人粒细胞杀菌蛋白的制备与体内外鉴定

目的：制备与鉴定人类天然杀菌及通透性增强蛋白,寻找抗ＬＰＳ新药。     

唾液富组氨酸蛋白一种具有前景的抗真菌物质

唾液腺分泌的抗菌肽类物质--唾液富组氨酸蛋白为一复含组氨酸的阳离子小蛋白家族,具有强大的杀伤白色念珠菌、光滑念珠菌、克鲁念珠菌和新型隐球菌等致病真菌与其耐药株的活性,对一些革兰阳性、阴性细菌与厌氧菌亦有抑制活性,作用机制独特,对机体几无毒性,作为抗真菌药物,是一理想的研究对象.对唾液富组氨酸蛋白的结构、杀菌功能、杀菌机制进行了综述并评述了作为抗真菌药物的研发前景.     

脂多糖结合蛋白及其拮抗剂的研究进展

脂多糖（LPS）结合蛋白（LBP）是存在于正常人和动物血清中的一种糖蛋白,分子量为60kDa,其蛋白质部分为456个氨基酸残基组成的多肽链,由肝细胞合成。LBP与LPS中的脂质A具有高度亲和性,可作为LPS载体,催化LPS与CD14结合;LBP还可作为调理素,促进单核细胞等吞噬调理后的LPS和革兰阴性菌。杀菌/通透性增加蛋白（BPI）是LBP的生物拮抗剂,存在于人中性和嗜酸性粒细胞的细胞颗粒中,是一个55kDa的糖蛋白,其分子结构和氨基酸序列与LBP相似（也是由456个氨基酸残基组成）,能够竞争性地与LPS结合,具有中和LPS和抗菌作用。     

τ蛋白、β淀粉样蛋白、视锥蛋白样蛋白-1与阿尔茨海默病病人认知功能障碍的相关性研究

目的 探讨τ蛋白、β淀粉样蛋白（β-AP）、视锥蛋白样蛋白-1(VILIP-1)与阿尔茨海默病（AD）病人认知功能障碍的相关性。方法 选取2020年1—7月在河北中石油中心医院的老年AD病人100例（AD组）作为研究对象,其中有47例痴呆,53例轻度认知功能损害（MCI）病人;同时选取该院体检健康者50例作为对照组,检测血清τ蛋白、β-AP、VILIP-1水平并比较,Pearson相关性分析探索τ蛋白、β-AP、VILIP-1与简明精神状态量表（MMSE）评分关系。结果 AD组血清τ蛋白、β-AP、VILIP-1分别为（24.40±5.55）pg/L、（210.22±44.43）ng/L和（8.11±1.82）ng/L,高于对照组（19.01±5.03）pg/L、（130.32±32.15）ng/L和（3.02±0.95）ng/L(P<0.05);AD病人中有47例为AD痴呆;AD痴呆病人MMSE评分低于MCI病人（P<0.05）;AD痴呆病人血清τ蛋白、β-AP、VILIP-1分别为（27.82±3.82）pg/L、（240.38±37.32）ng/L和（10.01±1....     

杀菌性／通透性增加蛋白的研究概况

中性粒细胞是机体抵抗微生物侵袭的中心环节,含有众多的抗微生物物质,其中对杀菌性/通透性增加蛋白(Bactericidal/permeability increas-ing Protein,BPI)的研究,近年来倍受关注,该蛋白不仅对革兰阴性菌有杀灭作用,而且具有中和内毒素的作用,被称为未来的“超级抗生素”,在革兰阴性菌脓毒症的治疗中具有特殊的地位和广阔的应用前景,BPI的性质及作用如表1所示.现就其研究概况作一综述.     

MMP-2蛋白及E-cad蛋白在胰腺癌组织中的表达及临床意义探索和研究

目的探讨MMP-2蛋白及E-cad蛋白在胰腺癌组织中的表达及临床意义。方法收集2011年12月至2013年1月本院确诊的胰腺癌组织标本30例设为观察组,收集同期正常胰腺组织10例设为对照组,采取免疫组织化学法对两组胰腺组织中MMP-2、E-cad的表达情况进行观察。结果观察组MMP-2蛋白阳性率为93.33%,E-cad蛋白阳性率为96.67%;对照组MMP-2蛋白阳性率为60%,E-cad蛋白阳性率为20%,观察组的MMP-2蛋白阳性率及E-cad蛋白阳性率均显著高于对照组,P<0.05,有统计学意义;MMP-2蛋白、E-cad蛋白阳性表达和胰腺癌的分化程度有一定关联;MMP-2蛋白、E-cad蛋白阳性表达和胰腺癌是否存在淋巴结转移有一定关联。结论 MMP-2蛋白在胰腺癌组织中呈高表达,E-cad蛋白在胰腺癌组织中呈低表达,且二者表达情况和胰腺癌组织的分化程度以及是否存在淋巴结转移均有密切关联。     

