骨关节炎软骨细胞中Wnt/β-catenin信号通路调控对骨桥蛋白表达的影响

目的 探讨骨关节炎（0A）软骨细胞中Wnt/β-catenin信号通路调控对骨桥蛋白（OPN）的影响及低密度脂蛋白受体相关蛋白（LRP）-5对OPN表达的调控作用.方法 体外培养人OA软骨细胞和正常软骨细胞,Real Time-PCR法检测β-catenin和OPN在第1代OA和正常软骨细胞中mRNA的相对表达量;取第2代OA软骨细胞,分为LRP-5组和对照组,利用siRNA干扰LRP-5表达后,Real Tirne-PCR和Western Blot法检测LRP-5及OPN mRNA、蛋白相对表达量.结果 第1代OA软骨细胞中β-catenin和OPN mRNA相对表达量均明显高于正常软骨细胞（1.73±0.21比1.05±0.13,2.24±0.25比1.32±0.16）,差异有统计学意义（P＜0.01）.siRNA干扰LRP-5后,LRP组LRP-5和OPN mRNA、蛋白相对表达量均低于对照组（mRNA相对表达量：0.97±0.06比1.34±0.12,1.75±0.21比2.11±0.25,蛋白相对表达量：0.060±0.012比0.130±0.087,0.170±0.021比0.290±0.018）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 OA软骨细胞OPN表达与Wnt/β-catenin信号通路相关,通过干扰LRP-5可调控OA软骨细胞OPN的表达.     

Wnt/β-catenin信号通路与发育和疾病研究进展

Wnt信号通路是参与发育过程的关键信号网络,能够参与组织特化和细胞迁移等的发育过程。Wnt信号通路在成体动物组织内稳态的维持过程中同样发挥着重要的作用,异常的Wnt信号常与多种癌症的发生密切相关。本文概述了近两年来Wnt信号通路的激活机制、与其他功能蛋白和通路间的交互影响及其在发育和疾病方面的最新进展。     

苦参碱对卵巢癌大鼠的干预效果及对Wnt/β-catenin通路的影响

目的 研究苦参碱对卵巢癌大鼠的干预效果及对Wnt/β-catenin通路的影响。方法 选取30只SD健康雌性大鼠,其中10只为正常组,另外20只大鼠建立卵巢癌模型,将建模成功的20只卵巢癌模型大鼠随机分为模型组和苦参碱组各10只。建模成功后苦参碱组大鼠腹腔注射3 mg·kg^-1·d^-1苦参碱,正常组、模型组腹腔注射同剂量生理盐水。对比分析3组大鼠肿瘤质量、腹水容积、血清CA125、HE4、ROMA风险指数,检测模型组和苦参碱组癌细胞凋亡率、增殖率及细胞周期变化,并检测3组大鼠卵巢组织中Wnt/β-catenin信号通路蛋白和下游调控蛋白相对表达量。结果 正常组大鼠无肿瘤、腹水,苦参碱组大鼠肿瘤质量、腹水容积高于模型组大鼠,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、苦参碱组大鼠血清CA125、HE4水平、ROMA风险指数高于正常组大鼠,苦参碱组大鼠血清CA125、HE4水平、ROMA风险指数低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。苦参碱组大鼠卵巢癌细胞增殖率低于模型组大鼠,卵巢癌细胞凋亡率高于模型组,苦参碱组较模型组G0/G1...     

水飞蓟宾胶囊对慢性HBV感染患者肝纤维化Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 探讨水飞蓟宾胶囊对慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染患者肝纤维化的作用,并分析对其Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法 选取2017年6月-2019年12月乌兰察布市中心医院收治的98例慢性HBV感染患者,随机分为治疗组(n=49)和常规组(n=49),常规组患者给予常规保肝药物治疗,治疗组患者在常规组基础上给予水飞蓟宾胶囊治疗,比较治疗前后两组患者肝功能、肝纤维化以及氧化应激指标的变化,记录治疗后36周、72周两组患者HBV DNA水平和谷丙转氨酶(ALT)复常率,并采用酶联免疫吸附法检测治疗前后两组患者血清Wnt3a、β-catenin和DKK1水平。结果 治疗后,治疗组患者ALT、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)水平、透明质酸酶(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(PCⅣ)水平、丙二醛(MDA)水平和白细胞介素(IL)-4、IL-10水平低于常规组(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)水平和干扰素-γ(IFN-γ)水平高于常规组(P<0.05);治疗后36、72周,治疗组患者HBV DNA水平均低于常规组(P<0.05),ALT复常率均高于常规组(P<0.05);治疗后,治疗组患者血清Wnt3a、β-catenin水平低于常规组(P<0.05),DKK1水平高于常规组(P<0.05)。结论 水飞蓟宾胶囊治疗慢性HBV感染可保护患者肝功能,抑制肝纤维化,减轻氧化应激损伤和炎症反应,阻断HBV DNA复制,促进肝功能恢复,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关。     

