低浓度臭氧暴露对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液炎症因子的影响

观察低浓度臭氧(O3)暴露后过敏性哮喘大鼠支气管-肺泡灌洗(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中炎症细胞及IL-2等细胞因子的改变情况。结果显示,大鼠气道呈变应性炎症改变和气道黏膜损伤加重,同时支气管-肺泡灌洗液中细胞因子发生改变,表明IL-2、IL-6和IL-8等细胞因子在O3介导的气道炎症过程中起重要作用。     

细胞因子IL-12在哮喘小鼠发病机制中的作用

目的探讨白细胞介素-12(IL-12)在哮喘小鼠发病机制中的作用及对气道炎症的影响。方法 65只小鼠随机分为对照组(A组)、哮喘组(B组)、重组白细胞介素-12(rm IL-12)组(C组)和IL-12基因敲除组(D组),以卵白蛋白(OVA)致敏和激发制备哮喘模型。C组在每次激发前30 min给予rm IL-12腹腔注射,D组在激发前1 d给小鼠植入含有抗IL-12多克隆抗体的缓释泵,A组小鼠在末次激发后24 h处死,其余三组小鼠在末次激发后的1 d、2 d、4 d、7 d分别处死。摘眼球取血进行血浆一氧化氮(NO)和免疫球蛋白E(Ig E)的检测。收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测其上清中白细胞介素-10(IL-10)、IL-12、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。离心后的细胞沉淀行白细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)分类计数;剪下结扎右肺下叶用于HE染色。结果(1)细胞计数:小鼠BALF中的细胞总数和EOS百分比,B组明显高于A组(P0.05),C组明显低于B组(P0.05),D组较B组明显升高(P0.05)。(2)ELISA检测:与A组相比,B组小鼠BALF中IL-10、IL-12水平明显降低(P0.05),TNF-α、NO、Ig E水平明显升高(P0.05)。与B组相比,C组小鼠BALF中IL-10、IL-12水平明显升高,TNF-α、NO、Ig E水平明显降低;D组小鼠TNF-α、NO、Ig E水平明显升高,IL-10、IL-12水平明显降低;于1 d、2 d、4 d、7 d差异均有统计学意义(P0.05)。(3)肺组织病理改变:A组小鼠HE染色未见异常;B组小鼠肺泡间隔及小血管周围可见大量炎性细胞浸润;C组小鼠的炎性细胞浸润较B组缓解;D组小鼠部分可见小气道管腔完全闭塞,炎性细胞浸润较B组明显加重。结论 rm IL-12能够明显抑制哮喘小鼠炎症细胞的浸润,同时降低炎症因子TNF-α、NO和Ig E的表达,促进抑炎因子IL-10的表达,从而在哮喘发病过程中起到保护作用。     

丹参注射液联合地塞米松对哮喘大鼠CD4+CD25+调节性T细胞的影响

目的 探讨丹参注射液联合地塞米松(DXM)抑制哮喘气道炎症的免疫学机制.方法 50只Wistar大鼠随机分成正常对照(NC)组、哮喘组、丹参组、DXM组、联合用药组,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数并分类,HE染色行肺组织病理学检查,流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)比例,ELISA检测BALF中IL-4、IL-5含量.结果 与哮喘组比较,药物干预组细胞总数、中性粒细胞(Neu)、淋巴细胞(Lym)、嗜酸性粒细胞(Eos)百分率下降(P<0.05,P<0.01),联合用药组下降程度大于丹参组、DXM组(P<0.05).哮喘组呈显著炎症变化,丹参组呈中度炎症变化,DXM组呈轻度炎症变化,联合用药组无炎症改变.与哮喘组比较,药物干预组CD4+CD25+Treg/CD4+T升高(P<0.05),IL4、IL-5含量下降(P<0.05),联合用药组CD4+CD25+ Tree/CD4+T升高程度和IL-4、IL-5下降程度大于丹参组和DXM组(P<0.05).结论 丹参注射液具有抑制哮喘大鼠气道炎症的作用,和DXM联合应用后,抑制作用更加明显,该作用可能和促进CD4+CD25+Treg产生,进而抑制IL-4、IL-5产生,纠正Th1/Th2失衡,最终减轻气道炎症有关.     

