趋化因子受体CCR4在活动期类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞表达的研究

目的 探讨活动期类风湿关节炎(aRA)患者趋化因子受体CCR4在外周血CD4+T细胞的表达及其意义,并对该表达与血清重要细胞因子水平的相关性进行研究.方法流式细胞计数方法对12例aRA患者和10名健康对照者外周血CD4+T细胞表面CCR4的表达情况进行检测;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测患者血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10及干扰素(IFN)-γ的水平并记录患者相关临床及实验室资料.分析及评价aRA患者外周血淋巴细胞中CD4+CCR4+T细胞百分数(CD4+CCR4+T%)与TNF-α、IL-10、IFN-γ的血清水平及临床指标的相关性.结果 aRA组外周血CD4+CCR4+T%明显高于健康对照组(P＜0.01).aRA组血清TNF-α(P＜0.01)、IL-10(P＜0.01)及IFN-γ(P＜0.01)水平明显高于健康对照组.在检测的细胞因子中,aRA患者血清IL-10水平与CD4+CCR4+T%呈明显正相关关系(r＝0.66,P＜0.05).在临床指标中,CD4+CCR4+T%与aRA患者Lunsbury关节指数、血沉、C反应蛋白及血小板计数呈明显正相关关系(P＜0.05).结论 CCR4在CD4+T细胞趋化至病变关节过程中可能发挥重要作用;外周血CD4+CCR4+T%与血清IL-10水平密切相关;该百分数可以作为临床评价RA活动性的一个敏感指标.     

胃癌患者CD4~+/8~+T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3表达水平及意义

目的观察胃癌患者外周血、癌旁组织和癌组织中CD4~+T细胞和CD8~+T细胞表面T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim3)的表达情况及其对CD4~+T细胞和CD8~+T细胞功能的影响。方法抽取胃癌患者外周血,通过密度梯度离心法分选获取外周血单个核细胞(PBMC)。获取的肿瘤组织及癌旁组织标本经研磨法获取肿瘤浸润T细胞。通过流式细胞染色的方法检测胃癌患者外周血、癌旁组织和癌组织中CD4~+T细胞和CD8~+T细胞表面Tim3的表达情况。激活Tim3信号后,通过流式细胞术胞内染色的方法检测CD4~+T细胞和CD8~+T细胞表达肿瘤坏死因子(TNF)-α和穿孔素的能力。结果与胃癌患者外周血CD4~+/8~+T细胞表面Tim3表达水平相比,胃癌患者癌旁组织和癌组织浸润CD4~+/8~+T细胞表面Tim3表达水平显著升高(P0.01);且与胃癌患者癌旁组织浸润CD4~+/8~+T细胞表面Tim3表达水平相比,胃癌患者癌组织浸润CD4~+/8~+T细胞表面Tim3表达水平显著升高(P0.01)。激活Tim3信号后,CD4~+T细胞分泌TNF-α的能力显著降低(P0.01),同时CD8~+T细胞分泌穿孔素的能力亦显著降低(P0.01)。结论胃癌组织CD4~+T细胞和CD8~+T细胞表面Tim3表达水平的升高可能与胃癌的进展密切相关。     

