化妆品原料眼刺激性替代方法分层筛选模型的建立

目的建立化妆品原料眼刺激性的体外替代方法分层筛选模型。方法应用鸡胚绒毛膜尿囊膜试验(HET-CAM)、鸡胚绒毛膜尿囊膜-台盼蓝染色试验(CAM-TBS)、中性红摄取试验(NRU)、红细胞溶血试验(RBCH)、荧光素漏出试验(FLT)及离体兔眼试验(IRET)6种体外替代方法对30种化妆品原料的眼刺激性进行检测,将检测结果与Draize试验结果进行比对(指标为灵敏度、特异度和ROC曲线下面积),根据6种替代方法分别在区分有无刺激性、有无腐蚀性两个级别的效能设计、建立分层筛选模型,并对模型进行评价。结果 6种方法区分有无刺激性的效能为NRUHET-CAMIRETCAM-TBSRBCH,区分有无腐蚀性的效能为IRETFLTRBCHNRUHET-CAMCAM-TBS。本研究建立并评价的4种模型中,以NRU(第一层)和FLT(第二层)组成的分层筛选模型具有最好的检测效能[Mc Nemar-Bowker检验,W=3.0(P=0.392),Gamma=0.85(P0.001),Kappa=0.76(P0.001),分级一致率为83.3%]。结论鉴于由NRU和FLT组成的分层筛选模型与Draize试验分级结果比较具有很高的相关性和分级一致性,检测效能明显优于单一替代方法,因此更适合检测化妆品原料的眼刺激性。     

眼刺激试验离体替代方法研究进展

因眼刺激试验评分系统主观性较强。为此相继建立了一系列以离体眼、角膜、鸡胚绒毛膜尿囊膜及培养组织细胞等为材料的离体实验方法替代眼刺激试验 ,并对这些方法进行了深入的评估分析。本文就近年眼刺激试验离体替代方法和评价准则等研究进展进行了综述     

鸡胚尿囊绒膜试验检测化妆品的刺激性

目的研究鸡胚尿囊绒膜-苔盼蓝吸收(CAM-TB)试验作为体内眼刺激试验(Draize test)的替代方法检测化妆品产品时眼刺激性的可行性.方法用该方法对17种化妆品的刺激性进行检测,与Draize test的结果进行比较,作相关性分析.结果 CAM-TB与Draize test的相关系数为0.937?5.结论 CAM-TB试验可作为Draize test眼刺激试验的一种替代方法,用于评价化妆品对眼刺激性.     

鸡胚应用于化学品眼刺激替代试验方法及评价标准初探

传统的动物眼刺激实验存在着评分系统主观性、动物个体差异等问题,因此相继建立了一系列替代眼刺激试验方法,其中绒毛膜尿囊膜试验是眼刺激性试验替代方法中广泛使用的模型之一,本文就此介绍以绒毛膜尿囊膜为替代材料的实验方法和评价标准。     

鸡胚绒毛膜尿囊膜试验应用于抗菌洗液类产品毒性初筛研究

目的通过观察抗茵洗液类产品对鸡胚绒毛膜尿囊膜（CAM）的毒性作用,探讨鸡胚绒毛膜尿囊膜试验方法（HET—CAM）用于该类产品初筛的可行性。方法采用HET—CAM和家兔阴道黏膜试验方法（动物试验）,分别对18种抗茵洗液类产品进行检测,分析2种方法试验结果的相关性和一致性。结果分别采用2种方法对18种抗茵洗液类产品进行检测,结果显示HET—CAM分级结果中有13个结果与动物试验结果一致,灵敏度为100．00％（6／6）,特异度为58．33％（7／12）,阳性预测值为54．55％（6／11）,阴性预测值为100．00％（7／7）,分级相关性为Gamma=1．000（P〈0．01）,一致性为Kappa=0．483（P〈0．05）,ROC曲线下面积A=0．896,Std=0．076,P=0．008。结论HET．CAM对受试物的刺激性分级与家兔阴道黏膜试验具有较好的相关性和一致性,适合用于抗茵洗液类产品的初筛。     