淫羊藿苷对哮喘模型大鼠氧化应激的影响

目的探讨淫羊藿苷对哮喘模型大鼠氧化应激的影响。方法选取SPF级健康雌性Wistar大鼠40只,采用随机数字表法分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、布地奈德组(C组)及淫羊藿苷组(D组)。建立哮喘大鼠模型,于末次雾化激发后对模型大鼠进行气道灌洗,随后取出右肺组织,使用ELISA法检测氧化因子ROS、MDA及SOD的表达,RT-PCR方法检测Nrf2 m RNA的表达。结果与B组比较,D组和C组均可有效降低哮喘模型大鼠BALF中白细胞计数及其氧化因子ROS、MDA表达,同时提升哮喘模型大鼠Nrf2 m RNA的表达,均具有显著差异(P0.05),但D组和C组比较无明显差异(P0.05)。结论淫羊藿苷可减轻哮喘模型大鼠气道炎症反应,并改善其氧化应激水平,对哮喘具有较好的调控作用。     

地塞米松对哮喘大鼠气道炎症及CD4+ CD25+ 调节性T细胞的影响

目的 观察地塞米松对支气管哮喘(哮喘)大鼠气道炎症和CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Tr)的影响,探讨地塞米松治疗哮喘的机制.方法 30只Wistar大鼠随机分成正常对照组,哮喘组,地塞米松组.计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数并分类,应用HE染色行肺组织病理学检查,流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+ CD25+ Tr的比例.结果 地塞米松组BALF细胞总数及淋巴细胞(Lym)、中性粒细胞(Neu)和嗜酸性粒细胞(Eos)百分率较哮喘组明显减少(P＜0.05,P＜0.01),与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).病理组织学显示:地塞米松组较哮喘组肺组织炎性细胞浸润明显减少.哮喘组PBMCs中CD4+ CD25+ Tr比例较正常对照组明显减少(P＜0.05),地塞米松组CD4+ CD25+ Tr比例较哮喘组明显增加(P＜0.05).结论 地塞米松可减轻哮喘大鼠气道炎症反应,其机制可能与促进CD4+ CD25+ Tr产生有关.     

高氧加重通气机所致肺损伤及地塞米松的防护作用

目的观察高浓度氧对通气机所致肺损伤的影响,以及地塞米松的防护作用。方法将36只健康雄性SD大鼠随机分为A、B、C三组。A组实施空气大潮气量通气,B组实施高氧大潮气量通气,C组为地塞米松干预组。每小时进行1次动脉血气分析,计算氧合指数。测定左肺湿/干(W/D)值,支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞及中性粒细胞计数,肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-2含量与肺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果B组大鼠氧合指数较A组显著下降(P<0.01);左肺W/D值,BALF中白细胞及中性粒细胞计数,TNF-α、IL-1β、MIP-2、肺组织MDA水平较A组显著增高(P<0.01);SOD水平较A组显著下降(P<0.01)。C组大鼠氧合指数较B组显著增高(P<0.01);左肺W/D值,BALF中白细胞及中性粒细胞计数,TNF-α、IL-1β、MIP-2、肺组织MDA水平较B组显著下降(P<0.01);SOD水平较B组显著增高(P<0.01)。结论高浓度氧能加重通气机所致大鼠急性肺损伤,地塞米松对高氧加重的通气机所致肺损伤有较明显的防护作用。     

