PCR检测降钙素基因高甲基化在监测慢性髓细胞白血病恶化？…

目的 观察慢性髓细胞白血病（ＣＭＬ）病情恶化与降钙素（ＣＴ）基因高甲基化程度之间的关系，方法 用内切酶酶切和ＰＣＲ技术研究４５例ＣＭＬ患者（其中慢性期３３例，加速期２例，急变期１０例）的ＣＴ基因高甲基化程度，ＣＴ基因未高甲基化，则能被相应的内切酶断，无法扩增出的特异ＤＮＡ片断，否则，能扩增出特异ＤＮＡ片断，据此推断ＤＮＡ的甲基化程度。结果 ３例慢性期，２例加速期及８例急变期患者呈现降钙素基因高甲基     

HpaⅡ—PCR检测慢性髓细胞白现降钙素基因甲基化

采用ＨｐａⅡ－ＰＣＲ检测３１例不同病期慢性髓细胞白血病降钙素基因甲基化。结果显示：降钙素基因的高甲基化与慢性髓细胞白血病恶性程度密切相关,加速期与夺始细胞危象期检出率远高于慢性期。提示检测降钙素基因甲基化水平期预测疾病转变和选择骨髓移植病例有参考价值。     

HpaII—PCR检测急性白血病降钙素基因高度甲基化

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合ＨｐａⅡ限制性内切酶消化法（ＨａｐⅡ－ＰＣＲ）检测７８例急性白血病（ＡＬ）患者降钙素（ＣＴ）基因的甲基化状态。病例组待检细胞ＤＮＡ经ＨｐａⅡ消化后，再用两对ＣＴ基因特异性引物作ＰＣＲ扩增，分别产生长度为５６６ｂｐ和１．４ｋｄ特异片段。急性淋巴细胞白血病阳性率６８．８％（３３／４８），急性非淋巴细胞白血病７３．３％（２２／３０），敏感性达１０＾－３。证明ＣＴ基因５＇高度     

Hpa Ⅱ- P C R 检测慢性髓细胞白血病降钙素基因甲基化

采用 Ｈｐａ Ⅱ Ｐ Ｃ Ｒ 检测３１ 例不同病期慢性髓细胞白血病降钙素基因甲基化。结果显示：降钙素基因的高甲基化与慢性髓细胞白血病恶性程度密切相关,加速期与原始细胞危象期检出率远高于慢性期。提示检测降钙素基因甲基化水平对早期预测疾病转变和选择骨髓移植病例有参考价值。     

急性白血病钙素基因甲基化的PCR检测

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了１０例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）和２２例急性随细胞白血病（ＡＭＬ）降钙素（ＣＴ）基因的甲基化程度。结果表明，７例ＡＩＬ与１６例ＡＭＬ的ＣＴ基因都发生了高度甲基化。临床完全缓解的３例ＡＭＬ和２例ＡＩＬ中有１例ＡＬＬ为阳性，另有１例阴性的ＡＭＬ于１个月后转为阳性，随后出现临床复发。     

急性髓性白血病降钙素基因甲基化定量研究

为探讨降钙素（ＣＴ）基因高甲基化能否作为急性髓性白血病（ＡＭＬ）微小残留病（ＭＲＤ）的检测指标。采用设有内、外参照的聚合酶链反应（ＰＣＲ），结合限制内切酶和激光扫描技术，检测了４０例ＡＭＬ患者骨髓细胞的ＣＴ基因５′端甲基化率（ＣＴＭＲ）。结果：初发ＡＭＬ患者ＣＴＭＲ为５２５％±１９３７％，显著高于对照组（８１％±３７３％；Ｐ＜００００５），部分缓解（ＰＲ）组显著高于对照组而显著低于初发组；完全缓解（ＣＲ）组显著高于对照组而与ＰＲ组差别无显著性；ＡＭＬ患者的ＣＴＭＲ与骨髓白血病细胞数呈显著正相关（ｒ＝０．７１５，Ｐ＜０００１），ＣＲ组１６例中４例ＣＴＭＲ在５０％以上，分别于２、４、４５和９个月后复发。结果提示：ＣＴＭＲ有可能成为检测ＡＭＬ微小残留病的有用指标     

白血病细胞诱导分化过程中降钙素基因异常甲基化的研究

采用ＰＣＲ检测技术，观察白血病细胞诱导分化前后ＣＴ基因甲基化型的变化和检测本方法的灵敏度及对检测白血病ＭＲＤ的意义。结果发现随着ＨＬ－６０细胞以及人早纪粒白血病体外诱导分化成熟，该基因由收藏 化状态转变为正常，２例缓解期的ＡＰＬ病人，其甲基化正常，本方法的度为１／１０００白血病细胞，如进一步提高敏感性，将有助于ＭＲＤ的检测。     

