WISP-2在人脑星形细胞瘤中的表达研究

目的探讨WISP-2mRNA及蛋白在人脑星形细胞瘤中的表达及意义。方法采用半定量PCR检测WISP-2mRNA在人脑星形细胞瘤组织与正常脑组织中的表达差异;随后利用免疫组化方法验证WISP-2蛋白在星形细胞瘤组织与正常脑组织之间的表达差异。结果半定量PCR检测发现,WISP-2mRNA在正常脑组织中无表达,在星形细胞瘤中相对表达量为0.677±0.445,两者比较有统计学意义(t=4.783,P0.05),在高级别组(Ⅲ-Ⅳ)与低级别组(Ⅰ-Ⅱ)星形细胞瘤中的相对表达量分别为0.924±0.438、0.478±0.344,两者比较有统计学意义(t=3.909,P0.05)。免疫组化检测发现,正常脑组织细胞中无WISP-2蛋白阳性表达(0/10),WISP-2蛋白在星形细胞瘤组织内呈高表达,阳性率为66.0%(31/47),两者比较有统计学意义(χ2=11.92,P0.01),WISP-2蛋白在高级别组(Ⅲ-Ⅳ)与低级别组(Ⅰ-Ⅱ)星形细胞瘤中的表达阳性率分别为85.7%(18/21)、50.0%(13/26),两者比较有统计学意义(χ2=6.60,P0.05).与WISP-2mRNA在星形细胞瘤组织内表达特征相一致,两者具有正相关性(r=0.63,P0.001)。结论WISP-2mRNA和蛋白在人脑星形细胞瘤组织中明显高表达,并与其恶性程度有关,可作为判断脑星形细胞瘤恶性程度的一个辅助指标。     

Skp2和PTEN在人脑星形细胞瘤中的表达及临床意义

目的探讨Skp2和PTEN在人脑星形细胞瘤中的表达及与病理分级的关系。方法免疫组化S-P法检测70例Ⅰ～Ⅳ级脑星形细胞瘤和8例正常脑组织标本中Skp2和PTEN的表达。结果（1）Skp2、PTEN在人脑星形细胞瘤组中阳性表达率分别为47．1％和50．0％，而在正常脑组织组中阳性表达率分别为0％和100％。从星形细胞瘤Ⅰ、Ⅱ级组，Ⅲ级组到Ⅳ级组，Skp2的阳性表达率呈增高趋势，分别为9．1％、45．5％、80．8％，而PTEN的阳性表达率呈降低趋势，分别为90．9％、50．0％、15．4％。（2）Spearman等级相关检验证实病理分级和Skp2标记指数呈正相关，和PTEN标记指数呈负相关。人脑星形细胞瘤中Skp2和PTEN的表达呈负相关。结论Skp2和PTEN蛋白的表达情况可作为人脑星形细胞瘤的诊断和恶性程度评估的参考资料，可能成为人脑星形细胞瘤治疗的新靶点。     

Skp2和PTEN在人脑星形细胞瘤中的表达及临床意义

目的探讨Skp2和PTEN在人脑星形细胞瘤中的表达及与病理分级的关系。方法免疫组化S-P法检测70例Ⅰ～Ⅳ级脑星形细胞瘤和8例正常脑组织标本中Skp2和PTEN的表达。结果(1)Skp2、PTEN在人脑星形细胞瘤组中阳性表达率分别为47.1%和50.0%,而在正常脑组织组中阳性表达率分别为0%和100%。从星形细胞瘤I、II级组,III级组到IV级组,Skp2的阳性表达率呈增高趋势,分别为9.1%、45.5%、80.8%,而PTEN的阳性表达率呈降低趋势,分别为90.9%、50.0%、15.4%。(2)Spearman等级相关检验证实病理分级和Skp2标记指数呈正相关,和PTEN标记指数呈负相关。人脑星形细胞瘤中Skp2和PTEN的表达呈负相关。结论Skp2和PTEN蛋白的表达情况可作为人脑星形细胞瘤的诊断和恶性程度评估的参考资料,可能成为人脑星形细胞瘤治疗的新靶点。     