早期气道接触细菌抗原对大鼠哮喘模型影响

目的 了解早期气道接触细菌抗原对辅助性T淋巴细胞1/2(Th1/Th2)平衡以及大鼠成年后哮喘气道炎症的影响,研究哮喘的发病机制.方法 将新生SD大鼠随机分为3个细菌抗原组、哮喘组及对照组,细菌抗原组大鼠分别于出生后第1、3、5、7 d鼻咽部给予107、106、105灭活肺炎链球菌10μL,哮喘组及对照组大鼠则给予磷酸盐缓冲液(PBS)10μL;大鼠饲养至成年后造模,观察各组大鼠肺组织病理、支气管肺泡灌洗液(BALF)白细胞分类、血清中白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)、卵蛋白-IgE含量.结果 肺组织病理显示,早期接触灭活细菌的大鼠气道炎症较重;107、106抗原组大鼠BALF中淋巴细胞百分比为(32.94±13.62)%、(29.50±8.92)%,与哮喘组比较明显增多(P＜0.05);107抗原组大鼠血清中卵蛋白-IgE水平(0.33±0.07)较哮喘组明显升高(P＜0.01),IFN-γ水平为(11.93±2.74)pg/mL,较哮喘组明显下降(P＜0.05).结论 早期气道接触细菌抗原可加重Th1/Th2失衡以及大鼠成年后哮喘气道炎症.     

甲醛暴露对哮喘大鼠气道反应性及肺组织病理学改变影响

目的 探讨甲醛暴露对哮喘大鼠气道反应性及肺组织病理学改变的影响.方法 选择Wistar雄性大鼠40只,随机分为4组,每组10只.A组为正常对照组,B组为哮喘模型组.C和D组分别为甲醛低、高质量浓度(12.5、25.0mg/m<'3>)哮喘组.每只大鼠染毒结束1周后处死,测量每只大鼠的气道阻力30 min的变化,观察肺组织病理形态学变化,测定血清中白细胞介素(IL)-13和免疫球蛋白(Ig)E的水平.结果 ①B、C、D组大鼠的气道阻力、血清IgE、IL-13水平均明显高于A组(P<0.01),C、D组大鼠的气道阻力、血清IgE、IL-13水平均较B组明显升高(P<0.01);②D组比C组气道阻力,血清IL-13、IgE水平均明显升高(P<0.01);③肺组织病理切片中C、D组管壁周围均出现大量炎性细胞浸润,以中性粒细胞、淋巴细胞为主;可见上皮细胞绒毛倒伏、粘连、脱落;杯状细胞大量增生,基底膜明显增厚等改变.结论 吸入甲醛可加重哮喘大鼠气道阻力和气道炎症反应.     

丹参注射液抑制哮喘大鼠肺IL-13和嗜酸性粒细胞趋化因子表达

目的 探讨丹参注射液抑制哮喘气道变应性炎症的分子机制.方法 30只SD大鼠随机分成正常对照组,哮喘组,丹参组,每组10只.HE染色行肺组织病理学检查,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数并分类,应用免疫组化SP法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肺组织中白细胞介素-13(IL-13)和嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)表达.结果病理组织学显示:丹参组较哮喘组肺组织炎性细胞浸润明显减少.丹参组BALF细胞总数及淋巴细胞(Lym)、中性粒细胞(Neu)和嗜酸性粒细胞(Eos)百分率较哮喘组明显减少(P<0.05,P<0.01),与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).哮喘组肺组织IL-13和Eotaxin表达较正常对照组明显增加(P<0.05),丹参组IL-13和Eotaxin表达较哮喘组明显减少(P<0.05).IL-13和Eotaxin表达呈正相关(r=0.90,P<0.01).结论 丹参注射液可减轻哮喘大鼠气道炎症反应,其机制可能与降低哮喘大鼠肺内IL-13和Eotaxin表达有关.     

