实时荧光定量PCR法检测乙型肝炎患者血清HBVDNA含量512例分析

目的探讨实时荧光定量PCR检测不同血清标志物模式的乙型肝炎患者的血清HBVDNA含量的特点。方法应用ELISA对512例病人血清中乙型肝炎血清标志物进行检测,同时用实时荧光定量PCR检测标本中HBVDNA的含量,分别统计每组的HBVDNA阳性例数及其阳性率,用u检验进行统计学处理。结果HBsAg（＋）／HBeAg（＋）／抗HBc㈩组168例,HBVDNA阳性161例,占95．8％;HBsAg（＋）／抗HBe（＋）／抗HBc（＋）组163例,HBVDNA阳性51例,占31．3％;HBsAg（＋）／抗HBc（＋）组181例,HBVDNA阳性94例占51．9％;三组之间互相比较差异均有显著性（P〈0．001）。结论HBsAg（＋）／HBeAg（＋）／抗HBc（＋）组中HBV复制最活跃,实时荧光定量PCR检测HBVDNA比血清标志更能反映乙型肝炎病毒存在与复制情况。     

慢性乙型肝炎患者表面抗原水平与乙型肝炎病毒DNA载量关系分析

目的多角度分析慢性乙型肝炎（乙肝）患者血清乙肝表面抗原（HBsAg）水平与乙肝病毒（HBV）．DNA载量之间的定量关系,为HBsAg定量结果的临床应用提供实验依据。方法回顾性分析有肝病理活检,同时检测HBsAg定量与HBV—DNA的182例慢性乙肝患者临床资料。从3个角度分组分析各组HBsAg水平与HBV—DNA载量的线性关系：依据182例患者HBV．DNA载量结果（0．000～5．745）的分布规律,分为低载量组（0．000-1．915）、中载量组（〉1．915～3．830）和高载量组（〉3．830～5．745）,即相当于原始结果的0～104、〉104～106、〉106-108U／mL;依据乙肝e抗原（HBeAg）结果分为阴性组和阳性组;依据纤维化病变的程度分为无明显纤维化组（S0-S1期）、明显纤维化组（S2-S3期）和早期肝硬化组（s4期）。结果HBV．DNA低、中、高载量组间HBsAg水平差异比较：总体水平以及HBV．DNA高载量组与低、中载量组间比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）;HBV．DNA低、中载量组间比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。HBV．DNA载量与HBsAg水平的线性关系：总体呈负相关『相关系数（r）=-0．448,P〈O．01];HBV—DNA低、中栽量或HBeAg阴性时,二者均无相关性（P〉0．05）;HBV．DNA高载量、HBeAg阳性及肝纤维化病变各组二者呈高到低度负相关（r=-0．553、-0．635、-0．459,P〈O．01）;随肝纤维化病变程度的进展,二者相关性下降（r=-0．535、-0．459、-0．218,P〈O．05）,HBeAg阳性时的相关性最高（r=-0．635,P〈O．01）。结论慢性乙肝患者HBsAg水平与HBV—DNA载量呈负相关,但不能直接反映HBV复制的状态．实际工作中对HBsAg定量结果应依据病程和HBeAg等相关检查进行分析和合理应用。     

HBeAg阴性乙型肝炎患者HBV-DNA检测分析

目的 了解乙型肝炎E抗原（HBeAg）阴性的乙型肝炎患者体内病毒的复制情况.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测604例HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒（HBV）的DNA载量和丙氨酸氨基转移酶（ALT）浓度.按肝功能检查结果分组：乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性（＋）、乙肝核心抗体（抗-HBc）阳性（＋）为Ⅰ组（44例）,HBsAg（＋）、乙肝e抗体（抗-HBe）阳性（＋） 、抗-HBc（＋）为Ⅱ组（560例）.结果 604例患者中HBV-DNA阳性335例（55.5%）,ALT异常85例（14.1%）.其中Ⅰ组患者HBV-DNA阳性15例（34.1%）,ALT异常17例（38.6%）;Ⅱ组患者HBV-DNA阳性320例（57.1%）,ALT异常68例（12.1%）.结论 乙型肝炎患者在HBeAg消失,或抗-HBe、或抗-HBc出现时,仍然存在病毒在体内复制的可能.对HBeAg阴性的乙型肝炎患者应定期进行相关标志物及HBV-DNA检测,以了解患者个体治疗情况,对患者的病情、疗效、预后有良好的判断作用.     