白血病干细胞与Wnt/β-catenin信号传导通路

白血病被认为是白血病干细胞（LSC）不断克隆分化增殖的结果.白血病的发生发展、复发与耐药的根本原因在于白血病患者体内存在极少数的白血病干细胞.白血病干细胞与正常造血干细胞（HSCs）一样,具有自我更新以及一定的分化能力,两者在调节自我更新与分化的分子机制上的差异,源于与此有关的信号传导通路基因的突变,本文就Wnt/β-catenin信号通路与白血病干细胞之间的联系作一综述,从而有利于针对白血病干细胞进行分子靶向治疗.     

Wnt/β-catenin/c-myc 信号通路活化与肺癌分化及转移的关系研究

目的 研究肺癌组织标本中Wnt、β-catenin、c-myc蛋白的阳性表达率、mRNA和蛋白的相对表达水平与肺癌不同病理类型、不同分化程度、淋巴结转移与否之间的关系.方法 回顾65例肺癌患者的临床资料,以30例正常肺组织标本为正常对照,采用免疫组化染色法检测所有标本中Wnt、β-catenin、c-myc蛋白的阳性表...     

Wnt/β-catenin信号通路相关基因与子宫内膜异位症患者生殖道解脲支原体感染的关系

目的 分析Wnt/β-catenin信号通路相关基因水平与子宫内膜异位症(EMS)患者生殖道解脲支原体(UU)感染的关系。方法 选择漯河市医学高等专科学校第二附属医院2019年1月-2020年1月收治的260例EMS患者,按是否存在UU感染分为UU感染组(n=69)、非感染组(n=191),比较两组患者临床资料和Wnt-7a、β-catenin、Frizzled7、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA表达;Logistic逐步回归分析UU感染与Wnt/β-catenin信号通路相关基因的关系。结果 UU感染组患者年龄高于非感染组(P<0.05),两组子宫内膜异位症生育力指数(EFI)评分、输卵管最低功能(LF)评分、美国生育学会修订的EMT分期标准(r-AFS)分期比较差异有统计学意义(P<0.05); UU感染组Wnt-7a、β-catenin、Frizzled7、MMP-9 mRNA表达均高于非感染组(P<0.05); Logistic逐步回归分析显示Frizzled7 mRNA、Wnt-7a mRNA与EFI评分、LF评分均是EMS患者UU感染的独立影响因素(P<0.05)。结论 EMS合并UU感染患者Wnt/β-catenin信号通路相关基因水平较单纯EMS患者明显上调,其中Frizzled7 mRNA、Wnt-7a mRNA是EMS患者UU感染的独立影响因素,值得临床重视。     

宫颈鳞癌中β-catenin和DKK-1的表达及相关性研究

目的:研究β-catenin蛋白及DKK-1(Dickkopf-1)蛋白在宫颈鳞癌中的表达,探讨两者在宫颈鳞癌侵袭转移中的作用和机制,分析DKK-1表达水平改变时对宫颈鳞癌的侵袭能力和Wnt信号通路活性的影响。方法:应用免疫组织化学染色方法检测54例宫颈鳞癌组织、20例正常宫颈组织中β-catenin的异常表达和DKK-1蛋白的阳性表达,并分析不同宫颈组织临床及病理因素之间的关系。结果:宫颈鳞癌中DKK1蛋白的阳性表达低于正常宫颈组织,而β-catenin蛋白的异常表达高于正常宫颈组织(P<0.01);DKK-1和β-catenin蛋白在宫颈鳞癌中的表达与肿瘤分化程度、临床分期及有无淋巴转移有关(P<0.05)。宫颈鳞癌中DKK1的阳性表达与β-catenin的异常表达呈负相关(r=-0.465,P<0.01)。结论:DKK-1表达的减少或缺失与宫颈鳞癌的发生和发展密切相关,其机制可能与活化Wnt/β-catenin信号通路有关。     

