新生期大鼠反复惊厥上调大脑皮质可塑性相关基因-1蛋白水平

目的 探索可塑性相关基因-1(plasticity related gene 1,PRG-1)在反复惊厥大鼠大脑皮质中的动态表达及其意义.方法 用三氟乙醚使新生第6天的SD大鼠呈现反复惊厥状态,每天持续30min,连续6d,分别于末次惊厥后3h,12h,48 h和14d取大脑皮质,并每个时间点设未做任何干预对照组,用免疫印迹方法观察PRG-1蛋白表达.结果 末次惊厥后3 h,12h,48 h、14d大脑皮质可塑性相关基因-1的表达,对照组分别为1.363±0.742、1.278±0.687、0.763±0.374、1.004±0.113,实验组分为1.818±1.093、1.562±0.782、1.024±0.510、1.378±0.279.3 h、12h、48 h大脑皮质PRG-1的表达在实验组和对照组无统计学意义(t=0.843,0.668,1.011,均P＞0.05).14d大脑皮质PRG-1的表达,实验组明显高于对照组(t=3.041,P＜0.05).结论 PRG-1在新生大鼠反复长程惊厥后的远期表达增多,提示参与发育期惊厥性脑损伤的病理生理机制.     

生酮饮食对新生期反复惊厥大鼠远期神经行为及大脑皮层内锌离子流入蛋白7表达的影响

目的 观察生酮饮食(ketogenic diet,KD)对三氟乙醚所诱导的新生期大鼠反复惊厥后远期神经行为损伤的影响及其大脑皮层内锌离子流入蛋白7(ZIP7)表达的变化.方法 24只8日龄SD大鼠,随机分为4组,分别为空白对照组(NS+ND组)、对照生酮饮食组(NS+KD组)、单纯惊厥组(RS+ND组)、惊厥生酮饮食组(RS+KD组),每组n=6.于出生后31d进行前肢悬吊实验和旷场实验.于生后32 d各组大鼠断头取大脑皮层组织,采用免疫印迹技术(Western blot)检测ZIP7的表达.结果 (1)前肢悬吊实验中,RS+ND组前肢悬吊时间[(19.17±2.48)s]较NS+ND组[(32.67±2.42)s]明显缩短(P＜0.05),RS+KD组前肢悬吊时间[(26.25±2.87)s]较RS+ND组明显延长(P＜0.05).(2)旷场实验中,与NS+ND组[(2.00±0.63)次]相比,RS+ND组清洁次数[(4.00±0.63)次]明显增多(P＜0.05);与RS+ND组比较,RS+KD组清洁次数[(2.17±0.75)次]明显减少(P＜0.05).(3) Western blot结果显示,与NS+ND组相比,RS+ND组皮层ZIP7表达显著降低(P＜0.05);与RS+ND组相比,RS+KD组皮层ZIP7表达明显升高(P＜0.05).结论 新生期反复惊厥导致神经行为损伤,生酮饮食可能通过上调大脑皮层中ZIP7的表达改善神经行为.     

新生期反复惊厥大鼠神经行为改变及褪黑素的预防作用

目的 探讨新生期反复惊厥后大鼠的远期神经行为改变及褪黑素(Melatonin)的预防作用.方法 生后6 d(用P6表示,下同)的健康Sprague-Dawley (SD)大鼠24只,采用随机数字法分成4组,每组6只:对照组(CONT)、褪黑素空白对照组(MEL)、惊厥组(Recurrent Seizures,RS)及褪黑素组(RS+ MEL).通过三氟乙醚反复吸入建立新生期大鼠反复惊厥动物模型:RS组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作5次,每次间隔30 min,连续9 d;RS+ MEL组于惊厥前1 h(上午8:00)腹腔注射褪黑素(55 mg/kg),同样方法吸入三氟乙醚诱导惊厥发作,方法同RS组;MEL组,与RS+ MEL组同样操作但不吸入三氟乙醚.于P24进行神经行为学评分(平面翻正实验、悬崖回避实验、前肢悬吊实验、负向趋地应实验),于P35天进行旷场行为实验.结果 (1)平面翻正实验显示:RS组平面翻正时间[(0.33 ±0.51)s]较CONT组[(1.17±0.40)s]和RS+ MEL组[(0.50±0.54)s]明显缩短,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)悬崖回避实验显示:RS组悬崖回避时间[(16.00±6.32)s]较CONT组[(4.00±2.60)s]和RS+ MEL组[(7.67±3.26)s]明显延长(P＜0.05);(3)前肢悬吊实验显示:RS组前肢悬吊持续时间[(11.67±7.58)s]较CONT组[(49.50±28.96)s]和RS+ MEL组[(24.83±6.61)s]明显缩短(P＜0.05).(4)负向趋地反应实验显示:RS组负向趋地反应时间[(7.67±1.36)s]较CONT组[(4.50±2.66)s]和RS+ MEL组[(6.17±0.75)s]明显延长(P＜0.05).(5)旷场实验显示:RS组延迟时间[(8.17±3.86)s]较CONT组[(3.00±1.41)s]明显延长(P＜0.05).结论 三氟乙醚诱导的新生期大鼠反复惊厥发作会导致神经行为损伤,惊厥发作前应用褪黑素进行预防,能改善惊厥所致神经行为损伤.     