荧光素漏出试验检测化妆品眼刺激性的初步验证

目的初步验证荧光素漏出试验(FLT)替代家兔眼刺激试验用于化妆品行政许可检验的可行性。方法用荧光素漏出试验对20份化妆品进行检测,以受试物处理后4h所引起荧光素漏出20%时受试物浓度(FL20H4)作为刺激分级标准,与《化妆品卫生规范》(2007年版)中家兔眼刺激试验分级标准进行相关性比较。结果 FLT能有效筛选出重度刺激物,FLT分级与规范要求做30s冲洗产品的家兔眼刺激试验分级有较好的一致性,两者间校正Spearman等级相关系数rs为0.694(P<0.05),Pearsonχ2值为16.343(P<0.01);对规范要求做4s冲洗的染发剂类产品,FLT法中仅20mg/mL FL20H4值与兔眼刺激试验结果有一定的相关性。结论荧光素漏出试验有望成为我国现行化妆品行政许可检验体外替代方法之一。     

鸡胚尿囊膜苔盼蓝染色试验替代兔眼刺激试验的研究

目的评价鸡胚尿囊膜苔盼蓝染色试验（CAM—TBS）替代动物眼刺激试验（Draizetest）的可行性。方法在本实验室建立CAM—TBS试验方法，对已知刺激性分级的26种化学物质和未知刺激性分级的20种化妆品产品进行刺激性测评，化妆品检验样品同步进行Draize试验，然后将2种试验的分级结果进行比较，以分析判断2种方法分级结果的相关性和一致性。结果对所选的26种化学物质及其因不同受试浓度而形成的36个刺激性分级，CAM—TBS与Draize试验有32个分级结果一致，两者间等级相关性为Gamma=0．990（P〈0．01），分级一致性为Kappa=0．833（P〈0．01）：而对于20种化妆品产品，CAM—TBS刺激性分级结果有18个与Draize试验结果一致，两者间等级相关性为Gamma=0．957（P〈0．05），分级一致性为Kappa=0．688（P〈0．01）。结论CAM—TBS对受试物眼刺激性的分级与Draize试验具有较好的一致性，具有替代Draize试验的应用价值。     

两种化妆品原料的短期毒理学安全性评价

目的初步评价两种化妆品原料短期毒理学安全性,探讨测试与评价方法中需要注意的问题。方法以家兔14 d皮肤连续涂抹试验、家兔眼刺激试验评价原料的急性眼刺激性与多次皮肤刺激性;以豚鼠光毒性试验测试豚鼠皮肤一次接触原料,继而暴露于紫外线照射下所引发的皮肤红斑、焦痂和水肿等毒性反应;以体外CHO细胞染色体畸变试验评价原料的致突变性。结果 1号原料多次皮肤刺激性试验结果为中刺激性;家兔眼刺激试验(不冲洗及30 s冲洗)结果为不可逆眼损伤。将其用维生素E油稀释至20%(v/v)、0.5%(v/v)后,其家兔眼刺激试验(不冲洗)结果为轻刺激性。2号原料的多次皮肤刺激试验结果为轻刺激性;豚鼠皮肤光毒试验、体外哺乳动物染色体畸变试验结果均为阴性。结论短期试验测试表明1号化妆品原料有潜在的急性刺激性危害,未发现2号化妆品原料具有强皮肤刺激性、皮肤光毒性和致突变性。     

米非司酮对种植于鸡胚绒毛尿囊膜的人绒毛膜和蜕膜组织培养的影响

为研究人子宫组织的出血现象,将米非司酮8×10~(-3)M滴加到种植于鸡胚绒毛尿囊膜表面的人蜕膜和绒毛膜组织上进行培养观察。结果显示:米非司酮具有明显促进组织生长、抑制组织出血现象产生的作用。提出鸡胚绒毛尿囊膜可做为研究子宫组织出血的实验模型;米非司酮抑制出血的作用,可借鉴到临床用于药物流产后出血副反应的防治。     

复方甘露醇注射液体外溶血、全身过敏、血管刺激性实验研究

目的 了解复方甘露醇注射液是否有溶血、过敏、血管刺激作用,评价其注射用药的安全性.方法 按<化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则>(2005年)进行了体外溶血试验、豚鼠全身过敏试验、家兔血管刺激试验.结果 复方甘露醇注射液对豚鼠未见明显的过敏反应,体外溶血试验结果 为阴性,家兔血管刺激试验结果 为阴性.结论 ...     

