斑点免疫金渗滤法检测弓形虫感染效果

目的建立一种简捷、准确的弓形虫感染检测方法。方法将弓形虫P30抗原包被在硝酸纤维素膜上,与待检血清中的相应抗体结合,通过金标记Protein-A蛋白直接显色。结果用该试剂检测5种血清样本共221份,其中弓形虫感染病人血清58份,敏感性为96.55%(56/58)。正常人群对照血清68份,检测结果全部为阴性,特异性为100%。检测25份类风湿病人血清、18份血吸虫病人血清及22份肺炎支原体病人血清,仅有1例类风湿病人血清出现阳性交叉反应。结论用弓形虫P30为抗原,以金标记Protein-A蛋白为探针显色系统的斑点免疫金渗滤法,对检测弓形虫病人血清抗体具有较高的敏感性和特异性,且操作简单、快速。     

滴金免疫渗滤法快速诊断肺吸虫病的研究

目的 寻找一种快速诊断肺吸虫病的方法。方法 以肺吸虫成虫浸出液为抗原，金标抗人IgG为显示剂检测肺吸虫抗体（DIGFA）。结果 检测肺吸虫病人血清41份，阳性符合率为100％；检测非流行区健康人血清51份，流行区健康人血清30份，阴性符合率100％；检测班氏丝虫病人血清20份，均为阴性；检测日本血吸虫病人血清20份，其中2例呈阳性。用DIGFA与ELISA同时检测肺吸虫病人血清41份，非流行区健康人血清51份及流行区健康人血清30份，两种方法的阳性与阴性符合率均为100％。结论 DIGFA检测人体肺吸虫抗体敏感性高，特异性强，检测时无需特定的仪器，操作简便、快速，适于基层单位和现场应用。     

滴金免疫渗滤法快速诊断肺吸虫病的研究

目的寻找一种快速诊断肺吸虫病的方法.方法以肺吸虫成虫浸出液为抗原,金标抗人IgG为显示剂检测肺吸虫抗体(DIGFA).结果检测肺吸虫病人血清41份,阳性符合率为100%;检测非流行区健康人血清51份,流行区健康人血清30份,阴性符合率100%;检测班氏丝虫病人血清20份,均为阴性;检测日本血吸虫病人血清20份,其中2例呈阳性.用DIGFA与ELISA同时检测肺吸虫病人血清41份,非流行区健康人血清51份及流行区健康人血清30份,两种方法的阳性与阴性符合率均为100%.结论DIGFA检测人体肺吸虫抗体敏感性高,特异性强,检测时无需特定的仪器,操作简便、快速,适于基层单位和现场应用.     

弓形虫抗体免疫印迹试剂盒的研制

目的 研制敏感、特异的检测弓形虫IgM和IgG抗体免疫印迹试剂盒。 方法 收集人工感染RH株弓形虫速殖子昆明系小鼠的腹腔液，提取弓形虫胞质蛋白，采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离弓形虫可溶性抗原，并经电泳转印至硝酸纤维膜，以无毒灵敏的四甲基联苯胺（TMB）为底物分别检测30份弓形虫IgM和28份IgG阳性血清，40份健康人血清。通过比较抗原制备方法和使用剂量、封闭剂、洗涤和稀释剂、工作浓度、作用时间以及反应带出现率，选择最佳实验条件，以敏感性、特异性、Youden指数以及稳定性作为试剂盒评价标准。 结果 用免疫印迹试剂盒检测30份弓形虫IgM和28份IgG阳性血清，敏感性分别为90.0%（27/30）和85.7%（24/28），40份健康对照者血清的弓形虫IgM和IgG抗体均为阴性，特异性均为100%，Youden指数分别为0.9和0.86。试剂盒于4℃ 保存约6个月的检测结果一致。 结论 该免疫印迹试剂盒敏感性和特异性均较高，且操作简便、快速。     