镍精炼烟尘激活Wnt/β-catenin通路诱导人支气管上皮细胞Warburg效应的研究

目的 探讨Wnt/β-catenin通路在镍精炼烟尘诱导人支气管上皮（Beas-2B）细胞产生Warburg效应过程中的作用。方法 采用不同浓度镍精炼烟尘（0、12.5、25.0、50.0 μg/ml）处理Beas-2B细胞24 h，通过CCK-8法检测镍精炼烟尘的细胞毒性，使用乳酸试剂盒检测乳酸分泌量，使用免疫印迹法（Western blot）检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin和Warburg效应相关蛋白丙酮酸脱氢酶激酶1（pyruvate dehydrogenase kinase 1，PDK1）、单羧酸乳酸转运体1（monocarborxylat transporter 1，MCT1）和乳酸脱氢酶激酶A（lactate dehydrogenase A，LDHA）的表达水平。采用通路抑制剂XAV-939处理Beas-2B后以25.0 μg/ml镍精炼烟尘染毒24 h，检测Warburg效应相关蛋白PDK1、MCT1和LDHA的表达水平。结果 与对照组相比，镍精炼烟尘染毒组Beas-2B细胞的相对存活率明显降低，乳酸生成量随着镍精炼烟尘暴露浓度增加而升高（P<0.05），β-catenin及Warburg效应相关蛋白PDK1、MCT1和LDHA的表达水平均见增高且呈剂量依赖关系；Wnt/β-catenin通路抑制剂XAV-939可以抑制Warburg效应相关蛋白的表达（P<0.05）。结论 镍精炼烟尘可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路诱导Beas-2B细胞产生Warburg效应，从而将正常的线粒体氧化磷酸化转变为有氧糖酵解的能量代谢方式，并可能诱导癌症的发生。     

Wnt/β-catenin信号通路激活与宫颈病变研究新进展

Wnt/β-catenin通路是经典的Wnt通路,作为细胞间信号转导通路之一,调控细胞增殖、分化、黏附及凋亡等,在胚胎发育过程中发挥重要作用。Wnt信号通路的异常激活可引起细胞异常增殖、分化而导致肿瘤的发生。此外,Wnt信号通路也是诱导肿瘤细胞发生上皮间质转化（EMT）过程的关键通路之一,从而影响肿瘤的进展和转移。该通路中包含许多信号成员蛋白,其中E钙黏蛋白（E-cadherin）和β-连环素（β-catenin）是该通路的核心因子,并且是构成上皮细胞间连接复合体的关键分子。E-cadherin表达下调和β-catenin表达异位可激活Wnt通路的靶基因,通过降低上皮细胞间的黏附力、增加细胞的增殖及迁移能力,促使上皮细胞发生间质转化。综述Wnt/β-catenin通路激活上皮间质转化的过程及二者与宫颈癌的发生、进展及转归的相关性。     

EpCam与Wnt/β-catenin在结肠癌中的表达及临床病理意义

目的 探讨EpCam与Wnt/β-catenin通路在结肠癌组织中表达分布情况及其临床病理意义,研究两者之间关系.方法 回顾性分析用免疫组化方法检测的60例结肠癌组织、20例癌旁不典型增生组织、60正常结肠黏膜组织内EpCam与Wnt/β-catenin蛋白表达.结果 (1)正常结肠黏膜组织、癌旁组织、癌组织中EpCam阳性表达呈现明显上升趋势,分别为23.5％、62.3％、96.5％;随着正常结肠黏膜组织向癌组织的转化,β-catenin的胞膜表达阳性率依次降低,而胞质表达阳性率则依次增高,在低分化癌组织中甚至出现了核表达,EpCam强阳性表达及Wnt/β-catenin胞质阳性率与肿瘤组织学类型,肿瘤浸润深度,淋巴结转移均有关;(2)发现EpCam与Wnt/β-catenin呈正相关(r=0.653,P＜0.05),(3)高表达EpCam和Wnt/β-catenin患者结肠癌复发率明显增加,5年生存率明显降低.结论 EpCam与Wnt/β-catenin通路在结肠癌存在正相关性,EpCam和Wnt/β-catenin高表达与肿瘤浸润,转移及预后有密切关系.     

细菌性腹膜炎大鼠黏膜炎症因子与应激状态及其Wnt5a/β-catenin信号通路

目的 探讨细菌性腹膜炎大鼠黏膜炎症因子与应激状态及其Wnt5a/β-catenin信号通路的变化。方法 对大鼠建立细菌性腹膜炎模型,并将造模成功的实验性细菌性腹膜炎大鼠分为8 h、16 h、24 h模型组,每组10只,于注射菌液后8 h、16 h、24 h时检测各组大鼠体征变化、血清内毒素,观察腹腔黏膜病理变化,检测黏膜炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,与应激因子超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、活性氧自由基(ROS)水平,并检测黏膜组织中Wnt5a/β-catenin信号通路相关蛋白与mRNA水平。结果 对照组疾病活动指数(DAI)评估、内毒素水平低于模型组;对照组黏膜结构清晰,未见充血水肿、炎症浸润,模型组黏膜上皮细胞有明显坏死脱落,出现水肿、出血,大量炎性细胞浸润;模型组IL-1β、IL-4、IL-6、TNF-α表达高于对照组,IL-10低于对照组(P<0.001);模型组MDA、ROS高于对照组,SOD、GSH-Px低于对照组(P<0.001);模...     

