类风湿性关节炎患者外周血TH1/TH2细胞的研究

目的探讨CD4+TH1/TH2细胞在类风湿性关节炎(RA)发生发展过程中的作用.方法采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)对15例RA患者和30例健康人外周血中T淋巴细胞亚群及CD4+TH1/TH2功能亚型进行检测.结果RA患者外周血中TH1细胞的百分率较正常对照组升高(P＜0.05).结论 TH1细胞介导的细胞免疫可能与RA的发生发展有关.     

微囊化转mIL-12基因细胞介导荷瘤小鼠TH1/TH2的漂移

目的　观察微囊化mIL 1 2基因修饰的 (中国仓鼠卵巢 )CHO细胞皮下移植对荷瘤小鼠TH1 TH2 类细胞因子的影响 ,进一步了解外源性IL 1 2对TH1 TH2 平衡的调节作用 ,同时探讨微囊化基因工程细胞移植治疗恶性肿瘤的可行性。方法　将mIL 1 2基因转染到正常细胞CHO ,然后进行微囊化 ,移植到荷瘤小鼠的皮下。 2 0d后 ,测定小鼠血清TH1 和TH2 类细胞因子IFN γ、IL 2、IL 1 2和IL 4、IL 1 0的水平。结果　经微囊化mIL 1 2基因修饰的CHO细胞皮下移植干预治疗后 ,小鼠血清TH1 细胞因子IFN γ、IL 2、IL 1 2水平明显升高 (P <0 .0 5) ,而TH2 类细胞因子IL 4、IL 1 0则明显降低 (P <0 .0 5)。结论　外源性mIL 1 2促进荷瘤小鼠TH1 细胞的分化 ,使TH1 TH2 向着TH1 方向漂移 ;微囊化基因工程细胞的移植 ,有望替代基因工程药物 ,成为恶性肿瘤生物免疫治疗的平台     

通痹灵总碱对THl／TH2型细胞因子表达的影响

类风湿性关节炎 (RA)是一种常见的以关节滑膜慢性炎症及系统性血管炎为特征的慢性自身免疫功能障碍性疾病。由于T淋巴细胞尤其是CD4 (TH)细胞是滑膜浸润细胞中的主要细胞亚群 ,因此一直被认为与RA有着密切的关系。一般认为TH1及其细胞因子在RA的发病过程中占优势 ,TH1可诱发或加重疾病 ,而TH2可阻止或缓解病情。因此 ,绕过抗原调节TH1 TH2细胞因子平衡是治疗控制RA自身免疫和炎症反应的有效手段之一。中药复方通痹灵 (TBL)由《金匮要略》中桂枝芍药知母汤加减而成 (组方包括桂枝、知母、白芍、防风、水牛角、制马钱子粉、制川乌…     

强直性脊柱炎TH亚群激活及T细胞活化状态研究

目的 :研究强直性脊柱炎 (AS)患者TH1 TH2细胞激活状态及T细胞活化状况 ,探讨其发病机理。方法 :运用流式细胞仪 (CBA)法检测 35例AS患者TH1(INF γ、TNF α、IL 2 )、TH2 (IL 10、IL 5、IL 4 )细胞因子水平以及外周血淋巴细胞CD3 、CD4 、CD8 T细胞、B细胞 (CD19 )、NK细胞 (CD16 5 6 )和CD3 HLA DR 、CD4 HLA DR 、CD8 HLA DR T细胞百分率 ,并与健康对照组比较。结果 :AS患者血浆TNF α水平、IL 2水平均显著低于健康对照组 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,IL 10水平显著高于健康对照组 (P <0 0 5 )。CD3 、CD3 CD8 T细胞百分率显著低于健康对照。CD8 HLA DR T细胞百分率均显著低于健康对照 (P <0 0 5 ) ,CD4 HLA DR T显著高于健康对照 (P <0 0 5 )。结论 :AS患者血浆低水平的TNF α、IL 2和高水平的IL 10提示其体内存在着TH1 TH2平衡的偏移 ;TH1激活程度低下 ,而TH2激活程度增强 ,细胞因子水平的改变尤以TH1细胞因子TNF α改变特别明显。AS患者在多个层面存在细胞免疫功能紊乱     

