孕哺期及断乳后氯化镧暴露对子代大鼠大脑皮质GRP表达和PERK及IRE1磷酸化的影响

目的观察氯化镧(lanthanum chloride,LaCl_3)对大鼠大脑皮质细胞凋亡、葡萄糖调节蛋白(glucose regulated protein,GRP)表达、PKR样内质网激酶(PKR-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)和肌醇需求酶1(inositol requiring enzyme 1,IRE1)磷酸化的影响,研究LaCl_3对大脑皮质产生损害效应的机制。方法 32只成年雌性Wistar大鼠随机分为对照组、2.5、5和10 g/L LaCl_3组,2.5、5和10 g/L LaCl_3组妊娠大鼠从受孕起分别饮用2.5、5和10 g/L LaCl_3蒸馏水溶液,对照组妊娠大鼠从受孕起饮用蒸馏水。LaCl_3组子代大鼠断乳前经母鼠胎盘和母乳染镧,断乳后饮用2.5、5和10 g/L LaCl_3蒸馏水溶液1个月。取子代大鼠大脑皮质,以尼氏染色法检测大脑皮质神经细胞尼氏体表达水平,以流式细胞仪法测定大脑皮质神经细胞凋亡率,采用Western blot法检测大脑皮质GRP78、GRP94、PERK、IRE1、磷酸化的PERK(pPERK)和IRE1(pIRE1)及分别受PERK和IRE1调控的生长迟滞和DNA损伤诱导蛋白(growth arrest and DNA damage inducible protein,GADD)153和JUN氨基端激酶(JUN NH2-terminal kinase,JNK)的表达水平。结果各LaCl_3组子代大鼠大脑皮质神经细胞尼氏体表达水平低于对照组(P0.05),而细胞凋亡率高于对照组(P0.05),且均具有一定的剂量-效应关系。2.5 g/L LaCl_3组子代大鼠大脑皮质GRP78、GRP94、pPERK、pIRE1、GADD153和pJNK表达水平高于对照组(P0.05),5 g/L LaCl_3组子代大鼠大脑皮质GRP78、GRP94、pPERK、pIRE1、和GADD153表达水平高于对照和2.5 g/L LaCl_3组(P0.05),10g/L LaCl_3组子代大鼠大脑皮质GRP78、GRP94、pPERK、pIRE1、GADD153和pJNK表达水平高于对照、2.5 g/L和5 g/L LaCl_3组(P0.05)。结论 LaCl_3对大鼠大脑皮质的毒性效应机制可能涉及GRP78和GRP94表达上调、PERK和IRE1磷酸化水平升高所致凋亡增多。     

高流量鼻导管氧疗联合氨溴索对ARDS大鼠肺氧化应激损伤的保护作用

目的 研究高流量鼻导管(high-flow nasal cannula,HFNC)氧疗联合氨溴索(ambroxol,AMB)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的ARDS大鼠肺氧化应激损伤的保护作用。方法 实验分为正常对照组、ARDS对照组、HFNC氧疗组、AMB治疗组、联合(HFNC+AMB)治疗组。用LPS“两次打击”法建立ARDS大鼠模型,观察五组大鼠肺指数和肺组织病理变化,比色法检测肺组织MDA含量及SOD、GSH-Px活性,qPCR法检测肺组织Nrf2、HO-1和NQO1mRNA的表达,Western blot及免疫组化法检测肺组织Caspase-3水平。结果 HFNC氧疗组、AMB治疗组、联合(HFNC+AMB)治疗组均能降低肺指数,减轻肺组织病变;下调肺组织MDA含量及上调SOD、GSH-Px活性(P＜0.05);提高Nrf2、HO-1和NQO1mRNA水平(P＜0.05);减少Caspase-3表达(P＜0.05)。结论 HFNC氧疗、AMB治疗及二者联合干预的方式通过上调抗氧化应激Nrf2-HO-1/NQO1信号通路,抑制LPS所致的过度氧化应激反应,发挥对ARDS的治疗作用,且HFNC氧疗联合AMB的干预效果最佳。     

