53例地中海贫血产前基因诊断与临床分析

目的回顾性分析地中海贫血基因产前诊断病例,了解重型地贫胎儿的基因型状况。方法通过介入性产前诊断方法获取胎儿DNA,应用聚合酶链反应（PCR）方法进行地贫产前基因诊断。结果 53对夫妇的胎儿分别检出HbBart＇s胎儿水肿综合征10例,HbH病1例,α地贫-1杂合子16例,α地贫-2缺失型1例,静止型α地贫5例,β地贫中间型（BEM）2例,重型β地贫6例,轻型β地贫12例,其中α、β复合型轻型地贫4例。结论 PCR产前基因诊断法能有效地检出各种常见地贫杂合子和纯合子。     

β地贫CD41-42突变杂合子复合缺失型α地贫双重杂合子的基因检测与血液学分析

目的了解β地中海贫血(地贫)CD41-42(-TCTT)杂合子(β41-42杂合子)复合缺失型α地贫双重杂合子在本地区β41-42杂合子个体中的检出情况及其临床血液学表现.方法分别采用单管多重PCR与反向点杂交法检测缺失型α地贫与β地贫基因,常规进行血细胞分析及其它地贫筛查试验.结果 144例β41-42杂合子有8例同时复合缺失型α地贫杂合子,其中7例(4.9%)携带有α地贫1基因(αα/--SEA),1例(0.69%)携带有缺失型HbH基因(-α3.7/--SEA).7例复合α地贫1患者的MCV均都高于另外136例单纯的β41-42杂合子的MCV平均值(63.53fl); 而对携带有HbH基因的样本进行pH8.6与6.5的血红蛋白电泳时都无法找到HbH区带.结论诊断β41-42杂合子复合α地贫双重杂合子的患者时,如只依赖其临床表现和常规的实验室检查结果作为筛查诊断的指标,容易会出现有病患的α或β地贫基因漏诊的情况.     

桂林地区产前地中海贫血基因诊断175例分析

目的探讨分子诊断技术在产前地中海贫血基因诊断中的应用,以此降低出生缺陷。方法 2016年1月至2016年12月在本院确诊为同型地贫携带者夫妇共175对(其中3例为双胎妊娠),通过羊膜腔穿刺术获取胎儿标本提取DNA,应用跨跃断裂点PCR和PCR结合反向斑点杂交技术进行α,β地贫基因诊断。结果检测出正常胎儿30例,异常胎儿148例,中重型胎儿38例(21.35%)。夫妇为同型α地贫共122对,产前诊断检出正常胎儿22例(18.03%),轻型α地贫73例(59.84%),中间型α地贫17例(13.93%)及Bart′s水肿胎10例(8.20%);夫妇为同型β地贫共30对,产前诊断检出正常胎儿5例(16.67%),杂合子20例(66.67%),纯合子3例(10.00%)及双重杂合子2例(6.67%);夫妇同型地贫且一方为α复合β地贫共20对,产前诊断检出正常胎儿3例,轻型α地贫3例,中间型α地贫1例,β地贫杂合子6例,β地贫纯合子1例,α复合β地贫6例;双胎妊娠孕妇3例,检出轻型α地贫2例,Bart′s水肿胎2例,β地贫杂合子2例。结论应用分子诊断技术,对高危人群在孕中期行羊水地贫基因检测,可以尽早发现中、重型地贫胎儿,从而有效地降低出生缺陷。     

广西柳州地区αβ复合型地中海贫血基因突变类型及检出率分析

目的研究广西柳州地区αβ复合型地中海贫血（地贫）基因突变类型及检出率。方法采用膜反向杂交技术检测β地贫基因。用gap-PCR法检测三种常见α地贫缺失基因型：东南亚型缺失（--SEA）、右侧缺失（-α^3.7）、左侧缺失（-α^4.2）。结果153例β地贫中检测出30名α地贫,检出率为19.61%。均为轻型β地贫复合α地贫,其中β地贫杂合子复合--SEA/αα占90.00%,β地贫杂合子复合-α^3.7/αα占3.33%,β地贫杂合子复合-α^4.2/αα占6.67%。结论广西柳州地区αβ复合型地贫检出率高。--SEA/αα是本地区β地贫杂合子检出的主要复合α地贫基因型。准确诊断β地贫合并α地贫双重杂合子对正确进行遗传咨询,搞好优生优育十分重要。     