PTTG、MMP-2在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

目的探讨PTTG、MMP-2在人脑星形细胞瘤中的表达,研究其与病理分级的关系,分析二者在表达过程中的相互关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测PTTG、MMP-2在正常脑组织及在不同病理级别人脑星形细胞瘤中的表达。结果 PTTG、MMP-2在2组阳性表达比较差异有统计学意义(P<0.05),表达阳性率随病理级别的增高呈增高趋势,低度恶性组与恶性组比较差异有统计学意义(P<0.05),而恶性组与高度恶性组比较差异无统计学意义(P>0.05),二者在表达过程中存在正相关(r=0.504,P<0.05)。结论 PTTG和MMP-2在人脑星形细胞瘤的发生发展过程中存在正相关性,PTTG可能通过MMP-2促进肿瘤的发生和发展。     

Bcl-2和Bax蛋白在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

目的　研究 Ｂｃｌ２ 和 Ｂａｘ 蛋白与人脑星形细胞瘤发生的关系。方法　收集人脑星形细胞瘤标本５８ 例, 行 Ｓ Ｐ 染色。结果　 Ｂｃｌ２ 在星形细胞瘤中阳性表达率为５６９ ％ , 且表达率随肿瘤恶性程度的增加而增高。 Ｂａｘ 的表达率为５５２ ％ , 显著高于对照组。 Ｂｃｌ２ 表达阳性的肿瘤中 Ｂａｘ 蛋白表达率（６６７ ％ ） 显著高于 Ｂｃｌ２ 表达阴性的肿瘤（４００ ％ ） 。结论　 Ｂｃｌ２ 和 Ｂａｘ 蛋白的表达与星形细胞瘤的发生和发展有较密切的关系, 且它们在星形细胞瘤的发生中可能存在相互作用的关系。     

Ezrin在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

目的 探讨Ezrin在人脑星形细胞瘤中的表达及意义.方法 免疫组化法检测107例星形细胞瘤和10例正常脑组织中Ezrin的表达,结合临床随访资料分析其表达与预后的相关性.结果 Ezrin的表达在2组之间的差异有统计学意义(P＜0.05).星形细胞瘤中Ezrin阳性表达率为89.7%,其表达与肿瘤恶性程度呈正相关(r=0.551,P＜0.01),临床资料分析发现Ezrin的表达与肿瘤细胞分化、瘤周水肿程度有关(P＜0.05).Ezrin强阳性表达组和弱阳性+阴性表达组的术后无瘤生存时间之间差异具有统计学意义(X~2=29.85,P=0.000).结论 Ezrin的表达与星形细胞瘤的恶性程度相关,过表达对肿瘤发展起重要作用.     

Survivin、Bcl-2和PTEN在人脑星形细胞瘤中的表达及相关性研究

目的 研究人脑星形细胞瘤中survivin、bcl-2和PTEN的表达情况及相关性，探讨其与星形细胞瘤的发展、临床病理参数之间的关系。方法 应用免疫组织化学Elivision二步法检测实验组与正常对照组标本中survivin、bcl-2和PTEN的表达。结果 survivin、bcl-2和PTEN在不同级别星形细胞瘤中的阳性表达率有显著性差异（P〈0．01）。随着星形细胞瘤病理分级的增加，survivin和bcl-2表达的阳性率及表达强度渐增（P〈0．01），PTEN表达的阳性率及表达强度渐减（P〈0．01）。survivin和bcl-2的表达之间存在正相关关系（P〈0．01）；survivin、bcl-2与PTEN的表达均存在负相关关系（P〈0．01）。结论 在人脑星形细胞瘤中，survivin、bcl-2高表达和PTEN相对低表达，说明三者可能参与人脑星形细胞瘤的病理发展。     

Cyclin E 和p27在人脑星形细胞瘤中的表达和意义

目的检测cyclin E和p27在原发性星形细胞瘤中的表达情况并评价其表达程度与肿瘤病理分级之间的关系.方法应用免疫组化染色法,对 46例星形细胞瘤标本和8例非肿瘤脑组织标本中 cyclin E和p27的表达情况进行检测,结果用标记指数(LI)表示.结果 cyclin E和p27在所有标本中均有不同程度的表达.t检验显示,在对照组和各级别星形细胞瘤之间、对照组与低恶性度组之间、低恶性度组与高恶性度组之间,cyclin E和p27表达程度的差异均有显著性意义(P<0.05).等级相关分析显示,星形细胞瘤的病理分级与cyclin E LI之间呈正相关(r=0.599, P<0.01),与p27 LI之间呈负相关(r=-0.732, P<0.01).同时cyclin E LI与p27 LI之间也呈明显的负相关(r=-0.754, P<0.01).结论 cyclin E和p27在星形细胞瘤中存在异常的表达,其标记指数与肿瘤病理分级之间有良好的相关性.cyclin E和p27的表达程度可作为反映星形细胞瘤恶性程度的参考指标,两者联合应用时意义更大.     