美满霉素对阿尔茨海默病模型大鼠认知功能的影响研究

目的 观察美满霉素对阿尔茨海默病模型（AD）大鼠认知功能和前额叶皮质葡萄糖调节蛋白（Glucose - Regulatedprotein 78,GRP78）和C/EBP同源蛋白( C/EBPhomologousprotein,CHOP）的表达的影响,探讨美满霉素对AD大鼠脑保护作用的机制。方法 侧脑室注射Aβ25-35建立AD大鼠模型。健康雄性 SD 大鼠随机分成对照组、模型组和美满霉素(50 mg/kg)治疗组。Morris水迷宫和跳台仪检测认知行为学改变,免疫荧光组织化学法和Western blotting法检测前额叶皮质GRP78与CHOP蛋白的表达,TUNEL法检测前额叶皮质神经细胞凋亡。结果 行为学检测结果显示,美满霉素可以明显改善侧脑室注射Aβ25-35导致的大鼠学习记忆障碍,提高认知功能;免疫荧光组织化学法和Western blotting法检测结果显示,与对照组比较,模型组大鼠前额叶皮质GRP78与CHOP表达均上调（P＜ 0.01）,与模型组比较,美满霉素治疗组大鼠前额叶皮质GRP78与CHOP表达明显减少（P＜ 0.01）;TUNEL法检测结果显示,与对照组相比,模型组大鼠前额叶皮质神经细胞凋亡数量显著增高（P＜0.05）;与模型组比较,美满霉素治疗组前额叶皮质凋亡细胞明显减少,但高于对照组（P＜0.05）。结论 美满美素可能通过降低AD大鼠脑组织GRP78与CHOP的表达,抑制内质网应激,减少神经细胞凋亡,改善AD大鼠认知功能,发挥脑保护作用。     

IRE1通路在高碘诱导甲状腺细胞凋亡中的作用

目的 观察IRE1通路在高碘诱导甲状腺细胞凋亡中的特征,进一步分析高碘诱导甲状腺细胞凋亡的作用机制.方法 用0(对照)、1、10、50 mmol/L的碘化钾(KI)染毒体外培养的Nthy-ori 3-1细胞,24h后采用流式细胞术检测Nthy-ori 3-1细胞凋亡率,用荧光定量PCR及Western blot检测葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、肌醇需求酶-1(IRE1)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)基因蛋白的表达水平.结果 与0(对照)、l、10 mmol/L KI染毒组相比,50 mmol/L KI染毒组细胞凋亡率升高(P＜0.05);与对照组相比,各染毒组GRP78、IRE1 mRNA表达水平均无统计学差异(P＞0.05),CHOP mRNA表达水平升高(P＜0.05),GRP78、IRE1和CHOP蛋白表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 内质网应激中IRE1通路可能没有参与高碘诱导的Nthy-ori 3-1细胞凋亡过程.     

锰对新生大鼠神经细胞凋亡及葡萄糖调节蛋白78和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白表达的影响

目的 研究不同浓度锰对大鼠神经细胞凋亡及内质网应激信号分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)mRNA与蛋白以及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12(caspase-12)蛋白表达的影响.方法 以出生4～7 d的SPF级Wistar大鼠脑片为模型,分别用0(对照)、25、100、400 μmol/L锰暴露24h.检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量,神经细胞凋亡率以及神经细胞内GRP78、CHOP mRNA和蛋白及caspase-12蛋白的表达.结果 与对照组比较,100和400 μ,mol/L锰暴露组培养液中LDH的释放量均较高,而各浓度锰暴露组大鼠神经细胞凋亡率均较高,差异有统计学意义(P＜O.01);且随着锰暴露浓度的升高,培养液中LDH的释放量和大鼠神经细胞凋亡率均呈逐渐升高的趋势.与对照组比较,100和400 μmol/L锰暴露组神经细胞内GRP78mRNA及各浓度锰暴露组大鼠神经细胞内CHOP mRNA的表达均较高,而100、400 μmol/L锰暴露组神经细胞内GRP78和CHOP蛋白及各浓度锰暴露组大鼠神经细胞内caspase-12蛋白的表达也均较高,差异有统计学意义(P＜0.01);且随着锰暴露浓度的升高,大鼠神经细胞内GRP78、CHOP mRNA和蛋白及caspase-12蛋白的表达均呈逐渐升高的趋势.结论 锰可促使大鼠神经细胞凋亡及GRP78和CHOP表达升高.     