高龄肝癌患者CD4+CD25+调节性T细胞及转化生长因子-β1检测的临床意义

目的 探讨检测老年原发性肝癌患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)及血清转化生长因子(TGF)-β1的临床意义. 方法 应用流式细胞学方法和酶联免疫吸附测定方法分别检测80岁以上老年健康者20例、原发性肝癌患者22例、转移性肝癌患者25例外周血Treg占总CD4+T细胞的比例和血清TGF-β1浓度. 结果 老年原发性肝癌、转移性肝癌患者外周血Treg占总CD4+T细胞的比例与老年健康对照组比较均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).老年原发性肝癌患者外周血T reg总CD4+T细胞比例较老年转移性肝癌患者亦明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).老年原发性肝癌、转移性肝癌患者血清TGF-β1浓度与老年健康对照组比较均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).老年原发性肝癌患者血清TGF-31浓度较老年转移性肝癌患者亦明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).相关分析显示,原发性肝癌患者外周血Treg占总CD4+T细胞的比例与病理分期、血清TGF-β1浓度呈正相关(r=0.782、r=0.698,P＜0.01),与Karnofsky功能状态(KPS)评分负相关(r=-0.643,P＜0.01). 结论 高龄原发性肝癌患者外周血Treg比例明显升高,且与血清TGF-β1浓度、病理分期及KPS评分具有一定的相关性.检测老年原发性肝癌患者外周血Treg占总CD4+T细胞的比例,可能有助于评估老年原发性肝癌患者病情进展情况及判断其预后.     

CD4+CD25+ T细胞在溃疡性结肠炎中的表达及其临床意义

目的 研究溃疡性结肠炎(UC)患者外周血CD 4CD 25调节性T细胞比例的变化,探讨其在UC病理机制中的意义.方法 选择UC患者33例,对照组20例.用流式细胞仪检测外周血CD 4CD 25T细胞阳性率.用RT-PCR检测外周单个核细胞(PBMC)中Foxp3 mRNA的表达.用酶联免疫吸附试验检测血清中IL-10和TGF-β的浓度.结果 UC患者CD 4CD 25T细胞占CD 4T细胞的比例明显低于对照组(P＜0.01),并且与疾病的活动指数及血沉水平均呈显著负相关(R值分别为-0.660和-0.572,P值均＜0.01).UC患者Foxp3 mRNA的表达也明显低于对照组(P＜0.01).两组患者血清IL-10和TGF-β的浓度比较无明显差异(P＞0.05).结论 UC患者外周血CD 4CD 25 调节性T细胞明显降低,与疾病活动性相关,提示这类细胞可能在UC的病理机制中发挥作用.Foxp3表达降低可能是导致CD 4CD 25 T细胞发育障碍的重要因素.     

乙型肝炎病毒感染者不同疾病阶段外周血T淋巴细胞表面程序性死亡受体-1及血清细胞因子的表达

目的 探讨HBV感染后不同疾病阶段(免疫耐受期、免疫清除期、非活动携带状态)患者T淋巴细胞表面程序性死亡受体-1(PD-1)和血清细胞因子的表达差异.方法 2011年4月至2011年9月无锡市第五人民医院住院或门诊的HBV感染者105例,HBV感染后免疫耐受期、免疫清除期、非活动携带状态患者各35例,另选20名健康人作为对照组.收集研究对象的外周血,流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞表面PD-1的表达水平,ELISA检测血清IL-10、IFN-γ的表达水平.数据处理采用t检验,相关性分析采用Pearson相关分析.结果 HBV感染组CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达水平为(12.35±3.48)％,高于健康对照组的(4.65±1.21)％(t=9.76,P＜0.01);HBV感染组CD4+T淋巴细胞表面PD-1表达水平为(4.95±2.87)％,健康对照组为(4.08±2.14)％,两组比较差异无统计学意义(t=1.29,P＞0.05).免疫耐受组、免疫清除组、非活动携带组CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达水平分别为(15.87±3.18)％、(7.69±3.64)％和(10.12±2.84)％,均高于健康对照组(t值分别为15.12、3.61和8.17,均P＜0.01),免疫耐受组CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达水平高于免疫清除组(t=10.01,P＜0.01).慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达水平与IL-10呈正相关(r=0.377,P＜0.05),与IFN-γ呈负相关(r=-0.620,P＜0.05).结论 慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达上调,PD-1水平与血清Th1细胞因子IFN-γ呈负相关,与血清Th2细胞因子IL-10呈正相关;HBV感染慢性化可能与PD-1高表达有关.     

