外周血涂片镜检联合微小残留病检测在急性髓系白血病复发诊断中的应用

目的分析急性髓系白血病(AML)患者完全缓解(CR)后外周血涂片镜检情况和微小残留病(MRD)检测水平,探讨两者在判断AML复发中的应用价值。方法回顾性分析36例AML复发患者的外周血涂片原始细胞检出情况和MRD值,MRD<0.1%为阴性、MRD≥0.1%为阳性。结果 36例复发患者中,外周血涂片检出原始细胞31例,其中21例报告时间早于骨髓送检时间;原始细胞检出患者中最常见的复检类型是血小板计数降低、单核细胞百分比增高和白细胞计数降低。MRD检测阳性29例,阴性7例,阳性明显多于阴性;复发期与缓解期相比,MRD显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。外周血涂片镜检和MRD检测对AML复发的诊断符合率分别为86.11%和80.55%,2种方法联合检测的符合率为94.44%。结论外周血涂片镜检联合MRD检测对早期发现急性髓系白血病的复发具有临床意义。     

急性髓系白血病微小残留病与疾病复发的关系

目的探讨急性髓系白血病(AML)患者诱导化疗后首次完全缓解(m CR)时,白血病微小残留病(MRD)检测的预后价值。方法回顾性分析多参数流式细胞术(MFC)监测53例AML(非M3型)MRD的百分比,研究其与疾病复发的相关性。结果复发组的MRD中位数明显高于未复发组,差异有统计学意义(P0.05)。以0.1%为MRD的临界值,MRD阳性组与阴性组之间的复发率及3年无复发生存率(RFS)差异均有统计学意义(P0.05)。中危核型亚组中,MRD阳性组和阴性组的复发率和3年RFS差异均有统计学意义(P0.05)。MRD阳性组中,干细胞移植患者RFS高于化疗组;而MRD阴性组患者无论采取干细胞移植或化疗,RFS差异均无统计学意义(P0.05)。结论 MFC检测MRD在AML诱导治疗后具有预测复发、判断预后以及指导个体化治疗的价值。     

CD117在急性髓系白血病病程中的表达分析

目的探讨CD117在急性髓系白血病病程中表达及其临床意义。方法应用CD45/SSC设门,直接荧光标记法,经流式细胞术对122例不同病程急性髓系白血病(AML)和47例急性淋巴细胞白血病(ALL)进行CD117的检测。结果对照组、ALL及AML3组CD117的表达阳性率和表达率差异有统计学意义(χ2=41.681,F=35.753,P﹤0.01)。AML组CD117的表达阳性率(58.9%)及表达率[(29.4±19.7)%]均明显高于对照组[(0,(4.2±1.2)%)]及ALL组(8.5%,8.9%±6.3%);在AML中,初治病例、CR病例及复发病例CD117的阳性率分别为58.9%、6.5%、72.2%,表达率分别为(29.4±19.7)%、(11.5±7.9)%、(34.2±20.1)%。3组间CD117的阳性率及表达率差异均有统计学意义(χ2=28.103,F=14.864,P﹤0.01)。CR组的CD117阳性率及表达率均明显低于初治组和复发组。结论 CD117阳性表达可作为AL髓系免疫表型依据;单独或联合其他抗体检测AML患者骨髓中CD117的表达可以作为预测复发及监测MRD的指标之一。     

