临床分离常见致病菌的耐药分析

目的了解2003年1月～2005年12月临床住院患者送检的各类标本分离出的大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌,金黄色葡萄球菌的耐药性及变化趋势.方法采用Kirby-Bauer纸片扩散法进行药敏试验,按照美国临床实验室标准化委员(NCCLS)标准判断.结果大肠埃希氏菌最敏感的抗生素为丁胺卡那总耐药率为10.5%.铜绿假单胞菌最敏感的抗生素为氟哌酸总耐药率为13.7%.金黄色葡萄球菌最敏感的抗生素为先锋V号总耐药率为25.1%.3种菌株均有对抗菌素的耐药性呈逐年上升的变化趋势.结论坚持对细菌耐药监测,采取合理选用抗菌药物.     

头孢西酮钠的体外抗菌活性

目的评价头孢西酮钠(第1代头孢类抗生素)对临床分离社区感染细菌的体外抗菌活性。方法头孢西酮钠与头孢唑啉钠、头孢氨苄、头孢呋辛钠、阿奇霉素作比较,用纸片药敏法进行药物敏感性试验,用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度。结果对肺炎链球菌、β溶血链球菌、甲氧西林敏感的金黄色葡萄菌和凝固酶阴性的葡萄球菌,4种头孢菌素均显示良好的抗菌活性,均优于阿齐霉素。其中,头孢西酮钠对肺炎链球菌的MIC50分别为头孢唑啉钠和头孢呋辛钠的1/2、头孢氨苄的1/8;头孢丙酮钠对β溶血链球菌的MIC50为头孢氨苄的1/4;其对葡萄球菌的MIC50分别为头孢唑啉钠的1/2、头孢氨苄的1/16、头孢呋辛钠的1/4。4种头孢菌素和阿齐霉素对流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌的敏感性,都在96.4%以上。结论头孢西酮钠对社区呼吸道和泌尿道感染中常见致病菌,均有较好的抗菌活性。     

窄谱抗生素头孢磺啶钠的研究进展

铜绿假单胞菌致病性较强,在临床上的危害很大,现有治疗药物由于抗菌谱较广,容易导致菌群失调,进而造成二重感染。头孢磺啶钠属窄谱抗生素,抗铜绿假单胞菌专属性好。但近年研究发现,铜绿假单胞菌对头孢磺啶钠亦产生了耐药性,因此解决铜绿假单胞菌耐药性的问题仍任重而道远。     

GC法测定头孢西酮钠中二甲基甲酰胺的限量

目的建立GC法测定二甲基甲酰胺限量的方法。方法气相顶空进样法,程序升温,Variancp7596石英毛细管柱,丁酮为内标物质,以1,3-二甲基咪唑啉酮为溶剂进行测定。结果二甲基甲酰胺在12·38~247·65μg范围内线性关系良好,r=0·9998,平均回收率99·4%,RSD=0·7%(n=6)。结论该方法测定二甲基甲酰胺的限量,干扰少,重现性好。     

2002年～2004年我院3种常见致病菌对常用抗菌药物的耐药性分析

目的监测临床常见病原菌对常用抗菌药物的耐药趋势。方法采用K-B纸片法,根据美国临床实验室标准化委员会标准判断结果,应用WHONET-5软件对临床分离细菌的药敏结果进行统计。结果所测细菌1266株,来自我院2002年~2004年各科住院感染患者;易产生耐药性的细菌为金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等。结论及时掌握致病菌谱及耐药现状与趋势非常必要。     

细菌细胞壁组分复合物对小鼠细菌感染的作用

目的:探讨双歧双歧杆菌完整肽聚糖(BbWPG)和细菌裂解物(BbBL)分别与金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌及流感嗜血杆菌的细菌裂解物优化组合成复合物对细菌感染小鼠的保护作用。方法:分别以化学提取法、超声破碎法及酶解法获得细菌细胞壁组分。用大肠埃希菌或金黄色葡萄球菌攻击,经BbWPG组和BbBL组复合物免疫的小鼠,记录小鼠存活情况,并作病理检查。结果:BbWPG组和BbBL组复合物对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌攻击小鼠的存活率分别为6/10、11/12和7/10、8/11,与对照组比较差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。2组复合物都能刺激脾脏的淋巴小结活跃增生。结论:2组细菌细胞壁组分复合物都具有对细菌感染的保护作用。     