B7-CD28/CTLA-4在胃癌患者中的表达及意义

目的 观察胃癌患者外周血中CD＋28、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4）（CD152）＋T细胞和癌组织细胞表面B7表达水平,以进一步探讨肿瘤的免疫逃逸机制.方法 研究对象包括同期手术治疗的胃癌患者（胃癌组）36例、胃炎及胃溃疡患者10例（胃良性疾病组）、健康查体者26例（对照组）,采用流式细胞术检测三组外周血中CD＋3、CD＋4、CD＋8、CD＋28、CTLA-4（CD152）＋T细胞水平,检测前两组胃组织细胞B7分子表达水平.结果 胃癌组外周血CD＋28T细胞水平显著低于其余两组（P＜0.01）、CTLA-4（CD152）＋T细胞水平显著高于其余两组（P＜0.01）;胃组织细胞B7-1（CD80）、B7-2（CD86）表达水平胃癌组显著低于对照组（P＜0.01）.结论 胃癌患者存在B7-CD28/CTLA-4共刺激通路异常,此可能为影响T细胞有效清除肿瘤细胞、从而使肿瘤逃避机体免疫监视的机制之一.     

晚期血吸虫病患者外周血CD4~+T细胞Tim-3分子表达及与肝功能损伤指标的相关性

目的检测T细胞免疫球蛋白域黏蛋白结构域分子3(T cell immunoglobulin and mucin domain protein 3,Tim-3)在晚期血吸虫病患者外周血CD4+T细胞表面的表达,并探讨其与肝功能损伤指标的关系。方法以28例晚期血吸虫病患者作为研究对象,同时选择20例慢性血吸虫病患者和30例健康人群作为对照,采用流式细胞术检测CD4+T细胞Tim-3表达水平,用ELISA法检测血清干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平,以日立7600型生化分析仪检测肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)和总胆红素(TBIL)浓度。结果晚期血吸虫病、慢性血吸虫病患者以及健康人群外周血CD4+T细胞表面Tim-3表达水平差异具有统计学意义(F=4.578,P0.05),晚期血吸虫病患者外周血CD4+T细胞Tim-3表达水平为(8.33±2.28)%,显著高于健康对照人群的(6.57±1.99)%(t=3.015,P0.01)。Spearman相关分析显示,晚期血吸虫病患者外周血CD4+T细胞Tim-3表达水平与患者血清ALT(rs=0.746,P0.01)、γ-GT(rs=0.656,P0.01)、IL-4水平(rs=0.672,P0.01)呈正相关,与IFN-γ水平(rs=-0.404,P0.05)呈负相关。结论晚期血吸虫病患者外周血CD4+T细胞Tim-3表达上调,其可能通过调节CD4+T细胞功能参与晚期血吸虫病肝损伤过程。     

系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量和Foxp3mRNA的表达水平与疾病活动性的相关性

目的 研究系统性红斑狼疮(SEE)患者CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞的数量及其功能基因Foxp3 mRNA的表达水平与SLE疾病活动性和肾脏损伤的相关性.方法 采用四色流式细胞术以Foxp3-异硫氰酸荧光素(FITC )/CD25-藻红蛋白/CD4-多甲藻叶绿素蛋白(PerCP)/CD3-藻蓝蛋白7抗体组合检测40名健康对照者及42例SLE患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞的数量,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达水平,并分析其与SLE患者疾病活动指数(SLEDAI)、补体C3及血清抗双链DNA(dsDNA)抗体的关系.统计学方法采用t检验和Spearman相关分析.结果 活动期SLE患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量显著低于健康对照组[(4±3)％与(7±4)％,P＜0.05],稳定期与健康对照组差异无统计学意义(P＞0.05);活动期SLE患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量及CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞/CD4+比值显著低于稳定期患者[(4±3)％,(9±6)％与(5±4)％,(10±6)％,P均＜0.05];活动期SLE患者外周血Foxp3 mRNA的表达水平明显低于稳定期和对照组(P＜0.01,P＜0.05);SLE患者并发肾病组外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量及CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞/CD4+比值显著低于SLE非肾病组(P＜0.05).相关分析显示,SLE患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量与SLEDAI呈负相关(r=-0.5782,P＜0.05);CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞/CD4+比值与SLEDAI呈负相关(r=-0.4913,P＜0.05),与补体C3呈正相关(r=0.3687,P＜0.05);SLE患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量与Foxp3 mRNA的表达水平呈正相关(r=0.6142,P＜0.0l).结论 SLE患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞和Foxp3 mRNA的变化可能是导致SLE疾病发生和发展的关键因素之一,与疾病的活动性有密切关系.     