P53在星形细胞瘤中的表达

目的研究P53在星形细胞瘤中的表达与肿瘤病理分级的关系,讨论P53在星形细胞瘤预后判断上的价值.方法SP免疫组化法对110例星形细胞中P53的表达进行研究.结果在星形细胞瘤中,P53阳性表达率及其阳性细胞百分率均与病理分级无关.结论P53基因突变是星形细胞瘤发生发展过程的不同阶段中的一种相对独立的基因改变,P53蛋白的积聚在该肿瘤预后判断上的价值尚难肯定.深圳市科委课题资助     

Moesin在人脑星形细胞瘤的表达及意义

目的探讨膜结构伸展刺突蛋白（Moesin）在人脑星形细胞瘤中的表达及意义。方法应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法（SP法）,检测56例人脑星形细胞瘤和10例正常脑组织中Moesin和磷酸化Moesin的表达,并结合临床随访资料分析表达水平与星形细胞瘤临床预后的相关性。结果Moesin的阳性表达率在人脑星形细胞瘤组96．4％（54／56）和正常脑组织对照组0％（0／10）之间有统计学差异（P〈0．01）。Ⅲ～Ⅳ级星形细胞瘤Moesin的强阳性表达高于Ⅰ～Ⅱ级,两者相比有统计学差异（χ^3=27．50,P〈0．01）,磷酸化Moesin的表达结果与Moesin的结果基本一致。Moesin强阳性表达组患者比弱阳性＋阴性表达组患者的术后无瘤生存时间短,其差异有统计学意义（χ^2=29．85,P=0．000）。结论Moesin的表达水平与人脑星形细胞瘤的恶性程度密切相关,Moesin的过度表达对星形细胞瘤发展和预后起重要作用,提示Moesin可以作为反映星形细胞瘤预后的一种有价值的分子标志物。     

高容量血液滤过对重型颅脑损伤患者颅内压的影响

目的观察重型颅脑损伤患者应用高容量血液滤过(HVHF)对其颅内压(ICP)及预后的影响。方法选取90例GCS评分3~8分的颅脑损伤患者按照治疗方法不同分为治疗组60例与对照组30例,对照组给予常规治疗措施,治疗组在此基础上给予HVHF,连续治疗2周后评价患者ICP变化及预后。结果治疗组3 d、7 d及14 d时颅内压均明显低于对照组(P0.05),3 d、7 d及14 d时血清IL-6、TNF-α值均明显低于同期对照组(P0.05),术后并发症及死亡率均明显低于对照组(P0.05),具有统计学意义。结论重型颅脑损伤患者术后应用HVHF治疗可显著降低颅内压增高曲线,改善患者预后。     

H19在多形性胶质母细胞瘤中的表达及对细胞系增殖、侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA(Long noncoding RNAs,LncRNAs)H19在人多形性胶质母细胞瘤((glioblastoma mutliforme,GBM)中的表达及其对U87-GBM生物学功能的影响及作用机理。方法实时荧光定量核酸扩增检测系统(Realtime Quantitative PCR Detecting System,qPCR)检测H19在GBM表达;CCK-8试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测U87细胞增殖;流式细胞技术(Flow Cytometry,FCM)检测U87细胞凋亡及细胞周期;侵袭小室(transwell)检测U87细胞迁移和侵袭.蛋白质印迹法(Western blot)法检测P53表达。结果 H19在GBM中高表达,上调H19促进GBM的增殖、侵袭、迁移;抑制凋亡;增加了细胞周期S期比例;抑制了P53的表达。结论 H19促进GBM的致癌性。     

过氧化氢干预下Rab30在PC12细胞中的表达及促凋亡通路

目的探讨经过氧化氢(H_2O_2)损伤干预下Rab30在PC12细胞中的表达及可能的促凋亡通路。方法将体外常规培养的PC12细胞分为正常组和H_2O_2组。采用MTT检测细胞存活率;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;Western-blot检测Rab30、JNK3、GM130、Caspase-3的蛋白表达情况。结果 H_2O_2损伤干预可导致PC12细胞的存活率显著降低(P0.05),早期凋亡率和总凋亡率均显著增高(均P0.05);JNK3、Caspase-3蛋白表达水平在PC12细胞中显著增加(P0.05),而Rab30、GM130蛋白表达显著下降(P0.05)。结论 H_2O_2在PC12细胞中的促凋亡通路可能是H_2O_2激活JNK3的表达而靶向下调Rab30,致使高尔基体结构破碎,并激活Caspase-3的活性,从而诱导PC12细胞的凋亡。     