卡介苗对哮喘小鼠TH1/TH2平衡的影响

目的　探讨卡介苗 (BCG)对哮喘小鼠TH1 TH2平衡的影响。方法　C5 7BL 6小鼠以卵白蛋白 (OVA)致敏激发建立哮喘模型。于第一次抗原激发前 2周以BCG皮内注射干预 ,在最后 1次抗原激发后 4 8h收集支气管肺泡灌洗液 (BALF)和外周血 ,ELISA方法测定外周血清及BALF中IL 5与IFN γ水平 ,并采用三色光流式细胞分析法测定外周血TH1 TH2细胞比。结果　与阴性对照组相比 ,OVA致敏激发组外周血清及BALF中IL 5水平升高而IFN γ水平降低 ,BCG干预组外周血清及BALF中IL 5较OVA致敏激发组低而IFN γ较后者升高 ,与阴性对照组水平相近。此外 ,OVA致敏激发组外周血中TH2 TH1比值 (1.5 7± 0 .5 6 )较阴性对照组 (0 .37± 0 .0 5 )明显增高 (P <0 .0 1) ,BCG干预后TH2 TH1比值 (0 .5 9± 0 .11)较OVA致敏激发组下降 (P <0 .0 5 ) ,同时Tc2 Tc1比值 (0 .6 2± 0 .0 7)也较OVA致敏激发组 (1.15± 0 .18)降低 (P <0 .0 5 )。结论　哮喘小鼠中TH2型免疫应答占优势 ,BCG干预不仅在细胞因子水平 ,也在细胞数量上校正了TH1 TH2失平衡。     

通痹灵总碱对TH1/TH2型细胞因子表达的影响

类风湿性关节炎(RA)是一种常见的以关节滑膜慢性炎症及系统性血管炎为特征的慢性自身免疫功能障碍性疾病.由于T淋巴细胞尤其是CD4(TH)细胞是滑膜浸润细胞中的主要细胞亚群,因此一直被认为与RA有着密切的关系.一般认为TH1及其细胞因子在RA的发病过程中占优势,TH1可诱发或加重疾病,而TH2可阻止或缓解病情.     

类风湿性关节炎患者外周血细胞内IFN-γ和IL-4的三色流式分析

目的　用全血在单个细胞水平上研究类风湿性关节炎 (RA)患者TH1 TH2 细胞因子分泌模式及其与疾病活动程度的关系。方法　用三色流式细胞术检测RA患者外周血细胞内细胞因子IFN γ和IL 4的表达情况。结果　RA患者外周血IFN γ 细胞百分率及IFN γ /IL 4 细胞比值比健康人明显增高 ,IFN γ /IL 4 比值与患者Stoke指数呈正相关 (r=0 .86 10 ,P <0 .0 1)。结论　RA患者外周血中细胞因子分泌模式朝TH1 偏移 ,IFN γ /IL 4 比值与疾病活动性相关 ,TH1 TH2 平衡在RA发病机理及疾病进程中起重要作用     

自身免疫性疾病中T_H1/T_H2细胞平衡

CD4 T细胞能分化成功能不同的TH1和TH2亚群 ,这两类细胞及其特征性细胞因子的平衡受TH分化因素、TH1 TH2细胞间相互作用及TH1 TH2细胞稳定性等的影响 ,并与自身免疫性疾病的发生、发展密切相关。本文就近年来对TH1 TH2细胞特性、功能、平衡的研究及一些自身免疫性疾病中TH1 TH2细胞平衡作一综述     

