加校正因子的主成分自身对照法测定奥美拉唑肠溶胶囊中有关物质的含量

目的:建立加校正因子的主成分自身对照法测定奥美拉唑肠溶胶囊中有关物质的含量。方法: Agilent HC-C₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相0.01 mol·L^-1磷酸氢二钠溶液(用磷酸调节pH至7.6)-乙腈 (75:25),流量1.0 mL·min^-1,检测波长280 nm,柱温35℃,进样量20 μL。测定奥美拉唑和杂质A,B,C,D 的线性方程,以斜率计算杂质相对于奥美拉唑的校正因子,用相对保留时间确定各杂质位置。结果:奥美拉唑杂质A,B,C,D的相对保留时间分别为0.27,0.31,0.41,0.79;校正因子分别为1.20,0.58,0.57,1.04。3批样品中杂质D的含量均为0.022%,其他杂质均低于检测限。结论:该方法简便快速,可准确测定奥美拉唑肠溶胶囊中4种有关物质的含量。     

罗红霉素原研制剂与自研制剂有关物质及降解机制研究

目的 对比研究自研制剂与原研制剂的杂质谱和杂质水平,初步探索罗红霉素的降解机理。方法 采用HPLC考察原研和自研制剂的有关物质,通过LC-MS定位EP系统适用性对照品的11种杂质,进而利用LC-MS对2种制剂的有关物质进行辅助结构确证。进行原研和自研制剂的强制降解实验,通过HPLC对比研究两者的主要降解途径,并利用LC-MS初步鉴定降解杂质的结构。结果 原研制剂检出的主要杂质为杂质F、杂质G、杂质H、杂质I,其中最大单杂为杂质G,含量为0.439%,自研制剂检测到杂质C、杂质D、杂质H、杂质I、杂质J,其中最大单杂为杂质C,含量为0.196%。原研制剂在碱、高温、光照条件下较稳定,强酸条件下主要产生杂质B、杂质D,强氧化条件下生成的杂质未能归属到EP系统适用性对照品的11种杂质中,已通过质谱确定分子量,推测可能为罗红霉素N氧化物。自研制剂主要降解途径及产生的杂质与原研制剂一致。2种制剂加速实验有关物质均无明显变化。结论 由于国产原料药和进口原料药的差异,自研制剂与原研制剂杂质谱不完全一致,自研制剂的杂质水平低于原研制剂。罗红霉素主要降解途径为水解、异构化和N的氧化,分别产生杂质B、D以及N氧化杂质（m/z=853.531 8）。     

加校正因子的主成分自身对照法测定培哚普利片中有关物质的含量

目的 采用加校正因子的主成分自身对照法测定培哚普利片中有关物质的含量。方法 采用GL Inertsil C8-3色谱柱（4.0 mm×150 mm,5 μm）,以流动相A（用50%高氯酸调节pH至2.5的水溶液）和流动相B（0.03%的高氯酸乙腈溶液）进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为215 nm,进样量为20 μL,柱温60℃,测定培哚普利叔丁胺和杂质B、E、F的线性方程,以斜率计算杂质相对于培哚普利叔丁胺的校正因子,用相对保留时间确定各杂质位置。并进行了方法学验证。用相对校正因子计算培哚普利片中杂质B、E和F的含量,并与杂质对照品法测得的结果进行比较。结果 培哚普利杂质B、E和F的相对保留时间分别为0.68,1.14,1.61;校正因子分别为0.77,1.02,1.24;检出限分别为2.24,0.52,1.02 ng;定量限为6.73,1.57,3.06 ng;采用校正因子的主成分自身对照法和外标法测得的结果无显著性差异。结论 该方法简便快速,可准确测定培哚普利片中杂质B、E和F含量。     