三组四色抗体的流式细胞术监测儿童B系急性淋巴细胞白血病微小残留病

目的 建立一种敏感的三组四色抗体流式细胞术,监测儿童B系急性淋巴细胞白血病(B lineage acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)微小残留病(minimal residual disease,MRD),并探讨其应用价值.方法 采用三组四色荧光抗体组合(CD45/CD19/CD10/CD34,CD45/CD19/CD10/CD13和CD45/CD19/CD22/CD34)检测18份初诊为B系急性淋巴细胞白血病患儿的骨髓样本(A组)和67份该病治疗后缓解患儿骨髓样本(B组)的白血病相关异常免疫表型(leukemia-associated aberrant immunophenotyping, LAIP)细胞.A,B两组样本来源于2004年6月至2007年12月在四川省人民医院儿科住院和定期随访的42例患儿,年龄为1～12岁;男性患儿为30例,女性为12例.同时,检测12份正常儿童骨髓(C组)作为对照(同期在本院就诊).结果 由于B系急性淋巴细胞白血病患儿骨髓的白血病相关异常免疫表型细胞与正常骨髓B细胞,在流式散点图中分布位置有差异,从而筛选出8个有价值的双参数散点图,以监测临床缓解B系急性淋巴细胞白血病患儿的微小残留病.本方法 在B系急性淋巴细胞白血病A组和B组患儿骨髓中的微小残留病阳性检出率分别为89%(16/18)和48%(32/67);白血病相关异常免疫表型细胞在A,B两组样本中分别为(67.8±36.4)%(±s)和(0.056±0.083)%(±s),A组患儿均明显高于B组患儿(P<0.01).分析3例复发患儿复发前的跟踪监测结果 发现,复发前均检测到微小残留病呈阳性,并且其白血病呈相关异常免疫表型细胞均明显升高. 结论 本研究建立了一种灵敏、快速、易于标准化操作的监测B系急性淋巴细胞白血病患儿微小残留病的方法 .     

6例急性髓细胞白血病复发前后CD87表达的改变

目的 探讨急性髓细胞白血病患者复发前后CD87表达的改变.方法 应用流式细胞术(FCM)检测了6例急性髓细胞白血病患者(包括M22例,M54例)CD87表达情况,并分析复发前后CD87表达的改变.结果 6例急性髓细胞白血病复发前后CD87表达的差异有统计学意义,P＜0.05.结论 急性髓细胞白血病复发前后CD87表达有变化,复发后CD87表达增高.     

流式微小残留病检测在急性髓系白血病化疗后疗效评估中的价值

目的探讨流式微小残留病(MRD)检测在急性髓系白血病(AML)化疗后疗效评估中的价值。方法收集128例AML为研究对象,评价首次化疗后MRD水平分别与细胞形态学缓解度、细胞遗传学的相关性分布;96例AML-CR患者依据MRD水平分组,评价1年期复发率。结果 128例AML患者经首次化疗后,75.00%(96/128)显示完全缓解(CR),25.00%(32/128)显示部分缓解(PR)或未缓解(NR)。96例CR中,MRD阴性占67.71%(65/96),MRD阳性占32.29%(31/96)。MRD水平与细胞遗传学相关性评价中,细胞遗传学预后较好组、预后中等组、预后较差组的MRD阴性率分别为59.52%、49.25%、36.84%,3组差异无统计学意义(χ~2=2.824,P0.05)。MRD阳性组复发率明显高于MRD阴性组,差异有统计学意义(χ~2=14.997,P0.05)。结论 MRD监测对指导AML治疗及早期预测复发具有重要的临床意义。     

免疫组化染色在白血病诊断分型中的应用

目的探讨免疫组化染色在白血病诊断分型中的应用价值。方法选取2015年1月至2018年1月本院收治的白血病患者120例。对入选患者初诊或接受化疗治疗前的骨髓和外周血细胞涂片进行抗生物素蛋白复合物(ABC-AP)免疫组化二步法检测,将检查结果与患者的临床症状、细胞组织化学染色及骨髓细胞形态学结果结合,诊断疾病并确定分型。结果本组初发患者中54例为急性髓细胞白血病,36例为急性B淋巴细胞白血病,12例为慢性淋巴细胞白血病,10例为急性T淋巴细胞白血病,4例为慢性粒细胞白血病。另4例患者为慢性髓细胞白血病急性淋系变。急性髓系细胞白血病患者中,髓细胞系相关抗原表达程度存在差异,其中阳性率最高为CD68。急性B淋巴细胞白血病患者中有22例CD19阳性,20例CD10阳性,8例CD20阳性。急性T淋巴细胞白血病患者中,4例患者CD7阳性,6例患者CD3阳性,2例患者CD5阳性。4例慢粒急变患者过氧化物酶阳性率为0~1%,非特异酯酶全部表现为阴性,同时糖原染色阳性率>40%,存在CD10阳性表达,不存在髓系相关抗原表达。结论免疫组化染色在白血病诊断分型中的应用价值较高,可为疾病诊断提供有效的依据。     