类风湿关节炎患者外周血CD4 T细胞关节局部趋化机制

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血CD4 T细胞比例变化情况及其对关节局部趋化的机制。方法流式细胞术分析RA患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4 T细胞的比例,并分析CD4 T细胞比例与RA疾病活动性评分系统(DAS28)评分间的关系。激光共聚焦方法检测RA患者滑膜局部浸润CD4 T细胞情况。流式细胞术分析RA患者CD4 T细胞表面趋化因子受体表达情况。结果与对照组相比,RA患者外周血PBMC中CD4 T细胞的比例显著降低(P0.01),且RA患者外周血CD4 T细胞比例与DAS28评分呈明显负相关(r=-0.753 0,P=0.001 2)。关节局部CD4 T细胞浸润的激光共聚焦结果显示,与对照组相比,RA患者滑膜中具有更多的CD4 T细胞浸润。趋化因子受体分析结果显示,RA患者外周血CD4 T细胞表面CCR5、CXCR1和CXCR3的表达显著升高(P0.01)。结论 RA患者外周血CD4 T细胞表面表达升高的CCR5、CXCR1和CXCR3可能参与外周血CD4 T细胞向滑膜局部的趋化。     

共刺激分子CD28 CD152在类风湿关节炎患者T细胞亚群上表达异常的研究

目的观察共刺激分子CD28,CD152在类风湿关节炎(RA)患者的T细胞亚群上的表达异常情况,探讨RA的发病机制及治疗手段.方法用流式细胞仪采用直接免疫荧光法测定39例RA患者和20名健康对照人外周血T细胞表面标志CD3,CD4,CD8的表达情况及CD28,CD152在CD4+T和CD8+T细胞上的表达.结果 RA患者CD3+CD4+细胞较正常对照组显著增高(P＜0.01),CD3+CD8+细胞较正常对照组显著降低(P＜0.05),CD4+T细胞上CD28的表达较对照组显著降低(P＜0.05),而CD8+T细胞上CD28的表达与对照组差异无显著性(P＞0.05);CD4+T和CD8+T细胞上CD152的表达都较对照组显著增高(P＜0.01).结论在RA患者的细胞免疫活化过程中首先表现为B7/CD28信号途径占优势,T细胞被激活,激活的T细胞大量分泌CD152,它与CD28竞争结合B7分子,CD152/B7途径转而占优势,下调或终止T细胞反应.同时CD28+细胞数目的减少或功能缺陷造成RA患者外周血单个核细胞凋亡加速,是诱发RA患者的局部病理损害的原因.阻断CD152和B7的相互作用可增强特异性T细胞应答,为RA的免疫学治疗提供理论依据.     

