泌则表现各异;而生长抑素(SMS)对二类细胞均具有明显的抑制效应.结果表明肿瘤细胞与正常垂体细胞的激素分泌途径存在差异,下丘脑对肿瘤细胞激素分泌不再有调控作用.     

人胰腺生长激素释放因子1-44在正常人所诱导的口服葡萄糖抑制生长激素分泌

口服葡萄糖能抑制正常人生长激素(GH)分泌,口服葡萄糖耐量试验是检验GH分泌的标准方法,其机理可能是直接抑制垂体的生长激素释放,抑制下丘脑生长激素释放激素(GHRH)的释放或通过下丘脑抑制性激素如生长抑制素(SS)的释放。最近从胰腺肿瘤中分离出一种人胰生长激素释放因子1-44(hp GRF 1-44),和下丘脑GHRH相似它具有特异的生长激素释放活性。本文旨在研究口服葡萄糖与hp GRH 1-44对GH分泌的相互作用。研究对象为6名正常志愿者,男4,女2,年龄23～29岁,平均26岁,体重均不超过理想体重的10％,女子在月经周期的头8天进行试验,均无内分泌疾     

两种生长激素类似肽对大鼠和人流产胎儿垂体激素分泌的影响研究

目的研究ProProhGHRH(144)OH和ProProhGHRH(144)GlyGlyCys两种神经肽对大鼠垂体或人流产胎儿垂体激素分泌的影响。方法将神经肽加入KrebsRinger缓冲液内,在不同保温时间内测定大鼠垂体GH或人流产胎儿垂体的hGH、hTSH、hFSH、hLH和hPRL在体外的释放值。GH浓度用人GH放射免疫多抗试剂盒测定,其他垂体激素浓度用顺磁性粒子化学发光免疫测试试剂盒确定。结果鼠垂体活性结果显示,ProProhGHRH(144)OH组(0.1～10μg/mL)和ProProhGHRH(140)GlyGlyCys组(0.01～1μg/mL)的GH刺激值,与刺激前的空白对照值相比有明显的提高,而且随肽浓度的增加,GH的释放量明显提高。在相同浓度下,ProProhGHRH(144)GlyGlyCys肽释放的GH值远大于ProProhGHRH(144)OH肽释放的GH值,即使ProProhGHRH(144)GlyGlyCys的剂量0.01μg/mL,仍有较好的活性。流产胎儿垂体的体外测试结果显示,在5μg/mL剂量下,3种多肽都产生很好的活性,ProProhGHRH(144)GlyGlyCys的平均活性是ProProhGHRH(144)OH的1.71倍,但3种活性多肽间差异没有显著性(P>0.05)。对hTSH、hFSH、hLH和hPRL垂体激素的测试结果显示,这两种神经肽对它们没有刺激作用。结论ProProhGHRH(144)GlyGlyCys和ProProhGHRH(144)OH有很好的GH释放活性和功能特异性。测试结果表明,GHRH的C端改构可调节垂体释放生长激素的活性。     

人生长素激素类似物可促进儿童增长

Sermorelin是一种含有29个氨基酸的人生长素释放激素(GHRH)类似物,是具有GHRH完全生物活性的最短的合成肽。静脉和皮下给予Sermorolin可特异性地刺激垂体前叶的生长激素分泌。静脉给予Sermorelin(1μg/kg体重)所表现的激素应答是一种诊断生长激素缺乏的快速和相对特异性的试验,与其它激发试验     

GHRH类似物与糖尿病

生长激素释放激素(GHRH)是一种重要的内分泌激素,由于其半衰期短,人们合成了多种GHRH类似物。本文对GHRH类似物的认识、合成、活性分析方法,与糖尿病的关系,以及GHRH类似物应用于糖尿病的研究现状进行了逐一论述。     

垂体生长激素腺瘤和胚胎垂体细胞的体外分泌效应

为观察垂体生长激素（GH）腺瘤细胞的体外分泌效应，选择8例垂体GH腺瘤和4例胚胎垂体，采用单层细胞培养技术，在给予生长激素释放激素（GHRH）、生长激素释放肽－2（GHRP－2）后，发现胚胎垂体细胞具有明显的分泌效应，肿瘤细胞（gsp癌基因阳性和阴性）的分泌则表现各异；而生长抑素（SMS）对二类细胞均具有明显的抑制效应。结果表明：肿瘤细胞与正常垂体细胞的激素分泌途径存在差异，下丘脑对肿瘤细胞激素分泌不再有调控作用。     