依帕司他原料药有关物质的HPLC测定方法改进研究

目的 采用改进的高效液相色谱法测定依帕司他原料药有关物质。方法 采用依利特Hypersil BDS C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-pH6.5磷酸盐缓冲液（0.025 mol·L^-1 KH₂PO₄+0.025 mol·L^-1 Na₂HPO₄,用H₃PO₄调节pH至6.5）为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为396 nm和280 nm,柱温为30℃,进样量为20 μL。结果 依帕司他与相邻杂质能较好地分离。立体异构体杂质在浓度0.010~30 μg·mL^-1内线性关系良好,检测限和定量限分别为0.80,2.4 ng·mL^-1。精密度、稳定性、准确度、耐用性均符合要求。结论 该方法可用于依帕司他原料药有关物质的检查。     

药用辅料苯甲酸苄酯有关物质HPLC检测方法的建立

建立苯甲酸苄酯有关物质的高效液相色谱方法,对该辅料质量标准提出修订建议。方法:用苯基硅烷键和硅胶为填充剂,以甲醇-1%-醋酸（60:40）为流动相,检测波长为254 nm,流速1.0 mL·min^-1,进样量20 μL。结果:根据破坏试验结果,并兼顾分离度要求,确定了苯甲酸苄酯有关物质的色谱条件,并进行了方法学验证。有关物质中杂质苯甲酸和苯甲醛的检测限分别为0.2 μg·mL^-1和0.01 μg·mL^-1,苯甲酸和苯甲醛的校正因子分别为1.0和0.1。按新建方法对4家企业6批次苯甲酸苄酯样品进行有关物质检查,均检出苯甲醛杂质,杂质含量在0.02%~0.1%。杂质总量在0.02%~0.9%。结论:新建立的方法可增订入苯甲酸苄酯的质量标准中,并根据给药途径的不同,制定不同的杂质限度,以便更好的控制药品质量。     

HPLC法测定测定左卡尼汀注射液中的有关物质

目的:建立HPLC法测定左卡尼汀注射液中有关物质的方法。方法:采用Alltima Amino色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值至4.3) (65:35);检测波长为205 nm;柱温为30℃;流量为0.7 mL·min^-1。结果:左卡尼汀杂质A在0.001~0.500 mg·mL^-1范围内线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为100.08%,RSD为1.14%(n=9)。结论:建立的方法灵敏度高,测定结果准确,可用于左卡尼汀注射液中有关物质的测定。     

HPLC测定拉坦前列素滴眼液复杂系统中的有关物质及含量

目的 建立HPLC测定拉坦前列素滴眼液复杂系统中的有关物质及含量的方法。方法 采用糖涂敷型手性色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,有关物质测定以0.005 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH值至2.7）-乙腈（56：44）为流动相,含量测定以0.005 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH值至2.7）-乙腈（54：46）为流动相,检测波长为200 nm,流速为0.5 ml·min^-1。结果 有关物质测定中2个已知杂质与主峰之间的分离度良好,线性关系良好,5,6-反式-拉坦前列素和15S-拉坦前列素的平均回收率分别为101.5%和99.5%,拉坦前列素、5,6-反式拉坦前列素和15S-拉坦前列素的定量限（S/N≈10）分别为0.12,0.13和0.12 μg·mL^-1;含量测定线性关系良好,重复性RSD=0.90%,拉坦前列素平均回收率为98.8%。结论 建立的方法准确可靠,可用于拉坦前列素滴眼液的质量控制。     

HPLC法测定盐酸乌拉地尔原料药中有关物质

目的 建立盐酸乌拉地尔原料药中有关物质的HPLC检测方法。方法 采用Agilent XDB C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm ，5 μm），以0.05 mol·L^-1磷酸二氢铵溶液（含0.02%三乙胺，磷酸调pH值至6.0）为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱；体积流量为1.0 mL·min^-1，柱温为30℃，检测波长为270、236 nm，进样量为10 μL。进行方法专属性、稳定性、检测限与定量限、线性关系、精密度、耐用性考察。应用所建立的方法进行3批盐酸乌拉地尔原料药样品检测。结果 盐酸乌拉地尔与相邻杂质之间、各杂质之间的色谱峰均分离良好；各个组分的检测限和定量限分别为0.059 7～0.090 0 μg·mL^-1、0.198 9～0.299 9 μg·mL^-1。各组分在相应浓度范围内均有良好的线性关系，r均在0.999 8～1.000 0。加样回收率均在92.2%～103.2%，RSD均≤5.37%。3批盐酸乌拉地尔原料药样品检测结果显示，已知杂质质量分数均小于0.15%、最大未知单杂均小于0.10%，杂质总质量分数小于0.50%。结论 经方法学验证，所建立方法灵敏、高效、专属性强、准确度高，可用于盐酸乌拉地尔原料药有关物质的测定。     

