大鼠马桑内酯点燃癫痫模型P-糖蛋白和多药耐药相关蛋白1的表达

耐药性癫痫约占癫痫患者的30％，耐药癫痫动物模型是研究其耐药机制和探讨治疗方法的重要工具。马桑内酯（coriaria lactone，CL）是从植物马桑中提取的一种致痫物质，对动物反复肌注阈下剂量的CL可以建立化学点燃模型，并具有一定的耐药性。P-糖蛋白（P-glycorprotein，P-gp）和多药耐药相关蛋白1（muhidrug resistance-associated protein 1，MRP1）是近年在耐药性癫疴患者脑组织中发现的两种与耐药性产生相关的膜蛋白。     

大鼠难治性癫(癎)模型的建立和P-糖蛋白表达规律的探讨

P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是多药物耐药基因编码的能量依赖性药物外排泵,近来发现其于难治性癫(癎)(refractory epilepsy,RE)致(癎)灶呈现过度表达[1],提示P-gp可能促进癫(癎)耐药.由于临床处理因素可控性差,本实验旨在建立RE动物模型,研究癫(癎)持续状态(status epilepticus,SE)和抗癫(癎)药对P-gp表达的影响,探讨P-gp的表达规律和癫(癎)耐药机制.     

多药转运蛋白对匹罗卡品癫(癎)大鼠模型脑内拉莫三嗪浓度的影响

目的 观察多药转运蛋白[P-糖蛋白(P-glycoprotein,PGP)和多药耐药相关蛋白(multi-drug resistance associated protein,MRP)]对匹罗卡品慢性癫(癎)大鼠模型海马内拉莫三嗪浓度的影响,探讨PGP和MRP在难治性癫(癎)多药耐药机制中的作用.方法 建立匹罗卡品慢性癫(癎)动物模型,在模型大鼠海马内安置微透析探针,腹腔注射拉莫三嗪(10mg/kg)后于不同时间点收集透析液,并用高效液相色谱检测其中的药物浓度.通过微透析探针局部分别给予PGP拮抗剂维拉帕米和MRP拮抗剂丙磺舒,观察维拉帕米和丙磺舒对模型鼠海马内神经元细胞外液拉莫三嗪浓度的影响.结果 维拉帕米明显升高了癫(癎)大鼠海马细胞外液拉莫三嗪的药物浓度,在给药后60、90、120、150 min(0.65±0.11、0.84±0.09、0.70±0.09和0.58±0.08)与模型组(0.41±0.10、0.50±0.04、0.39±0.09和0.30±0.06)比较差异有统计学意义(F=5.01、8.61、10.23、7.89,P<0.05),丙磺舒也提高了海马内拉莫三嗪的浓度,给药后90、120、150 min(0.75±0.09、0.58±0.10和0.49±0.07)与模型组比较差异有统计学意义(F=6.58、4.56、4.75,P<0.05).结论 PGP和MRP均能够限制拉莫三嗪通过癫(癎)大鼠血脑屏障,从而降低了海马内拉莫三嗪的药物浓度,上述机制可能参与了难治性癫(癎)耐药的发生.     

多药耐药基因1位点C3435T多态与难治性癫(癎)的相关性

脑内P-糖蛋白(P-glyeoprotein,P-gp)过度表达是难治性癫(癎)(refractory epilepsy,RE)重要的发生机制之一[1].人类P-gp由多药耐药基因1(multidrug resistance 1,MDR1)和MDR3编码,前者起主导作用.     

癫癎耐药机制的分子生物学研究进展

癫癎是神经科常见病,难治性癫癎约占癫癎的30%.其耐药机制包括许多方面,目前认为早期发病、症状性癫癎、特殊的临床发作类型等是难治性癫癎的重要相关因素[1].近年来,对肿瘤耐药机制的研究使人们逐渐认识到多药耐药基因(multiple drugs resistance,MDR)及其表达产物与难治性癫癎的相关关系.     