APO2L/TRAIL expression in human brain tumors

APO2 ligand (APO2L)/TRAIL is a novel member of the tumor necrosis factor cytokine family and a potent inducer of apoptosis in tumor cell lines. We recently reported that APO2L is consistently expressed in low-grade astrocytomas, anaplastic astrocytomas, glioblastomas, and cell lines derived thereof, and that malignant glioma cell lines are susceptible to APO2L-induced apoptosis. In this study, we investigated whether APO2L is expressed in medulloblastoma or neuroblastoma cell lines and whether these cells are sensitive to APO2L-induced apoptosis. Immunoblot analyses revealed full-length APO2L protein expression in one (DAOY) of three medulloblastoma cell lines but not in two neuroblastoma cell lines (SKN-BE and SKN-LE). Viability assay performed after exposure to soluble APO2L for 16 h showed that DAOY medulloblastoma cells were the most sensitive and that apoptosis induced by APO2L was greatly enhanced when protein synthesis was inhibited by cycloheximide. Neuroblastoma cell lines were almost completely resistant to APO2L-induced apoptosis. We also carried out APO2L immunohistochemistry in a total of 115 tumors of the nervous system with different histogenesis and biological behavior. In all 9 pilocytic astrocytomas, the areas of dense fibrillary network showed diffuse and strong APO2L expression. In oligodendrogliomas, APO2L expression was observed in areas with a significant admixture of astrocytic cells, but was absent in neoplastic oligodendrocytes. In 13 of 14 ependymomas, APO2L was expressed in perivascular pseudorosettes. In all 12 medulloblastomas, strong APO2L expression was observed in intra-tumoral-reactive astrocytes, but neoplastic cells did not show APO2L immunoreactivity. Thus, the pattern of APO2L expression was largely similar to that of glial fibrillary acidic protein (GFAP), except for choroid plexus tumors and 3 of 8 anaplastic meningiomas, in which APO2L was focally expressed without concomitant GFAP expression. APO2L expression was absent in meningiomas, neurocytomas, and schwannomas. Thus, there is considerable heterogeneity of APO2L expression and susceptibility to APO2L-induced apoptosis among human brain tumors. Received: 18 August 1999 / Revised, accepted: 29 September 1999     

小电导钙激活型钾通道SK3在大鼠偏头痛模型中脑干的表达变化

目的初步探讨小电导钙激活型钾通道SK3与大鼠偏头痛的关系,为研究偏头痛的发病机制,寻找新治疗靶点提供实验依据。方法 40只成年雌性SD大鼠随机分为对照组8只,模型组16只,干预组16只,后两组再随机分为发作期组和间歇期组,每组8只。按Tassorelli Cristina法复制偏头痛大鼠模型。对照组用生理盐水造模。干预组每天灌服氟桂利嗪2 ml(0.5 mg/kg),对照组每天灌服生理盐水2 ml。发作期组于第5次造模后3 h、间歇期组于第5次造模后4 d断头处死取脑干组织。RT-PCR法及Western法分别检测各组脑干SK3 mRNA及其蛋白的表达。结果模型组、干预组脑干SK3 mRNA及其蛋白的表达水平均较对照组下降(P0.05),且各发作期组均较相应间歇期组更低(P0.05);而模型发作期组与干预发作期组、模型间歇期组与干预间歇期组比较SK3 mRNA及其蛋白的表达水平无明显差异(P0.05)。结论脑干SK3表达的降低可能与偏头痛的发生发展有关;氟桂利嗪防治偏头痛可能不是通过影响脑干SK3的表达量实现的。     

人脑星形细胞瘤中Gal-3和Bcl-2蛋白的表达及相关性研究

目的研究人脑星形细胞瘤中Gal-3和Bcl-2蛋白的表达及相互关系。方法 46例标本取自首次行星形细胞瘤切除的患者,8例正常脑组织标本取自颅脑外伤行内减压的患者,应用SP法免疫组化检测标本中Gal-3和Bcl-2蛋白在正常脑组织和不同病理分级的星形细胞瘤中表达。结果正常脑组织中无明显Gal-3和Bcl-2表达,Gal-3的阳性表达与星形细胞瘤的病理分级之间呈显著相关性,不同病理分级星形细胞瘤中Bcl-2阳性表达的差异无统计学意义。Gal-3与Bcl-2在星形细胞瘤中的表达呈正相关。结论 Gal-3在星形细胞瘤中的表达可能对肿瘤发生、发展有重要的作用,它有可能通过调节Bcl-2蛋白的水平来发挥抑制细胞凋亡的作用。     