新生大鼠反复惊厥对脑内γ-氨基丁酸A受体α1和γ2亚单位表达的长期影响

目的:研究新生期反复惊厥对大鼠脑内γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)A受体α1和γ2亚单位表达的长期影响,及成年期记忆功能和惊厥阈的长期改变.方法:将生后7天(postnatal 7 d,P7)的SD大鼠随机分成两组,每组16只,惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1 次,每次持续30 min,连续6 d;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚.两组大鼠于出生后第61～65天(P61～P65)行Morris水迷宫实验,于P75时给予大鼠腹腔注射戊四唑测定大鼠的惊厥阈.随即处死大鼠,分别采用免疫组化方法和RT-PCR方法观察大鼠大脑皮层及海马GABA A受体(GABAAR)α1和γ2亚单位表达的变化.结果:惊厥组大鼠在P64的寻找水下平台时间[(82 424±35 622)ms]较对照组[(40 712±29 467)ms]明显延长(P=0.001).在P65,惊厥组大鼠120 s内穿越原平台位置次数[(1.2±0.9)次]较对照组 [(3.1±1.3)次]明显减少(P＜0.001).惊厥组大鼠注射戊四唑后发生惊厥的潜伏期[(1 487±662) s]与对照组[(1 841±648)s]比较差异无统计学意义(P=0.137).惊厥组大鼠GABAAR α1亚单位免疫化学累积光密度在顶叶及海马CA1、 CA2和CA4区较对照组明显降低(P＜0.05);惊厥组大鼠GABAAR γ2亚单位免疫化学累积光密度在额叶和海马CA4区较对照组明显降低(P＜0.05).惊厥组大鼠大脑皮层GABAAR γ2亚单位和海马区α1亚单位mRNA的表达较对照组明显减少(P＜0.05).结论:新生大鼠反复惊厥可造成脑内GABAAR α1和γ2亚单位表达的长期改变,这种改变可能与新生期反复惊厥导致的成年期记忆障碍相关.     

运动训练对新生期大鼠反复惊厥所致学习能力损害的干预研究

目的 探讨踏转轮运动训练对新生期大鼠反复惊厥所致学习能力损害的干预作用.方法 生后6 d(用P6 表示,下同) 的SD大鼠随机分成2组,反复惊厥组(RS组)每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1 次,每次持续30 min ,连续6 d ;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚.2组大鼠分别于P29～P35、P61～P67进行两次Y迷宫学习训练,检测大鼠的学习和记忆功能.期间,于P51～P56对2组进行踏转轮训练,每天1次,每次30 min,连续6 d.结果 ①学习能力测试:第1次Y-迷宫学习训练RS组大鼠辨别学习达到标准的训练次数为(60.0±14.1)次,与对照组(37.5±17.2)次比较,差异具有显著性(t =2.69,P ＜0.05);第2次Y-迷宫学习训练RS组大鼠辨别学习达到标准的训练次数为(27.5±14.1)次,与对照组(21.0±11.01)次比较,差异无显著性(t =1.03,P ＞0.05);2组第2次测试学习成绩均较第1次有显著改善,差异有显著性.②记忆保存测试:RS组与对照组2次测试结果差异无显著性(P ＞0.05).结论 运动训练能显著改善新生期反复长时程惊厥对学习能力的损害.     