促性腺激素释放激素拟似剂对青春期大鼠生长轴与性腺轴相关基因表达的影响

目的 探讨促性腺激素释放激素拟似剂(GnRHa)对青春期大鼠生长轴与性腺轴的影响及其作用机制。方法 青春期大鼠应用GnRHa后，取其下丘脑、垂体、卵巢、下肢骺软骨等组织，应用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术检测组织中相应激素的基因表达水平。结果 GnRHa可使下丘脑中促性腺激素释放激素(GnRH)和垂体中GnRH受体(GnRHR)基因表达水平下降，下丘脑中生长激素释放抑制激素(SRIH)基因表达水平增高，生长激素释放激素(GHRH)基因表达无变化；垂体中生长激素(GH)、卵巢中雌激素受体(ER)、下肢骺软骨中胰岛素样生长因子—1(IGF-1)等基因表达水平均下降。结论GnRHa除抑制垂体GnRHR产生受体降调节外，还可抑制下丘脑GnRH的基因表达，使性腺激素水平降低，从而减缓第二性征的成熟程度和速度；同时GnRHa通过促进下丘脑SRIH的基因表达，抑制垂体GH和下肢骺软骨IGF-1的基因表达。这可能是Gn—RHa延缓特发性真性性早熟患儿骨骺闭合的机理之一。     

吡啶斯的明对生长激素分泌及其释放激素的激发与增效作用

观察了吡啶斯的明(PD)对正常儿童、垂体性和下丘脑性生长激素(GH)缺乏病儿GH分泌的激发作用和对生长激素释放激素(GHRH)的增效作用。结果表明,PD有良好的激发GH分泌作用,可作为GH缺乏的筛选试验。PD对正常儿童和下丘脑性GH缺乏病儿有明显的增加GHRH引起的GH释放效应。PD可能对某些GH缺乏病儿及其他原因所致的身材矮小病儿有较好的治疗效果。     

基因重组人生长激素在儿科的临床应用

生长激素(GH)是垂体前叶分泌的一种肽类激素,主要作用是促进人体生长.1958年首次应用来自人垂体的GH(phGH)治疗儿童垂体性侏儒症,取得初步疗效.1984年报道首例Creutzfeldt-Jacob病(CJD,痉挛性假性硬化),怀疑与phGH应用有关,1985年宣布停用.同期基因重组人GH(r-hGH)应用于临床.20世纪90年代初国产r-hGH问世,临床应用日益广泛. 1 基础研究 1.1 GH分泌与调节 GH生理情况下由腺垂体嗜酸细胞分泌,每个腺垂体含GH 5～10 mg,GH是由191个氨基酸组成的单链多肽,含二硫键,相对分子质量为2 200.GH基因簇由5个成员组成:GH1,CSHp1,CSH1,GH2,CSH2,定位于染色体17q22-24区带,其中仅GH1基因在垂体前叶GH分泌细胞中表达. GH分泌调节主要受下丘脑分泌的生长激素释放激素(GHRH)和生长激素释放抑制激素(SRIF)的调控,也受GH-IGF轴反馈调节,性腺、甲状腺功能也对GH分泌有影响.主要影响因素见表1.     

LHRH-PE40与Hela细胞表面LHRH受体结合的特异性及其细胞毒性

目的:研究重组免疫毒素LHRH-PE40与Hela细胞表面LHRH受体结合的特异性,并观察由此产生的细胞毒性作用.方法:ELISA方法检测LHRH-PE40与Hela细胞表面LHRH受体结合的高度特异性、饱合性及其与时间的关系;LHRH-PE40由LHRH受体介导对Hela细胞产生细胞毒作用进行光、电镜观察.结果:LHRH-PF40与Hela细胞表面受体的结合与正常鸡胚成纤维细胞的结合相比有显著意义(P＜0.01);LHRH-PE40与LHRH竞争LHRHR的OD值和TSH相比有显著意义(P＜0.01);光镜观察,LHRH-PE40对Hela细胞作用明显而对正常鸡胚成纤维细胞几乎没有作用;电镜观察,LHRH-PE40使Hela细胞表面出现凋亡征象.结论:与其他正常组织的细胞相比,Hela细胞膜表面LHRH受体分布呈过表达状;LHRH-PE40与细胞表面LHRH受体的结合具有高度特异性、饱和性;LHRH-PE40对细胞的作用由LHRHR介导,并且只对LHRHR阳性细胞产生毒性作用.     

Galanin协同生长释放素（GHRH）促进生长激素（GH）的释放

Galanin是新发现的促进GH释放的下丘脑激素。已知给正常人反复注射GHRH会导致GH释放的减低。我们研究了6例正常人对重复注射GHRH同时滴注galanin的GH反应。结果表明重复注射GHRH后GH释放明显减低,但在重复注射同时合用galanin则GH释放显著增强。galanin和GHRH联合应用克服了因重复注射GHRH所致的GH反应降低。其机理可能是gatanin抑制下丘脑SRIH的分泌之故。     