激素抵抗性哮喘患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞及IL-10、TGF-β1的变化及意义

目的 观察激素抵抗性哮喘(SRA)患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)及白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)的变化,分析其在SRA发病机制中的作用.方法 采用流式细胞术检测40例SRA患者(激素抵抗组)外周血单个核细胞CD4+CD25+Foxp3+ Treg数目,并计算CD4+CD25+Foxp3+ Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其血清IL-10、TGF-β1水平,并与激素敏感性患者(激素敏感组,46例)及正常体检者(正常组,30例)进行对比.结果 激素抵抗组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比、CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对值及血清IL-10、TGF-β1水平均明显低于激素敏感组与正常组(P＜0.01,P＜0.05);激素敏感组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比、CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对值及血清TGF-β1水平明显低于正常组(P＜0.01,P＜0.05),血清IL-10无明显差异(P＞0.05);CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数均与血清IL-10、TGF-β1水平呈明显正相关(P＜0.01).结论 SRA患者外周血CD4+CD25+Foxp3+ Treg数目减少及IL-10、TGF-β1含量减低可能与SRA的发生、发展有关.     

骨桥蛋白介导类风湿关节炎发病机制的初步研究

目的研究骨桥蛋白(OPN)介导类风湿关节炎(RA)发病和促进炎症因子产生的作用。方法采用实时定量聚合酶链反应(PCR)的方法检测OPN在RA患者外周血、关节液和关节滑膜组织和在T淋巴细胞亚群中的表达;从蛋白水平分析RA患者关节液中促炎症细胞因子和抗炎症细胞因子的分泌格局,分析OPN与细胞因子的相关性。结果RA患者关节滑液和关节滑膜组织的OPN表达远远高于外周血单个核细胞的OPN基因表达,CD4 T细胞OPN基因表达均高于CD8 T细胞;RA患者关节液中OPN的表达显著高于血清,白细胞介素(IL)-10,干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平比自身血清及对照组血清增高,IL-18和IL-12水平比正常对照组明显升高。结论OPN可能通过调节病灶部位的细胞因子的分泌来调控RA病理过程中的炎症反应。     

激素抵抗性哮喘患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞及IL-10、TGF-β1的变化及意义

目的 观察激素抵抗性哮喘(SRA)患者外周血CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞(Treg)及白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)的变化,分析其在SRA发病机制中的作用.方法 采用流式细胞术检测40例SRA患者(激素抵抗组)外周血单个核细胞CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg数目,并计算CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其血清IL-10、TGF-β1水平,并与激素敏感性患者(激素敏感组,46例)及正常体检者(正常组,30例)进行对比.结果 激素抵抗组患者外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比、CD4+ CD25+Foxp3+ Treg绝对值及血清IL-10、TGF-β1水平均明显低于激素敏感组与正常组(P＜0.01,P＜0.05);激素敏感组患者外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比、CD4+ CD25+ Foxp3+Treg绝对值及血清TGF-β1水平明显低于正常组(P＜0.01,P＜0.05),血清IL-10无明显差异(P＞0.05);CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg/CD4+T及CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg绝对数均与血清IL-10、TGF-β1水平呈明显正相关(P＜0.01).结论 SRA患者外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg数目减少及IL-10、TGF-β1含量减低可能与SRA的发生、发展有关.     