十溴联苯醚诱导小鼠海马神经元细胞氧化应激和凋亡的机制

目的探索十溴联苯醚(PBDE-209)诱导小鼠海马神经元细胞凋亡的潜在机制。方法原代海马神经元细胞和海马神经元细胞系HT-22用0、6.25、12.5、25、50和100μg/mL PBDE-209处理24 h。检测原代海马神经元细胞SOD活性,MDA、NO和GSH的含量,用Annexin V/PI双染法检测海马神经元细胞系HT-22细胞凋亡情况,用免疫蛋白印迹Western blot检测Bax、Bcl-2、CHOP、GRP78、PERK和Caspase-12蛋白表达水平。结果染毒组原代海马神经元细胞和HT-22细胞系细胞存活率显著降低(P0.05)。原代海马神经元细胞MDA、NO含量显著升高(P0.05),GSH含量、SOD活性显著降低(P0.05);原代海马神经元细胞的Bax/Bcl-2比值、CHOP、Caspase-12蛋白表达水平升高(P0.05)。HT-22细胞系GRP78、PERK、Caspase-12表达水平和细胞凋亡率升高(P0.05)。结论氧化应激和内质网应激可能参与PBDE-209诱导的海马神经元细胞凋亡过程。     

内质网应激在妊娠期糖尿病患者中的表达特征及与胰岛素抵抗的关系

目的探讨内质网应激在妊娠期糖尿病患者中的表达特征及与胰岛素抵抗的关系。方法纳入2018年1月-2020年1月在该院进行规律性产前检查及分娩的124例妊娠期糖尿病孕妇为妊娠期糖尿病组,另选取同期入院的120例正常妊娠孕妇为正常妊娠组。留取血清标本,电化学发光法测定空腹胰岛素(FINS)水平,计算稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),并采用酶联免疫吸附试验测定外周血内质网应激相关指标葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及天冬半胱氨酸特异性蛋白酶-12(Caspase-12)表达。比较妊娠期糖尿病组和正常妊娠组FINS,HOMA-IR,外周血GRP78、CHOP及Caspase-12表达,并分析妊娠期糖尿病孕妇FINS、HOMA-IR与外周血GRP78、CHOP及Caspase-12表达的相关性。结果妊娠期糖尿病组FINS、HOMA-IR显著高于正常妊娠组(P0.001)。妊娠期糖尿病组外周血GRP78、CHOP及Caspase-12表达显著高于正常妊娠组(P0.001)。124例妊娠期糖尿病孕妇中,有80例(64.52%)孕妇HOMA-IR≥2.69,纳为胰岛素抵抗组;44例(35.48%)孕妇HOMA-IR2.69,纳为非胰岛素抵抗组。胰岛素抵抗组外周血GRP78、CHOP及Caspase-12显著高于非胰岛素抵抗组(P0.05)。经Pearson相关性分析,发现妊娠期糖尿病孕妇外周血GRP78、CHOP及Caspase-12与FINS均呈正相关(r=0.574、0.478及0.424,均P0.001),与HOMA-IR均呈正相关(r=0.622、0.524及0.470,均P0.001)。结论妊娠期糖尿病孕妇胰岛素抵抗与外周血内质网应激水平密切相关,临床应引起足够重视。     