CD_9及P_(170)在白血病诊治中的表达及其临床意义

目的探讨CD9及P170在白血病患者中的表达与分型、疗效、预后的关系。方法采用SAP法检测了53例白血病患者CD9及P170的表达。结果①淋系白血病(T-ALL、B-ALL及CLL)CD9表达较高,阳性率达52%,与对照组(5.5%)比较差异显著(P<0.01),其中B-ALL表达CD9(73%)高于T-ALL(28%)及CLL(33%)(P<0.05)。②髓系白血病CD9的表达率为59%,特别高表达于M3(82%)、M5(88%)及CML(67%),与对照组比较差异显著(P<0.01)。③白血病NR或复发组P170表达(83%)明显高于CR或PR组(15%)及对照组(11%)(P<0.01)。④白血病CD9及P170的表达之间无相关性(r=0.038,P>0.05)。结论CD9可作为M3及B-ALL的一个鉴别诊断指标,了解白血病P的表达对判断预后及选择化疗方案具有一定指导价值。     

6例急性髓细胞白血病复发前后CD87表达的改变

目的探讨急性髓细胞白血病患者复发前后CD87表达的改变。方法应用流式细胞术（FCM）检测了6例急性髓细胞白血病患者（包括M22例，M，4例）CD87表达情况，并分析复发前后CD87表达的改变。结果6例急性髓细胞白血病复发前后CD87表达的差异有统计学意义，P〈0．05。结论急性髓细胞白血病复发前后CD87表达有变化，复发后CD87表达增高。     

急性髓性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群及CD56+细胞的临床意义的分析

目的:检测急性髓性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及CD56+细胞比例的临床意义。方法:选取确诊但未治疗的急性白血病30例为初治组;确诊并经化疗达完全缓解的急性白血病30例为复治组;健康志愿者30例为正常对照组。用流式细胞仪检测初治组、复治组及对照组人群的外周血T淋巴细胞亚群及CD56+细胞的比例,检测初治组中不同CD56+细胞组间患者血红蛋白及白蛋白水平。结果:初治组的CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD4+/CD8+比值较复治组及对照组均有显著性下降(P<0.05),而复治组与对照组比较差别无统计学意义(P>0.05)。初治组AML的CD56+细胞比例超过25%患者为40%(12/30),而复治组仅10%(3/30),差别具有统计学意义(P<0.05)。初治组中CD56+细胞高表达组的血红蛋白(Hb)及白蛋白(Alb)显著性低于正常表达组(P<0.05)。结论:初治组急性髓性血病患者的T淋巴细胞亚群变化明显,说明细胞免疫与白血病的发生、发展及转归有关;急性髓性白血病患者CD56高表达提示临床状况较差,生活质量低,可能与预后不良有关。     

影响艾滋病病毒异性性传播有关因素的研究

目的　了解中国中部地区艾滋病病毒 (HIV)异性性传播的特点及其影响因素。方法(1)现况研究 :在中国河南、河北等省农村寻找至少一方HIV阳性、有稳定婚姻、年龄 2 0～ 50岁的夫妻 ,由专业研究人员对其进行访谈 ,并采集夫妻双方抗凝全血样本 2 0ml,检测病毒载量、CD4 CD8细胞计数 ;(2 )病例对照研究 :以一方HIV阳性 ,通过性生活导致对方HIV感染的夫妻为病例 ,以一方HIV阳性、双方有正常的性生活 ,但对方未感染HIV的夫妻为对照 ,进行病例对照研究。结果　 (1)共收集到 87对至少一方HIV阳性的夫妻 ,其中病例夫妻 7对 ,对照夫妻 56对 ,发生HIV性传播的夫妻占全部有性传播危险夫妻的 11.1% ;(2 )在对照夫妻中 ,男方HIV阳性的 14对 ,占 2 5.0 % ,女方HIV阳性的 42对 ,占 75.0 % ;(3 )病例组性生活次数≥ 4次 月的比例显著高于对照组 (Fisher’s检验 ,P =0 .0 47,OR =8.0 )。病例组病毒载量≥ 10 5 拷贝 ml的比例显著高于对照组 (Fisher’s检验 ,P =0 .0 16,OR =2 2 .0 )。病例组先感染一方的HIV病毒载量显著高于对照组的感染一方 (t=3 .591,P <0 .0 1)、而CD4细胞计数和CD4 CD8比值均显著低于对照组的感染一方 (t=2 .767,P <0 .0 5;t =6.0 6,P <0 .0 5)。结论　中国中部地区有稳定婚姻的夫妻中HIV异性性传播的     