乙型肝炎病毒表面抗原低水平阳性血清的病毒核酸载量分析

目的：探讨分析血清中乙型肝炎病毒表面抗原（HBV-HBsAg）低水平阳性与病毒核酸载量的关系。方法 HBsAg弱阳性的患者3632例,通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清（HBsAg）、使用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测血清乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）。结果3632例HBsAg弱阳性的患者病毒DNA检出率为80.55%,病毒核酸载量的平均值为7.305。结论乙型肝炎病毒表面抗原低水平阳性对乙型肝炎的诊断不具有代表性,只能能说明体内含有乙肝病毒外壳,还需要结合血清病毒核酸载量检测来判断患者体内是否具有乙肝病毒DNA。只有在HBsAg阳性且合并病毒核酸载量值异常时,才有助于乙型病毒性肝炎的诊断和疗效的评估。     

乙肝血清标志物与HBV—DNA定量检测结果分析

目的探讨乙肝血清标志物（HBVM）与HBV-DNA定量的关系,为临床诊断及治疗提供有价值的判断标准。方法采用聚合酶链反应和时间分辨免疫荧光分析法（TRFIA）分别对603例乙肝患者血清进行乙肝血清标志物（HBVM）与HBV-DNA定量检测。结果HBV-DNA定量结果与乙型肝炎病毒血清标志物不同组合间存在一定差异,乙型肝炎＂大三阳＂病毒检出率为94.4%,明显高于其他各组,有显著性差异（P值〈0.01）。结论乙型肝炎患者HBsAg和HBeAg均为阳性模式HBV-DNA高于HBeAg阴性模式,乙型肝炎患者血清标志物与HBV-DNA含量之间存在一定的相关性,进一步探索其规律,能更好指导临床正确治疗。     

乙肝表面抗原阳性孕妇肌注乙肝免疫球蛋白预防母婴宫内传播临床观察

目的：观察携带乙型肝炎病毒的孕妇注射乙肝免疫球蛋白（HBIG）预防母婴宫内传播临床疗效。方法：对乙肝表面抗原阳性孕妇自孕28周起多次肌注HBIG60例为预防组及未注射的50例乙肝表面抗原阳性孕妇为对照组，采用酶联免疫法和荧光定量PCR法检测母血HBsAg及其新生儿血HBsAg、抗HBs、HBVDNA。结果：预防组60例新生儿中有54例血清抗HBs阳性与对照组相比差异有显著性（P〈0．05），预防组新生儿血HBsAg、HBVDNA检出率均明显低于对照组。结论：经母亲对胎儿行被动免疫可有效预防乙肝病毒宫内传播。     

慢性HBV感染者血清HBVDNA载量与HBeAg／抗-HBe、ALT之间的关系

目的探讨慢性HBV感染者血清HBVDNA载量与HBeAg／抗-HBe以及丙氨酸转氨酶（ALT）水平之间的关系。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测134例慢性HBV感染者HBV血清标志物,根据HBeAg／抗-HBe检测结果将患者分为Ⅰ组（HBeAg＋／抗-HBe-,43例）;11组（HBeAg-／抗-HBe＋,69例）;Ⅲ组（HBeAg-／抗-Hbe-,22例）。同时应用实时荧光定量PCR方法以及连续监测法检HBVDNA载量以及ALT水平。结果Ⅰ组HBVDNA阳性率和HBVDNA载量明显高于Ⅱ、Ⅲ组（P〈0．01）。HBVDNA阳性患者ALT异常率高于HBVDNA阴性患者（P〈0．01）。HBVDNA阳性患者HBVDNA载量与ALT水平之间无相关性（r=0．174,P=0．156）。结论血清HBVDNA载量与HBeAg／抗-HBe以及ALT之间存在一定的关系,但不能单纯依靠HBeAg／抗-HBe以及ALT来判断HBV在体内的复制情况,三项指标联合检测对HBV慢性感染者的病情检测、治疗具有重要意义。     