HBeAg导致慢性乙型肝炎患者外周血Th1/Th2型细胞因子失衡

目的 探讨HBeAg对慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)功能的调节作用. 方法 以重组的HBeAg体外刺激CHB患者和健康志愿者的PBMC,用流式细胞术和酶联免疫吸附试验法检测其刺激前后Th1/Th2型细胞因子的变化情况,并观察HBeAg对CHB患者PBMC表面细胞程序性死亡受体(PD)1及其配体(PD-L)1表达的影响.两组间资料比较采用独立样本t检验; PD-1/PD-L1表达水平与HBV DNA拷贝数的相关性采用Spearman相关分析.结果 HBeAg刺激后可使HBeAg阴性CHB患者和健康志愿者CD3+CD4+T淋巴细胞内干扰素(IFN)γ表达水平(0.17％±0.08％与0.17％±0.04％)明显低于未刺激组(0.30％±0.16％与0.32％±0.12％),t值分别为-2.382和-4.190,P值均＜0.01;培养上清液中白细胞介素(IL)-6、IL-10和肿瘤坏死因子α含量明显高于未刺激组(HBeAg阴性CHB患者的t值分别为2.504,3.583和4.324,健康志愿者t值分别为3.542,6.246和5.273,P值均＜0.01).HBeAg刺激PBMC后,HBeAg阴性CHB患者和健康志愿者CD14+细胞表面PD-L1表达水平分别为13.02％±4.98％和3.10％±2.47％,明显高于未刺激组的5.89％±1.56％和0.97％±0.83％,t值分别为4.815和3.454,P值均＜0.05.基础状态下在HBeAg阳性CHB患者外周血中,CD3+CD4+T淋巴细胞内IFNγ表达水平为0.23％±0.09％,明显低于HBeAg阴性CHB患者和健康志愿者的0.34％±0.15％和0.35％±0.09％(t=-3.177,P＜0.01 ; t=-4.541,P＜0.01);而IL-4表达水平为0.39％±0.16％,明显高于HBeAg阴性CHB患者和健康志愿者的0.26％±0.12％和0.23％±0.12％,t值分别为3.382和4.393,P值均＜0.01.基础状态下在HBeAg阳性CHB患者外周血中,CDB+T淋巴细胞表面PD-1和PD-L1表达水平明显高于HBeAg阴性CHB患者及健康志愿者(P值均＜ 0.01),CD14+T淋巴细胞表面PD-L1表达水平显著高于HBeAg阴性患者和健康志愿者,t值分别为5.092和5.473,P值均＜0.01 ; HBeAg阴性CHB患者外周血中CD3+T淋巴细胞表面PD-L1表达水平明显高于健康志愿者(t=3.214,P＜0.01).结论 HBeAg可以明显抑制Th1型细胞因子IFN γ的产生,促进Th2型细胞因子IL-6和IL-10分泌,上调外周血PBMC表面PD-1/PD-L1的表达,从而有利于形成对HBV感染的免疫耐受.因此,HBeAg可能是造成慢性HBV感染者体内免疫耐受的重要因素之一.     

夏枯草胶囊对桥本甲状腺炎患者自身抗体及Th17细胞的影响

目的 观察夏枯草胶囊对桥本甲状腺炎甲状腺功能减低患者血清甲状腺抗过氧化物酶抗体(TPO-Ab)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)及Th17细胞的影响,并探讨TPO-Ab、TGAb与Th17细胞的关系.方法 将45例桥本甲状腺炎甲状腺功能减低患者随机分为治疗组(23例)和对照组(22例).对照组给予优甲乐;治疗组在此基础上联合应用夏枯草胶囊,连续治疗2个月;同时选择20例健康体检者为正常组.观察治疗前后TPO-Ab、TGAb、Th17细胞占外周血CD4+T细胞百分率的变化.结果 治疗组和对照组患者治疗后血清TPO-Ab、TGAb水平较治疗前均明显下降(P＜0.01或P＜0.05),且治疗组下降幅度明显优于对照组(P＜0.05).治疗后治疗组外周血Th17/CD4+T细胞百分率较治疗前显著下降(P＜0.01),且45例桥本甲状腺炎患者外周血Th17/CD4+T细胞百分率改变与血清TPO-Ab及TGAb阳性表达呈显著正相关(分别为r=0.573,P＜0.01;r =0.527,P＜0.01).结论 夏枯草胶囊联合优甲乐治疗桥本甲状腺炎甲状腺功能减低,能明显降低TPO-Ab、TGAb及Th17细胞水平,改善患者自身体内免疫状态,疗效显著.     