HPLC测定赛利司他有关物质及降解产物

目的 建立HPLC测定赛利司他有关物质的方法。方法 采用Agilent Phenyl色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以5 mmol·L^-1磷酸二氢钾（用10%磷酸调pH值至4.0）-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为226 nm。结果 各杂质与主峰之间的分离度良好。开环杂质（杂质A）、2-十七烷基氧-6-甲基-4氢-3,1-苯并噁嗪-4-酮（杂质B）、2-十八烷基氧-6-甲基-4氢-3,1-苯并噁嗪-4-酮（杂质C）浓度分别在0.049 5~1.981 μg·mL^-1,0.059 9~0.399 1 μg·mL^-1,0.059 6~0.397 5 μg·mL^-1内与峰面积呈良好的线性关系,r均为0.999 9;杂质A、B、C加样回收率的平均值分别为104.2%,107.0%和107.8%,RSD分别为2.09%,1.77%和2.18%。结论 本方法简便、准确可靠,适用于赛利司他中有关物质的控制。     

基于转基因血管荧光斑马鱼的芦丁、甘草酸、汉防己甲素、葛根素、柚皮素、鞣花酸、黄芩苷、大黄素、穿心莲内酯、苦参碱促血管新生活性初探

目的 采用转基因血管荧光斑马鱼研究芦丁、甘草酸、汉防己甲素、葛根素、柚皮素、鞣花酸、黄芩苷、大黄素、穿心莲内酯、苦参碱促进血管新生的作用。方法 选取48 hpf转基因血管荧光Fli-1品系斑马鱼3 480尾于六孔板中,每孔均处理30尾(实验组),分别水溶给予芦丁81.90~1 637.95 μmol·L^-1、甘草酸60.76~1 215.17 μmol·L^-1、汉防己甲素5.02~80.29 μmol·L^-1、葛根素120.08~2 161.49 μmol·L^-1、柚皮素3.67~734.59 μmol·L^-1、鞣花酸0.21~3.31 μmol·L^-1、黄芩苷28.00~448.07 μmol·L^-1、大黄素0.19~740.08 μmol·L^-1、穿心莲内酯35.67~570.69 μmol·L^-1、苦参碱50.33~805.28 μmol·L^-1,同时设置对照组(养鱼用水处理斑马鱼),处理24 h后观察记录斑马鱼的毒性表型和死亡情况,确定供试品对斑马鱼的最大耐受浓度(MTC)。用10个化合物的MTC与斑马鱼共培养24 h,检测肠下血管面积和肠下血管出芽数。结果 与对照组比较,芦丁组、甘草酸组、汉防己甲素组、葛根素组、柚皮素组、黄芩苷组、穿心莲内酯组、苦参碱组斑马鱼肠下血管面积像素升高,其中甘草酸组、汉防己甲素组、黄芩苷组、穿心莲内酯组差异显著(P<0.05、0.01、0.001);鞣花酸组、大黄素组斑马鱼肠下血管面积像素降低,差异不显著;芦丁组、汉防己甲素组、葛根素组、柚皮素组、鞣花酸组、苦参碱组斑马鱼肠下血管出芽数比对照组多,芦丁组差异显著(P<0.05);甘草酸组、黄芩苷组、穿心莲内酯组斑马鱼肠下血管出芽数比对照组少,大黄素组斑马鱼肠下血管出芽数与对照组相当。结论 芦丁、甘草酸、汉防己甲素、黄芩苷和穿心莲内酯对斑马鱼具有促进血管新生作用;葛根素、柚皮素、鞣花酸、大黄素和苦参碱对血管新生无明显影响。     