儿童HIV感染者及AIDS患者高效抗反转录病毒治疗前后T淋巴细胞及亚群的变化

目的 观察儿童HIV感染者或AIDS患者接受高效抗反转录病毒治疗(HAART)前后T淋巴细胞及亚群的变化.方法 选取2006年5月至2009年4月在广西壮族自治区疾病预防控制中心AIDS抗病毒治疗门诊接受HAART的儿童作为研究对象,共招募99例儿童HIV感染者或AIDS患者.分别在治疗前(D0),治疗后第3、6、12、18、24、30、36个月(M3、M6、M12、M18、M24、M30、M36)时随访调查并采集2 ml静脉血,应用四色荧光标记流式细胞术检测外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞绝对数及CD3比率、CD4比率、CD8比率、CD4/CD8比值.结果 99例研究对象的治疗方案为:拉米夫定(3TC)/齐多夫定(AZT)/奈韦拉平(NVP),65例(65.66%);3TC/司他夫定(D4T)/NVP,16例(16.16%);3TC/AZT/依非韦伦(EFV),8例(8.08%);3TC/AZT/克力芝(LPV/r),10例(10.10%).CD4/CD8比值的中位数在M3、M6、M12、M18、M24、M30、M36时分别为0.39、0.51、0.61、0.65、0.70、0.73、0.76,与D0时(0.19)比较,均有明显提高(Z值分别为-5.158、-7.375、-9.078、-8.853、-8.373、-5.845、-5.844,P值均＜0.000).CD4比率的中位数在M3、M6、M12、M18、M24、M30、M36时分别为16.92%、22.70%、25.54%、26.66%、27.99%、30.36%、29.30%,与D0时(9.92%)比较,均有明显提高(Z值分别为-5.268、-7.568、-9.496、-9.171、-8.760、-6.190、-5.964,P值均＜0.000).CD4+T淋巴细胞绝对数的中位数在M3、M6、M12、M18、M24、M30、M36时分别为631、813、1050、946、1057、1166、894个/mm3,与D0时(382个/mm3)比较,均有明显提高(Z值分别为-3.318、-5.288、-6.661、-5.886、-5.801、-4.110、-3.600,P值均＜0.000).CD8比率的中位数在M3、M6、M12、M18、M24、M30、M36时分别为47.25%、43.01%、43.04%、42.60%、41.37%、40.83%、3 8.31%,与D0时(53.17%)比较,均有明显降低(Z值分别为-3.082、-4.697、-5.282、-5.846、-5.757、-3.883、-4.380,P值均＜0.001).结论 T淋巴细胞及亚群的变化具有一定规律,可用于评价和指导HAART.     

Nutrition disorder and immunologic parameters: study of the intestinal villi in growing rats