川芎嗪对大鼠反复惊厥后NCAM表达的影响

目的 研究幼年大鼠反复惊厥后大脑皮质组织神经细胞黏附分子(NCAM)蛋白表达的变化及川芎嗪干预对其的影响,探讨NCAM在幼年期惊厥性脑损伤发病机制中的作用及对川芎嗪脑损伤的可能保护机制.方法 72只20日龄健康Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组:正常对照组、惊厥组及川芎嗪干预组,通过三氟乙醚反复吸入(1次/d,连续6 d),制作幼年大鼠惊厥动物模型.用免疫组化(SP)法检测各组动物反复惊厥结束后1、3、7 d大脑皮质组织中NCAM蛋白的表达.结果 反复惊厥结束后1 d惊厥组大脑皮质组织NCAM蛋白表达下降,和对照组比较有显著性差异(P＜0.01).在反复惊厥后3、7 d大脑皮质组织中NCAM蛋白表达逐渐增多,与对照组无差异.川芎嗪干预组在反复惊厥结束后1、3、7 d大脑皮质NCAM蛋白表达均较惊厥组显著上调(P＜0.05).结论 ①幼年大鼠反复惊厥后NCAM表达由早期暂时降低,后逐渐增高且接近正常,提示NCAM参与了幼年期惊厥性脑损伤修复.②川芎嗪干预组上调反复惊厥后NCAM的表达,提示川芎嗪对幼年期惊厥性脑损伤的保护机制,可能与促进大脑皮质NCAM的表达增高有关.     

肌苷对阿尔茨海默病模型大鼠认知功能改善作用及机制研究

目的 研究肌苷对β-淀粉样蛋白1-40(beta-amyloid protein,Aβ_(1-40))所致的模拟阿尔茨海默病大鼠神经元凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响.方法 成年健康雄性Wistar大鼠30只,用随机数字表法随机分为对照组、模型组和治疗组各10只,经左侧侧脑室微量注射Aβ_(1-40)建立阿尔茨海默病模型,腹腔注射肌苷(100mg·kg~(-1))干预治疗,采用Y型电迷宫检测大鼠学习和记忆功能,HE染色观察神经细胞的结构变化,原位TUNEL法检测神经细胞凋亡,免疫组织化学检法测Bcl-2和Bax蛋白表达.结果 模型组大鼠认知能力[(79.84±6.46)次,(4.83±3.14)次]较对照组[(59.13±7.52)次,(7.94±2.21)次]明显下降(t=5.67,2.25,P＜0.05),神经细胞结构异常,TUNEL阳性细胞数明显增多、Bcl-2和Bax蛋白表达增加(P＜0.05).肌苷组大鼠认知能力[(68.54±8.86)次,(7.11±1.13)次]和细胞结构较模型组[(81.22±3.92)次,(4.61±1.61)次]显著改善(t=3.46,4.64,P＜0.05),相对于模型组(20.24±1.32,41.82±3.71,35.51±2.30),肌苷组Bcl-2蛋白表达(33.52±5.68)明显增强、Bax蛋白表达(25.11±2.45)明显减弱、细胞凋亡数量(23.40±7.07)明显减少(t=6.04,9.94,4.30,P＜0.05).结论 肌苷能促进Bcl-2表达、抑制Bax表达,降低凋亡率,从而改善阿尔茨海默病大鼠大学习和记忆能力.     