微囊化转mIFN-γ基因CHO细胞皮下移植促进荷瘤小鼠TH1/TH2的漂移

目的：通过观察微囊化转mIFN-γ基因CHO细胞皮下移植对荷瘤小鼠TH1／TH2类细胞因子的影响，进一步了解外源性IFN－γ对TH1／TH2平衡的调节作用，同时验证微囊化基因工程细胞移植治疗恶性肿瘤的可行性。方法：将mIFN-γ基因转染到正常细胞CHO，然后进行微囊化，移植到荷瘤小鼠的皮下，2周后，测定小鼠血清TH1和TH2类细胞因子IFN－γ、IL－2、IL－12、IL－4、IL－10的水平，并与对照组相比较。同时测量肿瘤的平均直径，以观察肿瘤的生长速度，并观察荷瘤小鼠的生存期。结果：经微囊化转mIFN-γ基因CHO细胞皮下移植干预治疗后，小鼠血清TH1类细胞因子IFN－γ、IL－2、IL－12水平明显升高，而TH2类细胞因子IL－4、IL－10变化不明显；小鼠肿瘤的生长速度明显减慢，生存期明显延长。结论：外源性IFN－γ促进荷瘤小鼠TH1细胞的分化，使TH1／TH2向着TH1方向漂移；微囊化基因工程细胞的移植，有望替代基因工程药物，成为治疗恶性肿瘤的又一新平台。     

TH1/TH2平衡的体外诱导转换及其对嗜酸性粒细胞功能的影响

目的：探索TH1／TH2平衡的体外诱导作用及其对嗜酸性粒细胞（Eos)功能的影响。方法：取人肝素抗凝外周全血，加入结核菌素纯蛋白衍生物（purified proteinderivative,PPD)10μg/ml，培养3，5，7d，用ELISA方法检测上清IL－4和γ－IFN的含量，取3d上清洁培养液加入到肝素抗凝全血中，体外培养72h,IL-5作为阳性对照，用流式细胞术分析CD16阴性细胞群体中CD69的表达和碘化丙啶（PI）的染色情况。结果：应用PPD体外诱导全血产生较高水平的γ－IFN，IL－4含量未测出；培养体系中加人PPD诱导上清液明显抑制了Eos和IL－5活化的Eos CD69的表达并诱导其凋亡，结论：PPD体外成功诱导TH1／TH2平衡的转换。PPD诱导上清液具有活化Eos和诱导其凋亡的作用。     

恶性淋巴瘤患者TH 1/TH 2细胞因子表达水平的研究

目的 探讨恶性淋巴瘤患者血清中TH1/TH2细胞因子变化及其临床意义,为肿瘤的免疫治疗提供实验依据.方法 用流式细胞小球微阵列术(cytometric bead array,CBA)检测92例恶性淋巴瘤患者及70例健康人群血清中γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α仪(TNF-α)、白细胞介素(IL-2、IL-4、IL-5、IL-10)表达水平.结果 92例恶性淋巴瘤患者血清中TH1型细胞因子的水平分别为:IFN-γ(34.26±33.4g)pg/ml、TNF-α(8.17±10.09)pg/ml、IL-2(3.74 4±1.72)pg/ml;TH2型细胞因子的水平分别为:IL-10(6.28±8.56)pg/ml、IL-5(3.53±3.20)pg/ml、IL-4(6.22±7.13)pg/ml.除TNF-α表达水平降低外,其余5项均明显高于健康体检组,差异有统计学意义(P＜0.01).TH1细胞因子IL-2与TH2细胞因子IL-4的比值明显下降(0.78±O.44),与健康体检组(1.09±0.45)比较差异有统计学意义(P＜0.01).IL-10与疾病的进展相关,Ⅲ/Ⅳ期恶性淋巴瘤患者的表达水平为(9.58±13.96)pg/ml,Ⅰ/Ⅱ期的表达水平为(4.77±3.50)pg/ml,二者比较差异有统计学意义(P＜0.01).IFN-γ在大于60岁的恶性淋巴瘤患者中表达水平明显降低,与其他年龄段恶性淋巴瘤患者比较差异有统计学意义(P ＜0.05).结论 恶性淋巴瘤患者血清中TH1/TH2细胞因子平衡失调,检测TH1/TH2细胞因子可作为评价淋巴瘤临床进展及预后指标.TH1/TH2平衡向TH2方向漂移,这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸,从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一.     