二氧化硫暴露对哮喘大鼠速发相反应影响

目的 探讨二氧化硫(SO2)暴露对哮喘大鼠速发相反应的影响.方法 选择Wistar雄性大鼠40只,随机分为4组,每组各10只;A组为正常对照组,B组为哮喘模型组,C组为SO2低质量浓度(15 mg/m3)哮喘组,D组为SO2高质量浓度(30 mg/m3)哮喘组.每只大鼠染毒结束1周后处死,测量每只大鼠的气道阻力30 min的变化,观察肺组织病理形态学变化,采用酶联免疫吸附试验法测定血清中白细胞介素(IL)-13和IgE的水平.结果 ①B组大鼠的气道阻力明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.01),C、D组大鼠的气道阻力较B组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);②B组大鼠血清中IL-13和IgE的水平较A组明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),C、D组大鼠血清中IL-13和IgE的水平与B组比较差异无统计学意义(P>0.05);③肺组织病理切片实验组大鼠支气管上皮细胞部分脱落或全部脱落,大量的嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润,也出现单核细胞的浸润,杯状细胞大量增生,并充填上皮细胞的位置,有大量的黏液分泌,可见黏液栓,基底膜出现纤维化.结论 SO2可加重哮喘大鼠气道高反应性和肺部变态炎症反应.     

支气管哮喘气道IL4和IL12动态变化及对气道炎症反应的影响

目的研究支气管哮喘(哮喘)﹚炎症促进因子白细胞介素4(IL-4)和炎症抑制因子(IL-12)的变化趋势,相互关系及对气道炎症反应的影响.方法用卵蛋白(OVA)﹚敏原制备wistar大鼠哮喘模型,在激发后1、8、24、48、96h及7、14d行支气管肺泡灌洗(BAL),测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞总数与嗜酸细胞数(EOS);酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中IL-4、IL-12的浓度.结果 OVA激发后,气道出现明显的炎症反应.EOS计数1h上升,8h后迅速上升,24h达到高峰期,96h后开始回落,7～14d回落到略高于对照组;炎症细胞总数1h上升,8h后迅速上升,24～96h处于高峰期,7d回落到接近8h水平,14d接近基础水平.BALF中,IL-4在1h上升,8～96h处于高峰期,7～14d回落到基础水平;IL-12在1h上升,8处于低水平,24h上升,48～96h处于高峰期,7～14d回落到基础水平;EOS与IL-4有正相关性(r=0.74,P＜0.001),与IL-12无相关性(r=-0.13,P＞0.05),与IL-4/IL-12有密切相关性(r=0.85,P＜0.001).结论哮喘气道中存在IL-4/IL-12比值失衡,IL-4/IL-12比值对哮喘气道炎症反应起重要的调节作用.     

乙酰半胱氨酸对肥胖哮喘小鼠气道炎症和重建的作用

目的探讨乙酰半胱氨酸对哮喘气道炎症和重建的影响。方法60只雌性C57／6J小鼠按随机数字表法分为哮喘组（A组）,肥胖哮喘组（B组）,治疗组（C组）,对照组（D组）,每组15只。经腹腔注射与雾化吸入卵蛋白（OVA）制作慢性哮喘模型,高脂饮食制造肥胖模型。计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及分类,ELISA法测定肺组织匀浆中IL-6和8-异前列腺素F2α（8-iso-PGF2α）水平,肺组织切片观察各组小鼠病理变化,并测定气管壁面积（WAt）、气管平滑肌面积（WAm）、管腔基底膜周长（Pbm）。结果,A组、B组小鼠BALF中白细胞总数及嗜酸性粒细胞比例、肺组织IL-6水以及病理切片中气管壁厚度（WAt／Pbm）、气管平滑肌厚度（WAm／Pbm）均较D组明显增加,且B组IL-6和WAt／Pbm较A组进一步增加（P〈0．05）。C组小鼠BALF中白细胞总数、IL-6和WAt／Pbm均较B组明显下降（P〈0．05）。四组小鼠肺组织匀浆8-iso—PGF2α水平按D组、C组、A组、B组依次升高,各组差异有统计学意义（F=101．8,P〈0．01）。Pearson相关分析表明,8-iso—PGF2α水平与肺组织IL-6水平和WAt／Pbm和呈正相关（r=0．817、0．737,P〈0．01）。结论乙酰半胱氨酸能够通过抑制氧化应激反应,抑制哮喘小鼠的气道炎症和气道重建。     