红细胞溶血试验作为眼刺激性替代方法的初步研究

目的探讨红细胞溶血试验在化妆品原料和产品眼刺激性检测中的适用性。方法选择已知动物实验眼刺激性分级的23种化学品原料和12个洗发、护发类化妆品产品作为受试物,确定受试物引起绵羊红细胞50%发生溶血时的受试物浓度(LC50值)和血红蛋白变性指数(DI,%),计算L/D值(LC50/DI),以L/D值作为评价标准,进行眼刺激性分级。将红细胞溶血试验刺激性分级结果与动物实验结果进行分级一致性比较,初步分析体外试验的适用性。结果红细胞溶血试验对23种化妆品原料的分级结果与动物实验的分级一致性系数为0.582,而当化妆品原料不包括酸、碱及难溶于水的物质时,一致性系数为0.803。红细胞溶血试验对化妆品的分级结果与动物实验结果具有等级相关性(γ=1.000,P0.001)及分级一致性(κ=0.733,P0.001)。结论与Draize试验比较,红细胞溶血试验具有较好的预测能力,除了酸类、碱类以及难溶性受试物,作为严重眼刺激性化妆品原料和产品评价的筛选方法具有良好的应用价值。     

荧光素漏出试验替代整体兔眼刺激试验的初步研究

目的：探讨荧光素漏出试验（FLT）替代整体动物眼刺激试验（Draize eye irritation test，Draize test）的可能性。方法：用FLT对26种阳性参考物和20种化妆品产品进行检测并分级，化妆品产品同步进行Draizetest，比较分析两种方法受试物刺激性分级结果的等级和分级一致性。结果：对于所检测26种阳性参考物和20种化妆品的刺激性分级，FLT与Draize test之间具有较高的一致性（kappa值分别为0．827和0．571，P均〈0．001）。结论：FLT是一种有效的Draizetest体外替代方法，具有良好的应用价值。     

溶血试验作为眼刺激试验替代方法的研究

目的：使用溶血试验作为体内眼刺激试验（Draize test)的一种替代方法。方法：用该方法对14种化学物的眼刺激性进行检测，得到指标HC50值，与Draize test两种评分标准，即最大平均值（MAS）和24h作用值的结果进行相关性比较。结果：LogHC50与MAS和24h作用值的相关系数分别是0．955和0．944，MAS与结膜评分相关显著。结论：溶血试验可用于替代Draize眼刺激试验。     

育发产品的毒理学安全性评价

目的研究育发产品的毒理学安全性,为相关产品开发利用提供毒理学依据。方法通过急性眼刺激试验、多次皮肤刺激性试验、皮肤变态反应试验、皮肤光毒性试验、Ames试验和体外哺乳动物细胞染色体畸变试验进行毒理学评价。结果新西兰白兔急性眼刺激反应和多次皮肤刺激性反应均为轻刺激级,豚鼠的皮肤变态反应、皮肤光毒性反应均为阴性,Ames试验中各剂量组4种菌株的回变菌落数均小于相应的阳性对照组的2倍,体外哺乳动物细胞染色体畸变试验中各剂量组致畸变率小于阳性对照组,差异有统计学意义(P<0.005)。结论该育发产品仅造成轻微眼刺激和皮肤刺激,无致突变和致畸性,在本试验剂量和观察指标范围内,其作为化妆品是安全的。     