组分抗原斑点金标免疫渗滤法检测血吸虫短程抗体的研究

目的建立一种可用于检测血吸虫病人短程抗体的斑点金标免疫渗滤法（dot immuno-gold filtration assay,DIG-FA）。方法将血吸虫可溶性虫卵组分抗原（107～121 kDa）包被于混纤膜上,以胶体金标记的抗人IgG为二抗,建立组分抗原-DIGFA。用该法检测慢性血吸虫病人、健康人、卫氏并殖吸虫病人和华支睾吸虫病人血清。同时与血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）-DIGFA比较。结果检测54份慢性血吸虫病人血清,组分抗原-DIGFA敏感性为94.4%,SEA-DIGFA敏感性为96.3%,两种方法检测50份正常人血清的特异性均为100%。检测19份卫氏并殖吸虫病人血清和30份华支睾吸虫病人血清,SEA-DIGFA敏感性分别为26.3%和10.0%,组分抗原-DIGFA均未检出阳性反应。结论应用组分抗原-DIGFA检测血吸虫短程抗体具有较高的敏感性和特异性,且与其他吸虫病几乎无交叉反应,特异性优于SEA-DIGFA。     

急性血吸虫病患者血清弓形虫病IHA试验阳性反应探讨

<正> 在运用绵羊红细胞为载体的弓形虫病间凝试验(IHA)对血吸虫病流行区进行调查时,观察到急性血吸虫病人血清中,弓形虫病IHA试验阳性率高达76.8％。国内外资料表明绵羊红细胞表面存在嗜异性抗原,血吸虫病人血清中有大量嗜异性抗体。本文着重讨论急性血吸虫病人血清中嗜异性抗体对弓形虫病IHA的影响。 30份正常人血清和52份急性血吸虫病人血清,经嗜异性抗体凝集试验,正常人阳性率为60％,滴度小于1:160;而急性血吸虫病人阳性率为100％,且滴度大于1320。把嗜异性抗体阳性病人血清用10％的绵羊红细胞吸收后,正常人血清全为阴性,而52例急性血吸虫病人中,血吸虫病IHA试验有73.1％(38/52)的滴度小于1:3000;而弓形虫病IHA     

混合重组抗原用于血吸虫病诊断的研究

目的观察混合重组抗原用于血吸虫病诊断的价值。方法采用亲和层析法制备纯化的日本血吸虫23kDa膜蛋白分子大亲水肽段(SjC23HD)、21.7kDa膜蛋白(SjC21.7)和日本血吸虫虫卵毛蚴抗原(SjCMP10),采用酶联免疫吸附法对不同包被量的可溶性虫卵抗原、单个重组抗原、多个混合重组抗原检测血吸虫病血清抗体效果进行了比较。结果分别使用2.5μg/ml和7.5μg/ml的可溶性虫卵抗原包被酶标板,检测同一组血吸虫病人血清抗体的效果相同,但使用相同包被量的单一重组蛋白抗原及混合重组蛋白抗原检测同一组血吸虫病人血清抗体,混合重组蛋白抗原检测血清抗体的吸光度明显高于单一重组蛋白抗原,两者差异有显著性。用可溶性虫卵抗原与混合重组抗原同时检测39份急性血吸虫病人血清、80份慢性病人血清、27份晚期病人血清,两者阳性检出率相似。混合重组抗原检测20份华支睾吸虫病人血清及40份健康人血清无交叉反应和假阳性反应,特异性比可溶性重组抗原高。结论建立混合重组抗原诊断血吸虫病的方法,有助于提高重组抗原用于血吸虫病诊断的效能。     

