PCR与DIBT检测脑脊液结核分支杆菌的价值

应用ＰＣＲ法扩增结核杆菌ＤＮＡ重复序列１２３ｂｐ片段；用酶斑免疫结合技术检测结核分支杆菌抗原成分。结果：结核性脑膜炎患者脑脊液的两项检测阳性率分别为８１％（４３／５３）和７３．５％（３９／５３）。疾病早期ＰＣＲ阳性检出率高于ＤＩＢＴ，中晚期二者有阳性交叉现象。     

聚合酶链式反应与DNA探针检测临床标本中结核分支杆菌的评价

本文应用ＰＣＲ联合ＤＮＡ探针快速检测临床标本中结核杆菌ＤＮＡ。对临床３０７例标本同时进行ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交。     

聚合酶链式反应与DNA探针检测临床标本中结核分支杆菌的评价

本文应用ＰＣＲ联合ＤＮＡ探针快速检测临床标本中结核杆菌ＤＮＡ。对临床３０７例标本同时进行ＰＣＲ和Ｓｏｕｅｈｅｒｎ杂交。其中临床确诊为结核病的１０９例，二者的阳性率分别为４９．６％、６０．６％。未确诊结核病的１９８例，二者均为阳性２例、单纯ＰＣＨ阳性３例。结果表明ＤＮＡ探针检测的灵敏性和特异性高于ＰＣＲ。二者联合使用，有助于对疑难电泳图谱的分析和判断，降低假阴性和假阳性率。     

应用PCR检测脑脊液中结核杆菌的研究

采用Manjunath等设计的一对引物,对人型结核杆菌H_(37)R_v以检测其敏感性为1pg,17种分支杆菌DNA仅人型、牛型及BCG出现240bp扩增带,其它均未出现扩增带.50例结脑csf作PCR检测结核菌与培养、涂片对比,阳性率分别为54%,6%和.8例非结核性脑膜炎均为阴性.结果表明,该引物具有较高的敏感性和特异性.应用PCR方法可以为结核性脑膜炎提供快速、敏感、特异的病原学诊断.     

结核分支杆菌吡嗪酰胺酶活性与敏感性比较试验

本文用Wayne方法测定186株临床分离结核杆菌PZA酶(PZase)的活性和用蛋黄琼脂培养基测定PZA敏感性。结果:PZase阳性符合率93.3％阴性符合100％。测定PZase活性代替PZA敏感性试验是一种快速,简单,可靠的方法。     

PCR法检测在慢性乙型肝炎血清学标志物400例

1993年4月开展了PCR检测慢性乙型肝炎血清的HBVDNA,现报告如下。 1 对象和方法 1.1 对象 我院住院和门诊慢性乙型肝炎患者(诊断符合1990年上海第六次全国病毒性肝炎会议修订的肝炎诊断标准)共400例,其中慢性迁延型肝炎293例,慢性活动型肝炎107例,400例肝功能检查皆有总胆红素和/或谷丙转氨酶不同程度升高,男308例,女92例,年龄10-56岁,平均32.5岁。 1.2 方法 我们采用酶标法乙肝三系检测试剂盒检测患者的HBVM,同时采用PCR HBVDNA试剂盒测定HBVD-NA,选用北京中科院遗传所生产的PCR-90A型扩增仪进行DNA扩增,操作按说明书进行。     

三种快速检测结核分支杆菌方法的评价

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术、单克隆抗体（ＭｃＡｂ）ＴＢ１５－Ｃ＿３经酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及抗酸染色等３种方法，对１０种抗酸杆菌及２种非分支杆菌进行检测。ＰＣＲ仅对结核分支杆菌复合体扩增出２４５ｂｐ特异性条带，ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测除人型结核分支杆菌外，还与ＢＣＧ、鸟型及瘰疬分支杆菌反应阳性，抗酸染色则所有分支杆菌均呈阳性。用ＰＣＲ、ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ及抗酸染色检测了１２４份临床标本，ＰＣＲ的检出率高于抗酸染色涂片的阳性率（Ｐ＜０．０５），ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测阳性率明显高于抗酸染色涂片和ＰＣＲ的阳性率（Ｐ＜０．０１）。认为三种方法在使用中各自有其优点，不可偏废。     

三种快速检测结核分支杆菌方法的评价

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术、单克隆抗体（ＭｃＡｂ）ＴＢ１５－Ｃ３经酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及抗酸染色等３种方法，对１０种抗酸杆菌及２种非分支杆菌进行检测。ＰＣＲ仅对结核分杆菌复合体扩增出２４５ｂｐ特异性条带，ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测除人型结核分支杆菌外，还与ＢＣＧ、鸟型及瘰疠分支杆菌反应阳性，抗酸染色则所有分支杆菌均呈阳性。用ＰＣＲ、ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ及抗酸染色检测了１２４份监床标本，Ｐ     