13种中药材提取物体外抗菌活性筛选

目的:研究比较13种常见中药材80%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)、大肠埃希菌(Escherichiacoli,EC)和白色念珠菌(Candida albicans,CA)的抑制作用。方法:通过旋转蒸发仪减压蒸馏将13种常见中药材的80%乙醇冷浸提取物浓缩制备成干浸膏,琼脂打孔法测量其抑菌圈直径,微量液体培养基倍比稀释法测定其最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal/fungicidal concentration,MBC/MFC),测定这13种中药材粗提物对临床常见4种病原菌的体外抗菌活性。结果:鸡冠花、大狼毒、川明参、巴戟天、白茅根、一支箭对13株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的MIC/MBC值,除个别菌是12.5 mg·mL-1,其他MIC值都在0.09~6.25 mg·mL-1之间;鸡冠花、川明参、荜澄茄对一株标准EC有抑菌活性其MIC/MBC值均在6.25~12.5 mg·mL-1之间;大狼毒、鸡冠花、白茅根、没药、川明参、巴戟天、一支箭对10株耐药PA,其MIC/MBC值在0.78~6.25 mg·mL-1之间;川明参、巴戟天、大狼毒、对7株CA的耐药菌株,其MIC/MFC值在3.12~6.25 mg·mL-1之间。结论:鸡冠花、大狼毒、川明参、白茅根具有广谱抗菌活性,且抑菌活性强弱依次是SA>PA>EC>CA。     

头孢西酮钠定量杂质谱研究

目的利用HPLC色谱杂质谱对头孢西酮钠中杂质进行定量分析和利用液质联用法初步推断主要杂质结构。方法采用18烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以磷酸盐缓冲液(50 mmol·L~(-1)磷酸水溶液,用三乙胺调p H4.0)-乙腈(体积比为85∶15)为流动相,检测波长278 nm,流速1.0 m L·min~(-1),柱温35℃,进样量10μL,检测头孢西酮钠杂质谱;通过HPLC-MS初步鉴定杂质。分别用自身对照法和系统指纹定量法对统一化杂质谱的杂质数目和分布情况以及杂质总含量进行评价。结果根据头孢西酮钠合成路线和HPLC-MS测定结果初步推断5个杂质的可能结构,并测定11个杂质含量。用系统指纹定量法对杂质谱的杂质数目和分布情况及杂质总含量的评价结果基本反应了杂质总量情况。结论系统指纹定量法对杂质数目和含量分布情况及杂质总量评价具有快速便捷的特点,《药物杂质谱数字化定量评价系统》5.0软件能快速计算杂质含量。     

铜绿假单胞菌和大肠埃希菌耐药性动态分析

目的了解我院铜绿假单胞菌及大肠埃希菌在2003和20042年中的耐药变化,以期合理控制抗菌药物使用并指导临床用药。方法以美国DADE BHRING公司Microscan Walkway-40全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏实验方法(微量MIC板),并对2年耐药结果予以统计学处理。结果铜绿假单胞菌总体敏感率较高的是亚胺培南、丁胺卡那等,2年间耐药性变化显著的为环丙沙星。大肠埃希菌较敏感的为亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、丁胺卡那、头孢他啶等,耐药性显著变化的有氨苄西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶。结论临床应重视药敏试验结果,严格控制抗菌药物的使用。     

头孢噻利的药理作用和临床应用进展

头孢菌素类药物具有抗菌作用强,耐青霉素酶、耐β内酰胺酶、临床疗效高、毒性低、过敏反应较青霉素少等优点,因而曾被临床广泛使用.但随着广谱抗生素特别是β内酰胺类抗生素的应用增加,临床上需要有针对革兰阳性菌和革兰阴性菌的强效广谱抗生素.     