大鼠杏仁核电刺激癫痫持续状态后颞叶癫痫模型海马区神经生长相关蛋白43的表达

目的 探讨神经生长相关蛋白43(GAP-43)在大鼠杏仁核电刺激癫痫持续状态后颞叶癫痫(SE)模型海马区的表达及意义.方法 健康雄性Wistar大鼠60只,分成4组:空白对照组、未刺激组、未发作组和发作组.空白对照组:不植入电极;未刺激组:植入电极未行电刺激;发作组:植入电极电刺激后15d内、30 d内能观察到稳定的自发性反复发作(SRS)的大鼠归为发作组,其余归为未发作组.分别在15d、30 d时,将标本应用RT-PCR及免疫荧光检测方法检测大鼠海马GAP-43的表达.结果 致痫15d,发作组、未发作组和未刺激组的GAP-43表达高于空白对照组,并依次降低(P＜0.05).致痫30 d,发作组和未发作组GAP-43表达仍高于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);未刺激组与空白对照组水平相当,二者差异无统计学意义(P＞0.05).结论 GAP-43参与了神经元损伤修复和突触重塑,其可能是颞叶癫痫的病理基础——突触重塑的重要分子机制.     

失眠模型大鼠脑干γ-氨基丁酸转运体-1表达的变化

目的 检测失眠模型大鼠脑干组织中γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1) mRNA及GAT-1蛋白的表达变化.方法 36只SD大鼠随机分为失眠模型组、生理盐水对照组和地西泮干预组.腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)制作大鼠失眠模型.采用RT-PCR法和Western blot法分别检测大鼠脑干组织中GAT-1 mRNA和GAT-1蛋白的表达变化.结果 与对照组相比,模型组和干预组GAT-1 mRNA及GAT-1蛋白的表达均降低(P＜0.01),干预组较模型组表达更低(P＜0.01).结论脑干GAT-1表达下调可能与失眠后机体的保护性机制有关;地西泮下调GAT-1可能是其发挥催眠作用的机制之一.     

Olig-2在人脑胶质细胞瘤中的表达及临床意义

目的研究少突胶质细胞转录因子-2（Olig-2）在人脑胶质细胞瘤组织中的表达,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化sP法和蛋门印迹技术（Westernblot）,检测96例脑胶质细胞瘤患者的手术标本,WHO分类：Ⅰ级26例,Ⅱ级28例,Ⅲ级20例,Ⅳ级22例;组织学分类：巨细胞星形胶质细胞瘤26例,少突胶质细胞瘤28例,间变性星形胶质细胞瘤20例,多形胶质母细胞瘤10例,髓母细胞瘤12例和10例颅脑损伤内减压脑组织标本中Olig-2蛋白的表达水平：结果免疫组化结果表明：巨细胞星形胶质细胞瘤阳性表达牢为23．08％（6／26）,少突胶质细胞瘤阳性表达率为82．14％（23／28）,间变性星形胶质细胞瘤阳性表达率为40．00％（8／20）,多形胶质母细胞瘤阳性表达率为30．00％（3／10）,髓母细胞瘤阳性表达率为75．00％（9／12）和正常脑组织阳性表达率为60．00％（6／10）;Olig-2阳性率在良性（Ⅰ＋Ⅱ）和恶性（Ⅲ＋Ⅳ）中分别为53．70％（29／54）和47．62％（20／42）,统计学处理无明显差异（P〉0．05）;少突胶质细胞瘤Olig-2阳性率82．14％（23／28）和其它病理类型肿瘤阳性率38．24％（26／68）比较有明显差异（P〈0．05）;Westernblot结果显示少突胶质细胞瘤中Olig-2蛋白的表达明显高于其它类型胶质细胞瘤及正常脑组织（P〈0．05）。结论Olig-2在少突胶质细胞瘤中明显高表达,但表达水平与脑胶质细胞瘤恶性程度无明显相关,Olig-2可以作为人脑少突胶质细胞瘤与其它类型胶质细胞瘤鉴别诊断的重要标记物.