丹参协同地塞米松对哮喘大鼠T-bet/GATA-3及Th失衡的调控研究

目的探讨丹参协同地塞米松对哮喘大鼠T-bet/GATA-3及Th失衡的调控作用。方法随机将80只SD大鼠分为哮喘模型组;正常对照组;丹参治疗组;联合用药组（丹参协同地塞米松治疗）,每组20只。测定气道反应性;肺组织苏木素伊红（HE）染色观察病理改变;蛋白质印迹法（western-blots）检测T-bet和GATA-3在肺组织中的表达;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肺组织匀浆白细胞介素4（IL-4）和白细胞介素5（IL-5）水平。结果丹参组和联合用药组大鼠肺部病理学切片呈现肺部炎症改变较哮喘组减轻,以联合用药组减轻更明显。大鼠气道阻力示哮喘组>丹参组>联合用药组>对照组(P 均< 0.05),且各组随着组胺浓度的升高气道阻力增高明显。蛋白质印迹法检测肺组织中T-bet水平对照组>联合用药组>丹参组>哮喘组(P 均< 0.01),而GATA-3水平则与之相反。肺组织IFN-γ蛋白水平对照组>联合用药组>丹参组>哮喘组(P 均< 0.01),而IL-4水平则与之相反。肺T-bet/GATA-3水平与IFN-γ蛋白水平呈正相关(r=0.787,P < 0.01) ,与IL-4 蛋白水平呈负相关( r=-0.816,P < 0.01) ,与IFN-γ/IL-4比值呈正相关(r=0.893,P < 0.01)。结论丹参注射液可上调T-bet/GATA-3水平,进而纠正Th1/Th2失衡,与地塞米松有协同发挥抗气道炎症作用。     

慢性支气管炎大鼠IL-8水平与炎症细胞变化特点的探讨

目的 探讨慢性支气管炎的气道炎症特点及IL-8在其发病中的作用。方法 以脂多糖(LPS)气管内注入法复制慢性支气管炎大鼠模型。对各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数和分类。用酶联免疫标记法测定各组大鼠血清及肺组织匀菜液中IL-8水平，并观察其支气管肺组织病理形态学变化。结果 模型组BALF中白细胞总数及中性粒细胞数较正常组显著增高。模型组血清和肺组织匀浆液IL-8水平较正常组显著增高。结论 中性粒细胞和IL-8共同参与了慢支气道炎症反应。     

儿童哮喘支气管肺泡灌洗液细胞学计数及白细胞介素-8变化

目的探讨支气管哮喘BALF细胞学计数及白细胞介素-8(IL-8)变化。方法选择2015年5月-2016年5月住院哮喘急性发作患儿60例为哮喘组,另选取同期行支气管镜下异物取出术患儿60例为对照组,对2组BALF中细胞学计数和IL-8水平进行检测,比较不同哮喘程度肺泡灌洗液中细胞学计数和IL-8水平变化。结果 2组BALF中有核细胞计数差异无统计学意义(Z=-1.44,P0.05);2组BALF中EOS比例差异有统计学意义(P0.01)。随着哮喘发作程度加重,BALF中EOS计数显著升高;BALF中IL-8浓度显著升高,差异均有统计学意义(P0.01);BALF中EOS计数和IL-8水平与哮喘发作程度呈正相关(r=0.87、0.94,P0.01);结论 BALF中EOS计数和IL-8浓度能反映哮喘气道炎症,对指导哮喘的诊断和严重程度有一定参考价值。     