膀胱移行细胞癌中Survivin蛋白和PTEN蛋白的表达及意义

目的探讨Survivin蛋白与PTEN蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达和意义。方法用免疫组织化学S-P法检测62例膀胱移行细胞癌组织及10例正常膀胱黏膜组织中Survivin蛋白和PTEN蛋白的表达。结果10例正常膀胱黏膜组织中PTEN蛋白表达均为阳性,Survivin蛋白表达均为阴性;PTEN在膀胱移行细胞癌中阳性表达率为46．8％（29／62）,肿瘤不同分级中随恶性程度的增高,表达减少,Ⅰ级与Ⅲ级比较,差异有统计学意义（P〈0．05）,不同临床分期中随分期的增高,表达减少,Tis—T1与T2～T4比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;Survivin蛋白在膀胱移行细胞癌中阳性表达率为56．5％（35／62）,肿瘤不同分级中随恶性程度的增高,表达增高（P〈0．05）,不同临床分期中随分期的增高,表达增高,差异有统计学意义（P〈0．05）;PTEN蛋白和Survivin蛋白表达负相关（P〈0．05）。结论Survivin蛋白和PTEN蛋白异常表达可作为膀胱移行细胞癌肿瘤标志物。     

银杏抗菌肽蛋白基因原核表达及其重组蛋白的体内外抑菌作用研究

目的:获取银杏抗菌肽(GBA)重组蛋白,并考察其体内外抗菌活性,为解决病原菌耐药问题、规模化生产植物源性新型抗菌剂提供实验基础。方法:根据Genebank中公布的GBA基因序列(FJ865399),利用基因技术构建重组质粒pET32a(+)-GBA,再以大肠杆菌原核表达获取重组蛋白,并采用凝胶电泳和Western blotting法对所得蛋白进行纯化及鉴定。采用纸片扩散法考察所获重组蛋白对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、鼠伤寒沙门氏菌的药物敏感度;采用肉汤稀释法测定重组蛋白最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);考察重组蛋白对金黄色葡萄球菌感染模型小鼠的保护作用。结果:成功表达并纯化获得目标重组蛋白(大小约32 kDa)。该重组蛋白对金黄色葡萄球菌中度敏感,对其他3种细菌低度敏感;对金黄色葡萄球菌的MIC为(50.00±5.00)mg/mL、MBC为(138.33±12.58)mg/mL,MIC显著高于其他3种细菌(P<0.05)。高剂量重组蛋白(8.0 g/kg)能显著降低金黄色葡萄球菌导致的小鼠死亡率(P<0.05),对小鼠的保护效果与阳性药物青霉素接近。结论:所获重组蛋白对金黄色葡萄球菌的抑制效果明显,对大肠杆菌和绿脓杆菌有一定的抑制作用,对鼠伤寒沙门氏菌抑制作用较弱;该蛋白高剂量给药对金黄色葡萄球菌感染小鼠具有明显的保护作用。     

蛇毒蛋白与血小板血栓形成

多种蛇毒蛋白具有与血小板表面整合素、膜糖蛋白Ⅰb（GPⅠb）或血管性血友病因子（VWF）相互作用而影响血栓形成的功能。影响血小板血栓形成的蛇毒蛋白目前分为3类：去整合素、VWF调节蛇毒蛋白及GPⅠb结合蛋白。其中,去整合素具有高效抑制血小板聚集的功能;VWF调节蛇毒蛋白具有体外介导VWF依赖型血小板聚集的功能;而GPⅠb结合蛇毒蛋白又分为2组：GPⅠb激动剂和GPⅠb拮抗剂,分别起诱导血小板聚集与抑制VWF介导的血小板聚集的功能。本文将对上述影响血小板血栓形成的蛇毒蛋白的结构、功能及其在临床上的研究与应用进行综述。     