HBeAg阳性与HBeAg阴性慢性重型乙型肝炎死亡患者的临床特征比较

目的探讨HBeAg阳性与HBeAg阴性慢性重型乙型肝炎患者的临床特征。方法对95例慢性重型乙型肝炎患者的临床资料、肝功能、肝纤维化指标、HBVDNA载量及并发症发生率进行回顾性分析。结果95例患者中,HBeAg阳性41例（43％）,HBeAg阴性54例（57％）。HBeAg阳性组与HBeAg阴性组平均发病年龄,ALB、TB、CHE、肝纤维化指标及肝衰竭并发症发生率差异无统计学意义（P〉0．05）。HBeAg阴性患者的ALT、AST分别为（400．37±413．59）U／L和（578．14±600．23）U／L,高于阳性患者的（198．25±215．37）u／L和（254．78±269．16）U／L（P〈0．05）。HBeAg阳性患者的HBVDNA载量为（6．17×10^6±8．24×10^1）copies／ml高于阴性患者的（2．39×10^5±6．75×10^1）copies／ml,两组间具有显著差异（P〈0．05）。另外HBeAg阳性患者的左肝前后径及右肝厚度分别为（65．12±12．43）mm及（95．37±12．69）mm,均高于阴性患者的（56．78±11．04）mm和（89．34±9．23）mm（P〈0．05）。结论HBeAg阴性慢性重型乙型肝炎患者与HBeAg阳性患者相比在较低的HBVDNA载量下,仍引起较高的肝损伤和较大幅度的肝脏萎缩。     

乙型肝炎患者血清前S1抗原与e抗原及HBV-DNA载量相关性的探讨

目的探讨前S1抗原（PreS1）与e抗原（HBeAg）及HBV-DNA载量相关性,评价PreS1的临床检测意义。方法对160例未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者采用实时荧光定量PCR法测定HBV-DNA,ELISA法检测PreS1和HBeAg。结果PreS1在乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性组中检出率为84.8%,高于其在HBeAg阴性组中的检出率35.1%（P〈0.01）;HBV DNA阳性组中PreS1阳性率为76.6%,显著高于HBV DNA阴性组的53.4%（P〈0.05）。随着HBV-DVA载量的升高,PreS1和HBeAg的阳性率也随之升高,在HBV-DNA低载量时,PreS1的阳性率明显高于HBeAg。结论HBV PreS1抗原与具有病毒复制活动性意义的指标（HBeAg和HBV DNA）有良好的相关性,PreS1抗原能够比HBeAg更灵敏地反映HBV复制。     

拉米夫定阻断乙肝病毒母婴传播的临床观察

目的观察拉米夫定对妊娠晚期HBVDNA〉10^6拷贝/ml的孕妇HBV垂直传播的阻断作用。方法血清HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性及HBVDNA〉10^6拷贝/ml的孕妇41例,分为拉米夫定治疗组17例,对照组24例。治疗组从孕33周开始口服拉米夫定至分娩后1个月停服,检测两组孕妇分娩前和产后1年肝功能、二对半（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）、HBVDNA定量及婴儿1岁时二对半结果。结果拉米夫定治疗组孕妇分娩前HBVDNA下降明显（P〈0.05）,对照组观察期间血清HBVDNA水平无明显变化,治疗组和对照组HBV母婴传播的阻断率分别为100%和83.3%（P〈0.05）,2组孕妇及婴儿均随访1年,未发现有不良反应。结论妊娠晚期应用拉米夫定能降低孕妇HBV DNA载量,减少HBV母婴传播。     