呼吸道合胞病毒下呼吸道感染TH亚群功能状态的研究

目的 探讨RSV下呼吸道感染TH亚群功能状态。方法 用单克隆抗体双色免疫荧光PE／FITC双标记，流式细胞仪检测30例RSV下呼吸道感染患儿急性期外周血单个核细胞（PBMCs)辅助性T淋巴细胞CD4^ 及其亚群CD4^ CD8RA^ 、CD4^ CD45RO^ 的表达，ELISA方法检测血清中IFN－γ、IL－4，IgE水平。结果 RSV下呼吸道感染组患儿外周血辅助性T淋巴细胞CD4^ 明显低于对照组（P＜0．05），CD4^ CD45RA^ 细胞明显下降（P＜0．05），CD4^ CD45RO^ 细胞虽有下降，但与对照组相比无统计学差异（P＞0．05）。CD4^ CD45RA^ /CD4^ CD45RO^ 比值与对照组相比明显降低（P＜0．05）。RSV下呼吸道感染组患儿血清中IFN－γ，IL－4水平均有降低，其中IFN－γ水平下降非常明显（P＜0．01），IFN－γ/IL-4比值降低（P＜0．05）。RSV下呼吸道感染组患儿血清中IgE水平明显升高。结论 婴幼儿RSV下呼吸道感染急性期的免疫功能紊乱主要表现为辅助性T淋巴细胞CD4^ 及其亚群CD4^ CD45RA^ /CD4^ CD45RO^ 的失衡。TH1及其功能下降，TH2及其功能相对增强，TH1／TH2失衡是导致该病发生TH2样反应重要的免疫机制。     

TH1型/TH2型细胞因子对滋养层及蜕膜内分泌功能的影响

目的　探讨辅助T细胞 (TH) 1型 / 2型细胞因子对人绒毛组织及蜕膜组织内分泌功能的影响。方法　应用新鲜绒毛组织和蜕膜组织建立体外分泌人绒毛膜促性腺激素 (hCG)及催乳素(PRL)的模型。hCG及PRL的分泌水平应用放免法 (RIA)进行分析测定。结果　TH1型细胞因子γ干扰素 (IFN γ)在一定的浓度范围内 (10～ 10 0 0ng/ml)对绒毛组织分泌hCG有明显的抑制作用 (P <0 .0 1) ;而TH2型细胞因子白细胞介素 4 (IL 4 ) (1～ 10ng/ml)则有明显的促进作用 (P <0 .0 1)。TH1型细胞因子IFN γ低浓度时 (1～ 10ng/ml)对蜕膜组织分泌PRL有刺激作用 (P <0 .0 5 ) ,高浓度时 (10 0～10 0 0ng/ml)则有抑制作用 (P <0 .0 1) ;TH2型细胞因子IL 4对PRL分泌的调节作用与对hCG分泌的作用相类似。结论　TH1型 /TH2型细胞因子可能通过影响滋养层及蜕膜内分泌功能而在早期妊娠中起重要的免疫调节作用。     