大鼠难治性癫模型的建立和P-糖蛋白表达规律的探讨

P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是多药物耐药基因编码的能量依赖性药物外排泵,近来发现其于难治性癫(refractory epi-lepsy,RE)致灶呈现过度表达[1],提示P-gp可能促进癫耐药。由于临床处理因素可控性差,本实验旨在建立RE动物模型,研究癫持续状态(status epilepticus,SE)和抗癫药对P-gp表达的影响,探讨P-gp的表达规律和癫耐药机制。1材料和方法1.1实验动物及分组:雄性Wistar大鼠(250g±10g),随机分成模型组及其对照组、药物治疗组及其生理盐水腹腔注射对照组。1.2大鼠RE模型的制作:立体定位仪引导,于左侧CA3(AP,5.5mm;ML,4.5mm;DV,…     

脑内高表达多药转运体和难治性癫癎耐药关系的研究

癫癎是一种神经科常见病,尽管大多数患者经过正规治疗后,病情能够得到控制,但是仍有大约1/3的病人对抗癫癎药物(AEDs)不敏感,被称为难治性癫癎.目前国际上对难治性癫癎尚缺少一个确切的定义,临床一般将那些接受单一或联合的一线AEDs治疗,血药浓度已达到最大耐受剂量,但癫癎发作仍不能被有效控制者相对地划分为难治性癫癎[1].难治性癫癎预后差,常伴有智能障碍和/或神经缺损症状,致残率和致死率都很高,严重威胁了患者的身体健康和生活质量.癫癎患者对AEDs不敏感(或者称为癫癎耐药)的病理生理基础目前还不清楚,推测可能有内外环境中多种因素参与了这种机制.早先对肿瘤细胞的研究发现,细胞膜上多药转运体(multidrug transporter)如:p-糖蛋白(P-glycoprotein PGP)的表达和对化疗药物耐药密切相关[2].由此联想到癫癎耐药可能和病灶局部多药转运体的高度表达有关,如果这种假设成立,将对未来理解癫癎耐药的发生机理和临床治疗难治性癫癎提供有益的帮助,本文就近年来关于脑内多药转运体的表达和癫癎耐药之间关系的研究作一回顾.     

多药耐药基因及其单核苷酸多态性与难治性癫(癎)耐药性的关系

近年来研究发现,多药耐药基因(MDRI)及其单核苷酸多态性(SNPs)与难治性癫癎的耐药性相关,现就此方面的研究进展作一综述. 1MDR1与难治性癫癎耐药性 虽然难治性癫癎耐药性形成的机制尚不十分清楚,但大量研究[1,2]表明,其形成与MDRI及其产物P-糖蛋白有关.     

维拉帕米对耐苯妥英钠和卡马西平癫(癎)模型大鼠电生理和行为的影响

目的 观察P-糖蛋白(PGP)拮抗剂维拉帕米对耐苯妥英钠(PHT)和卡马西平(CBZ)癫(癎)大鼠电生理指标和行为学的影响.方法 建立慢性杏仁核点燃癫(癎)大鼠模型,筛选出耐药组和治疗有效组,给予维拉帕米,观察其对各组大鼠后放电阈值(after discharge threshold,ADT)、后放电时程(after discharge duration,ADD)等电生理指标和行为学的影响.结果 相对于耐药对照组,耐药组大鼠在预先给予维拉帕米后,使用抗癫(癎)药物后ADT[(238.0±32.2)μA]明显高于耐药对照组[(177.0±23.3)μA,P＜0.05];ADD时程明显缩短,Racine行为分级明显下降(P＜0.05).结论 维拉帕米可以协助抗癫(癎)药物(AEDs)改善耐药大鼠的电生理活动,降低点燃后发作分级,提示有效抑制PGP有助于改善多药转运体高表达导致的癫(癎)耐药.     