金标免疫渗滤法诊断试剂盒诊断血吸虫病的价值研究

目的　评价金标免疫渗滤法诊断试剂盒（DIGFA-kit）用于血吸虫病血清流行病学调查的价值。方法　采用DIGFA与ELISA单盲平行检测各期血吸虫病病人血清、非流行区人群血清、疫区人群血清和血吸虫病已控制地区人群血清共2304份。结果　DIGFA检测血吸虫抗体的敏感性为96.8%，对非流行区健康人群的特异性为100%；该法检测疫区居民血清508份，抗体阳性检出率为35.6%，在Kato法粪检阳性的81人中，其中抗体阳性79人，阳性符合率为97.5%；检测血吸虫病已控制地区人群血清，抗体阳性率为4.6%；根据DIGFA的敏感性和对非流行区人群的特异性，计算其Youdens指数为0.926。上述各项结果与ELISA比较，差异无显著性（P>0.05）。结论　DIGFA与ELISA有相似的敏感性和特异性，且方法简便、快速，胶体金标记物制备容易，试剂稳定，运送方便，在现场和临床诊断更具有优越性。     

金标免疫渗滤法诊断试剂盒诊断血吸虫病的价值研究

目的：评价金标免疫渗滤法诊断试剂盒（DIGFA－kit)用于血吸虫病血清流行病学调查的价值。方法：采用DIGFA与ELISA单盲平行检测各期血吸虫病病人血清，非流行区人群血清，疫区人群血清和血吸虫病已控制地区人群血清共2304份。结果：DIGFA检测血吸虫抗体的敏感性为96．8％，对非流行区健康人群的特异性为100％，该法检测疫区居民血清508份，抗体阳性检出率为35．6％，在Kato法粪检阳性的81人中，其中抗体阳性79人，阳性符合率为97．5％；检测血吸虫病已控制地区人群血清，抗体阳性率为4．6％，根据DIGFA的敏感性和对非流行区人群的特异性，计算其Youden's指数为0．926，上述各项结果与ELISA比较，差异无显著性（P＞0．05），结论：DIGFA与ELISA有相似的敏感性和特异性，且方法简便，快速，胶体金标记物制备容易，试剂稳定，运送方便，在现场和临床诊断更具有优越性。     

双夹心DIGFA检测血吸虫循环抗原的应用研究

以日本血吸虫重组极低密度脂蛋白 ( SVL BP)制备的多抗为捕捉抗体 ,胶体金标记血吸虫虫卵多克隆抗体为覆盖抗体 ,采用双夹心金标免疫渗滤法 ( DIGFA)检测血吸虫病病人血清中循环抗原。结果 70份急性血吸虫病病人血清的阳性率为 10 0 % ,15 9份慢性血吸虫病病人血清的阳性检出率为 6 2 .3% ;12 0份流行区健康人群血清检测均阴性 ;10 0份非流行区健康人群血清 ,2份呈阳性反应 ,假阳性率为 2 %。与肺吸虫病病人血清的交叉反应率为4.0 % ( 1/ 2 5 ) ;与华支睾吸虫病病人血清未见交叉反应。提示该法具有较高的敏感性和特异性 ,判断结果比较客观 ,且简便、快速 ,适合于基层医院及现场应用     

Composition of circulating immune complexes in acute toxoplasmosis

The circulating immune complexes (CIC) that form in the hot just in early Toxoplasma gondii invasion can be present in the blood bed for a while. At the same time, the data on the antigenic composition of CIC in toxoplasmosis are fragmentary and rather contradictory. The investigation used enzyme immunoassay (EIA) to detect specific CIC that contain antigens to T. gondii tachyzoites in the sera of different populations and studied their antigenic composition by immunoblotting after 2-6% polyethylene glycol 6000-induced deposition. Examining 464 sera from groups of individuals with varying-stage T. gondii invasion indicated CIC in each, but showing their different frequency. CIC were virtually present in all sera from children who had been diagnosed as having congenital toxoplasmosis. In groups of seropositive pregnant women, CIC detection rates were noticeably higher in the samples showing both IgG and IgM antibodies (40.2 and 66.4%, respectively). CIC were also revealed in 9.8% of the seronegative blood donors; however, immunoblotting failed to confirm that they had no components that specifically reacted with T. gondii tachyzoite antigen antibodies. There were some differences in the composition of CIC in the serum yielding positive results in both EIA and immunoblotting. The serum CIC from pregnant women that exhibited only IgG antibodies contained mainly T. gondii antigens having molecular weights of 67 and 30 kD. The serum CIC from children with congenital toxoplasmosis and from pregnant women with serologically detected IgM antibodies to Toxoplasma antigens were found to contain 55-58-, 48-, 44-, 38-, 30-, and 26-kD components. The same molecular weight proteins were detected by electrophoretic studies of Toxoplasma excretory-secretory antigen (ESA). Comparing the findings suggests that in acute toxoplasmosis, the circulating complexes mainly contain ESA of the tachyzoites which appear in human blood just at the onset of invasion. Thus, this study demonstrates that specifically CIC are detectable in the sera of individuals infected with T. gondii and their antigenic composition varies with the stage of disease. In the authors' opinion, the detection of specific CIC and the determination of their antigenic composition may be serve an additional test in diagnosing acute toxoplasmosis.     