β-地贫合并α珠蛋白基因三联体导致中间型地贫的家系分析与产前诊断

目的 探讨分析β-地贫合并α珠蛋白基因三联体导致中间型地贫的家系分析和诊断流程，总结中间型地贫的诊断策略及产前诊断临床实践。方法 通过家系成员血液学表型、常规地贫基因检测和PCR电泳法及珠蛋白基因测序技术分析β-地贫合并α珠蛋白基因三联体的临床表现；利用羊水细胞DNA对该家系1例地贫高风险胎儿进行产前诊断。结果 先证者检出β-地贫CD41-42杂合突变合并αααanti4.2三联体，父亲检出αααanti4.2三联体，母亲检出β-地贫CD41-42杂合突变，胎儿结果未见异常。结论 临床表现为中重度贫血的β-地贫杂合突变且未见罕见型变异，应结合临床表现与基因型是否一致，考虑可能合并α珠蛋白基因三联体导致的中间型地贫。     

用PCR方法进行复合型地中海贫血产前诊断

本文介绍用聚合酶链反应和特异性寡核苷酸探针斑点杂交方法对6种不同形式的复合型地中海贫血高危胎儿12例进行产前诊断，结果是正常胎儿3例．β地贫杂合子3例，HbE杂合子1例，α地贫1复合HbE杂合子1例，α地贫1复合β地贫1例，重型α地贫(Hb—Batrs’水肿胎儿)2例，重型α地贫1例。     

5个中间型β-地中海贫血家系临床结果分析

目的了解现行PCR-RDB法对中间型β-地贫基因诊断的准确性。方法对5个中间型β-地贫家系进行血常规、血红蛋白电泳和β-地贫基因的PCR-RDB法检测,并用长链PCR法检测家系1和家系2中的先证者及母亲的β-地贫基因的缺失突变。结果 5例先证者HbF含量均增高,其中2例为轻度贫血,3例为中度贫血;4例先证者PCR-RDB法结果为杂合子与其表现的临床症状不符,1例先证者PCR-RDB结果为纯合子与父母基因检测结果不符;先证者1及其母亲长链PCR法显示阴性,先证者2及其母亲长链PCR法均为东南亚（SEA）缺失型HPFH。结论若在产前诊断时仅用PCR-RDB法检测β-地贫基因,会造成缺失型β-地贫基因漏诊,引起一系列严重的社会问题。     

梧州地区育龄人群地中海贫血基因型分布状况调查

目的调查梧州地区育龄人群地中海贫血的基因型分布状况,制定相应的地贫筛查策略。方法355名受检者均首先同时进行血液学表型分析及gap-PCR检测3种常见的缺失型α-地贫基因,血红蛋白电泳发现HbA2≥3.5%和/或HbF≥2.0%者,再采用反向点杂交法进行β-地贫基因检测。结果355名受检者中发现α-地贫携带者121例,占34.1%,--SEA、-α3.7、-α4.2这3种等位基因的构成比分别为78.1%、16.4%、5.5%。发现β-地贫杂合子74例,占20.8%,共检出8种β-地贫突变基因,最常见的5种基因-CD41-42、-28、IVS-II-654、CD17、CD71-72占所有突变基因的90.6%;检出β-地贫复合α-地贫双重杂合子共13例,占β-地贫携带者的17.6%。结论梧州地区为地中海贫血高发区,β-地贫杂合子复合α-地贫的发生率亦较高。应将gap-PCR作为临床上地贫筛查的一线技术,以有效检出静止型α-地贫,并减少β-地贫复合α-地贫双重杂合子漏检的可能,为遗传咨询和产前诊断提供更为准确可靠的信息。     