CD127在慢性重型乙型肝炎患者外周血T细胞中的表达及意义

目的:研究慢性重型乙型肝炎患者外周血T细胞表面CD127表达水平的变化及与慢性重型乙型肝炎发病的关系。方法:流式细胞术检测30例慢性重型乙型肝炎、20例慢性乙型肝炎(CHB)患者和20例健康志愿者外周血T细胞中CD127的表达,用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-7(白细胞介素-7)的表达。结果:慢性重型乙型肝炎组和CHB组CD8+T比例均较健康对照组高(P均<0.01),慢性重型乙型肝炎组CD4+T比例较健康对照组高(P<0.01)。慢性重型乙型肝炎与CHB组CD127+细胞的比例均较健康对照组低(P均<0.05)。慢性重型乙型肝炎组CD4+CD127+双阳性细胞的比例低于CHB组,CHB组又低于健康对照组(P均<0.01);慢性重型乙型肝炎组CD8+CD127+双阳性细胞比例较CHB组和健康对照组低(P均<0.01)。CD8+CD127+细胞的表达与HBV DNA载量呈负相关。慢性重型乙型肝炎组和CHB组血清IL-7含量均较健康对照组高(P均<0.01)。结论:慢性重型乙型肝炎患者外周血中CD4+CD127+、CD8+CD127+细胞表达降低;以CD8+CD127+降低更明显,并与HBV DNA载量呈负相关;血清中IL-7表达增高,可能与慢性重型乙型肝炎的发病有关。     

肝硬化患者外周血CD19+ CD25+细胞表达的临床意义

探讨肝硬化患者外周血CD19＋ CD25＋双阳性细胞表达的临床意义.采用流式细胞仪检测70例肝硬化患者和20例健康对照者外周血CD19＋ CD25＋细胞、T淋巴细胞以及B淋巴细胞的表达,免疫比浊法检测血清免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）水平.肝硬化患者外周血CD＋3、CD＋3 CD＋8细胞表达率和CD＋3、CD＋3 CD4＋、CD＋3 CD＋8细胞绝对数明显低于对照组（P均＜0.01）;而CD＋3 CD4＋/CD＋3 CD＋8比值、CD19＋、CD19＋ CD25＋细胞表达率以及免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）水平显著增高（P均0.05）.肝硬化患者CD19＋ CD25＋细胞表达率与ALT、IgG、IgA呈正相关（r为0.548、0.541、0.334,P均＜0.05）.食管胃底静脉曲张组CD＋3、CD＋3 CD4＋细胞绝对数以及CD＋3 CD＋8细胞表达率和绝对数明显低于未曲张组（P均＜0.01）;而CD＋3 CD4＋细胞表达率、CD＋3 CD4＋/CD＋3 CD＋8比值、免疫球蛋白（IgM、IgA）水平高于未曲张组（P均＜0.01）.肝硬化患者Child-Pugh分级越差,CD19＋ CD25＋细胞表达率和IgG、IgM、IgA水平明显升高（P均＜0.01）,而CD＋3、CD＋3 CD4＋、CD＋3 CD＋8细胞绝对数明显降低（P均＜0.05）.检测肝硬化患者外周血CD19＋ CD25＋细胞表达水平能反映患者的肝脏损伤程度和体液免疫状况,有助于指导临床治疗和预后判断.     