新生期反复惊厥大鼠神经行为改变及溶酶体酶抑制剂的干预作用

目的 探讨溶酶体酶抑制剂(CBI)在三氟乙醚致新生期大鼠反复惊厥性脑损伤中的干预作用及其信号通路.方法 90只生后6d(P6)的健康SD大鼠随机分为3组(n=30):对照(CONT)组、反复惊厥(RS)组及CBI组,RS组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作5次,每次间隔30min,连续9d;CONT组同样操作但不吸入三氟乙醚;CBI组惊厥前腹腔注射CBI(总量2μl),同样方法吸入三氟乙醚诱导惊厥,方法同RS组.分别于生后不同时间段检测体格、神经发育以及认知情感能力,并于末次惊厥后1.5 h、3h、6h、24h及第35天五个时间点(n=6)取大脑皮层组织,采用免疫印迹技术检测自噬相关蛋白cathepsin B的表达.结果 P14时RS组体质量(27.28±1.60)kg,低于CONT组(33.45±1.57)kg,差异具有显著性(P＜0.0001).神经发育指标显示悬崖回避时间,日龄P12时RS组历时(2.10±1.45)s,延长于CBI组(1.05±0.32)s,差异有显著性(P＜0.05).旷场行为测试:RS组水平运动(20.00±13.08)次,少于CONT组(57.83±33.22)次,差异有显著性(P＜0.05);RS组垂直运动(2.50±2.43)次,少于CONT组和CBI组[分别为(22.17±10.74)次,(9.33±5.39)次],差异有显著性(P＜0.01).Western blot法检测,RS组在1.5h、3h、6h、24h各时间点Cathepsin B的表达明显高于CONT组(P＜0.05);CBI组于1.5h、3h、6h、24h各时间点Cathepsin B的表达明显低于RS组(P＜0.05).P35时间点3组之间差异无显著性(P＞0.05).结论 CBI能够通过自噬信号途径抑制发育期惊厥所致神经行为损伤.

Abstract：

Objective To explore the intervention effect of cathepsin B inhibitor (CBI) and its signaling pathways after flurothyl inducing brain injury in rats with recurrent seizures. Methods 6-day-old (P6) SD rats were randomly divided into: recurrent neonatal seizure group ( RS group, n = 30), CBI-treated seizure group ( CBI group, n=30) and the control group( CONT group). Rats in RS group were subjected to 5 seizures with flurothyl during the first 14 days of life. In CBI group,CBI was injected each day before seizures were induced. Then examined development indexes such as the physical growth, neural reflex, neural behavior and cognitive emotional competence. Western blot was employed to determine Cathepsin B expression at different time points ( 1.5h,3h,6h,24h and P35) after the last convulsion. Results The weights of rats in RS group( (27.28 ± 1.6) kg) were lighter than CONT group( ( 33.45 ± 1.57 ) kg). They had significant difference (P＜ 0.01 ) at the age of p14. The time of cliff avoidance in RS group( (2. 10 ± 1.45 ) s) was longer than CBI group( ( 1.05 ± 0. 32) s). It showed a statistically significant (P ＜ 0.05 ) in p12. In the open-field behavior test: the activities of RS group (20.00 ± 13.08 )were markedly reduced than CONT group ( 57.83 ± 33.22 ) in the horizontal movements, the RS group ( 2.50 ±2.43 ) were significantly decreased than the CONT group and CB1 group( ( 22.17 ± 10.74), (9.33 ± 5.39 ) ) in the vertical motions (P ＜ 0. 05 ). Cathepsin-B expression in RS group( 1.5h, 3h,6h and 24h )was significantly higher than that at the same time in CONT group(P＜ 0. 05 ). Cathepsin-B expression of CBI group was significantly decreased compared with that in RS group (P＜ 0. 05 ) at the time point (1.5h ,3h,6h and 24h). There were no significant differences among three groups at P35(P＞0.05 ). Conclusions CBI can improve brain injury and regulate the expression of abnormal molecules.     

血塞通对局灶性脑缺血细胞凋亡及Bax,Bcl-2表达的影响

目的 :探讨血塞通对局灶性脑缺血大脑皮质神经细胞凋亡及Bax ,Bcl- 2基因表达的影响 .方法 :采用DNA原位末端标记TUNEL技术及ABC免疫组织化学方法 ,检测了局灶性脑缺血后 6h大鼠大脑皮质的凋亡神经元数及Bax ,Bcl- 2的平均灰度 .结果 :血塞通处理组神经细胞凋亡数 2 2 5± 6 3较缺血组 41 5±5 5明显减少 (P <0 0 5 ) .而Bax ,Bcl- 2的平均灰度 95 4± 4 9,77 2± 2 1亦较缺血组 82 5± 6 6 ,97 3± 4 4增加和减少 (P <0 0 5 ) .结果提示 :血塞通处理有效减少皮质凋亡神经细胞数 ,而此变化可能与凋亡基因Bax ,Bcl- 2的表达变化有关     