反相高效液相色谱法测定硝酸甘油溶液及其制剂的有关物质

目的探讨测定硝酸甘油溶液及其制剂的有关物质的方法。方法采用高效液相色谱法,用自身对照法测定硝酸甘油溶液及其制剂的有关物质。色谱柱为DiamonsilC18（4.6mm×150mm,5μm）,以乙腈-水（50∶50）为流动相,于波长为215nm处检测。结果硝酸甘油在0.5～11.7μg/ml（A=15262C＋1358.9,r=1,n=8）范围内线性关系良好,仪器精密度实验RSD=1.5%（n=6）,最低检测限为3.12ng/ml。结论采用反相高效液相色谱法测定硝酸甘油及其制剂的有关物质简便快捷,能准确地测定产品的有关物质。     

吡拉西坦有关物质的合成

目的 研究吡拉西坦1个有关物质的合成方法.方法 以4-氨基丁酸为起始原料,经过酯化、磺酰化等6步反应制得中间体4-[N-(9-芴甲氧基羰基)-N-(氨甲酰甲基)]氨基丁酸,最后经哌啶水解生成4-(N-氨甲酰甲基)氨基丁酸.结果 最终产物经核磁共振氢谱(1H-NMR)和质谱(MS)确证结构.结论 本研究合成了1个吡拉西坦的有关物质,作为吡拉西坦的质量研究的重要参照物.     

HPLC检测三苄糖苷中的有关物质

目的 检查三苄糖苷中的有关物质。方法 采用HPLC法,Hypersil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,10 μm),甲醇-水(75∶25)为流动相,流速1.0 ml·min-1,在波长224 nm处采用不加校正因子的主成分自身对照法对有关物质进行检查。结果 杂质与主成分能完全分离,有关物质的限量控制在2.0%以下。三苄糖苷的α体在1.28～25.60μg·ml-1范围内,峰面积与其浓度的线性关系良好(r=0.9998),最低检测限为10.40ng(S/N=3);β体在3.76-75.20μg·ml-1范围内,峰面积与其浓度的线性关系良好(r=0.9998),最低检测限为4.16 ng(S/N=3)。RSD=1.17%(n=6)。结论 通过对流动相强度、检测波长以及进样浓度的考察,建立了检测三苄糖苷中有关物质的最佳条件。     

抗菌药利奈唑胺有关物质的合成

目的合成利奈唑胺的四个有关物质。方法利奈唑胺在碱性条件下五元环水解,再经N-甲酰化、酸化,得到有关物质N-[(2S)-3-乙酰胺基-2-羟丙基]-N-[3-氟-4-(4-吗琳基)苯基]氨甲酸(Ⅰ);利奈唑胺经H2O2氧化,得到其氧化杂质(S)-N-[[3-[3-氟-4-(4-吗琳基)苯基]-2-氧代-5-口恶唑烷基]甲基]乙酰胺氮氧化物(Ⅱ);以N-(3-氟-4-吗啉苯基)氨基甲酸苄酯为原料,与S-正丁酸缩水甘油酯成环,经磺酰化、叠氮化后还原,得到(S)-3-(3-氟-4-吗啉苯基)-5-氨甲基-1,3-口恶唑烷-2-酮(Ⅲ);N-(3-氟-4-吗啉苯基)氨基甲酸苄酯与R-正丁酸缩水甘油酯成环,经磺酰化、叠氮化后还原,再经乙酰化,得到(R)-N-{{3-[3-氟-4-(4-吗啉基)苯基]-2-氧-5-口恶唑基}甲基}乙酰胺(Ⅳ)。结果与结论有关物质Ⅰ~Ⅳ的结构经MS、1H-NM R谱确证,可作为利奈唑胺质量控制的杂质对照品。     