来氟米特对狼疮肾炎患者T细胞表面共刺激分子谱影响的体外研究

目的 了解来氟米特(LEF)对狼疮肾炎(LN)患者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子谱的表达模式有无作用.方法 密度梯度离心法提取LN患者及健康对照外周血单个核细胞(PBMCs),设立4个培养组:空白组,植物血凝素(PHA)组,LEF组,PHA+LEF组.双色标记流式细胞术检测PBMCs中T细胞表面分子CD28,CD40L,淋巴细胞功能相关抗原(LFA)-1a和细胞毒T淋巴细胞相关抗原(CTLA)-4的表达水平.多组间比较采用单因素方差分析.结果 活动性LN组外周血T细胞表面CD28、CD40L、L FA-1a和CTLA-4表达水平较健康对照组明显上调CD28:33.4±6.5和14.4±3.2;CD40L:13.2±3.2和5.4±2.3;LFA-1a:8.5±2.3和2.2±1.1;CTLA-4:4.6±1.5(P均＜0.01);PHA可诱导健康对照T细胞表面CD28和CD40L表达明显上调CD28:26.8±6.7和14.4±3.2;CD40L:13.9±4.9和5.4±2.3(P均＜0.01),但对其CTLA-4和LFA-1α的表达无明显影响(P均＞0.05);而PHA对活动性LN组外周血T细胞表面上述指标表达均有明显上调作用CD28:54.8±9.5和33.4±6.5;CD40L;49.9±9.1和13.3±3.2;LFA-1a:25.5±7.5和8.5±2.3;CTLA-4:10.5±2.8和7.7±1.4(P均＜0.05);LEF活性代谢产物A771726对健康人外周血T细胞表面上述指标的表达无明显影响,但可逆转活动性LN患者外周血T细胞表面的CD40L、LFA-1α过度表达(P均＜0.05),对其CD28和CTLA-4过度表达无明显影响(P均＞0.05);且A771726对PHA所诱导的活动性LN患者外周血T细胞表面CD28、CD40L和LFA-1a表达增加亦有明显抑制(P均＜0.05).结论 LEF可下调活动性LN患者外周血T细胞CD40L和LFA-1a表达,而对其CD28和CTLA-4表达无明显抑制作用,可能是其有效治疗LN的重要机制之一.     

强直性脊柱炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的研究

目的 观察强直性脊柱炎(AS)患者外周血CD4+CD25调节性T细胞(Treg)的数量、功能及肿瘤坏死因子(TNF)-a 抑制剂治疗的影响.方法 活动性AS患者25例,10例给予etanercept治疗12周,健康对照21名,分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测CD4+CD25high T细胞比例;实时定量聚合酶链反应检测FOXP3 mRNA表达;免疫磁珠法去除CD25+细胞,可溶性噻唑盐(WST-1)法检测T细胞增殖.结果 活动性AS组CD4+CD25high T细胞比例与对照组差异尤统计学意义,但FOXP3 mRNA表达明显低于对照组(P＜0.01),并与C反应蛋白(CRP)呈负相关(P＜0.01).两组的CD4+CD25+细胞体外均能抑制T细胞增殖(P均＜0.01). Etanercept治疗明显增加CD4+CD25highT细胞比例和FOXP3 mRNA表达(P均＜0.01),与CRP降低呈负相关(P＜0.05;P＜0.01).结论 AS患者外周血表达FOXP3的CD4+CD25+Treg细胞异常,可能参与AS发生和发展;Etanercept治疗上调Treg细胞,可能是抗TNF-α治疗的一个机制.     

CD4+细胞及相关细胞因子在慢性乙型肝炎患者血中的变化

目的探讨部分CD4^＋细胞及相关细胞因子在慢性乙型肝炎患者血中的变化及意义.方法用流式细胞术检测外周血单个核细胞（PBMC）CD4、CD8和CD28分子表达情况;同时检测血清白介素（IL）-2、干扰素（IFN）-γ、IL-4、IL-10和IL-12水平以及肝功能.结果与正常对照组相比,86例慢性乙型肝炎患者PBMC CD4^＋细胞比率呈降低、不变和增高3种状态（定义为3组）;而CD28分子的表达与CD4^＋细胞比率的变化趋势一致;上述血清细胞因子水平除IL-4外,其余均显著增高（P＜0.01或P＜0.05）,但3组间差异无统计学意义;肝功能检测结果显示,部分患者ALT水平有异常,且与CD4＋细胞比率呈正相关.结论慢性乙型肝炎患者血中CD4^＋T细胞比率存在降低、不变和增高的改变;与病毒相关的几种细胞因子水平升高.鉴于ALT水平与CD4^＋T细胞比率呈正相关,推测乙型肝炎患者肝细胞损伤与CD4^＋细胞中的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）有关.