三种方法检测梅毒螺旋5体抗体的结果分析

对本单位 2 0 0 1年献血员初筛ＴＲＵＳＴ结果阳性标本 30份、阴性标本 10份 ,用测定梅毒螺旋体抗体的酶联免疫双抗原夹心法试剂 (批号 2 0 0 110 2 0 ,吉比爱生物公司产品 )、ＴＲＵＳＴ试剂 (批号 2 0 0 10 912 ,荣盛公司产品 )、ＴＰＨＡ诊断试剂 (批号ＨＬ .0 2 ,美国Ｌｉｆｅｋｅｙｂｉｏｍｅｄｉｔｅｃｈｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ产品 )进行检测。操作均按试剂说明书。结果 ,30份ＴＲＵＳＴ法初检阳性标本 ,实验当日再次检测 ,18份ＴＲＵＳＴ法阳性均与ＥＬＩＳＡ、ＴＰＨＡ相符 ;4份阳性而ＥＬＩＳＡ、ＴＰＨＡ均是阴性 ;8份ＴＲＵＳＴ…     

献血者初复检抗-HCV阳性标本确认及试剂分析

丙型肝炎是后果最严重的输血传播疾病之一[1] 。血站系统为了尽可能保证安全输血 ,对献血者采用两种不同的试剂进行两次ＥＬＩＳＡ方法的抗 ＨＣＶ检测。在实际工作中 ,ＥＬＩＳＡ方法的抗 ＨＣＶ的检测结果常出现两次结果不一致的情况 ,为了解这些反应的特异性与非特异性情况 ,笔者收集了部分一次结果阳性和两次结果阳性的标本进行了抗 ＨＣＶ确证 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　标本来源　初检或复检抗 ＨＣＶ阳性而被淘汰的献血者的血清标本 4 4份 (重庆市血液中心 2 0 0 0年 7月～ 2 0 0 1年9月 ) ,- 2 0℃储存备用。1.2　试…     

A群流脑多糖菌苗免疫后抗体消长趋势分析

为了解Ａ群流脑多糖菌苗免疫后抗体消长趋势 ,有效地控制流脑的发生与流行 ,我们用ＥＬＩＳＡ和ＰＨＡ两种检测方法对佳木斯市 0～ 7岁未患过流脑 ,流脑抗体阴性的儿童免疫了Ａ群流脑多糖菌苗 ,并对这些儿童免疫后不同时期的抗体水平进行了两年的动态追踪观察。材料和方法1 检测试剂 :ＥＬＩＳＡ试剂由中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所提供。ＰＨＡ试剂由本试验室自制 ,致敏绵羊红细胞用Ａ群流脑多糖抗原由长春生物制品所提供。免疫用Ａ群流脑多糖菌苗由长春生物制品研究所提供。2 检测方法及判断标准 :ＥＬＩＳＡ法以阳性血清的…     

检测乙型肝炎表面抗原的一步法试剂的钩状效应分析

卫生部下发的《血站管理办法 (暂行 )》中规定 ,对献血者血液乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)检测的质量标准是“ＨＢＶ表面抗原(ＨＢｓＡｇ)酶免疫吸附法 (ＥＬＩＳＡ) :阴性” ,但未要求用一步法还是二步法检测。目前 ,国内检测ＨＢｓＡｇ绝大多数采用ＥＬＩＳＡ中的双抗体夹心双位点一步法。用该方法检测ＨＢｓＡｇ ,当标本中的ＨＢｓＡｇ浓度过高时 ,会因钩状效应 (Ｈｏｏｋ)现象出现假阴性 ,而造成漏检 ,增加输血传播ＨＢＶ的风险度 ,严重威胁输血安全。ＨＢＶｅ抗原 (ＨＢｅＡｇ)和ＨＢＶ核心抗体 (ＨＢｃＡｂ)两项阳性时 ,大多数ＨＢｓＡｇ都…     

应用荧光定量ＰＣＲ技术对献血员进行ＨＣＶ ＲＮＡ检测

目前，血液系统利用ＥＬＩＳＡ法检测抗—ＨＣＶ对丙型肝炎进行筛查。敏感性和特异性不断提高的抗—ＨＣＶ的ＥＬＩＳＡ检测试剂虽然大大降低了输血及血液制品带来的病毒感染，但因输血导致的丙型肝炎病毒感染仍时有发生，这主要是因为窗口期的存在，在窗口期之内，已经感染病毒的献血者体内尚未产生足够的、可以检测到的特异性抗体，因此ＥＬＩＳＡ试剂的抗—ＨＣＶ检测结果显示为阴性。用高度敏感的荧光定量的ＰＣＲ技术直接检测病毒核酸，就可以大幅度地缩短窗口期，减少病毒传播的可能性。为了解ＥＬＩＳＡ常规筛查合格的献血者中ＨＣＶＲＮＡ检出率的情况，在２００１年２月收集了重庆市血液中心的部分抗—ＨＣＶ阴性血进行了ＨＣＶＲＮＡ检测，现将结果报道如下。     