药物CIG调节tau蛋白磷酸化改善转基因小鼠的tau蛋白病变

目的微管相关蛋白tau在阿尔茨海默病(AD)的发病机制中发挥重要的作用,并且得到了越来越多的关注。过表达P301L突变tau蛋白的rTg4510转基因小鼠具有明显的tau病理表现,广泛应用于AD的基础研究及药理研究中。山茱萸环烯醚萜苷(CIG)为中药山茱萸的有效部位,在我室之前的研究中显示CIG在体外模型中可以降低tau蛋白的磷酸化。方法本研究应用rTg4510小鼠为AD病理模型,给予CIG药物处理3个月后进行行为学检测,之后分别灌注固定取材及新鲜取材。应用Western印迹等方法检测磷酸化tau蛋白、磷酸化调节酶、微管及突触相关蛋白的表达水平;应用免疫荧光等方法观察病理性tau蛋白、微管的形态、突触相关蛋白表达等;应用Serine/Threonine Phosphatase Assay检测磷酸酯酶PP2A的活性。结果 CIG可以增加rTg4510小鼠在Morris水迷宫中的空间和工作记忆,改善在物体识别实验中的物体识别记忆,降低小鼠的过度活跃状态。同时CIG可以改善rTg4510小鼠的脑萎缩,降低海马区域的神经元的丢失;同时CIG可以增加rTg4510小鼠骨架相关蛋白的表达,改善细胞骨架形态;增加小鼠突触NMDA受体及突触相关蛋白的表达,增加突触的数量。其主要的机制为CIG降低了rTg4510小鼠脑内多个位点的磷酸化,降低了病理性tau蛋白的沉积;同时降低了磷酸化的可溶性tau蛋白,降低不可溶性tau蛋白。CIG降低磷酸化的机制,发现CIG可以增加主要的磷酸酯酶PP2A的甲基化修饰,并且可以调节PP2A甲基化调节酶LCMT-1/PME-1的比例。同时,CIG可以增加内源PP2A酶的激活因子PPP2R4的表达,并增加PP2A酶的活性。结论 CIG可以改善rTg4510转基因小鼠的认知能力,改善脑萎缩和神经元的丢失,保护细胞骨架形态和突触。其主要机制为CIG降低了tau蛋白的过度磷酸化及病理性tau蛋白的沉积。进一步研究发现CIG可能通过增加内源性PP2A激活剂PTPA的表达,进而直接或通过调节PP2A的修饰间接地增加PP2A活性。因此本研究提示CIG可能作为一个潜在的以PP2A激活为靶点的抗AD药物。     

Survivin蛋白与Caspase-3蛋白在喉鳞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Survivin蛋白、Caspase-3蛋白在喉鳞癌中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法收集经病理证实的28例新鲜喉鳞状细胞癌组织、癌旁组织及15例声带息肉,利用免疫组化技术检测Survivin蛋白与Caspase-3蛋白的表达。结果（1）Survivin蛋白与Caspase-3蛋白的阳性表达率在喉鳞癌组织中分别为71．43％与25．00％,在癌旁组织中分别为35．71％与82．14％,在声带息肉组织中分别为0与93．33％;均与喉鳞癌的分化程度有关,与临床分期、淋巴结转移无统计学意义。（2）Survivin蛋白的表达与Caspase-3蛋白的表达呈负相关（r=-0．889,P〈0.05）。结论Survivin蛋白可能通过抑制Caspase-3蛋白的活性而抑制细胞凋亡,可能是喉癌形成的分子机制之一。     

心血管系统中介导钙离子传递信息的蛋白

钙离子作为重要的细胞内传递信使,它的作用过程受到多种蛋白的调节,尤其在心血管系统中更为突出。在心血管系统中介导钙离子传递信息的蛋白主要包括三类:调节钙离子进入心肌细胞胞质的蛋白;胞质中与钙离子结合的蛋白;调节钙离子从胞质中排出的蛋白。     

血清前清蛋白清蛋白及超敏C反应蛋白与急性脑梗死的相关性

目的 探讨血清前清蛋白（PA）、清蛋白（ALB）、超敏C反应蛋白（hsCRP）与急性脑梗死的相关性,分析急性脑梗死的危险因素和保护性因素。方法 回顾性分析2014年1月至2017年12月安徽省第二人民医院神经内科收治的134例脑梗死患者的临床资料,依据患者影像学检查结果分为急性脑梗死组和非急性脑梗死组,每组各67例,比较两组患者年龄、血压、PA、ALB及hsCRP的数值水平差异,将差异有统计学意义的指标纳入logistic回归分析与脑梗死的相关性。结果 急性脑梗死组PA、ALB数值水平低于非急性梗死组,hsCRP水平高于非急性梗死组,差异均有统计学意义（P<0.05）,logistic回归分析示PA的OR=0.984（P<0.05）、ALB的OR=0.648（P<0.001）,hsCRP的OR=1.818（P<0.001）。结论 PA、ALB为急性脑梗死的独立保护性因素,hsCRP可能为急性脑梗死的独立危险因素。     

天花粉蛋白的研究进展

天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)是从葫芦科栝楼属植物栝楼的根块中提取出来的一种碱性蛋白,属于Ⅰ型核糖体失活蛋白(RibosomeInactivating Proteins,RIPs).它与双链RIPs-蓖麻毒蛋白(Ricin)的A链在一级结构上有56%的同源性.     