柴油废气颗粒对大鼠气道反应性及肺部病理改变影响

目的 探讨空气污染物中柴油废气颗粒(DEP)的吸入对哮喘模型大鼠的气道反应性和肺部病理改变的影响.方法 选择Wistar大鼠60只随机分为A组为正常对照组;B组为哮喘模型组,利用卵清白蛋白(OVA)制备哮喘模型;C、D、E、F组于第1天开始用OVA攻击(方法与B组相同),之后再给予吸入DEP各1、2、3、4周.每只大鼠均于最后一次雾化结束后次日处死,并测定每只大鼠气道阻力(RL)30 min的变化,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞的百分比和肺组织病理形态学改变,采用酶联免疫吸附试验法测定血清中总ISE的浓度变化.结果 抗原激发后B组RL比A组增高,E、F组的RL比B组明显增高,之间比较差异有统计学意义(F=156.186,P<0.01),RL的增高与DEP吸入时间呈显著正相关(r=0.948,P<0.01);血清中总IgE的浓度在B组较A组明显增加,之间比较差异有统计学意义(F=2.490,P<0.01);C、D、E、F组BALF中嗜酸性粒细胞占细胞总数的百分比(EOS%)逐渐增高,与B组比较差异有统计学意义(F=23.240,P<0.01),实验组BALF中中性粒细胞的浸润逐渐增多,E、F组BALF中的中性粒细胞数占细胞总数的百分比较B组明显增高,与之比较差异有统计学意义(F=36.329,P<0.01);肺组织病理切片中可以看到A组上皮细胞完整,气道周围未见炎症细胞的浸润,以纤毛柱状上皮细胞为主,仅有少量的杯状细胞,基底膜未见纤维化,实验组随着DEP的1、2、3、4周的吸入,逐渐出现上皮细胞的减少、中断、脱落,杯状细胞大量增生,气道周围的炎症细胞的浸润及基底膜的纤维化等改变.结论 柴油DEP的吸入可加重哮喘大鼠的气道高反应性和肺部的炎症反应.     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对哮喘大鼠气道炎症的影响

目的观察CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）对哮喘大鼠气道炎症的影响。方法将卵白蛋白（OVA）免疫耐受大鼠CD4^＋CD25^＋Treg细胞过继转移给哮喘大鼠,然后观察支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞计数及分类,ELISA检测BALF中IL-4、IL-5和IFN-1及血清OVA特异性IgE含量,HE染色观察肺组织的病理改变。结果与哮喘组比较,过继转移CD4^＋CD25^＋Treg细胞后哮喘大鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞和淋巴细胞百分率降低（P〈0．05）,嗜酸性粒细胞（Eos）百分率明显降低（P〈0．01）;BALF中IL4和IL-5含量明显降低,IFN-1含量明显升高,血清OVA特异性IgE含量明显降低（P〈0．05）;气道炎症明显减轻。结论过继转移OVA免疫耐受大鼠CD4^＋CD25^＋Treg细胞可以明显抑制哮喘的慢性气道炎症。     

格列苯脲和尼可地尔对哮喘大鼠BALF中IL-4/IFN-γ表达及气道重塑的作用

目的：观察钾离子通道开放剂尼可地尔和阻滞剂格列苯脲对哮喘大鼠肺泡盥洗液（BALF）中IL-4/IFN-γ的影响以及对气道重塑的作用。方法：SD雄性大鼠50只,随机分为正常对照组、哮喘模型组、尼可地尔组、地塞米松组和格列苯脲组。采用卵清蛋白（OVA）致敏复制大鼠哮喘模型,模型成功后取相关组织分别进行图像分析测定各组支气管壁各层的厚度、ELISA检测肺泡盥洗液（BALF）中IL-4/IFN-γ表达情况。结果：哮喘模型组和格列苯脲组支气管平滑肌明显增厚（P〈0.05）,有典型的气道重塑表现,尼可地尔组和地塞米松组无明显增厚;尼可地尔组和地塞米松组IL-4表达低于哮喘模型组和格列苯脲组,IFN-γ表达高于哮喘模型组和格列苯脲组（P〈0.05）。结论：尼可地尔通过开放KATP通道,能够明显改善哮喘大鼠气道炎症和抑制哮喘大鼠气道重塑的形成,其可能机制与IL-4表达降低,同时IFN-γ表达升高有关。     