PCR快速检测临床标本中结核杆菌的研究

本文用PCR(聚合酶链反应)技术检测238份临床标本中结核杆菌,并与培养及ELISA法进行对比观察。结果:用PCR扩增出123bp区带者142份(59.7％);培养出结核杆菌者55份(23.2％)。139份体腔液及尿标本还同时检测了抗PPD抗体,其中50份标本阳性(36％)。PCR检出率明显高于培养及ELISA(P<0.005)方法简便,快速,是一种检测结核杆菌的实用技术。     

利用PCR技术检测537份新疆结核病人痰标本中的结核分枝杆菌

目的 提高聚合酶链反应在检测人结核分枝杆菌中的特异性和敏感性。方法 在聚合酶链反应中对4种DNA片段即结核杆菌特异插入列IS6110,IS1081,和16SrRNA,65kDa摸板进行了比较;为获取较多的细菌DNA,临床痰标本处理采用了国际标准化方法主要包括用一定量的N－乙酰－L半胱胺酸和氢氧化钠处理痰标本;改进了RCR混和液的成份即添加了甘油,dUTP－尿嘧啶糖基化酶。结果 选择IS6110作为结核杆菌特异性摸板用于检测细菌DNA,制备出了6批人结核杆菌PCR检测试剂盒,在对来自新疆结核病研究所的537份痰标本的检测中发现,谝试剂盒检测的特异性为65.97%,敏感性为93.53%。结论 改良TB－PCR试剂盒显示有较高的敏感性,特异性还有待于进一步完善,该试剂盒在临床诊断中有一定的价值。     

聚合酶链反应检测结核分支杆菌临床标本制备方法的研究

分别检测６种结核菌ＤＮＡ提取方法的裂解效能、聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增灵敏度及其对临床标本的阳性检出率。结果显示，ＴＥ－ＴｒｉｔｏｎＸ法和Ｃｈｅｌｅｘ－１００法能裂解绝大多数的细菌并具最高的敏感性，可检测出少至１０个菌细胞，其临床标本的阳性检出率分别为９３．３％和８６．６％；而其余４种方法效果较差，ＴＥ－Ｔｒｉｔｏｎ和Ｃｈｅｌｅｘ－１００两种沸水浴法简捷、经济、高效，值得临床实验室推广使用。     

PCR检测自体LAK细胞治疗50例慢性乙型肝炎

目前国内有陆续报道应用白细胞介素Ⅱ(IL-2)体外孵育自体淋巴细胞成为淋巴因子活化杀伤细胞(LAK)后回输治疗慢性乙型肝炎,使HBeAg阴转,作者应用多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)测定慢性乙型肝炎的HBVDNA,来评价自体LAK细胞回输治疗慢性乙型肝炎传染性指标的阴转情况,现报道如下:1 对象和方法1.1 对象 1993年4月—1994年4月本科住院和门诊的慢性乙型肝炎患者50例,甲组30例(男22例,女8例),年龄平均32.3岁,用酶标法(ELISA法)测定乙肝HBsAg,HBeAg,抗-HBc等指标皆阳性;乙组20例(男15例,女5例),年龄平均31.2岁,用ELISA法测乙肝一项或多项指标     

结核分支杆菌联合药物敏感试验

本文报告了同时耐SM、INH、RFP中二种以上药物的结核分支杆菌92株,将该菌加做SM+INH+RFP及INH+RFP的联合药敏试验。结果与单药敏感试验相比,联合药敏试验方法简便,能直接反应出几种药物之间的协同效应,且耐药比率大大下降。     

结核分支杆菌与非结核分支杆菌快速鉴别的实验研究

目的 探讨提供一种从菌种水平快速检测和鉴别分支杆菌的方法。方法 应用三对分别对应于分支杆菌(分子量65000)表面抗原、结核分支杆菌插入序列IS6110及人类β-珠蛋白基因的部分序列的特异性寡核苷酸引物对受试菌种及临床标本中的DNA进行多重PCR扩增，其扩增产物分别为439bp、268bp及123bp，并对439bp进行BstE Ⅱ和Hae Ⅲ两种限制性内切酶消化，同时，将135例临床标本进行培养、涂片，和多重PCR联合限制性片段长度多态性分析(mPCR-RFLP)检测。结果 mPCR-RFLP方法可将12种受试的标准菌种分别区分到种及亚种水平。本方法在临床实验中亦体现出较高的灵敏性及特异性。结论 mPCR-RFLP分析是对结核分支杆菌与非结核分支杆菌进行菌种分类鉴定的一种快速有效的方法。