耐药性癫癎与耐药相关基因

癫癎是人类的常见病、多发病,目前主要的治疗手段是应用抗癫癎药物(AED)控制发作,约有20%~30%的癫癎患者对传统AED反应较差,尽管近年来不同作用机制的新型AED不断问世,但仍有部分患者对AED耐药,发作得不到有效控制。目前,对耐药性(drug-resistant or pharmacoresistant)癫癎的定义尚无一个统一的标准,多数学者认为如果经过几种适当的AED长期正规治疗,药物已经用至最大耐受剂量,患者不能达到12个月无发作,排除神经系统进行性病变,则可以定为耐药性癫癎或药物难治性(medically intractability or refractory)癫癎[1]。国内将难治性癫癎…     

难治性癫癎患者外周血中多药耐药相关蛋白1的表达

难治性癫癎，指经过2年以上的正规抗癫癎治疗，试用所有主要的抗癫癎药物（AED）单独或联合应用，且已达到患者所能耐受的最大剂量，血药浓度在正常范围之内，每月仍有4次以上发作，我们对癫癎患者外周血中多药耐药相关蛋白（MRP1）的表达进行检测，探讨与其与癫癎耐药的关系。     

P-gp与癫(癎)耐药相关性研究进展

P-gp是由ABCB1基因编码的能量依赖性跨膜外向转运蛋白,在灶组织内的表达明显增加,影响AEDs通过血脑屏障,降低灶组织内AEDs浓度.给予P-gp抑制剂,不仅可以提高耐药细胞内AEDs浓度,也能增加灶组织内AEDs浓度,并扭转癫(癎)的耐药性.越来越多的研究从P-gp的结构、功能和过表达等方面阐述与癫(癎)耐药的相...     

颞叶癫痫主穹窿蛋白表达及其作用研究

目的 探讨主穹窿蛋白(major vault protein,MVP)在颞叶癫痫大鼠模型脑组织的表达及其与难治性癫癎耐药是否相关.方法 用氯化锂-匹鲁卡品制作颞叶癫癎模型,并将它分为药物有效组和耐药组;用免疫组化和Western blot法检测MVP表达.结果 MVP主要表达在海马和皮质区的小胶质细胞,血管内皮细胞,血管周围的星形胶质细胞也有表达,神经元中少见表达;耐药组MVP表达较药物有效组和对照组明显增高,具有统计学意义(P<0.05).结论 耐药大鼠模型中MVP过量表达,提示MVP可能与难治性癫癎的耐药性有关.     

P-gp与癫(癎)耐药相关性研究进展

P-gp是由ABCB1基因编码的能量依赖性跨膜外向转运蛋白,在灶组织内的表达明显增加,影响AEDs通过血脑屏障,降低灶组织内AEDs浓度.给予P-gp抑制剂,不仅可以提高耐药细胞内AEDs浓度,也能增加灶组织内AEDs浓度,并扭转癫(癎)的耐药性.越来越多的研究从P-gp的结构、功能和过表达等方面阐述与癫(癎)耐药的相关性,现就这一方面的研究进展作一综述.     

戊四氮点燃大鼠脑内P-糖蛋白和缺氧诱导因子1α的表达及相关性

目的 研究戊四氮点燃大鼠脑内P-糖蛋白(P-gp)和缺氧诱导因子1α(Hif-1α)的表达变化和表达部位,探讨二者之间的关系.方法 反复腹腔注射戊四氮(40 mg/kg)制备大鼠点燃模型或注射PBS作对照.点燃后不同时间点处死动物.用免疫组织化学染色方法检测P-gp和Hif-1α的表达变化,用双标免疫酶组织化学染色法确定P-gp和Hif-1α的表达部位.结果 对照组的P-gp和Hif-1α零星分布在毛细血管内皮细胞,点燃组P-gp和Hif-1α分布在海马和皮质神经元的细胞膜,均以点燃后4 h的表达最高(P-gp:1.09±0.20;Hif-1α:1.12±0.19,F=2.83,P＜0.05),且分布方式相似.结论 癫(癎)反复发作可以诱导脑内神经元表达P-gp和Hif-1α,二者可能具有相关性.     