化妆品SIRC细胞短时暴露法试验

  目的  探讨兔角膜上皮细胞体外短时暴露试验方法（STE）用于化妆品原料及化妆品产品动物眼刺激试验替代的可行性及其适用范围。  方法  选择经济合作与发展组织（OECD）数据库中能涵盖无刺激性到重度眼刺激性的18种代表性化学物质以及20种市售化妆品产品,同时进行STE试验和兔眼刺激试验,通过Kappa分析比较2种试验方法结果的一致性。  结果  对于化妆品原料,经Kappa一致性检验,k = 0.826,2种试验结果几乎完全一致（0.81～1.00）。对于化妆品产品,经Kappa一致性检验,k = 0.370,2种方法分级结果一致性一般（0.21～0.40）。对于清洁类产品,经Kappa一致性检验,k = – 0.333,2种方法分级结果一致性极低（< 0.20）,对于护肤类产品,k = 0.796,2种方法的分级结果有高度的一致性（0.61～0.80）。  结论  STE试验适合于预测化妆品原料眼刺激性的分级标识。对于化妆品产品来说,面膜、眼霜和护发素等护肤类产品,预测效果好;清洁类产品和染发剂,假阳性率高,不太适用。     

亿人安~(TM)皮肤黏膜消毒液的毒理学安全性评价

目的探讨亿人安TM皮肤黏膜消毒液使用的毒理学安全性。方法按《消毒技术规范》(卫生部2002年版)进行大鼠急性经口毒性试验、小鼠急性经口毒性试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、家兔急性眼刺激试验、家兔皮肤刺激试验、家兔阴道黏膜刺激试验、豚鼠皮肤变态反应试验。结果亿人安TM皮肤黏膜消毒液对雌、雄性大、小鼠急性经口LD50均大于5 000mg/kg b.wt.;三个剂量诱导PCE微核细胞率与阴性对照组比较无统计学意义(P0.05),嗜多染红细胞/成熟红细胞1;对雌、雄性家兔的急性眼刺激试验未冲洗时急性眼刺激积分指数为0分;对雌、雄性家兔的急性皮肤刺激反应积分为0;对豚鼠致敏率为6.25%;对雌性家兔的的阴道黏膜刺激指数为1.1分。结论亿人安TM皮肤黏膜消毒液大、小鼠急性经口毒性为实际无毒、无致微核作用、无眼刺激性、无皮肤刺激性、属极轻度致敏性物,有极轻度阴道黏膜刺激性,该消毒剂在一定条件使用对人是安全的。     

化学杀虫剂的眼刺激性试验研究

目的研究分析有机磷等杀虫剂的急性眼刺激性。方法分别取受试物0．1ml滴眼,于给药后1、24、48、72h和4、7、14、21d观察兔眼部刺激症状,依据GB15670—1995（农药登记毒理学试验方法》对眼损伤进行评分及分级。结果232个不同类型杀虫剂,除沙蚕毒素类为无刺激性外,70％以上杀虫剂样品对兔眼有不同程度刺激性;其中53％样品为中度以上刺激性,26％样品引起的眼刺激性症状观察至21d仍未恢复。结论多数化学杀虫剂对兔眼有不同程度刺激性,杀虫剂为乳油时刺激性最重,为水剂、可湿性粉剂、悬浮剂时刺激性轻。     

受精鸡卵尿囊绒膜试验作为眼刺激试验替代方法的研究

目的　探讨受精鸡卵尿囊绒膜试验 (HET CAM)是否可作为体内眼刺激试验 (Draizetest)的一种替代方法。方法　用HET CAM的两种方法 ,即显微镜观察 (HET CAMscore)和台盼蓝染色法 (CAM TB)对 14种化学物的眼刺激性进行检测 ,并与Draizetest两种评分标准 ,即最大平均值 (MAS)和 2 4h作用值 (S2 4 )结果进行相关性比较。结果　HET CAMscore与MAS和S2 4的相关系数分别是 0 84 7和 0 779,CAM TB与MAS和S2 4分别是 0 86 2和 0 831。结论　HET CAM可用于替代Draizetest。