胞苷三磷酸合成酶在过敏性哮喘肺部炎症中的表达变化

目的 探讨胞苷三磷酸合成酶(cytidine triphosphate synthase,CTPS)在过敏性哮喘发生的致敏和激发两个阶段肺组织内的变化情况。方法 将36只BALB/c雌性小鼠随机分为卵清蛋白(ovalbumin,OVA)哮喘组、OVA致敏组和健康对照组,每组12只。采用HE和PAS染色法分析肺组织炎症和粘液分泌量,血球分析仪检测肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白细胞分类及计数,ELISA法检测肺匀浆IL-5、IL-13和补体因子D(complement factor D,CFD)水平,RT-PCR、Western blot和免疫荧光法检测肺内CTPS mRNA和蛋白的表达及定位。结果 OVA致敏和哮喘组的小鼠肺部炎症、粘液分泌、IL-5和CFD的水平都显著高于健康对照组(P<0.05),且OVA哮喘组高于OVA致敏组(P<0.05)。与健康对照组相比,OVA哮喘组BALF中白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞数量及肺匀浆IL-13表达量均显著升高(P<0.05),且肺组织、肺内气道上皮细...     

CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗对哮喘小鼠血清 IL-4、IL-13、IFN-γ及支气管肺泡灌洗液中IL-4、IL-25、IL-33的水平变化影响

目的 研究非甲基化CpG基序的寡聚脱氧核苷酸 (CpG ODN)联合热休克蛋白70(HSP70)/CD80DNA疫苗对哮喘小鼠肺部炎症、血清IL-4、IL-13、IFN-γ及支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-25、IL-33水平变化的影响,为联合 CpG ODN -HSP70/CD80 DNA疫苗治疗哮喘提供实验依据。方法 2019年6-9月选用 6~8周龄BALB/c小鼠32只, 卵清蛋白(OVA)加氢氧化铝[Al(OH)₃]佐剂致敏的方法制备小鼠哮喘模型, 随机分成4组,分别为对照组、哮喘组、HSP70/CD80DNA疫苗组及联合疫苗组(CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗组),HE染色观察肺组织病理形态学改变,ELISA法检测血清IL-4、IL-13、IFN-γ和BALF中IL-4、IL-25、IL-33水平变化。结果 肺组织HE染色结果显示HSP70/CD80疫苗联合CpG ODN治疗组小鼠肺组织炎症反应较哮喘组明显减轻,气道周围炎症细胞浸润显著减少。ELISA结果显示与对照组比较,哮喘组血清IL-4及IL-13水平显著增高(P<0.05),血清IFN-γ水平明显下降(P<0.05);与哮喘组比较,HSP70/CD80DNA疫苗组和联合疫苗组血清IL-4及IL-13水平显著降低(P<0.05),血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05);与HSP70/CD80DNA疫苗组比较,联合疫苗组血清IL-4及IL-13水平显著降低(P<0.05),血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05);支气管肺泡灌洗液(BALF)结果显示与对照组比较,哮喘组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著增高(P<0.05);与哮喘组比较,HSP70/CD80DNA疫苗组和联合疫苗组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著下降(P<0.05);与HSP70/CD80DNA疫苗组比较,联合疫苗组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著降低(P<0.05)。结论 CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗能抑制小鼠体内产生IL-4、IL-13、IL-25、IL-33, 增强小鼠体内产生IFN-γ,减轻哮喘小鼠气道炎症。