无锡地区3类人群弓形虫感染调查

目的　了解无锡地区类风湿性关节炎、恶性肿瘤、精神分裂症等3类人群刚地弓形虫感染情况，为后续该人群弓形虫感染防控提供数据支撑。方法　2016–2019年选择无锡地区经确诊的205例类风湿性关节炎病例、257例恶性肿瘤病例、235例精神分裂症病例作为调查对象，以250例健康体检者作为对照。采集全部研究对象人口学特征等相关数据，并采集血清。采用酶联免疫吸附试验检测研究对象血清弓形虫特异性IgG和IgM抗体水平，比较类风湿性关节炎、恶性肿瘤和精神分裂症病例与健康体检者血清抗弓形虫IgG和IgM抗体阳性率差异。结果　无锡地区类风湿性关节炎、恶性肿瘤和精神分裂症患者血清抗弓形虫IgG抗体阳性率分别为20.98%、24.12%和24.68%，均显著高于健康对照者（χ2 = 31.54、42.12和42.98，P均< 0.01）；类风湿性关节炎、恶性肿瘤和精神分裂症患者血清抗弓形虫IgM抗体阳性率分别为1.46%、2.72%和1.70%，与健康对照者血清抗弓形虫IgM抗体阳性率比较，差异均无统计学意义（χ2 = 0.06、1.52和0.21，P均> 0.05）。结论　无锡地区类风湿性关节炎、恶性肿瘤和精神分裂症患者血清抗弓形虫IgG抗体阳性率均显著高于健康体检者，后续应加强刚地弓形虫感染筛查，防止并发弓形虫感染引起的危害。     

乙酰螺旋霉素联合阿奇霉素治疗孕期弓形虫感染的临床效果

目的 目的 探讨螺旋霉素联合阿奇霉素治疗孕期弓形虫感染的综合治疗方法。方法 方法 应用ELISA方法检测孕妇血清 特异性弓形虫IgG和IgM抗体, 并采用PCR方法检测羊水中弓形虫感染情况; 选取其中3例弓形虫IgM抗体阳性孕妇作为 治疗对象, 应用螺旋霉素联合阿奇霉素进行综合治疗, 通过血清学特异性抗体检测和PCR检测结果初步判断其疗效。结 结 果 果 经ELISA检测, 孕期妇女血清特异性弓形虫IgG和IgM抗体的阳性率分别为5.97% （17/285） 和1.05% （3/285）, 对3例血 清IgM抗体阳性孕妇的羊水进行PCR检测特异性弓形虫基因, 有2例呈阳性。经过2种药物的联合治疗, 这2例孕妇血清 特异性弓形虫IgM抗体滴度阴转, PCR检测产妇脐带血中弓形虫基因为阴性。结论 结论 螺旋霉素联合阿奇霉素治疗孕期弓 形虫感染安全、 有效。     