ELISA检测HBsAg影响因素的探讨

本文以ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法检测ＨＢｓＡｇ为例 ,从边缘效应、“ＨＤ ＨＯＯＫ”效应、内源物质 (包括溶血、脂浊、补体、ＲＦ、ＡＦＰ、自身抗体等 )的干扰和外源物质 (如血液抗凝剂等 )的干扰等方面探讨ＥＬＩＳＡ的影响因素。1　材料与方法1 1　材料　ＨＢｓＡｇＥＬＩＳＡ试剂盒由新创公司提供 ,批号0 5 0 1;ＨＢｓＡｇ标准品由卫生部临床检验中心提供 ,批号991。1 2　方法　参照《全国临床检验操作规程》ＥＬＩＳＡ双抗夹心法 ,按照试剂盒说明书进行操作。2　结果2 1　边缘效应　以 2 μｇ/ＬＨＢｓＡｇ标准品作为样品 ,采用 37℃…     

抗HCV ELISA精密度问题的探讨

采用三种不同方法：（１）国产试剂微板ＥＬＩＳＡ,（２）进口试剂微板ＥＬＩＳＡ,（３）全自动ＥＬＩＳＡ分析法同时检测人血清中抗ＨＣＶ抗体,结果批内变异系数ＣＶ％分别为１０．３％,５．９％和２．６％。自动分析法由于减少了手工操作的误差,精密度明显高于另外二法。用（１）法测定了三种不同稀释度的抗ＨＣＶ阳性血清,结果Ａ值越小,ＣＶ越大,Ａ值在阳性判断值附近同一标本可得到阳性或阴性结果,在实际检测中应予注意     

应用双抗原夹心法检测抗－HCV抗体

目的建立检测抗－ＨＣＶ抗体的双抗原夹心酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）方法。方法用基因工程手段，在大肠杆菌中表达ＨＣＶ抗原表位与大肠杆菌噬菌体ＭＳ２ＤＮＡ聚合酶（ＭＳ２－Ｐｏｌ）的融合蛋白，纯化后作为包被抗原，可溶性表达的ＨＣＶ抗原表位与霍乱毒素Ｂ亚基（ＣＴＢ）的融合蛋白经辣根过氧化物酶标记后作为酶结合物，建立双抗原夹心ＥＬＩＳＡ。结果ＭＳ２－Ｐｏｌ融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达并进行了纯化，所建立的双抗原夹心ＥＬＩＳＡ系统用于检测１４份ＨＣＶ阳性血清样品，抗－ＨＣＶ抗体检出率１００％；检测２１份ＨＣＶ阴性血清，没有假阳性结果。ＣＴＢ抗体不干扰反应。结论双抗原夹心法与采用二抗的ＥＬＩＳＡ系统具有相近的灵敏度和更好的特异性。可以避免由于二抗干扰带来的非特异性。     

重庆市HIV抗体检测阳性结果分析

我市自 1 993年发现第 1例艾滋病毒感染者以来 ,至 2 0 0 0年底已检出ＨＩＶ抗体阳性者 5 2例 ,其中已有两例分别于 1 997年和 1 999年死亡。为掌握我市艾滋病流行病学状况 ,强化预防工作 ,现将感染者资料分析如下。材料和方法1 血清 :取自我市各戒毒所、妇教所高危人群、性病门诊者、献血者、医院就诊者等。2 方法 :用ＥＬＩＳＡ(ＨＩＶ1 + 2 )试剂进行初筛 ,阳性结果再用两种不同原理的ＥＬＩＳＡ试剂复核 ,两种结果均为阳性或 1阴 1阳者 ,用ＷＢ法 (蛋白印迹法 )进行确认。结　　果1 检出时间 :1 993年 1例 ,1 994年 2例 ,1 995年 3例…     

抗 ＳＳＡ、ＳＳＢ 和 ＣＥＮＰ⁃Ｂ 抗体在系统性红斑狼疮及干燥 综合征的发生率及浓度分析

目的 比较抗 ＳＳＡ、ＳＳＢ 和 ＣＥＮＰ?Ｂ 抗体在系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）和干燥综合征（ＳＳ）患者中的发生率和浓度。 方法 对 ５３１ 例 ＳＬＥ 患者和 ９６ 例 ＳＳ 患者同时采用 ＣＬＩＡ 和 ＥＬＩＳＡ 进行抗 ＳＳＡ、ＳＳＢ 和 ＣＥＮＰ?Ｂ 抗体检测。 比较上述 ３ 种抗体在 ＳＬＥ 和 ＳＳ 患者组的发生率和浓度，以及 ＣＬＩＡ 和 ＥＬＩＳＡ 检测结果的符合率。 结果 抗 ＳＳＡ 和 ＳＳＢ 抗体在 ＳＳ 患者组的发生率明显 高于 ＳＬＥ 患者组（Ｐ＜０．０１），而抗 ＳＳＢ 和 ＣＥＮＰ?Ｂ 抗体在 ＳＳ 患者组的浓度显著高于 ＳＬＥ 患者组（Ｐ＜０．０１）。 在 １３４ 例抗 ＳＳＢ 抗 体阳性的样本中，仅 ４ 例样本抗 ＳＳＡ 抗体阴性。 ＣＬＩＡ 和 ＥＬＩＳＡ 在检测上述 ３ 种抗体的总符合率分别为 ９６．４％、９５．７％和 ９８．３％。 结论 抗 ＳＳＡ 和 ＳＳＢ 抗体对 ＳＬＥ 和 ＳＳ 患者临床诊断具有重要价值。 抗 ＳＳＢ 抗体的发生具有与抗 ＳＳＡ 抗体的依赖 性。 ＣＬＩＡ 和 ＥＬＩＳＡ 两种方法检测上述 ３ 种抗体表现出良好的符合率。