OBJECTIVE: The aim of the present work was to study how a diet in which cereals were the only protein source would affect B and T lymphocytes and a cell population positive for thymus-expressed chemokine (TECK) in the intestinal villi of growing rats. METHODS: Wistar rats were fed a 6.5% precooked maize protein diet for 18-20 d (M group). An age-matched control group received stock diet (C group). Body weight (grams) was determined, ponderal growth rate (grams per day per 100 g) was calculated, and intestines were removed and processed by Saint-Marie's technique. Tissue sections were studied by indirect immunofluorescence. CD5(+) T cells and the T-cell subsets TCRalphabeta(+), TCRgammadelta(+), CD4(+), CD8alpha(+), and CD8beta(+) in the lamina propria (LP) and intraepithelium, in addition to immunoglobulin A-positive B cells in the LP were determined (n cells/30 fields were read). In addition, the presence of the TECK(+) cell population was qualitatively assessed. RESULTS: The M versus C group showed statistically significant differences in body weight and ponderal growth rate. The number of immunoglobulin A-positive B cells in the LP and the CD5(+) T cells and CD4(+), CD8alpha(+), CD8beta(+), TCRalphabeta(+), and TCRgammadelta(+) T-cell subpopulations of the M group in the LP and intraepithelium of the gut villi were significantly decreased compared with the C group (P < 0.001). The M group also showed differences in the size and cellularity of the gut villi and in the distribution of TECK. CONCLUSION: The results show that intake of a low concentration of a low-quality dietary protein as the only source of protein produces an important disorder in the mucosal immunity of experimental rats.     

First-in-human trial of the post-exposure tuberculosis vaccine H56:IC31 in Mycobacterium tuberculosis infected and non-infected healthy adults

BackgroundH56:IC31 is a candidate tuberculosis vaccine comprising a fusion protein of Ag85B, ESAT-6 and Rv2660c, formulated in IC31 adjuvant. This first-in-human, open label phase I trial assessed the safety and immunogenicity of H56:IC31 in healthy adults without or with Mycobacterium tuberculosis (M.tb) infection.MethodsLow dose (15 μg H56 protein in 500 nmol IC31) or high dose (50 μg H56, 500 nmol IC31) vaccine was administered intramuscularly thrice, at 56-day intervals. Antigen-specific T cell responses were measured by intracellular cytokine staining and antibody responses by ELISA.ResultsOne hundred and twenty-six subjects were screened and 25 enrolled and vaccinated. No serious adverse events were reported. Nine subjects (36%) presented with transient cardiovascular adverse events. The H56:IC31 vaccine induced antigen-specific IgG responses and Th1 cytokine-expressing CD4⁺ T cells. M.tb-infected vaccinees had higher frequencies of H56-induced CD4⁺ T cells than uninfected vaccinees. Low dose vaccination induced more polyfunctional (IFN-γ⁺TNF-α⁺IL-2⁺) and higher frequencies of H56-specific CD4⁺ T cells compared with high dose vaccination. A striking increase in IFN-γ-only-expressing CD4⁺ T cells, displaying a CD45RA⁻CCR7⁻ effector memory phenotype, emerged after the second high-dose vaccination in M.tb-infected vaccinees. TNF-α⁺IL-2⁺ H56-specific memory CD4⁺ T cells were detected mostly after low-dose H56 vaccination in M.tb-infected vaccinees, and predominantly expressed a CD45RA⁻CCR7⁺ central memory phenotype. Our results support further clinical testing of H56:IC31.     

贵州黔南州育龄人群地中海贫血基因检测结果分析

目的 分析黔南州育龄人群地中海贫血（简称地贫）基因携带状况,以便为地贫筛查规划提供参考依据。 方法 对2015-2019年黔南州23 987名育龄人群采用红细胞指标检测(MCV和MCH)和血红蛋白电泳(HbA2) 分析进行地贫筛查,初筛阳性者行基因检测确诊,运用统计学方法分析育龄人群基因检出情况。 结果 23 987名育龄人群中,地贫基因阳性1 037例,检出率4.32%（1 037/23 987）。其中男性地贫基因检出率3.80%（376/9 893）,女性为4.69%（661/14 094）。女性检出率高于男性（x2=11.114, P =0.015);汉族、布依族、苗族、水族、壮族、侗族、毛南族、土家族、瑶族、仡佬族、彝族、回族、其他民族地贫基因检出率分别为1.66%、5.95%、5.18%、7.24%、5.12%、2.95%、6.88%、2.43%、5.14%、1.34%、1.89%、2.81%、2.56%;黔南州地贫基因检出率排前三位分别是长顺县（4.69%）、惠水县（4.61%）和三都县（4.51%）,基因型主要以--SEA/αα、βCD41-42/βN、βCD17/βN为主,占60.95%。 结论 黔南州育龄人群地中海贫血基因携带率较高,具有性别、民族和县份分布特点。     