肾综合征出血热患者TH1/TH2、Tc1/Tc2亚群比例及有关细胞因子变化的研究

目的：探讨肾综合征血热（HFRS）患者TH1样和TH2样细胞平衡状态以及血清中细胞因子的变化，方法：收集HFRS患者和健康个体血清，采用夹心ELISA方法测定IFN－γ、IL－4和TNF－α的水平，分离PBMC，采用三色流式细胞术分析HFRS患者CD4^ T细胞和CD8^ T细胞中IFN－γ^ 和IL－4^ 细胞的百分率。观察HFRS患者TH1／TH2，Tc1/Tc2比例的变化，比较了不同病程和病情HFRS患者血清中上述指标的变化，结果：HFRS患者血清中TH1类和TH2类细胞因子水平均明显升高，其中IFN－γ和IL－4的平均水平显著高于健康个体（P＝0．016，P＝0．019）。HFRS患者PBMC中TH1、TH2、Tc1,Tc2细胞的平均百分率均高健康个体Tc细胞比例的改变较TH细胞明显，TH1样细胞的比例较TH2样细胞变化明显。发热期患者血清中IFN－γ、IL－4和TNF-α的水平明显升高于恢复期患者，发热期的重症患者的IFN－γ水平升高较轻症明显。结论：HFRS患者血清中IFN－γ和IL－4水平以及PMBMC中TH1、TH2、Tc1和Tc2细胞的比例均有所升高，发热期的患者和重症HFRS患者上述参数变化更明显，表明感染机体总体的免疫平衡偏向TH1类。     

Flt3配体促进再生障碍性贫血患者淋巴细胞向TH1表型分化

目的　探讨Flt3配体 (FL)对再生障碍性贫血 (AA)辅助性T细胞 (TH)分化的影响及与造血功能衰竭的相关性。方法　应用流式细胞仪分析AA患者骨髓及外周血中TH 亚群 ,并观察植物血凝素 (PHA)和白细胞介素 2 (IL 2 )对AA患者TH 亚群影响 ;体外培养研究FL对骨髓和外周血T细胞分化及细胞因子分泌的作用。结果　AA患者骨髓及外周血中TH1细胞比例明显增高 ,且以急性AA更为显著 (P <0 .0 1) ,TH1与TH2细胞比例失衡 ,TH1 TH2比例显著高于正常对照 (2 .1± 0 .8和 1.4± 0 .7,P <0 .0 5) ;AA及正常人淋巴细胞经PHA和IL 2激发后TH1比例并无明显变化 ,而正常人骨髓细胞经与FL共同孵育 10d后 ,培养上清中IFN γ含量增高 ,表型分析提示 ,除TH1细胞比例增加外 ,树突状细胞及自然杀伤细胞阳性率也有明显增加。结论　FL通过树突状细胞诱导淋巴细胞向TH1表型分化 ,是AA造血功能衰竭的原因之一。     

甲基强的松龙对哮喘患儿PBMC分泌TH源性细胞因子的影响作用研究

目的　了解皮质激素对哮喘患者TH1/TH2功能失衡的调节作用 ,探讨其治疗哮喘的机制。方法　将临床 30例哮喘患儿随机分为甲基强的松龙 (MP)治疗组和对照组 ,用ELISA法测外周血单个核细胞 (PBMC)细胞因子及血清IgE水平 ,用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)测定细胞因子mRNA表达。结果　MP组临床症状和体征消失时间明显缩短 ;MP对T辅助细胞 (TH)源性细胞因子和血清IgE均有抑制作用 ,但对IL 4、IL 10的抑制作用强于对IFN γ、IL 2的抑制作用 ;MP抑制IL 4mRNA表达程度强于对IFN γ表达抑制。结论　皮质激素可能部分通过调节哮喘患者TH 亚群分泌细胞因子而在治疗中起作用。     

类风湿性关节炎患者外周血TH17细胞测定

目的 探讨新的效应T细胞TH17在类风湿性关节炎(RA)患者外周血的分布及意义.方法 选取PHA或PMA+Ion作为刺激剂,建立流式细胞术胞内细胞因子染色的方法,应用该方法检测了35例活动期、30例稳定期RA患者及正常人外周血TH17和TH1细胞百分率.结果 PlVIA+Ion联合刺激的效果优于PHA.RA患者及正常人T细胞经PMA+Ion刺激后,CD3+CD8-T细胞IL-17表达水平较相应未刺激组显著增加(P<0.05).而不论是否加刺激剂,活动期RA患者外周血CD3+CD8-IL-17+细胞明显多于稳定期,二者均多于正常对照组(P<0.05).RA患者外周血TH1细胞呈现与T<,H>17细胞类似的分布特点.结论 活动期RA患者外周血存在TH17细胞的分布异常,T1H17细胞可作为评价RA患者细胞免疫功能状态的新指标.     