C-反应蛋白及清蛋白与急性心肌梗死的相关性研究

目的探讨C-反应蛋白及清蛋白水平与急性心肌梗死的相关性。方法检测150例急性心肌梗死患者的血清C-反应蛋白和m清清蛋白浓度,并与100例正常体检者进行比较。结果急性心肌梗死患者的C-反应蛋白浓度高于正常体检者,血清清蛋白浓度低于正常体检者,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;有心血管事件发生的血清C-反应蛋白浓度高于无心血管事件发生的患者,血清清蛋白浓度低于无心血管事件发生的患者,组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论血清C-反应蛋自浓度与急性心肌梗死呈正相关,浓度越高,心血管事件发生的可能性越大,而血清C-反喧蛋白浓度与血清清蛋白浓度呈负相关。高水平的血清C-反应蛋白浓度对急性心肌梗死的诊断及预后判断具有重要的预测意义。     

活化C蛋白

活化C蛋白是由C蛋白在凝血酶-血栓调节蛋白复合物的作用下转化而来,是一个重要的生理抗凝剂。它通过灭活凝血因子Ⅴa和Ⅷa而对凝血系统进行调控,同时它还有抗炎、调控细胞凋亡和内皮细胞存活的功能。最近,用于治疗严重败血症的重组人活化C蛋白制品已成功开发,同时对其它相关产品的研制和开发也在进行之中。     

去甲斑蝥素对体外微管蛋白聚合的抑制作用

目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)对微管蛋白聚合-解聚过程的影响。方法采用蛋白凝胶电泳鉴定从猪脑中提取的微管蛋白,并用Bradford法测定微管蛋白含量。在经过秋水仙碱和紫杉醇验证稳定的37℃和4℃平衡体系内加入NCTD 10,20和30μmol.L-1观察微管蛋白聚合-解聚活性。人卵巢癌SK-OV-3细胞加入NCTD 60μmol.L-1作用8 h,取上清和沉淀,Western印迹法检测微管蛋白含量。结果与空白对照组相比,在37℃聚合反应中,NCTD 10,20和30μmol.L-1组对微管蛋白聚合的抑制率分别为(5.5±2.7)%,(7.1±1.2)%和(27.5±0.4)%,在此浓度范围内NCTD随浓度的升高抑制作用增强(P<0.05),但对微管蛋白在4℃的解聚影响不显著。NCTD 60μmol.L-1作用人卵巢癌细胞后,细胞中游离微管蛋白增加了(91.5±8.5)%,聚合微管蛋白量减少了(51.8±3.8)%,说明NCTD抑制了人卵巢癌细胞SK-OV-3中微管蛋白的聚合。结论 NCTD对体外微管蛋白的聚合具有一定的抑制作用。     

G蛋白信号蛋白的调节剂：新的多功能药物靶点

G蛋白信号调节（RGS）是蛋白新近发现的能调节G蛋白功能的蛋白家族。RGS能通过加速鸟苷三磷酸（GTP）水解抑制G蛋白信号，即其GTP酶活化蛋白（GAP）功能。此外，RGS还能通过其RGS区域和非RGS区域产生非GAP功能。此类蛋白的组织分布特异，受到信号传递物质的调节并能在活细胞产生特定功能，也因而 而成为新的药理和治疗靶点。以RGS蛋白为靶点的药物分为5类：增强内源性激动剂功能的药物；阻断外源性G蛋白偶联受体（GPCR）激动剂脱敏的药物；增强外源性激动剂功能的药物，RGS蛋白效应器信号抑制剂；RGS激动剂。     

HBx蛋白对α干扰素诱导的MxA蛋白表达的影响

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)HBx蛋白(HepatitisB virus X protein)对α干扰素(IFN-α)诱导的抗病毒蛋白的影响及相关机制。方法以表达HBx蛋白的重组质粒FL1-145HBx转染人肝胚瘤细胞株HepG2细胞,经IFN-α处理后,RT-PCR法分析细胞内抗病毒蛋白MxA和JAK-STAT信号转导途径分子STAT1 mRNA表达水平,同时运用免疫印迹检测细胞内HBx、p-ERK、p-STAT1和t-STAT1等蛋白的表达。结果转染细胞内MxA、STAT1的mRNA和p-STAT1、t-STAT1的蛋白表达水平明显减少(P<0.05);而ERK抑制剂PD98059预处理后,转染细胞内MxA、STAT1 mRNA水平能够恢复至转染前的表达水平。结论 HBx蛋白很可能通过影响IFN-αJAK-STAT信号转导途径分子而抑制抗病毒蛋白MxA的表达;ERK信号转导途径的活化可能参与这一抑制过程。     

重组蛋白类药物蛋白含量测定方法研究进展

如何实现蛋白药物的准确定量一直是生物技术药物质量控制中的重要课题。本文将蛋白含量测定方法系统地分成3类：标准定量法、比色分析法以及紫外吸收法,并对每种方法如何实现准确定量分别进行阐述。此外,本文还提出一种测定抗体药物偶联物中蛋白含量的方法,为该种重组蛋白类药物蛋白含量的准确测定提供了参考。