乙型肝炎患者血清标志物与HBV-DNA水平的关系及临床意义

目的探讨乙型肝炎患者血清标志物和HBV-DNA水平的关系和临床意义。方法选取本院收治的HB-sAg/HBeAg/抗-HBc阳性患者73例和HBsAg/抗-HBe/抗-HBc阳性患者147例,通过荧光定量法和微粒子酶免法对HBV-DNA和血清标志物进行定量分析,比较其相关性。结果 HBsAg/HBeAg/抗-HBc阳性患者中,39例（53.42%）患者HBV-DNA〉107拷贝/mL;其中,C、D组抗-HBs水平以及D组HBeAg和抗-HBe水平与A组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,且HBV-DNA水平与抗-HBs呈负相关（r=-0.662）,与HBeAg和抗-HBe呈正相关（r=0.531,r=0.820）。HBsAg/HBeAg/抗-HBc阳性患者中,102例（69.39%）患者HBV-DNA〈104拷贝/mL,HBV-DNA与抗-HBs水平呈负相关（r=-0.572）。结论不同血清学模式之间其HBV-DNA水平与血清学标志物含量的分布特征并不相同,临床工作中应具体问题具体分析。     

乙型肝炎血清免疫标志物、乙型肝炎病毒核酸水平变化与HBV的关系及临床意义

目的：探讨乙型肝炎血清免疫标志物、乙型肝炎病毒核酸水平变化与HBV的关系及临床意义。方法选取本院2013年2月∽2014年2月收治的108例乙型肝炎患者为研究对象,按HBV DNA含量高低分为A（〈103拷贝/ml）、B（103∽105拷贝/ml）、C（106∽108拷贝/ml）3组,分别检测3组的乙型肝炎血清免疫标志物（HBV M）与乙型肝炎病毒核酸（HBV DNA）含量。结果 A组的HBeAg为（3.971±14.47）S/CO,B组为（446.7±785.8）S/CO,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;A组的抗-HBe、HBeAg、HBsAg与C组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;B组的HBeAg与C组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;3组的抗-HBs、抗-HBc比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。HBV M阳性标本中抗-HBs、抗-HBc与HBsAg含量与HBV DNA无相关性,抗-HBe与HBV DNA呈负相关,HBeAg与HBV DNA呈正相关。结论定量检测HBV DNA可真实反映HBV的复制情况,对于传染性评价、乙型肝炎诊治及疗效观察均具有指导意义;定量检测HBV M虽在HBV复制程度的判断及传染性评价方面无明显价值,但可为乙型肝炎数据管理奠定基础。     

定量检测乙型肝炎病毒标志物与HBV DNA定量间的关系及临床意义

目的　探讨定量检测乙型肝炎病毒血清标志物(HBVM)与(HBV DNA)定量之间的关系及临床意义。方法　采用实时荧光定量PCR仪检测HBV DNA,采用时间分辨荧光免疫分析仪检测HBVM。结果　375例乙肝患者在HBV DNA含量分组中,随HBV DNA含量增高,HBs Ag、HBe Ag含量也增高,后两者与前者有良好的一致性,存在一定的相关性(r=0 .5 332 ,r=0 .380 9)。抗HBs,抗HBe及抗HBc与HBV DNA之间,无明显规律。HBs Ag含量:慢性轻度肝炎分别与急性肝炎、慢性重度、亚重肝、慢性重型肝炎,肝硬化比较差异有非常显著性(P<0 .0 1,0 .0 5或0 .0 0 1) ,HBe Ag含量:慢性轻度肝炎分别与急性肝炎、慢性中度、慢性重度、亚重肝、慢性重肝,肝硬化比较差异非常显著(P<0 .0 1或0 .0 0 1) ,HBs Ag含量及HBe Ag含量在其他临床分型中比较部分有统计学意义。HBV DNA阳性率及HBV DNA定量在部分临床分型中比较有统计学意义。结论　时间分辨荧光免疫(DEL FIA)是一敏感、特异方法,定量检测HBs Ag、HBe Ag能反映HBV DNA载量及复制情况;部分情况表明肝脏病变越重,其HBs Ag及HBe Ag血清含量越低,HBV DNA阳性率及HBV DNA载量与乙肝临床分型之间关系无确定性结论     