粤北地区地中海贫血检出率及基因分型的调查分析

目的 了解粤北地区地中海贫血的发病情况及基因分型。方法 红细胞休克-管定量法对所有受检人进行地贫筛查，对地贫筛查阳性的标本进一步采用PCR法进行α地贫1基因检测，用PCR结合反向点杂交法(RDB)，进行β地贫的基因检测。结果 在1010例受检者中，地贫筛查阳性的有118例，占受检总人数的11．6％。地贫筛查阳性的所有标本均进行了α地贫1基因检测，诊断为α地贫1杂合子的有69例，占受检总数的6．83％，32例进行了β地贫基因检测，其中21例为β地贫杂合子，占受检总数的2．1％，其基因突变类型分别是：CD41—42(-TTCT)突变12例，IVS-2—654(C→T)突变2例，-28(A→G)突变2例，CD17(A→T)突变2例，71-72( A)突变2例，27—28( C)突变1例。结论 粤北地区地中海贫血发生率较高。做好婚前及产前地贫筛查及产前基因诊断等工作，对避免重型地贫患儿的出生，具有重要意义。     

血红蛋白Westmead的基因型与表型分析

目的分析血红蛋白Westmead(HbWS)携带者基因型与表型之间的关系,探讨HbWS对血液学指标的影响规律。方法回顾分析已通过PCR-反向点杂交技术确诊的82例HbWS携带者的血常规和血红蛋白电泳数据。结果 HbWS杂合子表型特征符合静止型α-地中海贫血(α-地贫);HbWS杂合子合并α左缺失或右缺失型突变时,表现出小细胞低色素性贫血的特征,但血液学和血红蛋白电泳改变相对东南亚缺失型地贫表现得更轻微;HbWS杂合子合并东南亚缺失型时,只呈现出轻型α-地贫的表型特征;HbWS杂合子复合β地贫的病例表现为典型的β地贫血液学特征。结论 HbWS杂合子无论是单独存在或合并其它地贫类型时,对表型的影响均表现得轻微。     

β珠蛋白基因非翻译区＋（43-40）（-AAAC）4bp缺失遗传学效应探讨

目的探讨临床普遍认为可导致β地贫的β珠蛋白基因5’端非翻译区＋（43—40）（-AAAC）4bp缺失（亦称CAP突变）是否具有遗传学效应,为β珠蛋白基因功能研究和地贫一临床基因诊断提供临床和理论依据。方法应用反向点杂交和DNA序列测定确诊四个携带此缺失的先证者,对先证者及其家系核心成员进行血液学分析和基因诊断,同时将各项检查结果与首例报道病例进行对比分析。结果＋（43—40）（-AAAC）4bp缺失杂合子无明显贫血症状,与β珠蛋白基因其他突变方式合并存在病例无严重贫血症状,与首例报道明显不同。结论β珠蛋白基因5’端非翻译区＋（43—40）（-AAAC）4bp缺失没有明显的遗传效应,对基因的表达和生物学功能很可能没有影响。此研究为β珠蛋白基因生物学功能研究提供了更丰富的资料;对β地中海贫血群体筛查具有指导性意义。     

异常血红蛋白(Hb J-Bangkok)合并β-地中海贫血的临床表型分析

目的 分析异常血红蛋白[Hb J-Bangkok(βCD56 GGC＞GAC)]杂合子及其合并β地中海贫血(简称β-地贫)突变的双重杂合子的血液学指标,分析携带该异常血红蛋白突变的表型特征及其对β地中海贫血表型的修饰作用.方法 收集1个携带有Hb J-Bangkok/β-地贫突变的家系以及3例散发的Hb J-Bangkok携带者样本,对其进行血常规分析和血红蛋白电泳,分析并测定α和β珠蛋白基因型.结果 家系中的父亲和3例散发样本均为Hb J-Bangkok杂合子,红细胞参数均正常,但血红蛋白电泳显示有Hb J异常带,无其他临床表型.先证者为Hb J-Bangkok合并β地贫IVS-Ⅱ-654突变的双重杂合子,其血液学表型与单纯β地贫杂合子类似,具有小细胞低色素贫血特征,血红蛋白电泳结果Hb A2上升,并有高含量HbJ异常带.结论 单纯Hb J-Bangkok杂合子无临床表型.Hb J-Bangkok合并β地贫突变不会加重其临床症状.因此携带Hb J-Bangkok突变不会对个体的临床表型产生影响.当Hb J-Bangkok突变携带者与β-地贫携带者婚配时无需进行产前诊断.     