Wnt/β-连环蛋白在骨关节炎信号通路中的作用

骨关节炎是一种以关节软骨退行性改变为特征的疾病,表现为软骨细胞外基质的分解和合成代谢平衡被打破,软骨结构遭到破坏进而出现病理性改变.Wnt/β连环蛋白信号通路在软骨的形成及发育中发挥着重要作用,现就Wnt/β连环蛋白在骨关节炎中作用进行综述,以期为骨关节炎的研究和治疗提供新的思路.     

乙型肝炎病毒感染对Wnt/β-catenin信号通路的影响机制研究

目的探讨研究乙型肝炎病毒(hepatic B virus,HBV)感染对患者Wnt/β-catenin信号通路的影响及其临床意义。方法研究收集西安交通大学第一附属医院2014年8月-2018年8月初治HBV感染患者300例,所有患者均接受肝脏穿刺活检,取得的标本进行石蜡包埋,此为试验组。另外选取100名健康志愿者肝脏组织标本作为对照组。采用高通量实时荧光定量PCR技术、Western blot方法分别检测试验组与对照组患者Wnt以及β-catenin的表达水平。300例HBV感染患者中,有156例患者合并肝硬化为肝硬化组,144例患者未合并肝硬化为非肝硬化组,采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(Polymerase Chain Reaction,PCR)、Western blot法分别检测两组患者的Wnt、β-catenin的表达水平,评估HBV对于Wnt/β-catenin信号通路的影响。结果与对照组相比,试验组患者的Wnt-1以及β-catenin的蛋白质、mRNA表达水平均升高(P<0.05);试验组患者肝脏组织的Wnt-1以及β-catenin表达的阳性率分别为26.0%和25.3%,较对照组的9.0%和8.0%高(P<0.05);与非肝硬化组相比,肝硬化组患者的肝脏组织的Wnt-1以及β-catenin的蛋白质、mRNA表达水平均升高(P<0.05);肝硬化组患者肝脏组织的Wnt-1以及β-catenin表达的阳性率分别为34.0%和32.1%,较非肝硬化组的15.3%和13.2%高(P<0.05)。结论HBV患者的Wnt/β-catenin信号通路相关因素Wnt-1以及β-catenin的表达升高,且Wnt以及β-catenin的表达与HBV感染后肝脏病变进展程度密切关联。     

Wnt／β琏环蛋白在骨关节炎信号通路中的作用

骨关节炎是一种以关节软骨退行性改变为特征的疾病,表现为软骨细胞外基质的分解和合成代谢平衡被打破,软骨结构遭到破坏进而出现病理性改变。Wnt／β连环蛋白信号通路在软骨的形成及发育中发挥着重要作用,现就Wnt／β连环蛋白在骨关节炎中作用进行综述,以期为骨关节炎的研究和治疗提供新的思路。     

梅毒患者Wnt 信号通路的表达及意义

目的探究梅毒患者Wnt信号通路的表达和意义。方法选择2014年3月-2017年12月早期梅毒住院患者97例作为病例组,其中Ⅰ期梅毒患者53例、Ⅱ期梅毒患者44例,选择医院同期健康体检人员50名作为对照组。检测入组研究对象血清Wnt1、β-catenin、DKK1、干扰素-γ(INF-γ)、白介素-18(IL-18)表达情况。结果梅毒Ⅱ期患者血清Wnt1、DKK1表达低于梅毒Ⅰ期患者和对照组,且梅毒Ⅰ期患者低于对照组(P<0.05);梅毒Ⅱ期患者血清β-catenin表达高于梅毒Ⅰ期患者和对照组,且梅毒Ⅰ期患者高于对照组(P<0.05);梅毒患者血清IFN-γ、IL-8水平较对照组升高(P<0.05),且梅毒Ⅰ期患者血清IFN-γ、IL-8水平升高程度优于梅毒Ⅱ期(P<0.05);梅毒患者血清Wnt1、DKK1与IFN-γ、IL-8呈正相关关系,血清β-catenin与IFN-γ、IL-8呈负相关关系(P<0.05)。结论梅毒感染患者Wnt信号通路以及免疫功能出现异常表达,且二者存在一定的相关性,并与患者病程有关。     