普洱市部分地区人群弓形虫感染血清流行病学调查

目的 目的 掌握云南省普洱市人群弓形虫感染状况, 为制定弓形虫病防治策略提供依据。 方法 方法 选择普洱市景 东、 景谷和孟连3个县作为调查点, 采用ELISA试剂盒检测人群血清弓形虫IgG抗体。 结果 结果 共检测血清906人份, 弓形 虫IgG抗体阳性率为24.17%。其中30～岁年龄组和60～岁年龄组IgG抗体阳性率较高, 分别为30.30% （60/198） 和 32.08% （17/53）; 不同年龄组间IgG抗体阳性率差异有统计学意义 （χ2 =17.77, P＜0.01）。不同性别、 文化程度、 生活习惯 之间阳性率差异无统计学意义 （P 均＞0.05）。农民、 学生和其他职业的IgG抗体阳性率分别为26.58% （194/730）、 15.49% （22/142） 和8.82% （3/34）, 差异有统计学意义 （χ2 =12.51, P＜0.01）; 猪饲养具有圈养和散养习惯人群的阳性率分别为 23.32% （198/849） 和36.84% （21/57）, 差异有统计学意义 （χ2 =5.33, P＜0.05）。结论 结论 普洱市部分地区人群弓形虫IgG抗 体阳性率较高, 应加强弓形虫病的防控和防治知识的健康教育。     

日本血吸虫不同抗原检测家兔感染及治疗前后IgG/IgM抗体动态

目的探索特异性抗体检测在日本血吸虫病诊断和疗效考核中的潜在应用价值。方法ELISA方法采用可溶性虫卵抗原(SEA)、成虫抗原(AWA)检测人工感染家兔治疗前后血清中特异性IgGI、gM抗体,评价特异性抗体检测的诊断和疗效考核价值。结果用SEA抗原检测IgM抗体,发现感染后7周不管治疗与否,抗体水平均快速下降。与SEA相比,感染后AWA特异性IgM抗体上升时间早,且治疗后5个月仍为阳性。SEA特异性IgG抗体水平最高,但治疗后5个月仍为阳性。结论采用SEA抗原检测IgG用于血吸虫病诊断效果较好;对早期感染的诊断可以考虑SEA抗原检测IgM抗体作辅助。AWA抗原检测IgM,对急、慢性血吸虫感染均有较好诊断效果。采用这两种抗原检测IgG和IgM,均无考核疗效意义。     

无锡地区不良妊娠结局妇女弓形虫感染及弓形虫病知识知晓率调查

目的 调查无锡地区不良妊娠结局妇女弓形虫感染情况及弓形虫病相关知识知晓率。 方法 以2011年1月至2015年12月无锡市217例不良妊娠结局妇女作为研究对象（试验组）,以250例正常妊娠妇女作为对照。采用ELISA法检测并比较试验组和对照组血清抗弓形虫抗体阳性率。采用自行设计的问卷对试验组和对照组妇女进行问卷调查,比较两组弓形虫病相关知识知晓率。 结果 试验组妇女血清抗弓形虫抗体阳性率为30.88%,显著高于正常妊娠妇女的8.80%（[χ2]= 36.70,P < 0.01）;抗弓形虫IgG和IgM抗体阳性率分别为20.74%和10.14%,显著高于对照组的6.00%和2.80%（[χ2]= 22.53和10.74,P 均 < 0.01）。此外,以胎停、自然流产、早产和出生缺陷为妊娠结局的妇女血清抗弓形虫抗体阳性率及血清抗弓形虫IgG和IgM抗体阳性率均显著高于正常妊娠妇女（P均< 0.05）。试验组妇女对“你听说过弓形虫或弓形虫病吗？” （P < 0.01）、“你知道养宠物猫和犬会感染弓形虫吗？”（P < 0.05）和“你知道孕期需要进行弓形虫感染检查吗？”（P < 0.01）等3道问题的知晓率显著低于对照组,而两组妇女对“你知道吃火锅会感染弓形虫吗？”、“你知道家中砧板生熟不分可能会导致弓形虫感染吗？”、“你知道孕妇感染弓形虫会传给胎儿吗？”、“你知道孕期弓形虫感染会导致流产、死胎、胎儿畸形等不良妊娠结局吗？”和“你知道孕妇感染弓形虫需要治疗吗？”等问题的知晓率差异无统计学意义（P 均> 0.05）。结论 无锡市地区不良妊娠妇女弓形虫感染率显著高于正常妊娠妇女。考虑到孕妇感染弓形虫的危害以及孕妇对弓形虫病相关知识知晓率较低的现状,应进一步加大弓形虫病相关知识宣传和健康教育力度,特别是对备孕妇女开展有针对性的弓形虫病健康教育,以降低孕妇弓形虫感染率、提高优生优育水平。     