广东清远地区513例地中海贫血高危孕妇产前基因诊断分析

目的了解广东省清远市地中海贫血高危孕妇的产前基因诊断情况,以期能够有效避免地中海贫血患儿的出生,降低清远市新生儿出生缺陷率。方法选取我院2013年6月-2018年6月间收治的513例地中海贫血高危孕妇(19例瑶族)作为研究对象进行研究,对所有高危孕妇进行基因诊断分析,同时在孕期对风险胎儿行脐血或羊水地中海贫血基因诊断。结果 531例地贫高危孕妇中共113例(22.08%)基因诊断显示为正常,静止型和轻型α-地贫分别为56例(10.83%)和121例(23.54%),中间型和重型α-地贫分别为44例(8.54%)和60例(11.67%),轻型β-地贫和轻型β-地贫并α-地贫分别为60例(11.67%)和29例(5.63%),中间型和重型β-地贫分别为14例(2.71%)和17例(3.33%);135例中重型α和β地贫孕妇中间型α地贫常见的基因类型为--SEA/-α3.7、--SEA/-αCSα和--SEA/-α4.2,重型α地贫常见基因类型是--SEA/--SEA,中间型和重型β地贫常见的基因类型是β41-42/β41-42、β41-42/β17和β41-42/β-28,临床上应予以重视。77例重型α和β地贫孕妇经建议均选择终止妊娠,58例中间型α和β地贫孕妇经过充分风险告知后39例选择终止妊娠,19例选择继续妊娠。19例瑶族孕妇中检出4例重型地贫胎儿(3例巴氏水肿胎、1例重型β地贫)。结论通过广泛实施地中海贫血基因筛查,对于地中海贫血高危孕妇进一步进行产前基因诊断,能够有效分辨出中间型和重型地贫胎儿,并采取针对性的处理措施,预防重型地贫胎儿的出生,减轻地贫患儿家庭及社会医疗负担。     

23809例育龄人群地中海贫血筛查与血液学分析

目的了解育龄人群中地中海贫血（地贫）携带情况及其血液学特点,为地贫出生干预及筛查方法的完善提供依据。方法 23 809例育龄人群进行地贫初筛,对红细胞脆性或（和）平均容积低于正常值者进行血红蛋白电泳分析,根据初筛及电泳结果进行基因诊断。结果 23 809例育龄人群中,地贫初筛阳性5147例,血红蛋白分析筛出可疑α地贫3523例、β地贫1624例。地贫基因检测确诊α地贫2435例,包括合并β地贫103,1877例α地贫-1,462例α地贫-2,96例HbH病;β地贫1492例,包括HbE61例,249对夫妇可能生育中、重型地贫儿。少数地贫者血红蛋白水平正常,部分HbH和HbCS病血红蛋白电泳无特殊区带,β地贫合并α地贫双重杂合子表现为β地贫特点,各类地贫间血红蛋白水平、MCV、血红蛋白电泳结果及RBC脆性比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论掌握地贫患者血液学特点,选择合理的筛查模式对育龄人群进行常规筛查,对高危者进行基因检测是干预重症地中海贫血患儿出生的有效措施。     

Down’s综合征相关基因克隆的研究进展

Down’s综合征是最常见的一种染色体数目异常，是导致先天性智力障碍的重要原因之一。寻找Down’s综合征的相关基因是阐明其发病的分子机制的关键步骤。本文综述了Down’s综合征相关基因的筛选策略、基因克隆方法、已克隆的重要相关基因以及在Down’s综合征动物模型研究方面的新进展；     

珠海市金湾区户籍小细胞低色素性贫血儿童和孕妇的病因分析

目的 调查珠海市金湾区户籍儿童和孕妇发生小细胞低色素性贫血的原因。方法 采用已建立的技术和方法分析珠海市金湾区户籍小细胞低色素性贫血门诊及体检儿童和孕妇个体的珠蛋白基因型和铁代谢状态及其他血液学指标。结果 在所研究的271例小细胞低色素性贫血儿童和孕妇病例中（其中儿童和孕妇各142和129例），检出α-、β-地中海贫血（地贫）表型阳性和缺铁（ID）病例各为80、93和98例。经基因分析，有115和93例分别被确定了α-和β-地贫基因型（各含124和96个突变等位基因，其中包括有3例β-合并α-地贫）。另外尚有3个和2个分别为α-和β-地贫表型阳性的病例未能确定其基因型。据此得出珠海市金湾区户籍小细胞低色素性贫血儿童和孕妇个体的地贫基因检出率和携带率分别为76．75％和81．18％（未知基因型以杂合子计），α-合并β-地贫的机率为1．11％；ID的发生率为42．44％，其中儿童和孕妇ID的发生率各为43．66％和41．09％。ID病例地贫基因检出率高达45．22％，地贫合并ID个体占25．00％。此外，还发现单纯性小细胞低色素症（MCV和MCH均降低，但不贫血）个体有更高的地贫基因检出率（84．62％）和携带率（85．31％）。结论 该研究阐明了地贫是引起珠海市金湾区户籍儿童和孕妇发生小细胞低色素性贫血特别是单纯性小细胞低色素症最主要的原因，其次为ID，地贫合并ID住居第三。同时还发现ID个体有不容忽视的地贫基因检出率。由于小细胞低色素性贫血通常被认为是ID的指征，故该研究所得出的结论具有很强的临床针对性和重要的优生优育学意义。     