螺旋藻对实验性变应性鼻炎大鼠血清TH1/TH2细胞因子表达的影响

目的　观察螺旋藻对实验性变应性鼻炎大鼠血清TH1 TH2细胞因子表达的影响 ,以探讨其治疗机制。方法　用卵清蛋白致敏大鼠制成变应性鼻炎动物模型 ,口服螺旋藻治疗 ,观察其行为学差异 ;组织病理学方法观察鼻黏膜改变 ;用酶联免疫吸附法 (ELISA)对血清中TH1细胞因子IFN γ、IL 2和TH2细胞因子IL 4、IL 5进行检测。结果　行为学得分 ,阳性对照组 (7.8± 1.0 3)明显高于实验组 (1.6± 1.35 )和正常对照组 (0 ) ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;实验组鼻黏膜炎性反应明显轻于阳性对照组 ;实验组IFN γ、IL 2水平明显高于阳性对照组 ;差异有显著性 (P <0 .0 1) ;实验组IL 4、IL 5表达水平明显低于阳性对照组 ;差异有极显著性意义 (P <0 .0 1)。结论　螺旋藻通过调节TH1和TH2细胞因子的表达 ,纠正失衡的TH1 TH2的细胞因子网络而对变应性鼻炎产生治疗作用。     

妊娠高血压综合征发病中免疫调节机制的研究

目的 探讨T细胞表型亚群及TH1/TH2功能亚群在妊娠高血压综合征(妊高征)发病中的免疫调节机制。方法 选择妊高征患者28例及同期分娩的正常健康产妇20例。植物血凝素(PHA)诱导的外周血T细胞表型及TH1型，TH2型细胞因子分别应用流式细胞仪和ELISA法进行检测。结果 与对照组相比，妊高征患者外周血的CD3^ T细胞变化不明显；轻度患者CD4^ T细胞变化不明显，而中、重度患者则增加明显；CD8^ T细胞随病情加重而逐渐减少。妊高征患者IL-2和IFN-γ水平较正常对照组明显升高，其升高程度与病情加重呈正相关；IL-4水平变化不显著，轻度患者的IL-10水平变化不显著，而中、重度患者明显降低。结论 妊高征的发生可能与CD4^ ／CD8^ T细胞比例失调，以及TH1/TH2功能亚群向TH1偏移有关。     

细胞因子信号抑制因子在支气管哮喘TH1/TH2细胞失衡中的作用

目的 探讨细胞因子信号抑制因子（SOCS）在支气管哮喘（简称哮喘）患儿TH细胞亚群（TH1／TH2）功能失衡中的作用，以及转录因子T-bet和GATA3与TH1／TH2反应的关系。方法 观察20例哮喘患儿及相同数量同龄对照，采用流式细胞术（FCM）检测哮喘患者外周血CD4^＋T淋巴细胞浆中白细胞介素4（IL-4）和γ干扰素（INF-γ）的表达，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和荧光定量聚合酶链反应（real time PCR）测定淋巴细胞SOCS3、SOCS5、T-bet、GATA3 mRNA表达水平。结果 急性发作期哮喘患儿TH1细胞比例显著下降，TH2细胞显著增高（P〈0．01）；哮喘患儿淋巴细胞SOCS3、GATA3 mRNA表达水平显著高于正常同龄对照（P〈0．01），SOCS5、T-bet mRNA表达显著下降（P〈0．01）。结论 SOCS3、SOCS5、T-bet和GATA3表达异常与哮喘患儿TH1／TH2失衡有关，其中SOCS3和SOCS5表达异常可能是重要的因素之一。