沙库巴曲有关物质的合成

目的为加强对沙库巴曲缬沙坦钠原料药及其中间体的质量控制,合成沙库巴曲的3种杂质A～C。方法以(2R,4S)-5-(联苯-4-基)-4-氨基-2-甲基戊酸乙酯盐酸盐为起始物,经过环合、酰化反应得到杂质A;该起始物经过水解、酯化、酰化和成盐得到杂质B;该起始物经过水解、酯化、酰化和再酯化得到杂质C。结果与结论合成的3种有关物质的结构经~1H-NMR、~(13)C-NMR和HRMS谱确证,HPLC测定纯度均在99%以上,3种杂质可用于沙库巴曲缬沙坦钠原料药的质量研究和质量控制。     

孕二烯酮有关物质的合成

目的为更好地对孕二烯酮原料药质量进行控制,合成孕二烯酮原料药中的2种有关物质。方法以13β-乙基-15α-羟基雌甾-4-烯-3,17-二酮为起始原料,经过3位羰基缩酮化保护、17位乙炔化和水解脱保护基共3步反应,得到有关物质13β-乙基-15α,17β-二羟基-18,19-双去甲基-17α-孕甾-4-烯-20-炔-3-酮,收率为12.1%;该有关物质经乙酰化得到另一种有关物质13β-乙基-17β-羟基-15α-乙酰氧基-18,19-双去甲基-17α-孕甾-4-烯-20-炔-3-酮,收率为72.9%。结果与结论合成了孕二烯酮原料药中的2种有关物质,并经1H-NMR、13C-NMR和MS谱确证结构,2种有关物质的纯度经HPLC检测均在98%以上,可以作为孕二烯酮原料药质量控制的对照品。     

拉科酰胺原料药中有关物质的合成

目的研究拉科酰胺原料药中有关物质的来源及合成方法,为产品质量控制提供依据和杂质对照品。方法在参考拉科酰胺原料药相关合成方法的基础上,以Boc-D-丝氨酸为原料,经多步反应分别制得拉科酰胺的6种有关物质:(R)-2-氨基-N-苄基-3-羟基丙酰胺(A)、(R)-2-乙酰胺基-N-苄基-3-羟基丙酰胺(B)、(2R)-2-(乙酰胺基)-3-(乙酰氧基)-N-(苯甲基)丙酰胺(C)、N-[(1R)-1-(甲氧基甲基)-2-氧代-2-[(苯基甲基)氨基]乙基]-2-甲基丙酯(D)、(R)-N-苄基-2-(3-苄基脲基)-3-甲氧基丙酰胺(E)、(R)-N-苄基-3-甲氧基-2-(N-甲基乙酰氨基)丙酰胺(F)。结果与结论合成的6种拉科酰胺有关物质的结构经~1H-NMR、~(13)C-NMR、HR-MS谱确证,可作为拉科酰胺原料药的杂质对照品,其中有关物质E和F为新化合物。     

阿可拉定的有关物质研究

目的分离纯化阿可拉定(淫羊藿苷,IC-162)的主要有关物质,进行结构确证。方法利用反相硅胶和凝胶柱色谱分离阿可拉定中的2个主要杂质,经化合物谱图数据(LC-DAD、LC-MS、1H-NMR和13C-NMR)鉴定其结构。结果阿可拉定中2个主要杂质分别为8-异戊烯基山柰酚和朝藿素B。结论阿可拉定有关物质的定量和定性研究可以为制定合理的杂质限度提供依据。     

氯硝柳胺中有关物质检查方法的研究

目的 建立氯硝柳胺中有关物质的检测方法。方法 采用高效液相色谱法(HPLC)：Diamonsil(C18柱4.6×250mm，5μm)，乙腈：缓冲液(每1000ml中含磷酸二氢钾2g，磷酸氢二钠1g，四正丁基硫酸氢铵2g)=3∶2为流动相，流速为1ml/min，检测波长为230nm，柱温为室温。结果 本法可检出氯硝柳胺...