乙型肝炎病毒前S_1抗原在乙型肝炎诊断中的意义

目的探讨Pre S1-Ag在乙型肝炎诊断中的意义。方法采用酶联免疫法检测464例乙型肝炎患者血清标志物(HBV-M)和乙型肝炎前S1抗原(PreS1-Ag)采用荧光定量PCR法同时检测HBVDNA,分析PreS1-Ag与血清HBV-M和HBVDNA的关系。结果 HbeAg阳性的两组中,PreS1-Ag阳性率分别为88.62%和74.19%,HBVDNA的阳性率分别为94.01%和83.87%与:HbeAg呈明显的正相关,三者间差异无统计学意义(χ2=1.87,P<0.05)。结论 PreS1-Ag能敏感地反映出HBV复制与HBVDNA的一致性较好,在乙型肝炎诊断和治疗中具有重要临床意义。     

乙型肝炎病毒DNA定量检测对乙型肝炎产妇母乳喂养的临床指导价值

目的探讨乙型肝炎（乙肝）病毒DNA（HBV—DNA）定量检测对乙肝产妇母乳喂养的临床指导价值。方法选择2012年1～lO月检测乙肝表面抗原（HBsAg）阳性（＋）的产妇100例设为研究组,其中大三阳组产妇32例,小三阳组产妇41例,HBsAg（＋）,乙肝核心抗体（＋）组产妇27例。选择同期健康产妇100例设为对照组,分别检测各组产妇血清及乳汁中HBV—DNA水平情况,并对结果进行综合分析。结果研究组3个小组产妇血清和乳汁HBV—DNA阳性率均在85．0％以上,明显高于对照组的0．0％,差异均有统计学意义（P〈0．05）;研究组各组产妇血清和乳汁HBV—DNA水平分别两两比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）;研究组产妇乳汁HBV—DNA水平与血清HBV—DNA水平呈正相关f相关系数（r）=0．9569,P〈0．05]。结论乙肝产妇产后能否实施母乳喂养与产后产妇血清及初乳中HBV—DNA的水平有关,因此,必须依据检测结果决定喂养方式．以保证婴儿的哺乳安全。     

测定低水平血清乙肝病毒表面抗原及其临床意义

目的了解测定低水平血清乙肝病毒表面抗原（HBsAg）的人群分布及相关乙肝病毒血清标志物模式特征。方法微粒子酶免疫分析技术测定6186例非肝炎病区住院患者血清HBsAg及表面抗体（抗-HBs）、乙肝病毒e抗原及e抗体（HBeAg、抗-HBe）和乙肝病毒核心抗体（抗-HBc）,根据定值参比血清和样本的HBsAg荧光速率值/阴性对照荧光速率值的比值（S/N值）,并结合中和试验结果,确定浓度在5μg/L以下的HBsAg阳性例数,并分析相关乙肝病毒（HBV）血清标志物模式。结果共检出HBsAg阳性626例,HBsAg浓度在5μg/L以下的有158例,占总数的2.55%,占HBsAg阳性人群的25.24%。其中,HBsAg浓度在1μg/L以下的有71例（44.94%）;1～2μg/L的有26例（16.46%）;2～5μg/L的有61例（38.60%）。对上述低水平HBsAg人群的5项HBV血清标志物检测获得8种模式,以＂HBsAg、抗-HBc、抗-HBe阳性＂,＂HBeAg和抗-HBs阴性＂模式为主（74.60%）;累计HBsAg和抗-HBc同时阳性者占94.17%;HBsAg与抗-HHs同时阳性只出现在HBsAg1μg／L以下人群中（6．45％）。结论低水平血清HBsAg人群不容忽视,提高HBsAg检测灵敏度有重要意义;同时检测相关HBV血清标志物,对于确定上述人群有帮助。     

乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测的临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒外膜大蛋白（HBV—LP）与乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（HBV—DNA）的相关性,动态检测俩项指标,分析其在诊断乙型肝炎和临床治疗,妒的意义。方法采用酶联免疫吸附试验和实时荧光定量聚合酶链反应技术对230例乙型肝炎患者血清标本进行HBV—LP和HBV-DNA平行检测。结果乙型肝炎病毒感染患者血清HBV—LP含量与HBV—DNA拷贝数间呈正相关（r=0．84,P〈0．01）,230例乙肝病毒感染患者血清标本中,HBV-LP阳性率为84.78％,HBV-DNA阳性率为84．35％,两者差异无统计学意义（P〉0．05）。55例HBeAg阴性血清标本中,HBV—LP与HBV-DNA的阳性检出率分别为63．63％（35／55）、58．18％（32／55）,两者差异无统计学意义（P〉0．05）。HBV—DNA阳性194例中,HBV—LP阳性率（82．47％）明显高于HBeAg阳性率（52．06％）（x2=80：3,P〈0．01）。结论HBV—LP及HBV-DNA是判断乙型肝炎病毒感染患者体内病毒复制程度的重要指标,尤其是HBeAg阴性患者体内病毒复制及预后判断有价值的血清学检测指标,为临床诊断及治疗提供可靠的实验室数据。     

血清HBeAg与HBV-DNA的相关性探讨

目的：探讨血清HBeAg与HBV-DNA的相关性,为临床诊治HBV相关疾病提供参考依据。方法选取本院收治的820例乙型肝炎病毒感染患者作为研究对象,分为HBeAg（＋）组（n=239）和HBeAg（-）组（n=581）,测定两组的血清标志物和HBV-DNA。结果HBeAg（＋）组的血清HBV DNA阳性率显著高于HBeAg（-）组（χ2=224.548,P＜0.01）;血清HBeAg的S/CO值与HBV-DNA对数值呈正相关（r=0.8820,P＜0.01）。结论HBeAg与HBV-DNA呈正相关性,但两者不能相互代替。     

慢性乙型肝炎血清LHBs与HBV DNA、HBeAg、ALT的相关性

目的探讨HBV表面大蛋白(LHBs)与HBV DNA、HBeAg、ALT的相关性及LHBs指标在慢性乙型肝炎(CHB)诊治中的临床意义。方法选择324例CHB患者,分别检测LHBs、HBV DNA、HBeAg、ALT。血清LHBs和HBeAg采用ELISA法,HBV DNA检测采用荧光定量PCR法。结果 324例CHB患者血清中,随着HBV DNA载量的升高,LHBs的浓度呈上升趋势,两者之间有良好的相关性(r=0.97,P<0.01),且LHBs的阳性率也逐步增加,不同组别间LHBs阳性率差异均有统计学意义(P<0.05);在171例HBeAg阴性血清中,LHBs和HBV DNA的阳性率分别为66.08%和61.99%(P>0.05);171例HBeAg阴性血清中,113例LHBs阳性与58例LHBs例阴性组血清ALT有统计学差异(P<0.05)。结论 LHBs是反映HBV感染者,特别是HBeAg阴件患者体内病毒复制程度敏感、可靠指标;检测CHB患者血清中LHBs对于了解乙型肝炎肝细胞损伤程度、抗病毒疗效和评估预后具有一定的临床价值。