急性白血病钙素基因甲基化的PCR检测

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了１０例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）和２２例急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）降钙素（ＣＴ）基因的甲基化程度。结果表明,７例ＡＬＬ与１６例ＡＭＬ的ＣＴ基因都发生了高度甲基化。临床完全缓解的３例ＡＭＬ和２例ＡＬＬ中有１例ＡＬＬ为阳性,另有１例阴性的ＡＭＬ于１个月后转为阳性,随后出现临床复发。提示急性白血病ＣＴ基因高度甲基化的ＰＣＲ检测,对ＡＬＬ与ＡＭＬ微小残留病有很重要的诊断价值,特别为缺乏恒定肿瘤细胞标志的ＡＭＬ提供了一个新的分子基因标志。     

PCR技术检测慢性淋巴细胞白血病患者基因甲基化异常

目的 探讨检测慢性淋巴细胞白血病患者孕激素受体B基因甲基化状态改变的临床价值.方法 选择2008年1月～2010年1月收治的慢性淋巴细胞白血病患者外周血DNA 27例作为观察组,采用甲基化特异性PCR技术对其进行检测;同时选取作为对照组的15例正常人对外周血DNA孕激素受体B基因甲基化状态.结果 慢性淋巴细胞白血病患者27例外周血中18例成功检测到孕激素受体B基因甲基化异常;对照组15例均没有发现甲基化异常.结论 PCR技术检测慢性淋巴细胞白血病患者基因甲基化异常对检测肿瘤的成长起着一定的作用.     

筑巢式PCR检测慢性粒细胞白血病bcr/ablm RNA

目的：观察慢性粒细胞性白血病（CML）患者bcr／ablmRNA的表达情况。方法：应用逆转录筑巢式聚合酶链反应（NestedPCR）检测了32例CML患者的bcr／ablmRNA。结果：30例检测到bcr／ablmRNA;其中19例检测到bcrexon3／ablexon2mRNA,7M表达bcrexon2／abl。exon2mRNA．4例同时表达这两种mRNA。结论：NestedPCR是检测CML患者bcr／ablmRNA有效而敏感的方法。     

慢性粒细胞性白血病bcr/abl融合基因的表达

目的：研究慢性粒细胞性白血病患者bcr／abl融合基因阳性率及其临床意义。方法：取慢性粒细胞性白血病(CML)患者骨髓或外周血，提取单核细胞的总RNA，用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)，观察其ber／abl基因的表达。结果：9例CML患者中，8例ber／abl基因阳性，占88.9％。结论：bcr／abl基因检测可以用来辅助CML的临床诊断。     

应用改良的多聚酶链反应诊断慢性粒细胞性白血病BCR／ABL融合基因

应用改良的多聚酶链反应诊断慢性粒细胞性白血病ＢＣＲ／ＡＢＬ融合基因生化教研室伞德忠，张乃忠，王莉琳，宋磊二院于军，武宝珍，夏丽娟海拉尔地区医院刘昌勋慢性粒细胞性白血病（ＣＭＬ）是首先被发现的细胞染色体异常的疾病，此异常染色体称ｐｈ染色体。研究表明这种...     

不典型慢性粒细胞白血病血液学特征分析

目的：探讨不典型慢性粒细胞白血病的诊断．方法：对比分析12例不典型慢性粒细胞白血病和23例典型慢性粒细胞白血病的临床表现和血液细胞学特征．结果：不典型慢性粒细胞白血病发病年龄较大，多数患者元贫血，血小板轻度增高，脾大不明显，外周血中性粒细胞碱性磷酸酶积分稍减低或正常，Ph染色体阴性，PCR检测阴性．结论：不典型慢性粒细胞白血病诊断必须结合临床动态观察，若随病程延长，病情加重，其他治疗无效者，应考虑本病．     

慢性粒细胞白血病患者血清乳酸脱氢酶的变化

目的 探讨慢性粒细胞白血病（CML）患者血清乳酸脱氢酶（LDH）的变化及LDH与其他预后因素关系。方法 检测68例CML患者血清LDH及其同工酶,分析LDH与患者临床特征、外周血、骨髓细胞学和bcr-abl基因表达（P210）的关系。结果 CML患者的血清LDH及其同工酶均有不同程度的升高,并与血白细胞,P210、骨髓增生程度、脾肿大有关,但与血红蛋白、血小板、肝肿大、年龄和性别无关。结论 检测血清LDH有助于CML的诊断和预后评估。     