硫利达嗪通过抑制Wnt/β-catenin通路逆转宫颈癌HeLa/DDP细胞对顺铂的耐药性

目的探讨硫利达嗪对宫颈癌He La/DDP细胞耐药性的影响及其分子机制,为宫颈癌临床治疗的发展提供新的方向和实验依据。方法实验以终浓度15μmol/L硫利达嗪药物处理He La/DDP细胞24 h为实验组,未经硫利达嗪处理He La/DDP细胞作为对照组。通过CCK-8法检测硫利达嗪对细胞的抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50);通过划痕试验检测细胞的迁移能力,Transwell试验检测细胞的侵袭能力。通过蛋白质印迹法检测细胞中P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1 (MRP1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Snail蛋白和β-链蛋白(β-catenin)的相对表达量。采用荧光素酶报告基因检测Wnt通路活性。结果硫利达嗪能明显降低顺铂药物对He La/DDP细胞中的IC50,能降低He La/DDP细胞侵袭能力和迁移能力。分子水平上,硫利达嗪能降低He La/DDP细胞中耐药蛋白(P-gp和MRP1),增加细胞上皮性标志分子(E-cadherin)同时降低间质性标志分子(Vimentin和Snail)蛋白相对表达水平。进一步研究结果表明,硫利达嗪能抑制He La/DDP细胞中的Wnt通路活性,并降低β-catenin蛋白表达水平。结论硫利达嗪通过抑制Wnt通路,降低He La/DDP侵袭、迁移和上皮间充质转化,从而一定程度上逆转He La/DDP细胞耐药。     

miRNA200a调控二氧化硅诱导小鼠肺上皮细胞Wnt/β-catenin信号通路的相关基因表达

目的观察过表达miRNA200a（miR-200a）重组慢病毒对二氧化硅（SiO2）诱导的小鼠肺上皮细胞株MLE-12细胞中Wnt/β-catenin信号通路的相关基因表达的影响。方法实验分为SiO2对照组（SiO2）、病毒对照组（SiO2＋Lv-NC）、miR-200a病毒组（SiO2＋Lv-miR-200a组）。各组细胞均用终浓度为200 μg/ml的SiO2刺激,培养18 h后,用实时荧光定量PCR（realtime-PCR）和蛋白免疫印迹技术（western blot）检测各组细胞β-链蛋白（β-catenin）、基质金属蛋白酶（MMP）2、MMP9、T细胞因子4（TCF-4）和细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）mRNA和蛋白表达水平。结果miR-200a病毒组MLE-12细胞的miR-200a表达明显高于SiO2对照组和病毒对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。与SiO2对照组和病毒对照组比较,miR-200a病毒MLE-12细胞的β-catenin、MMP2、MMP9、TCF-4和Cyclin D1 mRNA和蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）。 结论过表达miR-200a能够抑制SiO2诱导的小鼠肺上皮细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关基因的表达。     

Wnt/β-catenin信号通路及WNK 1基因在盆腔脏器脱垂发病机制中的作用

目的研究盆腔脏器脱垂(pelvic organ prolapse,POP)患者中Wnt经典信号通路(Wnt/β-catenin通路)、WNK 1基因的表达变化及两者相关性,初步探讨POP发生发展的可能分子机制。方法选择2017年1月至2018年5月在郑州大学第三附属医院因POP行阴式子宫切除术患者27例(POP组),及同期因妇科良性疾病行腹式或阴式子宫切除术患者21例(对照组)为研究对象。术中取子宫两侧主韧带组织,HE染色观察平滑肌束及成纤维细胞,Masson染色观察胶原纤维;WB及PCR检测通路相关蛋白(Wnt16、β-catenin、FZD 5)、WNK 1及Ⅰ型胶原蛋白(COL 1)的表达,并分析其与POP病理特征的关系,同时分析WNK 1基因与Wnt信号通路的相关性。结果①HE染色显示POP组平滑肌束萎缩断裂,成纤维细胞排列紊乱;②Masson染色可见胶原纤维明显受损、含量减少;③Western-blot及Real-TimePCR显示POP组Wnt 16、β-catenin、WNK 1、COL 1等mRNA及蛋白水平均明显下降,FZD 5 mRNA水平表达上升,蛋白水平表达无差异;WNK 1基因与Wnt通路表达趋势呈正相关;随着绝经时间延长及脱垂级别增加,β-catenin、WNK 1及COL 1表达下降。结论 POP的发生发展可能与WNK 1激酶水平及Wnt经典信号通路表达下降有关,β-catenin、WNK 1及COL 1的表达与绝经时间、脱垂程度有关。