睡眠剥夺对大鼠不同脑区microRNA-132microRNA-134表达的影响

目的 探讨睡眠剥夺(SD)对大鼠海马、下丘脑、皮质microRNA- 132(mir-132)、microRNA-134 ( mir-134)表达的影响.方法 将20只大鼠分为对照组(CON组)、睡眠剥夺组(SD组).用改良多平台法建立睡眠剥夺模型,用实时定量聚合酶链反应( Real time-PCR)方法检测正常睡眠、睡眠剥夺大鼠海马、下丘脑、皮质mir- 132、mir-134水平.结果 SD组大鼠海马脑区mir-132含量较CON组有所升高,差异有统计学意义(CON 51.87±8.13,SD 67.25±7.59)(P＜0.01);SD组大鼠海马脑区mir-134含量较CON组有所下降,差异有统计学意义(CON 1.82±0.15,SD 1.45±0.12) (P＜0.01);SD组大鼠皮质、下丘脑脑区mir-132、mir-134含量与CON组相比差异无统计学意义(P＞0.05),皮质mir-132水平分别为CON 1.57±0.10,SD 1.48±0.11,下丘脑mir-132水平分别为CON 1.37±0.09,SD 1.36±0.11;皮质mir-134水平分别为CON 98.26±5.17,SD 100.80±4.15,下丘脑mir-134水平分别为CON 97.56±6.28,SD 91.01 ±4.07(P＞0.05).结论 Mir-132、mir-134在睡眠剥夺模型大鼠海马的上升和下降提示这两种miRNAs在睡眠剥夺中可能起到了相反的作用,对这两种miRNAs在海马的含量测定有望为睡眠剥夺及其抗抑郁机制的研究找到新的线索.     

生酮饮食对新生期反复惊厥大鼠神经行为的影响及机制

目的观察生酮饮食（KD）对三氟乙醚所致新生期反复惊厥大鼠神经行为损伤的影响和载脂蛋白E（ApoE）表达的变化。方法48只日龄8d（P8,下同）的sD大鼠依据随机数字表法随机分为对照组（NS组）和惊厥组（Rs组）,每组各24只。于P9RS组大鼠吸入三氟乙醚诱导惊厥发作,反复诱导惊厥持续30min,每日1次,同样方法连续诱导8d;NS组同样操作但不吸入三氟乙醚。于P28每组大鼠依据随机数字表法再随机分为两组,即单纯对照组（NS＋ND组）、对照加生酮饮食组（NS＋KD组）、单纯惊厥组（RS＋ND组）、惊厥加生酮饮食组（RS＋KD组）,每组各12只。于P42进行神经发育指标监测。于P58每组各随机取6只大鼠断头取大脑皮层组织,采用免疫印迹技术（Westernblot）检测ApoE的表达。结果P42各组大鼠神经发育指标结果显示：平面翻正实验中,NS＋ND组平面翻正时间[（1．04-0．14）s]与RS＋ND组[（0．75±0．32）s]相比差异有统计学意义（P〈0．05）,RS＋KD组平面翻正时间与Rs＋ND组相比差异无统计学意义（P〉0．05）;负向趋地反应实验中,NS＋KD组、RS＋ND组负向趋地反应时间[（3．17±0．58）s,（6．754-0．75）s]与NS＋ND组[（1．58±0．52）S]相比差异均有统计学意义护〈0．05）,RS＋KD组负向趋地反应时间[（4．58±0．52）s]与Rs＋ND组[（6．75±0．75）s]相比差异有统计学意义（P〈0．05）;悬崖回避实验中,NS＋ND组、RS＋KD组悬崖回避时间[（5．754-2．90）s,（9．50±4．36）S]与RS＋ND组[（14．004-4．79）s]相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot结果显示：RS＋ND组ApoE在大脑皮层的表达（1．26士0．30）与NS＋ND组（0．78±0．12）相比差异有统计学意义（P〈0．01）,且与RS＋KD组（0．894-0．10）相比差异也有统计学意义（P〈0．05）。结论生酮饮食能够改善新生期反复惊厥所致的神经行为损伤,其机制可能与大脑皮层ApoE表达降低有关。     