胰岛素样生长因子-1对高胆红素血症SD大鼠幼崽脑组织Caspase-3表达的影响

目的通过观察SD大鼠幼崽罹患高胆红素血症时在胰岛素样生长因子-1(IGF-1)干预的情况下脑组织中Caspase-3的表达情况,探究IGF-1在胆红素脑病防治中可能发挥的作用。方法选取7日龄的SD大鼠幼崽120只,采用随机的方法分成3个组,即对照组(A组)、高胆红素血症组(B组)、IGF-1干预组(C组),再根据处死时间点的不同(6 h、12h、24 h、48 h和72 h)将其划分成5个子组,每个子组8只。观察各组SD大鼠幼崽的异常神经行为;再依据时间点取各组SD大鼠幼崽脑组织,用HE染色法观察各组SD大鼠幼崽脑组织的病理改变,测定脑组织细胞的凋亡率选用TUNEL检测法,测定Caspase-3的表达情况选用免疫组织化学法。结果 (1)与对照组相比,高胆红素血症组SD大鼠幼崽海马区神经细胞凋亡增加,Caspase-3表达明显升高(P0.05);与高胆红素血症组比较,IGF-1干预组SD大鼠幼崽海马区神经细胞Caspase-3蛋白表达明显降低(P0.05),凋亡减少(P0.05),但其表达和凋亡率仍较对照组偏高(P0.05)。结论 SD大鼠幼崽在罹患高胆红素血症时Caspase-3可能参与了神经细胞的凋亡;IGF-1可能通过下调Caspase-3表达来抑制神经细胞凋亡,从而发挥其对脑组织的保护作用。     

不同类型子痫前期孕妇血清及胎盘组织中GRP78、P53蛋白表达意义

目的:研究不同类型子痫前期孕妇血清及胎盘组织中GRP78、P53蛋白表达及临床意义。方法:选取60例2018年1月～2018年12月本院收治的子痫前期妊娠女性,其中早发型30例(早发组)、晚发型30例(晚发组),同期健康妊娠女性30例为对照组,采集3组妊娠女性血清及胎盘组织,酶联免疫吸附法检测血清GRP78、P53蛋白水平,免疫组织化学染色法检测胎盘组织GRP78、P53蛋白水平,半定量逆转录多聚合酶链式反应检测胎盘组织GRP78及P53 mRNA表达。结果:对照组血清及胎盘组织中GRP78、P53蛋白及GRP78、P53 mRNA水平均低于早发组和晚发组(P0.05);3组胎盘组织中均有GRP78、P53蛋白及GRP78、P53 mRNA表达;对照组胎盘组织GRP78蛋白主要表达黄色和浅棕色,早发组和晚发组多表达深棕色和浅棕色,棕色颗粒水平高高于对照组;P53蛋白主要表达于细胞滋养层细胞。早发组和晚发组胎盘组织中GRP78、P53蛋白阳性表达率高于对照组(P0.05);早发组和晚发组血清及胎盘组中GRP78、P53蛋白及GRP78mRNA、P53 mRNA水平比较无差异(P0.05)。结论:子痫前期孕妇血清及胎盘组织中GRP78、P53蛋白均呈现高表达,提示该蛋白水平变化与子痫前期发病机制存在一定关系。     

下调ZEB2对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的分析下调E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法用ZEB2 siRNA慢病毒和siRNA对照慢病毒感染乳腺癌细胞,应用real-time PCR和Western blot法测定ZEB2水平,应用CCK8法检测细胞增殖活性,应用流式细胞术检测细胞凋亡情况,应用Western blot检测细胞中糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、钙激活中性蛋白酶2(Calpain 2)及剪切型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白水平。结果对照组和siRNA对照组ZEB2 mRNA和蛋白水平,24、48、72及96 h的OD值比较差异均无统计学意义(均P0.05)。ZEB2 siRNA组ZEB2 mRNA和蛋白水平,24、48、72及96 h的OD值均显著低于对照组(均P0.05)。对照组和siRNA对照组乳腺癌细胞凋亡率,乳腺癌细胞中GRP78、CHOP、Calpain 2及Cleaved Caspase-3蛋白水平比较差异均无统计学意义(均P0.05),ZEB2 siRNA组乳腺癌细胞凋亡率,乳腺癌细胞中GRP78、CHOP、Calpain 2及Cleaved Caspase-3蛋白水平均显著高于对照组(均P0.05)。结论下调ZEB2可以通过内质网途径诱导乳腺癌细胞凋亡,抑制乳腺癌细胞的增殖活性,为ZEB2治疗乳腺癌的临床应用提供了依据,为研究ZEB2在乳腺癌发生中的作用机制奠定了基础。     