国产头孢拉宗钠对临床分离致病菌的体内外抗菌作用研究

目的 研究国产注射用头孢拉宗钠(CFB)的体内外抗菌效果.方法 体外实验采用琼脂二倍稀释法计算细菌的最低抑菌浓度(MIC),体内实验用临床分离大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌,小鼠腹腔注射最小致死量菌液造成全身感染,静脉注射不同剂量的受试药物,观察7d或14 d内小鼠的死亡情况,用NDST程序的Bliss法计算ED50.结果 CFB对G-菌中的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌抗菌作用良好,MIC50为0.25～0.5 μg·mL-1,对G+菌中的金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌呈强抗菌作用,MIC50均为0.5 μg· mL-1,对不动杆菌和铜绿假单胞菌无抗菌活性,体内保护实验显示:国产CFB对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的ED50为5.71、45.00 mg·kg-1.结论 国产注射用CFB对体外多数G+菌效果良好,对金黄色葡萄球菌有强抗菌作用,对G-菌大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌有较强抗菌作用.对腹腔感染大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的小鼠也有显著抗菌效果.     

阿扑西林在小鼠体内抑菌作用研究

目的观察阿扑西林对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的体内抗菌作用。方法以最小致死量的金黄色葡萄球菌(7.5×107个)、铜绿假单胞菌(7.5×107个)腹腔注射感染小鼠,2h后尾静脉注射阿扑西林,1d1次,连续3d,连续7d观察感染小鼠的生存期及致死率。结果感染金黄色葡萄球菌的小鼠生存期为2.83±0.94d,致死率为100%。哌拉西林钠及试品1.33,0.668和0.332g.kg-1的生存期分别为6.25±0.75,6.33±0.78,5.42±1.24和4.42±1.62d(P<0.01),致死率分别为58.33%,50.00%,66.67%和75.00%;感染铜绿假单胞菌的小鼠生存期为2.75±1.06d,致死率为100%,而哌拉西林钠及本品1.33,0.668和0.332g.kg-1的生存期分别为6.33±0.89,6.42±0.79,6.17±1.03和4.83±1.64d(P<0.01);致死率分别为50.00%,41.67%,58.33%和66.67%。结论阿扑西林对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌具有一定的抗菌作用,且在同等剂量下优于哌拉西林钠。     

药物协同抗生物膜研究进展

生物膜是细菌或真菌附着于物体表面所形成的有一定结构和功能的菌细胞群体, 其最显著的特征之一是高度耐药性, 单用一种抗菌药物很难将其完全清除, 而不同种类药物的联合应用可有效清除生物膜。本文 现就近年来针对铜绿假单胞菌、葡萄球菌、大肠杆菌、白念珠菌等常见病原菌生物膜的药物协同干预作用作一综述。     

消淤止痛喷雾剂微生物限度检查方法的建立与验证

目的 建立并验证消淤止痛喷雾剂微生物限度检查的方法.方法 采用常规方法检查消淤止痛喷雾剂的微生物限度,并依据<中国药典>2010年版收载的方法进行验证.结果 该供试品共接种5株阳性试验菌株,常规法检查大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉菌的加菌回收率均高于70%,故细菌、真菌及酵母菌总数应采用常规法进行测定.金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌常规法:试验组及菌液组检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌;阴性对照组及稀释液对照组未检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌,说明使用常规方法可检出金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌,具有专属性.结论 采用常规方法检查消淤止痛喷雾剂微生物限度可行.     