三七皂苷Rg1对慢性应激大鼠脑组织神经颗粒素表达的影响

［摘要］目的　探讨三七皂苷Rg1对慢性应激模型大鼠皮层、海马神经颗粒素（neurogranin,Ng）表达的影响．方法　成年雄性SD大鼠36只,随机分为对照组（CON）、模型组（CUS）和治疗组（CUS-G）,采用慢性不可预见性应激方法建立慢性应激动物模型,运用Morris水迷宫实验对大鼠进行学习记忆力测试,QPCR、Western blot分别检测皮层、海马Ng mRNA及Ng蛋白含量．结果　水迷宫实验显示慢性应激后动物学习记忆能力显著降低,而治疗组大鼠逃避潜伏期明显降低（P＜0.0 5）;应激6周后,慢性应激大鼠皮层、海马Ng mRNA水平皆与模型大鼠有差异（P＜0.05、P＜0.01）,治疗组大鼠皮层、海马Ng mRNA水平皆与模型大鼠有差异（P＜0.01、P＜0.05）;慢性应激大鼠皮层、海马Ng含量水平与模型大鼠有差异（P＜0.05、P＜0.01）,治疗大鼠皮层、海马Ng含量亦与模型大鼠有差异（P＜0.01、P＜0.05）．结论　慢性不可预见性应激导致大鼠皮层、海马Ng mRNA水平、NG 蛋白含量显著下降,造成大鼠学习记忆功能减退,三七皂苷Rg1可上调Ng mRNA水平、NG蛋白含量表达,且对慢性应激所致外显行为有积极调节作用．     

青霉素诱发发育期大鼠反复惊厥对学习记忆功能的远期影响

目的 建立发育期大鼠青霉素点燃模型,观察青霉素点燃幼龄大鼠模型的空间学习记忆能力.方法 生后29 d(P29) 的SD大鼠随机分为青霉素点燃实验组(RS,n=22)及生理盐水对照组(NS,n=10).RS组隔日腹腔注射青霉素560万U/kg体质量,连续6次,NS组以同样方法腹腔注射生理盐水.于末次惊厥后进行脑电记录.分别于P51～P56、P81～P84、P92～P95 进行3次Morris水迷宫实验,检测大鼠的学习和记忆功能.结果 ①皮层脑电图显示RS组明显的棘波和尖波.②逃避潜伏期:第1次Morris水迷宫各组潜伏期均呈逐渐下降趋势,但RS组第5天潜伏期[(29.57±18.52)s]明显高于NS组[(8.21±4.86)s],差异有显著性(t=3.14,P=0.014＜0.05);RS组第2次迷宫测试中第1天[(46.31±17.91)s]明显高于NS组[(21.21±18.25)s],差异有显著性(t=2.68, P=0.019＜0.05);第3次水迷宫第2天的潜伏期值(26.87±21.74)s仍明显高于NS组(7.85±7.11 )s,差异有显著性(t=2.34, P=0.045＜0.05).③记忆实验:三次记忆测试平台象限路径与总路径之比,RS组[第1次(0.16±0.07)s;第2次(0.22±0.07)s;第2次(0.20±0.06)s]均明显低于NS组[第1次(0.31±0.13)s;第2次(0.34±0.05)s;第3次(0.29±0.07)s],差异有显著性(P＜0.05).结论 青霉素诱导的发育期反复惊厥能够对学习和记忆功能产生远期的损害.     

新生大鼠反复惊厥对NMDA受体表达的长期影响

目的：研究反复惊厥对大鼠脑内N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体表达，以及成年期认知功能和惊厥阈的长期影响。方法：生后6d(用P6表示，下同)的Wistar大鼠随机分成两组，每组6只，惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1次，每次持续30min，连续6d；对照组同样操作但不吸入三氟乙醚。两组大鼠于P60-P65行Morris水迷宫实验，检测大鼠的学习记忆功能。于P75时给予大鼠腹腔注射戊四唑(PTZ)测定大鼠的惊厥阈。随即断头处死大鼠，分离大脑皮质和海马，匀浆提取细胞膜蛋白，应用免疫印记法测定NMDA受体亚基l(NRl)和NR2A-2D表达的变化。结果：从P6l至P65，两组大鼠寻找平台时间均逐渐缩短，惊厥组大鼠在P65的平均寻找平台时间较对照组显著延长。惊厥组大鼠注射PTZ后发生惊厥的潜伏期与对照组比较差异无显著性。在大脑皮层，惊厥组大鼠较对照组NRl和NR2B表达水平明显下调，在海马这两种亚基表达水平无明显改变，在大脑皮层和海马区，惊厥组较对照组NR2A表达水平明显下调，NR2C表达水平明显上调。两组在皮层和海马均无NR2D表达。结论；新生大鼠反复惊厥可导致远期认知障碍，同时伴有NMDA受体的数量和结构上的长期改变，NMDA受体表达的这种改变可能在发育期惊厥导致的脑长期认知功能损害中起重要作用。     