β淀粉样蛋白对人神经母细胞瘤细胞内质网应激的影响

目的研究β淀粉样蛋白(Aβ_(25~35))对人神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)凋亡过程中内质网应激的影响,探讨在内质网应激过程中未折叠蛋白质反应途径(UPR pathway)在凋亡中的作用。方法将处于对数生长期的细胞分别暴露于含0(对照)、5、10、20、30、40μmol/L Aβ_(25~35)的培养基染毒48 h,采用CCK8法检测细胞活性。将对数生长期的细胞分别暴露于含0(对照)、5、10、15μmol/L Aβ_(25~35)的培养基染毒24、48和72 h。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用Western blotting法检测内质网应激分子伴侣葡萄糖调节蛋白GRP78以及跨膜蛋白活化转录因子-6(ATF-6)、蛋白激酶-1(IRE1α)和RNA-激活蛋白激酶样内质网激酶(PERK)蛋白的表达水平。结果与对照组比较,各浓度Aβ_(25~35)染毒组SHSY-5Y细胞的存活率均较低,差异均有统计学意义(P0.05);且随着Aβ_(25~35)染毒浓度的升高,SHSY-5Y细胞的存活率呈下降趋势。与对照组比较,各浓度Aβ_(25~35)染毒组SHSY-5Y细胞的凋亡率均较高,除5μmol/L Aβ_(25~35)染毒24 h外,差异均有统计学意义(P0.05);且随着Aβ_(25~35)染毒浓度的升高和染毒时间的延长,SHSY-5Y细胞的凋亡率均呈上升趋势。与对照组相比,各剂量、时间点Aβ_(25~35)染毒组SHSY5Y细胞内质网ATF-6蛋白的表达水平较高;15μmol/L Aβ_(25~35)染毒24、48 h和各剂量Aβ_(25~35)染毒72 h后SHSY5Y细胞内质网GRP78蛋白的表达水平较高;10、15μmol/L Aβ_(25~35)染毒24 h和15μmol/L Aβ_(25~35)染毒48 h及各剂量Aβ_(25~35)染毒72 h后SHSY5Y细胞内质网IRE-1α蛋白的表达水平较高;15μmol/L Aβ_(25~35)染毒24 h和10、15μmol/L Aβ_(25~35)染毒72 h后SHSY5Y细胞质网PERK蛋白的表达水平较高,差异均有统计学意义(P0.05)。随着Aβ_(25~35)染毒浓度的升高和染毒时间的延长,细胞内GRP78、ATF-6、IRE1α和PERK蛋白的表达水平均呈上升趋势。结论 Aβ_(25~35)可以诱导SHSY5Y神经细胞内质网应激,导致SHSY5Y细胞发生凋亡。     

姜黄素对2型糖尿病大鼠心肌内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78、caspase-12表达的影响

目的探讨姜黄素对2型糖尿病大鼠心肌内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白(glucose regulated protein 78 kD,GRP78)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase-12,caspase-12)表达的影响。方法采用高脂饲料喂养大鼠4周,并一次性腹腔注射35 mg/kg链脲佐菌素建立2型糖尿病模型。造模成功大鼠随机分为模型对照组,姜黄素200、400 mg/kg剂量组和卡托普利(60 mg/kg)组,给药组连续灌胃给药12周。测定各组大鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平及心重指数、心电图;HE染色观察心肌病理变化;Masson染色观察心肌胶原纤维表达水平;免疫组化法检测心肌组织GRP78与caspase-12蛋白的表达。结果与空白对照组比较,模型组大鼠血清FBG、LDH水平升高,心重指数增大,形态学观察发现心肌细胞肥大、细胞间胶原纤维增多,心肌组织中GRP78、caspase-12蛋白表达增加(P<0.05)。与模型组比较,姜黄素400 mg/kg组大鼠FBG、LDH水平降低,心重指数降低,细胞间胶原纤维明显减少,心肌组织中GRP-78、caspase-12蛋白表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素对2型糖尿病大鼠心肌组织具有保护作用,其机制可能与降低血糖,并减少GRP78、caspase-12蛋白表达,阻断内质网应激启动的相关凋亡有关。     