过继免疫治疗对手术后肺癌患者外周血免疫细胞表型影响的研究

目的:探讨C IK过继免疫治疗对手术后肺癌患者免疫功能的影响。方法:采用流式细胞术检测40例肺癌患者外周血T细胞、B细胞和NK细胞表型。结果:肺癌患者CD3+、CD4+、CD4/CD8比值明显低于对照组并呈显著性差异,而CD8+细胞高于对照组(P<0.01)。经C IK治疗后CD3+、CD4+、CD3-/CD16+56+细胞和CD4/CD8比值都升高,其中CD4+、CD3-/CD16+56+细胞与治疗前比较呈显著性差异(P<0.05),而CD8+细胞与治疗前比较降低(P<0.05);CD19在治疗后稍有增高趋势,但无显著性差异。结论:C IK过继免疫治疗对肺癌患者免疫功能的恢复具有促进作用。     

CD56在肾细胞癌中的表达及其意义

目的研究CD56与肾细胞癌的细胞类型、肿瘤分级、临床分期及预后的关系。方法采用免疫组织化学二步法检测CD56在120例肾细胞癌中的表达,并对肾细胞癌组织进行系统的病理检查和分析。结果CD56的表达与肾细胞癌的病理分级和临床分期均呈正相关。CD56表达者与未表达者术后5年生存率分别为23.8%和92.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CD56的表达与肾细胞癌的病理分级和临床分期呈正相关,CD56与临床分期结合能更好地判断肾细胞癌的预后,CD56表达者易发生转移且预后差。     

急性髓性白血病患者CD7~+ CD56~+和CD7~- CD56~-免疫表型对比分析

目的:比较CD7+CD56+和CD7-CD56-急性髓性白血病患者免疫表型的差异。方法:采用多色流式细胞术检测患者免疫表型,对患者的其他资料和免疫表型进行比较。结果:CD7+CD56+在M0+M1分型中的分布比例、外周血血红蛋白、骨髓原始细胞比例、中枢系统浸润率、CD34平均荧光强度均高于CD7-CD56-;但胞浆髓过氧化物酶(CyMPO)MFI低于CD7-CD56-。结论:CD7+CD56+起源早,浸润性强,需加强巩固治疗和中枢系统微小残留病灶监测。     

不同年龄段儿童手足口病免疫细胞变化特点的研究

目的 分析不同年龄段儿童手足口病免疫细胞变化的特点,以期为儿童手足口病的预防诊治提供指导。方法 2015年1月-2018年1月收集1 090例不同年龄段手足口病(HMFD)患儿EDTA抗凝外周血,经破红、洗涤处理后分别加入CD3、CD4、CD8、CD19及CD16/CD56 5种荧光单抗对细胞进行标记,流式细胞仪对CD3+、CD4+、CD8+、CD19+及CD16+/CD56+五种免疫细胞含量进行分析。将患儿分为0~6个月、6个月＜~5岁、5＜~12岁3组,使用SPSS 19.0软件对3组患儿5种细胞含量构成比和升降幅度分别进行比较。结果 6个月<~5岁组患儿占总例数的89.1%,为HFMD高发组;该年龄段患儿CD3+(χ²=9.824,P=0.007)、CD4+(χ²=16.367, P＜0.001)及NK(χ²=8.666,P=0.013)细胞含量降低的比例, CD19+细胞(χ²=13.867,P=0.001)含量增高的比例与其他年龄组患儿比较,差异均有统计学意义;另外,该年龄段患儿CD3+细胞(F=3.907,P=0.020)含量降低的幅度,CD19+细胞(F=9.952,P＜0.001)含量升高的幅度较其他年龄组患儿比较,差异有统计学意义。结论 6个月<~5岁是HFMD的高发年龄段,该年龄段患儿免疫细胞的变化更为明显。细胞免疫功能指标的下降伴随CD19+细胞含量增高提示患儿病情急变,临床宜加强该年龄段患儿的免疫功能监控,调节免疫平衡,及早预防,从而改善患儿预后。