蒜头抑菌能力的调查研究

目的:了解湛江市各个菜市场及超市销售蒜头的抑菌能力.方法:制备蒜头提取液,采用琼脂稀释法检测蒜头提取液的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC).结果:蒜头的提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和白色念珠菌的MIC范围分别为8～256 μg/mL、8～256 μg/mL、16～512μg/mL和4～64.μg/mL.MIC的平均值分别为60.5μg/mL,89.5 μg/mL、139 μg/mL和20.75 μg/mL.结论:本地区的蒜头提取液的抑菌能力参差不齐,但都有一定的抑菌能力.     

Ocimum basilicum: Antibacterial activity and association study with antibiotics against bacteria of clinical importance

Context: Ocimum basilicum L. (Lamiaceae), popularly known as basil, is part of a group of medicinal plants widely used in cooking and known for its beneficial health properties, possessing significant antioxidant effects, antinociceptive, and others.

Objective: The objective of this study is to determine the pharmacological effects produced on the bacterial strains Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa when standard antibiotics and O. basilicum essential oil are combined.

Materials and methods: The extraction of O. basilicum (leaves) components was done by steam distillation. The Minimum inhibitory concentration (MIC) was calculated using microdilution technique, where the oil concentrations varied from 2 to 1024?μg/mL. The combinations of O. basilicum oil with ciprofloxacin or imipenem were analyzed by the checkerboard method where fractional inhibitory concentration (FIC) indices were calculated.

Results: Ocimum basilicum essential oil, imipenem, and ciprofloxacin showed respective MIC antibacterial activities of 1024, 4, and 2?μg/mL, against S. aureus. In S. aureus, the oil with imipenem association showed synergistic effect (FIC?=?0.0625), while the oil with ciprofloxacin showed antagonism (FIC value?=?4.25). In P. aeruginosa, the imipenem/oil association showed additive effect for ATCC strains, and synergism for the clinical strain (FIC values?=?0.75 and 0.0625). The association of O. basilicum essential oil with ciprofloxacin showed synergism for clinical strains (FIC value?=?0.09).

Conclusion: Ocimum basilicum essential oil associated with existing standard antibiotics may increase their antibacterial activity, resulting in a synergistic activity against bacterial strains of clinical importance. The antibacterial activity of O. basilicum essential oil may be associated with linalool.     

用流式细胞仪分析抗生素后效应中细菌的生物学特征

目的　了解亚胺培南、环丙沙星、庆大霉素、头孢他啶四种抗生素对大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌抗生素后效应 (PAE)中细菌的大小及核酸含量的改变。方法　将处于亚胺培南、环丙沙星、庆大霉素、头孢他啶后效应中的大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌 ,用碘化丙啶 (PI)染色 ,流式细胞仪检测。结果　亚胺培南、环丙沙星PAE中 ,两种菌体积与核酸含量均增大 ;庆大霉素PAE中 ,两种菌体积与核酸含量不变 ;头孢他啶作用后的大肠埃希氏菌体积、核酸含量增大 ,铜绿假单胞菌没有变化。结论　这些变化与抗生素作用机制有关。用流式细胞仪能快速、直观分析细菌的生物学特征。     

穿心莲内酯对铜绿假单胞菌PAO1诱发小鼠感染模型的体内保护作用研究

目的:考察穿心莲内酯对铜绿假单胞菌PAO1诱发小鼠感染模型的体内保护作用。方法:将左氧氟沙星配比不同剂量穿心莲内酯灌胃给予腹腔注射PAO1菌液复制的小鼠细菌感染模型,以小鼠24、48、72 h死亡率为指标,考察穿心莲内酯对左氧氧氟沙星的协同体内抗感染作用;采用全波长多功能酶标仪在420 nm下测定6个不同浓度(100、10、1、0.1、0.01、0.001μg.m L-1)穿心莲内酯对PAO1 24 h内生长速率的影响。结果:穿心莲内酯可有效提高左氧氟沙星对PAO1细菌感染小鼠模型的存活率(P0.05~0.01),但对体外铜绿假单胞菌PAO1生长无影响。结论:穿心莲内酯可提高左氧氟沙星体内抗PAO1的作用,但该作用与其直接抗菌作用无关。