硒甲基硒代半胱氨酸联合紫杉醇通过内质网应激诱导乳腺癌细胞凋亡的分子机制

目的探讨硒甲基硒代半胱氨酸(Se-MSC)联合紫杉醇通过内质网应激诱导三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡及其分子机制。方法MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期;Western blot法检测蛋白表达水平,实时qRT-PCR法检测mRNA的表达水平。SPSS 19.0软件进行统计分析。结果MTT法显示Se-MSC和紫杉醇抑制三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231和人脐静脉内皮细胞HUVEC的增殖;Se-MSC 50μmol/L和紫杉醇10nmol/L作用24h对HUVECs无抑制作用,但对MDA-MB-231细胞具有抑制作用;两种药物联合效果较单独使用增强,Se-MSC联合紫杉醇将MDA-MB-231细胞抑制于G1期(P<0.05)。Se-MSC和紫杉醇联合刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231可上调Bax、活化Caspase-9和Caspase-3表达,下调Bcl-2、前体caspase-3表达和Bcl-2/Bax比值(P<0.05),并激活内质网应激,上调GRP78、Caspase-4和CHOP的mRNA表达。结论Se-MSC联合紫杉醇通过抑制MDA-MB-231细胞增殖,上调Bax、Caspase-9和Caspase-3表达,下调Bcl-2、Pro caspase-3并激活内质网应激,可推测Se-MSC联合紫杉醇诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡,但需要进一步验证。     

四川凉山彝汉农民毒品使用情况及毒品认知的差异比较

摘要:目的 了解凉山彝汉农民毒品使用情况及毒品认知的差异性。 方法 用自拟问卷对凉山毒品泛滥地区的彝汉族农民进行调查,有效调查1 001例（汉族456例,彝族545例）。 结果 汉族农民吸食毒品的比例为7.89%（36/456）;彝族则为17.43%(95/545),组间有统计学差异（χ2=19.85,P=0.00）;吸毒农民的文化程度均以小学、文盲为主,组间有统计学差异（χ2=12.72,P=0.00）。在吗啡、甲基苯丙胺、麻古、K粉、氯胺酮、杜冷丁的认知率上,汉族农民高于彝族农民（P＜0.05）。汉族农民对毒品危害12个问题的正确认识率均高于彝族农民（P＜0.05）。结论 凉山农民人群中吸食毒品的比例较高,且彝汉农民在毒品滥用比例、毒品认知、毒品危害性认识上存在差异,提示政府除了要加强当地农民人群的禁毒教育外,还需按民族采取不同的禁毒方式。     

维甲酸致神经管畸形中牡蛎拮抗神经细胞凋亡的实验研究

目的 探讨维甲酸(retinoic acid,RA)致神经管畸形(neural tube defects,NTDs)中牡蛎拮抗神经细胞凋亡的分子机制。方法 建立NTDs模型并给予牡蛎拮抗,观察神经细胞的凋亡情况及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax与Caspase-3表达的变化。结果 1)RA组神经管上皮细胞凋亡指数明显高于对照组,牡蛎组凋亡指数明显低于RA组(P＜0.05)。2)RA组神经上皮细胞Bcl-2的表达明显低于对照组,牡蛎组Bcl-2的表达明显高于RA组(P＜0.05)。3)RA组Bax与Caspase-3的表达均明显高于对照组,牡蛎组Bax与Caspase-3的表达明显低于RA组(P＜0.05)。 结论 牡蛎可以拮抗RA引起的神经上皮细胞过度凋亡,其机理可能是通过上调Bcl-2的表达和下调Bax与Caspase-3的表达实现的。     

亚慢性镉暴露BALB/c小鼠丝裂原活化蛋白激酶信号通路蛋白在肾损伤中的作用

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase,MAPK）和细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinases,ERK）在亚慢性镉染毒小鼠肾脏损害发生后表达的变化及其意义。方法 21只雌性BALB/c小鼠随机分成3组,高、低剂量染镉组分别腹腔注射CdCl2溶液10.0、2.5 μmol/kg,对照组腹腔注射等量生理盐水,每周3次连续染毒14周。对肾脏进行苏木精-伊红(HE)染色、碘酸雪夫(PAS)染色和胶原纤维染色（Masson染色）,观察肾组织病理变化;免疫印迹(Western blot)法检测肾脏中ERK、p38、c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白及其磷酸化蛋白的表达差异。结果 高剂量染镉组pERK、pp38和pJNK蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),低剂量染镉组pJNK蛋白表达水平高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。镉染毒组的bcl-2、bax蛋白表达水平降低,且bcl-2/bax比值低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。镉染毒组肾小球和肾小管均有损害。结论 CdCl2可能通过调节ERK、JNK和p38蛋白激酶信号相关蛋白表达水平的变化,引发肾脏损害。     