黄体生成激素释放激素促排卵治疗前后促性腺激素脉冲形态研究

观察黄体生成激素释放激素(LHRH)小剂量脉冲给药前、后下丘脑性闭经妇女黄体生成激素(LH)与卵泡刺激素(FSH)脉冲分泌形态的变化。给药前的LH与FSH均不呈脉冲式分泌,经过小剂量脉冲式注入人工合成LHRH后,LH均值明显上升,由3.7±2.6u/L至1206±3.1u/L(<0.01),并呈脉冲式释放,FSH均值增加不明显。静脉给药4例中2例有排卵,2例卵泡发育至10～15mm直径,皮下给药4例中3例卵泡发育至10～14mm直径,1例无反应。卵泡发育受挫的原因可能与剂量,脉冲投药频率有关。     

gsp癌基因在人垂体生长激素腺瘤的表达及与GHRH对生长激素分泌效应比较

采用聚合酶链反应和直接序列分析法评价了30例肢端肥大症肿瘤组织的gsp癌基因,发现9例30％为gsp癌基因阳性。结果与生长激素释放激素对生长激素分泌效应比较,发现gsp癌基因阳性和阴性肿瘤体外生化特征各自差异较大,推测可能与细胞间多信号传导系统介入有关。     

促性腺激素释放激素系统与妇科肿瘤的研究进展

促性腺激素释放激素(GnRH)是下丘脑分泌的十肽激素,是神经内分泌调节系统相互联系的重要信号分子,对生殖调控具有重要意义。GnRH及其受体在多种人类恶性肿瘤组织中有表达,GnRH通过其受体介导调控肿瘤细胞增殖。GnRH及其人工合成的GnRH类似物有明显抗肿瘤细胞增生的作用,它拮抗生长因子促肿瘤细胞有丝分裂、抑制肿瘤细胞增殖的分子机制,可能与生长因子介导的有丝分裂信号传导通路有关联。GnRH通过抑制生长因子受体及其mRNA表达,抑制生长因子受体诱导的酪氨酸激酶活化,激活磷酸酪氨酸蛋白磷酸酶,最终抑制转录因子活性,抑制肿瘤细胞有丝分裂。GnRH对于肿瘤细胞与垂体细胞的作用不同,与GnRHR信号传导机制不同有关,GnRH抗肿瘤细胞增生的作用是GnRHR通过与Gαi偶联进行的。     

脉冲式LHRH给药在临床中的应用——治疗Kallman综合征一例报告

对一例Kallman综合征患者,用自动泵脉冲式给予LHRH治疗10个月。观察治疗中血清卵泡刺激毒(FSH),黄体生成素(LH),睾酮(T)变化。治疗三天后,FSH、LH即升高,但以后变化不明显。T在治疗第二个月后达正常人低限水平,治疗5个月后达正常人水平,但波动较大,且8个月后有下降趋势。本文对脉冲式给药的方法及效果进行了讨论。     

异位内膜GnRH受体表达与GnRHa疗效的研究

目的 探讨子宫内膜异位症（EMS）患者在位子宫内膜和异位子宫内膜组织中促性腺激素释放激素受体（GnRH-R）的表达情况及其临床意义。方法 采用免疫组化法检测40例正常子宫内膜组织及126例EMS患者在位子宫内膜和卵巢异位子宫内膜组织中GnRH-R的表达，同时对每位EMS患者术后应用3个月促性腺激素释放激素类似物（GnRHa），观察其卵巢内膜异位囊肿的复发情况。结果 在位内膜100．00％表达GnRH-R，异位内膜组织有62．38％的GnRH-R表达，且EMS患者在位内膜组织GnRH-R的表达率明显高于异位内膜组织（P〈0．01）；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期EMS患者异位内膜组织GnRH-R的表达率分别为84．6％、61．8％、37．5％，差异有显著性意义（X^2=13．43，P〈0．05）；GnRH-R阳性者的卵巢内膜异位囊肿的复发率（3．95％）低于GnRH-R阴性者（18．0％）（X^2=6．84，P〈0．05）。结论 异位内膜GnRH-R表达的缺失有可能与子宫内膜异位症的发生、发展有关；通过测定异位内膜GnRH受体的表达，有可能为临床EMS患者的治疗及疗效预测提供一定的参考依据。     

正常月经周期妇女促性腺激素脉冲形态的研究

观察正常月经周期妇女卵泡早期、卵泡晚期与黄体早期各5例的血黄体生成素(LH)与卵泡刺激素(FSH)的脉冲分泌型态。正常妇女LH脉冲分泌释放的频率、振幅与均值从卵泡早期至卵泡晚期呈显著增加,到黄体早期又明显下降。FSH的脉冲分泌释放频率、振幅与均值无论在卵泡早期、卵泡晚期与黄体早期均不明显显示。唯从卵泡早期到卵泡晚期LH/FSH的比值增加极显著(p<0.01),黄体期明显下降(p<0.05)。     

简化GnRH激发试验对中枢性性早熟的诊断价值

目的探讨单时相促性腺激素释放（GnRH）激发试验对中枢性性早熟（CPP）的诊断价值.方法应用传统的GnRH激发试验5个时相促性腺激素的值（FSH、LH）、B超检查、骨龄评估等方法对52例CPP女童进行诊断.结果GnRH激发试验5个时相：30 min的LH浓度与峰值相比差异无统计学意义（P＞0.05）,且达到文献推荐的诊断值.结论简化的30 min一次的GnRH激发试验具有可信性.