巢式PCR法检测不同类型标本中p16基因启动子过甲基化

目的 介绍一种高灵敏度的DNA甲基化分析方法，即巢式甲基化特异性。PCR法(nested-MSF，nMSP)，探讨该方法最佳应用条件，并用该法分析新鲜癌组织、石蜡包埋组织及肿瘤患者血清中p16基因启动子的甲基化状态。方法 将基因组DNA变性成为单链，用亚硫酸氢盐修饰单链DNA，所有未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶则不变。设计针对甲基化和非甲基化等位基因的特异引物，进行巢式PCR扩增，最后经凝胶电泳检测目的片段。结果 在3种类型的标本中都检测出了p16基因启动子的甲基化，比普通的甲基化特异性PCR法具有更高的灵敏度。结论 巢式甲基化特异性PCR是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法，可广泛应用于不同类型标本基因启动子甲基化分析。     

慢性髓性白血病急性变时染色体变化的研究

目的：探讨慢性髓性白血病（ＣＭＬ）急性变时染色体的变化及与预后的关系。方法：取２０例（ＣＭＬ病人急性变前、后外周血或骨髓液、处理后制片,Ｇｉｅｍｓａ染色,Ｇ显带或Ｒ显带,在显微镜下摄影后配对、分析。结果急性变前ｐｈ染色体阳性１８例,阴性２例。急性变后１９例附加出现了新的染色体异常。染色体数目异常超二倍体占１５／２０。附加出现的异常染色体中,＋８、＋１９、＋２２ｑ－及Ｉ（１７ｑ）中的我个或多个异常蝇     

石蜡包埋组织的p16基因甲基化特异性PCR技术

目的：以石蜡包埋组织为材料进行DNA甲基化特异性PCR(MSP)检测，研究其可行性。方法：40例食管组织以中性福尔马林固定、包埋、脱蜡、DNA样品制备和亚硫酸盐修饰后进行PCR测定。2例MSP阳性的冰冻甲状腺组织以70％酒精、丙酮和中性福尔马林分别固定及石蜡包埋后，非甲基化引物PCR扩增，比较不同固定剂的MSP效果。结果l石蜡包埋食管组织MSP检出率与文献报道的冰冻组织MSP检出率相同，三种常用方法固定的甲状腺组织均能获得理想的MSP效果。结论：MSP通过选择合适的实验条件，可应用于石蜡包埋组织。     

慢性髓性白血病的治疗进展

慢性髓性白血病(CML)属于多能造血干细胞恶性骨髓增生性疾病,费城(Ph)染色体是CML的细胞遗传学标志,90%以上CML患者骨髓细胞中发现有Ph染色体,经过20年的研究,CML患者的生存愈后得到了显著改善,特别是伊马替尼研制成功给治疗CML带来了很大飞跃。这篇综述总结这些年来CML的治疗进展。     

自体树突状细胞用于慢性粒细胞白血病骨髓净化的初步研究

目的 考察慢性粒细胞白血病（CML）树突状细胞（DC）刺激自体骨髓T细胞,清除白血病细胞的作用。方法 采用3例CML病人（2例慢性期和1例急变期）外周血,分离单个核细胞（PBMNC）,经塑料贴壁后在含自体血浆、重组人白介素4（rhIL－4)、重组人粒－单集落刺激因子（rhGM－CSF）和重组人肿瘤坏死因子（rhTNFα）的RPMI－1640培养液。37℃CO2孵箱培养10天,或用免疫磁珠从PBMNC分离DC,在含自体血浆、rhGMCSF和rhTNFα的RPMI1640培养液培养3天,收获的细胞即DC加到含rhIL－2的Dexter骨髓长期培养体系,置37℃,5％CO2孵箱培养7天,观察前后骨髓细胞的免疫表型和P210阳性细胞比例。结果 从CML病人外周血获得的DC大多数表达P210。在含rhIL－2的Dexter体系加入DC能进一步增加体系中的T细胞数。在2例慢性期病人体系中的P210。在含rhIL－2的Dexter体系加入DC能进一步增加体系中的T细胞数。在2例慢性期病人体系中的P210阳性细胞减少,但在急性期病例,体系中P210细胞明显增加。结论 CML病人的DC表达P210,能刺激自体骨髓中T细胞增生,在慢性期病人,这些自体DC活化的骨髓T细胞有清除白血病细胞的作用。