结核分枝杆菌特异性38kD多肽抗原提纯及其血清学诊断价值的研究

目的提纯结核分枝杆菌特异38kD多肽抗原,建立基于38kD多肽抗原(P38)的斑点金免疫渗滤法(DIGFA)检测结核病人血清标本,评价38kD多肽用于结核病血清学诊断抗原的实际价值。方法采用超声破碎、SDS-PAGE、切胶浸泡回收法提取结核分枝杆菌H37Rv株的38kD多肽抗原。建立以38kD多肽为包被抗原的DIGFA(P38-DIGFA),并检测147例临床确诊的活动性肺结核病人血清标本。同时建立以结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露糖(LAM)为包被抗原的DIGFA(LAM-DIGFA)作为对照。结果结核分枝杆菌H37Rv株38kD多肽抗原提取物经SDS-PAGE后仅显示为单一的条带,并可与临床确诊的肺结核病人阳性血清标本呈阳性免疫印迹反应。P38-DIGFA和LAM-DIGFA检测肺结核病人血清标本的总阳性率分别为84.4%(124/147)和76.2%(112/147),其中59份痰涂片及培养均阳性的肺结核病人血清标本P38-DIGFA和LAM-DIGFA阳性率分别为88.1%(52/59)和84.7%(50/59),88份痰涂片及培养均阴性的肺结核病人血清标本P38-DIGFA和LAM-DIGFA阳性率分别为81.8%(72/88)和70.5%(62/88),60例气管炎病人血清标本阳性率分别为13.3%(8/60)和6.7%(4/60),120例健康人血清标本阳性率分别为5.8%(7/120)和5.0%(6/120)。各P38-DIGFA和LAM-DIGFA检测阳性率之间均无显著性差异。结论结核分枝杆菌38kD多肽作为抗原用于结核病血清学检测时,其敏感性和特异性与LAM相似,可应用于研发结核病血清学诊断试剂盒。     

间接ELISA检测弓形虫感染鼠NTPase-Ⅱ抗体的研究

目的建立检测小鼠血清中刚地弓形虫NTPase-Ⅱ特异性IgGI、gM抗体的间接ELISA法,探讨用于弓形虫感染早期检测的应用价值。方法以刚地弓形虫NTPase-Ⅱ融合蛋白为包被抗原建立间接ELISA法,动态检测刚地弓形虫实验感染鼠血清NTPase-Ⅱ特异性IgGI、gM抗体变化。试验设脑囊虫病、血吸虫病及肺吸虫病病人血清对照。结果小鼠血清中的抗NTPase-Ⅱ抗体IgM于弓形虫感染后第3 d开始出现阳性反应,IgG抗体于感染后第7 d开始出现阳性反应,脑囊虫病、血吸虫病及肺吸虫病病人血清特异性IgG阳性率分别为0、1.92%和0。结论间接ELISA检测弓形虫感染鼠血清NTPase-Ⅱ抗体的敏感性和特异性较高,有望应用于人感染弓形虫的早期检测。     

我国部分地区弓形虫病流行病学监测

本文报道采用间接血凝试验对我国１６个省的部分地区进行了人畜弓形虫病流行病学调查．调查人群血清６３０９５份，阳性３６８３份，平均阳性率为５．８４％；检查畜禽３２１６５头，阳性５２７０头，平均阳性率为１６．３８％。这次调查共分离病原体３７株，其中人体３株，猪体２０株，兔体９株，鼠类５株；还从人群感染的地区、年龄、性别、职业等方面进行了分析，初步摸清了我国弓形虫病感染的基本情况．