急性肝衰竭大鼠微囊化肝细胞移植后HMGB1的动态变化

目的 本实验将微囊化肝细胞移植人急性肝衰竭大鼠腹腔内,动态观察大鼠肝功能和肝组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达情况和意义. 方法 用D-氨基半乳糖制作大鼠急性肝衰竭模型,随机分成3组:Ⅰ组为生理盐水组,Ⅱ组为裸肝细胞移植组,Ⅲ组为微囊化肝细胞移植组.在6、12、24、48、72、120和168 h,检测各组血生化,用RT-PCR方法检测肝组织HMGB1 mRNA的表达.另取6只正常大鼠样本作为参考值. 结果 各模型组ALT、AST和TBil在6 h就开始上升,24 h均已显著升高(P＜0.05),Ⅲ组ALT、AST和TBil显著下降,与Ⅰ、Ⅱ组比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).各模型组HMGB1mRNA在6 h显著升高(P＜0.01),12 h达高峰,Ⅱ组、Ⅲ组在24 h后表达量较Ⅰ组显著下降,72 h、120 h时Ⅲ组与Ⅱ组比较差异有统计学意义(P＜0.01). 结论 HMGB1可能参与了急性肝衰竭的病理生理过程,微囊化肝细胞移植组明显减少了肝衰竭大鼠肝组织中HMGB1 mRNA的表达,从而减轻肝组织炎症反应并改善肝衰竭大鼠的预后.     

百草枯诱导PC12细胞损害和miR-133b表达的变化

目的 探讨百草枯(PQ)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞毒性作用和对miR-133b表达的影响.方法 以50、100、300 μmol/L PQ分别处理PC12细胞24 h,用噻唑蓝(MTT)法检测PC12细胞毒性;以100、300 μmol/LPQ分别处理PC12细胞24 h,用Annexin V-FITC/P...     

雌激素对去势大鼠SIRT1表达的影响

目的：研究雌激素对去势大鼠大脑、心脏和肝脏等组织中沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）表达的影响,以探讨其抗衰老作用。方法：选取3个月龄Sprague-Dawley（SD）雌性大鼠33只,手术切除大鼠双侧卵巢以建立大鼠去势模型,以部分模拟更年期的某些病理生理改变,分为实验组、去卵巢对照组和假手术对照组（每组各11只）,实验组灌胃给予雌二醇（E2）,去卵巢对照组和假手术对照组给予等量生理盐水,每天1次,共12周。满12周后腹主动脉采血,测定大鼠血卵泡刺激素（FSH）、E2水平,处死大鼠后取大脑、心脏、肝脏等组织。采用逆转录聚合酶链反应实验（RT-PCR）和酶联免疫吸附实验（ELISA）检测各组织SIRT1 mRNA及其蛋白水平,分析比较各组间SIRT1的表达水平。结果：大鼠灌胃12周后,去卵巢对照组FSH水平高于实验组和假手术对照组（P＜0.001）,E2水平低于实验组和假手术对照组（P＜0.001）。在大鼠心脏、肝脏和脑组织中,实验组和假手术对照组SIRT1蛋白及mRNA水平均高于去卵巢对照组（P＜0.05）,实验组和假手术对照组SIRT1蛋白及mRNA水平差异无统计学意义（P＞0.05）。在实验组和假手术对照组中,心脏SIRT1蛋白水平高于肝脏和脑组织（P＜0.05）,肝脏组织SIRT1蛋白量高于脑组织（P＜0.05）;而去卵巢对照组的心脏和肝脏组织SIRT1蛋白水平高于脑组织（P＜0.05）,但心脏和肝脏组织SIRT1蛋白水平差异无统计学意义（P＞0.05）。3组心脏和脑组织SIRT1 mRNA水平均低于肝脏组织（P＞0.05）。结论：雌激素可显著提高去势大鼠SIRT1蛋白及mRNA水平,进而发挥其抗衰老作用。