褪黑素对噪声应激大鼠学习记忆的保护作用

目的 探讨噪声应激对大鼠记忆功能的影响及可能机制.方法 将50只大鼠用随机数字法分为空白组和2个实验组、2个对照组.空白组不给任何处理,实验组及对照组暴露于120dB噪声应激1d或3d,8h/d,并于每次噪声应激前分别腹腔注射褪黑素(MT,15mg/kg)或等量生理盐水.应激结束后,用旷场反应箱测试大鼠的行为,用Morris水迷宫法测试大鼠学习记忆,用试剂盒检测大鼠大脑皮层和海马中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量.结果 无论噪声应激1d或3d,旷场反应测试大鼠兴奋性和探索性行为实验组[运动总距离(TMD)(1322.50±504.32)cm,(1819.55±458.37)cm,较快运动时间(FMT)(68.49±23.90)s,(87.34±16.01)s,距中心距离(DTC)(63.56±2.75)cm,(60.13±1.87)cm,内环内时间(ITT)(7.87±2.06)s,(9.60±2.89)]均明显小于对照组[TMD(2042.03±449.19)cm,(2325.73±384.90)cm,FMT(109.32±21.84)s,(124.65±16.74)s,DTC(58.00±1.53)cm,(55.05±5.13)cm,ITT(12.84±3.62)s,(14.92±2.75)s,(P＜0.05,P＜0.01)];水迷宫中的逃避潜伏期实验组大鼠[(10.69±3.37)s,(18.87±4.74)s]均明显小于对照组[(23.86±7.66)s,(33.55±7.20)s,(P＜0.01)];大鼠大脑皮层和海马组织中NO和MDA含量实验组[皮层NO(3.35±0.40)μmol/gprot,(4.50±0.41)μmol/gprot,海马NO(2.24±0.18)μmol/gprot,(3.15±0.21)μmol/gprot,皮层MDA(1.34±0.44)nmol/mgprot,(2.39±0.18)nmol/mgprot,海马MDA(0.13±0.07)nmol/mgprot,(0.53±0.10)nmol/mgprot]明显低于对照组[皮层NO(3.35±0.40)μmol/gprot,(5.03±0.44)μmol/gprot,海马NO(2.93±0.31)μmol/gprot,(3.38±0.24)μmol/gprot,皮层MDA(2.24±0.26)nmol/mgprot,(4.21±0.21)nmol/mgprot,海马MDA(0.47e0.29)nmol/mgprot,(1.33±0.187)nmol/mgprot,(P＜0.05,P＜0.01)],SOD含量实验组[皮层(763.95±214.36)U/mgprot,(491.33±35.85)U/mgprot,海马(817.02±232.39)U/mgprot,(644.85±28.02)U/mgprot]明显高于对照组[皮层(556.50±101.51)U/mgprot,(327.35±30.54)U/mgprot,海马(279.74±117.02)U/mgprot,(108.75±15.52)U/mgprot,(P＜0.05,P＜0.01)].结论 褪黑素对噪声应激大鼠记忆障碍有改善作用,这种作用可能与抑制噪声应激大鼠大脑皮层和海马中NO及MDA的升高,并提高SOD活性作用有关.     