广东地区2919例育龄人群β地中海贫血检查报告

本文报道了广东地区对2919例育龄人群进行β地中海贫血血液学检查的结果,共筛出115例β地贫阳性病例,发生率为3．94％,并为一对双方均为β地贫杂合子的夫妇及其重型β地贫患儿做了基因诊断。     

广西不孕症妇女α和β地中海贫血的基因型鉴定

目的调查广西区内的不孕症妇女α和β地中海贫血的基因型及其构成比。方法以整群抽样收集2014年1-6月份初次于181医院生殖中心行ART治疗的广西籍不孕症妇女外周血917份,采用基于PCR的基因诊断技术分析这些人α和β地贫的基因型。结果 917个外周血样品中,共检出α地贫基因携带者100例(包括2例双重杂合子),α地贫基因携带率为11.01%,共检出含3种α地贫的等位基因(--SEA,-α3.7,-α4..2),其构成比分别为54.46%、30.69%、14.85%;β地贫基因携带者35例,其中3例为β地贫复合α地贫双重杂合子,基因携带率为3.82%,共发现6种不同的基因型。βCD41-42(-CTTT)移码突变、βCD17(T-A)无义突变占突变基因的77.1%。结论α和β地中海贫血在广西不孕症妇女中的发生率很高。     

β-地中海贫血产前基因诊断的临床应用

目的建立β-地中海贫血产前基因诊断方法并应用于临床诊断.方法对高风险孕妇于孕中期抽取羊水10ml,应用双重PCR结合反向斑点杂交技术（PCR-RDB）,进行产前基因诊断.结果 85例受检病例中,检出β-地贫基因突变46例,其中杂合子37例,双重杂合子5例,纯合子4例.结论 PCR-RDB法是β-地贫产前诊断的有效方法,灵敏、准确、重复性好,值得在临床上应用推广.     

地中海贫血的产前诊断分析

目的对本院基因诊断双方都是α地中海贫血基因携带者或双方都是β地中海贫血基因携带者的夫妇进行产前基因诊断,以杜绝中、重型α和β地中海贫血患儿的出生。方法在孕16～35周时对有生中、重型地贫儿风险的孕妇行羊膜腔穿刺术获得胎儿细胞,采用gap-PCR法检测胎儿三种缺失型α地中海贫血(-α3.7、-α4.2、--SEA)基因型。采用反向点杂交技术(RDB法)检测胎儿三种α基因点突变型(αQSα、αCSα、αWSα)及中国常见17种β基因点突变(41-42、654、-28、71-72、17、βE、31、27/28、IVS-1-1、43、-32、-29、-30、14-15、CAP、Int、IVS-1-5位点正常序列及突变)。结果 275对高危夫妇胎儿中,检测出巴氏水肿胎儿(Hb Bart′s)(基因型:--SEA/--SEA)30例,血红蛋白HbH病(基因型:--SEA/-α3.7,--SEA/-α4.2,--SEA/αCSα,--SEA/αWSα)25例,α地中海贫血携带者(基因型:--SEA/αα、-α3.7/αα、-α4.2/αα、αCSα/αα、αQSα/αα、αWSα/αα)74例,正常(基因型:αα/αα)39例。β地中海贫血纯合子11例,β地中海贫血双重杂合子14例,β地中海贫血携带者51例,未检测出中国常见17种β突变的31例。结论地中海贫血的产前诊断技术可以有效的减少中、重度地贫儿的出生。