低频电刺激丘脑底核对癫(癎)大鼠海马谷氨酸和γ-氨基丁酸表达的影响

目的 探讨低频电刺激(LFS)丘脑底核对癫(癎)大鼠海马谷氨酸(Glu)及γ-氨基丁酸(GABA)表达的影响.方法 用30只大鼠制备杏仁核电刺激点燃模型,同时在丘脑底核埋置刺激电极;制模成功的大鼠随机分为LFS组及对照组;两组大鼠每日点燃1次,共10 d;LFS组大鼠每次点燃前予以LFS丘脑底核.观察10 d后两组大鼠癫(癎)发作程度和持续时间,应用免疫组化法测定大鼠海马Glu、GABA阳性细胞数及灰度值.结果 与对照组比较,LFS组癫(癎)发作的Racine评分明显降低,癫(癎)发作持续时间明显缩短;海马GABA阳性细胞数明显增多、灰度值降低;Glu阳性细胞数明显减少,灰度值明显增加(均P＜0.05＝.结论 LFS丘脑底核能有效抑制大鼠杏仁核点燃发作,其作用机制可能是改变了脑内Glu、GABA的表达.     

耐药性癫痫患者脑脊液HSPBAP1和EML5表达变化的临床研究

目的观察热休克蛋白27相关蛋白1(HSPBAP1)和棘皮动物微管结合蛋白类似蛋白5(EML5)在耐药性癫癎患者脑脊液中的表达变化,探讨其用于耐药性癫癎早期诊断的临床价值。方法根据纳入标准共选择39例耐药性癫癎患者和性别、年龄与之相匹配的健康志愿者40例入组,经腰椎穿刺术采集脑脊液标本,双抗体夹心酶联免疫吸附法检测HSPBAP1和EML5。结果耐药性癫癎组患者脑脊液HSPBAP1和EML5表达水平分别为(0.17±0.03)和(0.13±0.02),正常对照组为(0.10±0.03)和(0.08±0.02),低于耐药性癫癎组且差异具有统计学意义(t=3.239.3.294;均P=0.002)。结论耐药性癫癎患者脑脊液HSPBAP1和EML5表达水平明显升高,可为耐药性癫癎的诊断提供新的途径,有助于耐药性癫癎的早期诊断。     

MK-801对耐苯妥英钠和卡马西平癫(癎)大鼠模型脑表达P-糖蛋白的影响

癫(癎)是神经科仅次于脑血管意外的常见疾病,其中大约有30%的患者对多种抗癫(癎)药物表现耐药,癫(癎)发作得不到有效控制,被称之为难治性癫(癎).难治性癫(癎)患者对药物产生耐药的机制还不明确.研究表明癫(癎)病灶内高度表达P-糖蛋白(P-glycoprotein,PGP)[1],PGP是一种多药转运蛋白,能够分解ATP获能从而逆浓度梯度将抗癫(癎)药物转运出脑组织,减少了癫(癎)病灶内的药物浓度,降低了药物的疗效,上述机制可能参与了难治性癫(癎)患者对多种抗癫(癎)药物产生耐药.     

MK-801对耐苯妥英钠和卡马西平癫(癎)大鼠模型脑表达P-糖蛋白的影响

癫(癎)是神经科仅次于脑血管意外的常见疾病,其中大约有30%的患者对多种抗癫(癎)药物表现耐药,癫(癎)发作得不到有效控制,被称之为难治性癫(癎).难治性癫(癎)患者对药物产生耐药的机制还不明确.研究表明癫(癎)病灶内高度表达P-糖蛋白(P-glycoprotein,PGP)[1],PGP是一种多药转运蛋白,能够分解ATP获能从而逆浓度梯度将抗癫(癎)药物转运出脑组织,减少了癫(癎)病灶内的药物浓度,降低了药物的疗效,上述机制可能参与了难治性癫(癎)患者对多种抗癫(癎)药物产生耐药.     

MK-801对耐苯妥英钠和卡马西平癫(癎)大鼠模型脑表达P-糖蛋白的影响

癫(癎)是神经科仅次于脑血管意外的常见疾病,其中大约有30%的患者对多种抗癫(癎)药物表现耐药,癫(癎)发作得不到有效控制,被称之为难治性癫(癎).难治性癫(癎)患者对药物产生耐药的机制还不明确.研究表明癫(癎)病灶内高度表达P-糖蛋白(P-glycoprotein,PGP)[1],PGP是一种多药转运蛋白,能够分解ATP获能从而逆浓度梯度将抗癫(癎)药物转运出脑组织,减少了癫(癎)病灶内的药物浓度,降低了药物的疗效,上述机制可能参与了难治性癫(癎)患者对多种抗癫(癎)药物产生耐药.