D-半乳糖衰老模型大鼠学习记忆能力和特定脑区抗氧化酶活性的变化

目的 探讨D-半乳糖衰老模型大鼠学习记忆能力和特定脑区抗氧化酶活性的变化,以揭示学习记忆能力与特定脑区抗氧化酶活性的关系.方法 Wistar大鼠皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,在MG-2型三等分辐射式迷宫中进行学习记忆能力的检测后,将大鼠立即断头处死,分别测定大脑皮层、小脑、纹状体、海马、下丘脑五个脑区SOD、CAT、GSH-Px活性.结果 D-半乳糖衰老模型大鼠迷宫正确反应率为(58.9±5.4)%,比对照组的(66.8±8.9)%明显降低(P＜0.05).24h后达标次数显著高于对照组[衰老组(29.5±12.8)次,对照组(16.6±6.2)次,P＜0.01],24h正确反应率明显降低于对照组[衰老组(67.3±10.3)%,对照组(79.1±6.9)%,P＜0.01].与对照组比较:皮层、海马、纹状体SOD活性(衰老组:66.12±5.89、80.46±6.57、87.82±6.87;对照组:57.63±4.21、67.46±6.80、68.37±6.52)显著降低(P＜0.05和P＜0.01);CAT活性在皮层、海马、纹状体、下丘脑四个脑区(衰老组:6.45±0.55、5.86±0.35、6.93±0.63、8.89±0.38;对照组:5.32±0.56、4.76±0.38、4.37±0.43、6.11±0.37)均显著降低(P＜0.05和P＜0.01);各脑区GSH-Px活性差异无显著性(P＞0.05).结论 D-半乳糖衰老模型大鼠学习记忆能力降低.衰老过程中海马、皮层、纹状体、下丘脑的抗氧化酶活性变化与学习记忆密切相关.     

氢气对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤内质网应激及神经细胞凋亡的影响

目的 探讨吸入高浓度氢气(H2)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(IRI)内质网应激(ERS)相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、半胱氨酸蛋白酶12 (Caspase-12)及脑皮质神经细胞凋亡和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响.方法 选取72只健康成年SPF级雄性SD大鼠,将其分为对照组(Ⅰ组:不作任何处理)、假手术组(Ⅱ组)、脑IRI组(Ⅲ组)、氢气治疗组(Ⅳ组),每组18只.采用线栓法建立大鼠局灶性脑IRI模型.于再灌注24 h后行神经功能缺损评分(NDS),采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察大鼠脑缺血梗死程度并计算脑梗死面积,原位末端标记法(TUNEL)技术检测各组大鼠脑皮质神经细胞凋亡并计算凋亡指数(AI),Western blot法和免疫组织化学法检测大鼠脑皮质GRP78、Caspase-12、Bcl-2及Bax蛋白表达.结果 与Ⅰ、Ⅱ组比较,Ⅲ、Ⅳ组大鼠脑IRI后NDS、脑梗死面积、AI均明显增加,GRP78、Caspase-12、Bax蛋白表达明显升高,Bcl-2蛋白表达明显下降(P＜0.05);与Ⅲ组比较,Ⅳ组大鼠NDS、脑梗死面积、AI及Caspase-12、Bax蛋白表达明显减少,GRP78、Bcl-2表达明显增加(P＜0.05).结论 再灌注同时吸入高浓度H2可通过增加脑IRI后内质网GRP78蛋白表达,并抑制Caspase-12的激活进而抑制ERS并促进内质网功能修复,对大鼠脑IRI起到一定的保护作用.     

脑梗死患者情景记忆编码损伤研究

目的 探讨脑梗死患者情景记忆编码损伤及其相关影响因素.方法 急性期病情稳定的脑梗死患者(112例),与正常对照组(115例)比较.各组均按要求在计算机上完成情景记忆编码测试,观察各组情景记忆编码成绩的变化以及相关因素的影响.结果 脑梗死组情景记忆编码成绩记住数(REM)明显低于对照组[(70.81±6.08)%,(84.67±4.49)%,P＜0.01)];额叶梗死组、颞叶梗死组、基底节梗死组及放射冠梗死组四组REM差异具有显著性[(65.88±5.73)%,(68.92±4.65)%,(73.39±6.20)%,(73.53±3.44)%,P＜0.01)],额叶梗死组低于颞叶梗死组(P＜0.05),颞叶梗死组低于基底节区梗死组及放射冠梗死组(P＜0.05,P＜0.01);皮层梗死组低于皮层下梗死组[(67.37±5.40)%,(73.46±4.99)%,(P＜0.01)].脑梗死小病灶组REM高于脑梗死大病灶组[(72.67±4.47)%,(67.56±6.18)%,P＜0.01)],且病灶直径大小与REM具有显著相关性(r=-0.39).对照组、脑梗死伴脑萎缩与脑梗死无脑萎缩三组REM差异具有显著性(P＜0.01),脑梗死伴脑萎缩组REM低于脑梗死无脑萎缩组和对照组,差异具有显著性(均P＜0.01);脑梗死无脑萎缩组REM低于对照组,差异具有显著性(P＜0.01).结论 脑梗死患者存在情景记忆编码损害,梗死部位、梗死灶大小以及有无脑萎缩与情景记忆编码损害有关.